UNIVERSIDADE DO VALE DO ITAJA- UNIVALI

CENTRO DE CINCIAS TECNOLGICAS DA TERRA E DO MAR - CTTMAR

CURSO DE CINCIAS BIOLGICAS- NFASE EM BIOTECNOLOGIA
Identifica!" e Ca#acte#i$a!" Fi%i"&'(ica de
E%)*cie% de Mic#"a&(a% I%"&ada% de +#ea%
I,)actada% )"# Re-eit"% de Mine#a!" de
Ca#.!" e, Santa Cata#ina
Tiago Tolentino de Souza
TRABAL/O DE CONCLUS0O A1RESENTADO AO
CURSO DE CINCIAS BIOLGICAS 2NFASE
BIOTECNOLOGIA3 1ARA A OBTEN40O DO GRAU
DE BAC/AREL EM BIOLOGIA5
ORIENTADOR6 1ROF75 DR5 LEONARDO RUBI
R8RIG 9 CTTMAR - UNIVALI
Ita-a:3 ;<<=
1
RESUMO
Organismos extremfilos so aqueles com capacidade de prosperar sob
ambientes extremos, como altas temperaturas, baixas temperaturas, ambientes salinos e no
caso em estudo, pH baixo como depsitos de rejeitos de carvo, frutos da atividade de
minerao e uso indiscriminado nas termoeltricas que depositam todo refugo em terrenos
baldios, formando ambientes que apenas algumas espcies bioindicadoras de microalgas
so capazes de abitar! "ste projeto tem como objetivo o isolamento e identificao de tr#s
cepas de microalgas acidof$licas, so elas% &lorof$ceas, &risof$ceas e "uglenof$ceas, e a
avaliao quanto ' toler(ncia das col)nias isoladas destas microalgas a tr#s tipos de metais
pesados% zinco, c*dmio e cumbo! &om o resultado espera+se buscar alternativas para os
processos de biorremediao de metais pesados e outros poluentes envolvendo as
microalgas acidof$licas j* que estas constituem espcies bioindicadoras de ambientes de pH
baixo e de poluio por metais!
,
>5 INTRODU40O
-s reservas brasileiras de carvo atingem ., bil/es de toneladas, sendo que
012 encontram+se no 3io 4rande do 5ul! -pesar de importante recurso energtico, a
extrao, o beneficiamento e a utilizao do carvo mineral so atividades potencialmente
poluidoras, o que pode representar elevado comprometimento ambiental 64aivizzo et al!,
,7778! 9o :rasil, especialmente no 3io 4rande do 5ul e 5anta &atarina, a combusto do
carvo uma importante fonte emissora de material particulado, principalmente de metais
traos e a absoro e acumulao dessas part$culas atravs das vias respiratrias so txicas
para o organismo! - concentrao dos elementos gerados durante a queima depende da
composio qu$mica do carvo original 6;assiliou et al., ,7778!
-mbientes extremamente *cidos so numerosos na terra e se originam de
processos geolgicos e antropog#nicos 6:roc<, 1=10a> -lbertano, 1==? apud 4ross, ,7778!
@m nAmero de diferentes processos biolgicos e geoqu$micos causam esta alta acidez,
podendo provocar profundas modifica/es paisag$sticas e na produtividade biolgica
64Bure et al!, 1=018! -liado a estas mudanas, a acidificao da *gua pela oxidao da
pirita uma severa conseqC#ncia do processo de minerao 6Dessman et al., 1===8,
resultando na produo de *cido sulfArico e conseqCentemente no decaimento do valor de
pH e solubilizao dos minerais presentes no rejeito 64ross, ,7778! "m per$odos de intensa
precipitao pluviomtrica, a *gua, de escorrimento superficial ou a percolada atravs do
rejeito, *cida e possui altas concentra/es de metais dissolvidos 64aivizzo et al!, ,7778
como Ee, -l, &u, Fb, Gn, &d e 5e, comprometendo a qualidade dos recursos $dricos da
regio 6-nderson H Ioungstrom 1=1J> Kavis H :oeglB, 1=01 apud :ra<e et al!, ,7718!
-lguns destes constituintes alcanam concentra/es que so txicos para a maioria dos
organismos aqu*ticos> somente poucas espcies de algas, bactrias, protozo*rios e fungos
t#m se adaptado a viver sob estas condi/es 6:ra<e et al., ,7718!
"studos da estrutura de comunidade de algas associados ao conecimento de
condi/es f$sicas e qu$micas da *gua podem constituir+se em bons indicadores de impacto
ambiental oriundo de despejos industriais e domsticos! - diversidade espec$fica das
comunidades pode retratar a estabilidade do sistema, sendo que $ndices de diversidade
baixos refletem, em geral, condi/es extremas de poluio ou pureza das *guas 6Largalef,
.
1=1M> 3ound, 1=01 apud 3osa et al!, 1=018! Os extremfilos so organismos capazes de
prosperar sob condi/es extremas e podem ser divididos em ? categorias N termfilos 6alta
temperatura8, psicrfilos 6baixa temperatura8, acidfilos 6baixo pH8, alcalfilos 6alto pH8 e
alfilos 6alta salinidade8! O#m se tornado de interesse acad#mico e biotecnolgico devido
aos seus aspectos ecolgicos e fisiolgicos> t#m importantes aplica/es industriais e
ambientais as quais incluem processos para a extrao do metal, provenientes de rejeitos
industriais 6Dpez+-rcilla et al., ,7718! O uso de microrganismos extremfilos nos
processos industriais tem crescido rapidamente nas Altimas duas dcadas, sendo que cada
categoria de microrganismo possui suas prprias caracter$sticas! -s enzimas dos
microrganismos extremfilos, denominadas extremozimas possuem alta estabilidade e
baixo risco de contaminao dos oganismos que as produzem! @m exemplo de sua
aplicao pode ser descrito pela capacidade de algumas extremozimas 6amilases, proteases,
celulases, entre outras8 degradar pol$meros! -lm disso, elas t#m papel fundamental nas
indAstrias aliment$cias, farmac#uticas, qu$micas, de papel e de tratamento de efluentes
6Oango H Pslam, ,77,8!
"m ambientes *cidos, iluminados, a produo prim*ria pode ser medida
pelos extremfilos como as algas acidof$licas que incluem os g#neros Euglena, Chlorella,
as espcies Chlamydomonas acidophila, Ulothrix zonata entre outras 6Qonson, 1==08!
-parentemente, os acidfilos no podem suportar uma alta acidez no interior de suas
clulas devido ao risco em danificar algumas molculas como o K9- 6Oango H Pslam,
,77,8> segundo 4ross, 6,7778 o pH citoslico de algumas algas, inclusive aquelas que
abitam ambientes com pH 1 se mostrou neutro! -s algas acidof$licas Cyanidium
caldarium e Galdieria sulphuraria desenvolveram mecanismos que tornaram sua
membrana temporariamente imperme*vel a prtons o que les confere a capacidade de
sobreviver v*rios meses sob escurido! 9o se sabe exatamente quais mecanismos les
conferem essa propriedade, mas em outros sistemas foi observado que a incorporao de
esteris, prote$nas eRou *cidos graxos saturados, causaram um decrscimo na
permeabilidade da membrana! @ma outra alternativa para evitar que prtons entrem na
clula poderia ser um potencial de membrana altamente positivo ou uma carga positiva na
superf$cie da membrana como encontrado em Dunaliella acidophila 64immler et al!,
1=0= apud 4ross, ,7778! "studos detalados de v*rias algas acidof$licas tem mostrado que
M
elas so muito tolerantes a metais pesados 6Sitton, 1=17> -lbertano et al!, 1=07a,b,c>
-lbertano e Oaddei, 1=07> &apasso e Finto, 1=0, apud 4ross, ,7778! @ma caracter$stica
not*vel observada em efluentes de minerao a presena de v*rias estruturas irregulares
em forma de bacilo, cor laranja, aspecto cristalino localizado nas clulas de Euglena
mutabilis> a cor laranja similar aos oxi+idrxido de ferro, sugerindo que esta espcie
possa reter metais em seu interior6Olavenson e 9aleTaj<o, ,7778! Pnvestiga/es sobre o
rejeito *cido da drenagem do carvo em *reas mineradas da 9ova Pnglaterra, mostraram
que o g#nero Klebsormidium sp. tem a capacidade de acumular metais pesados 6&a, Fb, Gn
e -s8 6-sleB H Dottermoser, 1===8! "xistem inAmeras abordagens a respeito da ligao de
metais pesados em relao a algas invi*veis> estas exibem diferentes caracter$sticas de
biossoro num dado pH 64ardea+OorresdeB, 1=00> 4reene et al!, 1=01 apud ;oles<B,
1==78> isto ocorre devido ' composio da parede celular de diferentes organismos o qual
resulta um Anico s$tio forte de ligao em algumas algas! For exemplo, Cyanidium
caldarium retm mais cobre 6PP8 em pH , do que Chlorella pyrenoidosa, Euglena bicyclis e
Spirulina platensis! "m 1=1M, Eergunson e :ubela documentaram que cepas de Chlorella
vulgaris, Ulothrix sp. e Chlamydomonas sp., acumulavam quantidades significativas de
&u6PP8, Fb6PP8 e Gn6PP8 em solu/es de laboratrio 6Eergunson e :ubela, 1=1M apud ;oles<B,
1==78!
&om este trabalo, pretende+se identificar as microalgas isoladas de *reas
impactadas por rejeito de minerao de carvo e analisar as respostas fisiolgicas quanto '
toler(ncia a metais pesados, de tr#s espcies de microalgas em meio *cido contendo metais!
?
;5 OBJETIVOS
2.1. OBJETIVOS GERAIS
Pdentificar e caracterizar fisiologicamente as cepas de microalgas isoladas de
*reas impactadas por rejeitos de minerao de carvo em 5anta &atarina!
2.2. OBJETIVOS ESPECFICOS
Psolar e purificar as cepas de microalgas isoladas de *reas impactadas por
rejeitos de minerao de carvo em 5anta &atarina!
Pdentificar as espcies de microalgas isoladas de *reas impactadas por rejeitos
de minerao de carvo em 5anta &atarina!
;erificar a toler(ncia de duas espcies de microalgas isoladas de *reas
impactadas por rejeito de minerao de carvo em 5anta &atarina em diferentes
solu/es contendo c*dmio, cumbo e zinco!
J
?5 JUSTIFICATIVA
&omo foi mencionado anteriormente a atividade de minerao constitui uma
importante fonte de poluio no apenas para a atmosfera mas para o solo e lagos que
adjacentes aos depsitos de carvo, so afetados indiretamente pelo uso irracional nas
termoeltricas! - situao ambiental, segundo estudos efetuados pela E-OL-, cr$tica
quando se analisa o conjunto de carga poluidora gerada pela lavra, beneficiamento,
transporte e estocagem do rejeito da minerao, pelas unidades produtoras de coque, pela
usina termoeltrica, pelas cer(micas, pelas fecularias e setor agro+industrial! 9os anos de
1=10 e 1=1= foram desenvolvidos estudos na regio que apontam dados quantitativos e
qualitativos de extrema import(ncia para o planejamento das a/es governamentais e para o
estabelecimento de uma pol$tica estadual de meio ambiente, reforando a necessidade do
imediato enquadramento dessa regio como U*rea cr$tica nacionalV!
Os metais pesados so as principais fontes de contaminao nestes
ambientes, na *gua podem ocorrer em misturas complexas e distintas, na forma solAvel e
insolAvel, podem estar presentes como espcies i)nicas, complexos org(nicos e inorg(nicos
eRou associados com part$culas suspensas! -lguns destes metais mais comumente medidos e
particularmente perigosos so o mercArio 6Hg8, o cumbo 6Fb8, ars#nio 6-s8, cromo 6&r8,
n$quel 69i8, zinco 6Gn8 e c*dmio 6&d8! O c*dmio tem sido classificado como prov*vel
cancer$geno umano, embora ainda no se tena derivado um fator de pot#ncia de c(ncer!
-s maiores relev(ncias da exposio umana ao c*dmio so os efeitos sobre os pulm/es
pela inalao aguda e o efeito sobre os rins da exposio cr)nica, induzindo proteinAria
irrevers$vel! - principal via de exposio da populao no fumante via alimentao!
Oeores de .7gRdD de Fb em sangue de pessoas adultas considerado limite m*ximo, sendo
que para valores acima de 1?gRdD aparecem sintomas claros de envenenamento por Fb! O
efeito cr$tico em crianas envolve o sistema nervoso central 6encefalopatia8, e em adultos, o
efeito m*ximo a ipertenso! O Fb acarreta uma srie de altera/es ematolgicas> outros
rgos alvo so o sistema gastrointestinal e o sistema reprodutivo! Lais de ,77
metaloenzimas requerem Gn como cofator e sua defici#ncia resulta em um grande espectro
de efeitos cl$nicos! O n$vel normal de zinco no sangue de 0? a 117gRdD> incomun a
toxicidade por excesso de zinco, e evid#ncias de efeitos ematolgicos, ep*ticos e renais
1
foram observados em indiv$duos que ingeriram mais do que 1,g de zinco elementar dentro
de dois dias!
O conecimento fisiolgico e ecolgico das algas acidof$licas seria de
extrema import(ncia sendo que estas poderiam ser utilizadas como bioindicadoras de pH
baixo e de poluio por metais pesados! -lm disso, so organismos com elevado potencial
biotecnolgico podendo ser aplicados para processos de biorremediao!
"ste estudo est* sendo realizado no laboratrio de Licrobiologia -plicada
6D!-!L!-8 localizado no &entro de &i#ncias Oecnolgicas da Oerra e do Lar 6&OOLar8 na
@niversidade do ;ale do Ptaja$ @9P;-DP> o local possui espao e estrutura adequada para o
crescimento e a realizao dos testes fisiolgicos das microalgas acidol$licas! -mbos, o
cultivo e os testes de toler(ncia aos metais pesados sero realizados no cep*rio do
D!-!L!-!
0
=5 MATERIAIS E M2TODOS
- metodologia ser* subdividida em tr#s etapas, a primeira correspondendo
ao istrico e a descrio da *rea de estudo, a segunda etapa compreendendo a coleta e o
cultivo das microalgas e a terceira aos testes fisiolgicos!
4.1 HISTRICO E DESCRIO DA REA DE ESTUDO
4.1.1 Histi!"
"m 5anta &atarina, o in$cio das atividades carbon$feras aconteceu no final
do 5culo WPW, realizadas por uma compania brit(nica que construiu uma ferrovia e
explorava as minas! "m 100? foi inaugurado o primeiro treco da ferrovia Kona Oereza
&ristina, ligando Dauro LCller ao Forto de Daguna, e cegando, em 1=1=, a 5o Qos de
&riciAma! &omo o carvo catarinense era considerado de baixa qualidade, sua explorao
no despertou muito interesse por parte dos ingleses! Kiante desse quadro, o 4overno
Eederal repassou a concesso para indAstrias cariocas, destacando+se, inicialmente,
Henrique Dage e, depois, Xlvaro &ato e 5ebastio 9etto &ampos! &om a queda da compra
do carvo importado, durante a Frimeira 4uerra Lundial, o produto catarinense assistiu seu
primeiro surto de explorao, poca em que foram ampliados os ramais ferrovi*rios no 5ul
do estado e inauguradas novas empresas mineradoras! "m 1=11 entra em operao a
&ompania :rasileira &arbon$fera -rarangu* 6&:&-8 e, 1=10, a &ompania &arbon$fera
@russanga 6&&@8! 9a dcada seguinte, em 1=,1, surgem a &ompania &arbon$fera
Frspera e a &ompania &arbon$fera Ytalo+:rasileira e, em 1=,,, a &ompania 9acional
Linerao :arro :ranco! O segundo surto veio no 4overno Eederal de 4etAlio ;argas, com
um decreto determinando o consumo do carvo nacional e com a construo da &ompania
5iderArgica nacional 6&598! - obrigatoriedade da utilizao do carvo nacional foi
estabelecida em 172 em 1=.1, aumentando esta cota para ,72 em 1=M7! Oal fato,
associado ao advento da PP 4uerra Lundial, proporcionou um significativo aumento da
produo nacional do carvo 6da ordem de .77 a ?7728, bem como de sua rentabilidade>
conseqCentemente, ocorrem melorias no setor ferrovi*rio e portu*rio! - &59 foi
constru$da em 1=MJ! 9as dcadas de M7 e ?7 v*rias minas operavam na regio e pertenciam
=
a pequenos propriet*rios locais, grandes empreendedores cariocas e uma estatal, a
&ompania Frspera, subsidi*ria da &59! -o longo dos anos J7 ocorrem profundas
mudanas no setor e, no in$cio dos anos 17, estavam em atividade apenas 11 mineradoras, a
maioria pertencente ' empres*rios locais! O Altimo boom no setor foi com a crise do
petrleo em 1=1., com as aten/es voltadas novamente para o uso do carvo nacional! 9o
in$cio da dcada de =7 o setor desregulamentado por decreto do 4overno Eederal,
mergulando toda a regio sul catarinense em profunda crise! O in$cio de uma nova fase de
desenvolvimento da atividade carbon$fera no 5ul do estado se avizina com a implantao
de um parque trmico na regio! "studos tcnicos v#m sendo realizados com base em
tecnologias avanadas j* desenvolvidas nos "stados @nidos! O trabalo tem envolvido as
empresas mineradoras da regio que, nos Altimos cinco anos, priorizaram pol$ticas de
recuperao e proteo ambiental, de segurana e saAde do trabalador e investimentos na
qualificao tecnolgica das minas!
17
4.1.2 #$ %# Est&%"
- *rea de estudo est* situada na localidade de "stiva dos Fregos no
munic$pio de &apivari de :aixo, prximo a Oubaro! &ompreende uma *rea de depsito de
refugos piritosos que * .7

anos recebe rejeitos de carvo das termoeltricas vizinas! @ma
delas, a usina termoeltrica Qorge Dacerda sendo a maior da -mrica Datina! O local da
coleta est* situado entre M0Z ??[ M0[[ D a M0Z ?J[ O e ,0Z ,J[ .,[[ 9 a ,0Z ,J[ .J[[ 5!
Eigura 1! Docalizao do depsito de refugos piritosos no munic$piode &apivari de :aixo 5&
4.2 CO'ETA E CU'TIVO DAS (ICROA'GAS
4.2.1 C")#t$ %$s $*"st$s
Eoram realizadas duas sa$das de campo piloto para a *rea de estudo% a
primeira sa$da realizada no dia ,JR7=R,77, e a segunda no dia .1R7.R,77.! -s amostras
foram coletadas em duplicata de pequenas lagoas as quais eram formadas nos depsitos de
11
Capivari de Baixo
Refugos
piritosos
rejeitos piritosos de carvo apresentando pH *cido! -s duplicatas foram fixadas com lugol e
armazenadas na geladeira, logo, as amostras in vivo foram cultivadas no meio *cido L!-!"
l$quido! Os repiques foram realizados semanalmente, sendo que o meio *cido L!-!"
apresentou melor resultado dentre os meios testados! - purificao e isolamento das
microalgas acidfilas foi realizado em meio slido *cido L!-!" com boa resposta de tr#s
classes de microalgas acidof$licas 6&lorof$ceas, &risof$ceas e "uglenof$ceas8 ao novo meio,
sendo que o repique deste Altimo feito quinzenalmente!
-s amostras de sedimento foram coletadas utilizando+se uma esp*tula e um
frasco de coleta de vidro para cada amostra, com aproximadamente .cm de di(metro
interno e =cm de altura! 9a coleta das amostras de sedimento, o frasco foi preencido com
a *gua do local at a metade do frasco e mantidos em isopor!
4.2.2 C&)ti+" %$s (i!"$),$s
9a primeira sa$da, as amostras coletadas foram inoculadas em meio l$quido>
dentre todos os meios testados, o Leio Xcido Lodificado L!-!" em pH. 65to<es, 1=0=8
foi o que apresentou melor resultado em relao ao crescimento de microalgas
acidof$licas! ;eja tabela 1%
T$-#)$ 1. C"*."si/0" %" (#i" !i%" ("%i1i!$%" (.A.E
5oluo "stoque Freparo da 5oluo "stoque ;olume 6mlRD8
1! 69HM8,5OM ?7gRl 17ml
,! &a&l,!,H,O 1gRl 17ml
.! Lg5OM!1H,O ?7gRl 17ml
M! \H,FOM .7gRl 17ml
?! 9a&l .gRl 17ml
J! 9a,"KO- ,7gRl 7!?ml
1! Letais Oraos ;eja abaixo 1ml
0! Ee5OM!1H,O M!=0gRl 1ml
H,5OM 1ml
=! ;itaminas ER, ;eja abaixo 1ml
T$-#)$ 2. C"*."si/0" %"s (#t$is t$/"s &s$%"s 2" (#i" !i%" ("%i1i!$%" (.A.E
&omponente gRDitro
1! H.:O. ,!0J
,! Ln&l,!MH,O 1!01
.! Gn5OM!1H,O 7!,,,
1,
M! 9aLoOM!,H,O 7!.=7
?! &u5OM!?H,O 7!71=
J! &o69O.8,!JH,O 7!7M=M
T$-#)$ 3. C"*."si/0" %$ Vit$*i2$ F42 &ti)i5$%$ 2" (#i" !i%" ("%i1i!$%" (.A.E
5oluo "stoque Freparo da 5oluo "stoque R177ml
1! :iotina 7!1mgRml 1mlR177ml
,! ;itamina :1, ?mgRml 7!1mlR177ml
.! Oiamina H&l ,7mgR177ml
Kepois de aproximadamente tr#s semanas repicando em meio l$quido, a
purificao das microalgas acidof$licas foram realizados em meio slido, adicionando+se
*gar na concentrao de ,MgRl, no preparo do Leio Xcido Lodificado L!-!"! -
concentrao do volume utilizado no preparo das solu/es estoque do meio L!-!"! foi
dobrada!
-s culturas de microalgas acidof$licas em meio slido so mantidas no
cep*rio do Daboratrio de Licrobiologia -plicada D!-!L!-, repicados quinzenalmente em
um fotoper$odo de 1, oras com uma temperatura controlada de ,7Z& ,Z&!
4.2.3 I%#2ti1i!$/0" %$s (i!"$),$s A!i%"16)i!$s
-s microalgas acidof$licas sero identificadas com aux$lio de literatura
especializada e consulta a especialistas na *rea! 5egundo observa/es realizadas no
microscpio tico e pesquisa em literatura adequada se conseguiu classificar as microalgas
de interesse a n$vel de classe e g#nero%
Kom$nio "ucarBa
Kiviso &loropBta
&lasse &loropBceae
Ordem ;olvocales
Eam$lia &lamBdomonadaceae
4#nero Chlamydomonas sp!
1.
Kom$nio "ucarBa
Kiviso "uglenopBta
&lasse "uglenopBceae
Ordem "uglenales
Eam$lia "uglenaceae
4#nero Euglena sp!
4.3 TESTES FISIO'GICOS
4.3.1 T#st# %# t")#72!i$ $ (#t$is P#s$%"s
&om as espcies isoladas de microalgas acidof$licas, cultivadas no
laboratrio de Licrobiologia -plicada D!-!L!-, pretende+se avaliar a toler(ncia aos metais
pesados zinco, c*dmio e cumbo utilizando uma metodologia padro para testes de
toxicidade em meio l$quido, atravs de dilui/es para obteno do "&?7! - partir de
solu/es com concentra/es pr+estabelecidas dos metais de interesse, misturadas ao meio
l$quido, avaliar+se+* a toler(ncia das duas espcies de microalgas acidof$licas
6&loropBceae e "uglenopBceae8, atravs de sete dilui/es com intervalos de 7,?! O
inculo inicial, estabelecido atravs do crescimento exponencial, ser* testado na
concentrao de 1mL para os tr#s metais pesados, em frascos de erlenmeBer de 1?7ml,
diluindo exponencialmente at a concentrao de 7,771mL!
Os testes sero realizados em triplicata para cada concentrao do metal
pesado avaliado! @ma comparao em paralelo estar* sendo realizada utilizando o mesmo
procedimento sem o acrscimo de 9a,"KO- na preparao do meio l$quido, pois, segundo
abordagens observadas na literatura, o "KO- pode atuar como quelante de metais pesados!
!
1M
@5 CRONOGRAMA
2003 2004
Jun Jul Ago Set Out Nov Dez Jan Fev
Repicagem das cepas
Identiica!"o das esp#cies
Testes isiol$gicos
An%lise dos dados
1?
Resultados dos testes
Obs! - coleta, processamento, cultivo e isolamento das amostras j* foram realizados ao
longo do ano de ,77,!
A5 DIS1ONIBILIDADE DE RECURSOS E INFRA-
ESTRUTURA
Os experimentos esto sendo realizados no cep*rio do Daboratrio de Licrobiologia
-plicada D!-!L!-! com os recursos dispon$veis no laboratrio! "sto inclu$dos meios de
cultura, reagentes e sais para a preparao dos meios de cultura, vidrarias como
erlenmeBers e placas de petri para a manuteno das culturas das microalgas e alguns sais
met*licos necess*rio para a realizao dos testes fsiolgicos!
1J
B5 REFERNCIAS BIBLIOGR+FICAS
4-P;PGGO, D! :!> ;PKO3, &!> O"K"5&O, L! Q! 3ecuperao de *reas utilizadas para
depsitos de rejeitos de minas de carvo! Pn% &"9O3O K" "&ODO4P- @E345! C$+0" #
(#i" A*-i#2t#. Forto -legre% "d! @niversidadeR@E345, ,777! p! M07!
;-55PDPO@, L!> KP&\, O! Letais txicos associados ao particulado atmosfrico da regio
carbon$fera do :aixo Qacu$, 35 N :rasil! Pn% &"9O3O K" "&ODO4P- @E345! C$+0" #
(#i" A*-i#2t#. Forto -legre% "d! @niversidadeR@E345, ,777! p! MJ= N M17!
11
43O55, S! "copBsiologB of algae living in iglB acidic environments! H8%"-i")",i$,
M.., p! .1+.1, ,777!
4I@3", -!> \O9OF\-, -!> :3OO\5, -!> KO"L"D, S! -lgal and bacterial activities in
acidic 6pH .8 strip mine la<es! A..)i#% $2% E2+i"2*#2t$) (i!"-i")",8, ?., p! ,7J=+
,71J, 1=01!
D"55L-9, K!> K"9"\", 3!> "9K"3, 3!> H"LL, L!> \-FE"3, L!> \3@L:"&\, H!>
SODDL-99, \!> 9PWKO3E, :! Da<e Flessa 171 6Dusatia, 4ermanB8 + -n extremelB
acidic salloT mining la<e! H8%"-i")",i$9 M70RM7=, p! ,=.+,==, 1===!
:3-\", 5! 5!> K-99"DDI, H! \!> &O99O35, \! -! &ontrols on te nature and
distribution of an alga in coal mine+Taste environments and its potencial impact on Tater
qualitB! E2+i"2*#2t$) G#")",89 M7, p! M?0+MJ=, ,771!
3O5-, G! L!> @94-3"OOP, P!> \3"L"3, D! L!> 5PD;-, 5! L!> &-DD"4-3O, ;! D!
L!> S"39"3, ;! 3! Eicoflora de -mbientes D#nticos + "studo preliminar da regio de
carqueadas, 3io 4rande do 5ul, :rasil, com vistas ' avaliao ambiental! A!t$ B"t72i!$
B$si)#i$9 1, p! 1J?+100, 1=01!
D]F"G+-3&HPDD-, -! P!> L-3P9, P!> -LPD5, 3! Licrobial communitB composition and
ecologB of an acidic aquatic environment% Oe Ointo 3iver, 5pain! (i!"-i$) E!")",89 M1,
p! ,7+.?, ,771!
O-94O, L! 5! -!> P5D-L, L! 3! Fotencial of "xtremopiles for :iotecnological and
Fetroleum -pplications! E2#,8 S"&!#s9 ,M, p! ??=, ,77,!
OD-;"5O9, L! L!> 9-D"S-Q\O, &! "ffects of aciditB on te groTt of tTo Euglena
species! H8%"-i")",i$9 M.., p! .=+?J, ,777!
10
-5HD"I, F! L!> DOOO"3LO5"3, :! 4! -rsenic contamination at te Lole 3iver mine,
nortern 9eT 5out Sales! A&st$)i$2 J"&2$) "1 E$t: S!i#2!#s9 MJ, p! 0J1+01M, 1===!
;OD"5\I, :! Bi"s".ti"2 "1 H#$+8 (#t$)s. &3& Fress, 1==7!
5OO\"5, F! L!> 5OO\"5, L! L! 3esponses of te acidopilic alga Euglena mutabilis
6"uglenopBceae8 to carbon enricment at pH .! J"&2$) "1 P:8!")",89 ,?, p! ?,=+?.=,
1=0=!
1=