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INFORME N 3

ESTUDIO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO OPTICO.



1) IMPORTANCIA:

El microscopio es un aparato de aumento para observar cuerpos transparentes o
translucidos, de extraordinaria utilidad en biologa. El mas comnmente usado es el
microscopio ptico(existen otros microscopios: varis tipos de microscopio electrnico,
ultramicroscopio, de efecto tnel, de ultrasonido, etc). Su nombre completo es :
microscopio ptico compuesto ( micro= pequeo ; scopio=mirar, ver; ptico porque utiliza
la luz visible y compuesto porque esta formado por varios lentes, a diferencia de una lupa
que seria un microscopio sencillo). Esencialmente consiste en la combinacin de dos
juegos de lentes el objetivo y el ocular. El objetivo es el lente mas importante del
microscopio ya que forma la primera imagen del objeto mientras que el ocular
simplemente amplia dicha imagen. Adems, del objetivo depende el poder de resolucin
del microscopio, es decir, la capacidad de este para que dos puntos o detalles
estructurales situados muy cerca puedan verse como puntos separados. La resolucin
mxima del microscopio ptico es de 0,2 micrometros, la del ojo humano es de 0,1
milimetros. Los microscopios que usaras pueden cambiar la imagen de las muestras
hasta 675 veces. El objetivo forma una imagen aumentada e invertida respecto del objeto
que se observa, el ocular forma una imagen aumentada pero no invertida respecto de la
imagen que da el objetivo, por lo tanto nosotros observaremos una imagen aumentada e
invertida del objeto que se trate. El microscopio actua amplificando la luz que ha pasado a
travs del objeto a observar, por ello es necesario que este sea transaparente o
translucido. Para conseguirlo se debe tomar una pequesima cantidad del material a
observar, de modo que, siendo tan poco, es transparente. Cuando se trata de una objeto
opaco (un hueso, o el corcho ) se pone una lamina finsima que, de tan fina, es
transparente.
Pero entonces, si es transparente, no se vern muchos detalles. Para que se vean, se
somete la muestra a otro tratamiento : se colorea mediante sustancias que tien solo
algunas partes de la muestra. Estas dos manipulaciones : conseguir que la muestra se
haga transparente y teirla, dejan al material listo para ser observado. Pero manejarlo es
muy difcil, pues es muy pequeo y muy poco firme. Para evitar este problema ponemos
el material sobre una pequeo vidrio, el portaobjetos o porta y lo tapamos con otro vidrio
aun mas fino y mas pequeo, el cubreojetos o cubre (en algunos casos este no es
necesario). En conjunto de porta, material y cubre constituyen la preparacin, lista para
ser observada al microscopio.

El microscopio debe estar protegido del polvo, humedad y otros agentes que pudieran
daarlo. Mientras no est en uso debe guardarse en un estuche o gabinete, o bien
cubrirlo con una bolsa plstica o campana de vidrio. Las partes mecnicas deben
limpiarse con un pao suave; en algunos casos, ste se puede humedecer con xilol para
disolver ciertas manchas de grasa, aceite de cedro, parafina, etc. Que hayan cado sobre
las citadas partes. La limpieza de las partes pticas requiere precauciones especiales.
Para ello debe emplearse papel "limpiante" que expiden las casas distribuidoras de
material de laboratorio. Nunca deben tocarse las lentes del ocular, objetivo y condensador
con los dedos; las huellas digitales perjudican la visibilidad, y cuando se secan resulta
trabajoso eliminarlas. Para una buena limpieza de las lentes puede humedecerse el papel
"limpiante" con ter y luego pasarlo por la superficie cuantas veces sea necesario. El
aceite de cedro que queda sobre la lente frontal del objetivo de inmersin debe quitarse
inmediatamente despus de finalizada la observacin. Para ello se puede pasar el papel
"limpialentes" impregnado con una gota de xilol. Para guardarlo se acostumbra colocar el
objetivo de menor aumento sobre la platina y bajado hasta el tope; el condensador debe
estar en su posicin ms baja, para evitar que tropiece con alguno de los objetivos.
Gurdese en lugares secos, para evitar que la humedad favorezca la formacin de
hongos. Ciertos cidos y otras sustancias qumicas que producen emanaciones fuertes,
deben mantenerse alejados del microscopio. Manejo del microscopio: Colocar el objetivo
de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina completamente. Si el
microscopio se recogi correctamente en el uso anterior, ya debera estar en esas
condiciones. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas.
Comenzar la observacin con el objetivo de 4x (ya est en posicin) o colocar el de
10aumentos (10x) si la preparacin es de bacterias. Para realizar el enfoque: acercar al
mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo macromtrico. Esto
debe hacerse mirando directamente y no a travs del ocular, ya que se corre el riesgo de
incrustar el objetivo en la preparacin pudindose daar alguno de ellos o ambos..
Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo dela
preparacin con el macromtrico y, cuando se observe algo ntida la muestra, girar el
micromtrico hasta obtener un enfoque fino. Pasar al siguiente objetivo. La imagen
debera estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micromtrico
para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdi por completo la imagen, es
preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operacin. El objetivo de 40x
enfoca a muy poca distancia de la preparacin y por ello es fcil que ocurran dos tipos de
percances: incrustarlo en la preparacin si se descuidan las precauciones anteriores y
mancharlo con aceite de inmersin si se observa una preparacin que ya se enfoc con el
objetivo de inmersin. Empleo del objetivo de inmersin: bajar totalmente la platina. Subir
totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que nos indica la zona
que se va a visualizar y donde habr que echar el aceite. Girar el revlver hacia el objetivo
de inmersin dejndolo a medio camino entre ste y el de x40.d.Colocar una gota mnima
de aceite de inmersin sobre el crculo de luz. Terminar de girar suavemente el revlver
hasta la posicin del objetivo de inmersin. Mirando directamente al objetivo, subir la
platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite. En ese momento se nota
como si la gota ascendiera y se adosara a la lente.
2) OBJETIVOS:


Aprender a utilizar correctamente el microscopio.
Conocer todas las partes y las funciones del microscopio.
Realizar preparados en fresco, faciles .
Saber como utilizar las laminas y como colocar las laminillas.
Observar distintas muestras en diferentes aumentos.

3) PROCEDIMIENTO :

-Primero observamos al microscopio , se nos menciono cuales eran sus partes y se nos
explico las funciones de cada una.


















Se nos explico que en un microscopio se distinguen dos partes: mecnica y ocular.
I. Parte mecnica:
-Tubo: cilindro hueco en cuyos extremos estn situados estn situados el objetivo y el
ocular.
-Brazo: columna lateral en la que se apoyan los distintos elementos.
-Platina: placa sobre la que se coloca la preparacin, con una pinza para sujetar la lmina.
-Macrometrico: provoca un movimiento amplio y sirve para un enfoque aproximado.
-Micrometrico: prooca un movimiento muy corto y sirve para un enfoque fino.
-Pie: base pesada para mantener la estabilidad del microscopio.
II. Parte ptica:
-Ocular : juego de lentes de la parte superior del tubo. Lleva marcado el nmero de
aumentos que posee.
-Objetivos : lentes de la parte inferior del tubo, suelen haber mas de uno, estn sujetos a
una pieza llamada revolver , el cual gira y permite cambiar de objetivo.
-Condensador : sistema de lentes situados bajo la platina que concentra la luz en el objeto
observado.
-Diafragma : situado bajo el condensador, regula la cantidad de luz que llega a la muestra.













-Se nos pidi recortar una letra e de un peridico para observarlo al
microscopio, se lo coloco en una lamina y se le echo una gota de agua, luego
se le coloco una laminilla para cubrirlo.

-RESULTADOS:































































4) DISCUSION:

-Como podemos obsevar en las distintas muestras, en una imagen vemos la muestra
mucho mas amplia, en cambio en la otra vemos la imagen ms pequea .
-Esto es debido al cambio de objetivos en el cual hay distintas medidas haciendo que el
tamao de la imagen varie.
-Hay varias medidas y de acuerdo a la que eligas la imagen se vera grande o pequea.

5) CONCLUSIONES:

El microscopio ha sido uno de los avances cientficos mas importantes del
hombre porque ha significado un gran avance para la ciencia y hoy en da lo
sigue siendo, por que gracias a el se investigan y desarrollan muchas ciencias.
En esta prctica se han aprendido las partes del microscopio su correcto uso,
manipulacin y mantenimiento.
El microscopio es una importante herramienta ya que sin este aparato seria
imposible visualizar los microorganismos a simple vista, es fundamental en el
avance de la citologa, citogentica, microbiologa, fitopatologa virologa,
bacteriologa, parasitologa y dems ciencias que se trabaja con
microorganismos.


6) CUESTIONARIO:

I. Describa los diferentes tipos de microscopio e indique su uso en medicina.

Microscopio ptico: tambin llamado "microscopio liviano", es un tipo de
microscopio compuesto que utiliza una combinacin de lentes agrandando las
imgenes de pequeos objetos. Los microscopios pticos son antiguos y simples
de utilizar y fabricar.
Microscopio compuesto: es un aparato ptico hecho para agrandar objetos,
consiste en un nmero de lentes formando la imagen por lentes o una
combinacin de lentes posicionados cerca del objeto, proyectndolo hacia los
lentes oculares u el ocular. El microscopio compuesto es el tipo de microscopio
ms utilizado.
Microscopio fluorescente : es un tipo especial de microscopio liviano, que en vez
de tener un reflejo liviano y una absorcin utiliza fluorescencia y fosforescencia
para ver las pruebas y sus propiedades.
Microscopio electrnico : es uno de los ms avanzados e importantes tipos de
microscopios con la capacidad ms alta de magnificacin. En los microscopios de
electrones los electrones son utilizados para iluminar las partculas ms pequeas.
El microscopio de electrn es una herramienta mucho ms poderosa en
comparacin a los comnmente utilizados microscopios livianos.
Microscopio de campo claro : consiste en una fuente luminosa, un condensador
que enfoca los rayos de luz sobre la muestra una platina sobre la cual se coloca la
muestra, un objetivo y un ocular a travs del cual se puede observar directamente
el espcimen. La utilidad del microscopio ptico reside en su capacidad de
magnificacin y lo que es ms importante, su capacidad de resolver detalles
estructurales.
Microscopio de luz ultravioleta: se utiliza una fuente de luz ultravioleta y depende
de la absorcin de esa luz por las molculas de la muestra. Sus resultados se
registran fotogrficamente. No es posible examinar en forma directa el espcimen
en el ocular, ya que la luz ultravioleta daa la retina. Este mtodo sirve para
detectar cidos nucleicos, especficamente bases puricas y pirimidicas del
nucletido. Tambin es til para detectar protenas que contienen ciertos
aminocidos.
Microscopio de polarizacin: es una simple modificacin del microscopio ptico,
pero el espcimen es atravesado por luz paralizada y se usa otro polarizador que
se hace rotar para detectar la orientacin molecular en muestra de tejidos.
Microscopio de contraste de fase: permite observar clulas y tejidos sin colorear y
por eso resulta especialmente til para el examen de clulas vivas y cortes
gruesos de material plstico no coloreados. Existen pequeas diferencias del
ndice de refraccin en diferentes partes de la clula y en distintas partes de una
muestra de tejido. La luz que pasa por regiones de mayor ndice de refraccin
experimenta una deflexin y queda fuera de fase con respecto al haz principal de
las ondas de luz.
Microscopio de barrido con focal: Es un sistema relativamente nuevo se usa para
estudiar la estructura de sustancias biolgicas. En este microscopio se utiliza un
rayo lser de iluminacin que es fuertemente convergente y por lo tanto produce
un punto de barrido muy poco profundo. La luz que emerge del punto es dirigida a
un tubo foto multiplicada, donde es analizada. Se utiliza un sistema de espejos
para mover el rayo lser a travs del espcimen iluminando un solo punto por vez.


II. Qu cuidados debe tenerse con un microscopio?

Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en
posicinde observacin, asegurarse de que la parte mecnica de la platina no
sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda.
Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su
funda para evitar que se ensucien y daen las lentes. Si no se va a usar de forma
prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del
polvo.
Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy
suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de ptica.
No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el
microscopio.
El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la mirada a
la preparacin para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca
de objetivo agarrndolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se est
observando a travs del ocular.
Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn
lquido, secarlo con un pao.

III. Qu es un colorante? Qu tipos de colorantes existen?

-Son compuestos orgnicos que tienen alguna afinidad especfica por los materiales
celulares. Los colorantes se utilizan en microscopia cuando deben visualizarse
componentes de clulas y tejidos en material animal y vegetal. Frecuentemente estas
tcnicas de visualizacin pticas son los nicos mtodos de identificar y diferenciar tales
tejidos. Los colorantes para microscopia se utilizan principalmente en histologa, citologa
y microbiologa, pero tambin en el anlisis de fibras textiles, papel y otros productos
tcnicos.
-Tipos: anionicos, catinicos, liposolubles, simples, diferenciales, selectivas.

IV. Esquematice y denomine la formacin de la imagen final en un microscopio
simple y de un microscopio compuesto.

-Formacion de la imagen en un microscopio simple: En el esquema se muestra la
formacin de la imagen, cuando se ha colocado el objeto entre la lente y su foco principal.
Se obtiene una imagen virtual y derecha, con tanta mayor amplificacin cuanto ms
prximo al foco se encuentre el objeto.










-Formacion de la imagen en un microscopio compuesto: La distancia entre el ocular y el
objetivo debe ser calculada de manera que la imagen real obtenida por el objetivo se
forme entre el ocular y su punto focal (11). El aumento del microscopio depender en
principio de la longitud focal del objetivo. Mientras ms pequea sea esta longitud y el
objeto se acerque al objetivo, ms grande ser la imagen real. El aumento tambin
depende de la distancia focal del ocular y mientras ms corta sea esta, mayor ser el
aumento.













V. Defina :

-Imagen real: Es aquella que se forma cuando, tras pasar por el sistema ptico, los rayos
de luz son convergentes. Esta imagen no la podemos percibir directamente con nuestro
sentido de la vista, pero puede registrarse colocando una pantalla en el lugar donde
convergen los rayos.
-Imagen virtual: Es aquella que se forma cuando, tras pasar por el sistema ptico, los
rayos divergen. Para nuestro sentido de la vista los rayos parecen venir desde un punto
por el que no han pasado realmente. La imagen se percibe en el lugar donde convergen
las prolongaciones de esos rayos divergentes. Es el caso de la imagen formada por un
espejo plano. Las imgenes virtuales no se pueden proyectar sobre una pantalla.
-Longitud de onda: Longitud de onda se le denomina a la distancia que hay entre dos
crestas consecutivas de una onda. La luz, el sonido, las ondas de radio, etc. tienen
longitudes de onda. La longitud de onda es inversamente proporcional a la frecuencia,
osea que a menor longitud de onda mayor frecuencia y viceversa. Las longitudes de onda
se pueden medir en metros, centmetros, milmetros, micrmetros, nanmetros
(millonsima de un metro), etc. Todo depende de la comodidad, ya que la longitud de
onda puede variar enormemente (de varios metros a unos pocos nanmetros).
-Limite de resolucin: Lmite de resolucin vendra a ser la menor distancia entre dos
objetos para que puedas visualizarlos separados. Te marca la minima distancia entre dos
objetos que puedes diferenciar.
-Poder de resolucin: El poder resolutivo es la capacidad que tiene un microscopio (o el
ojo humano, etc.) de percibir por separado dos puntos pequeos, adyacentes y cercanos.
Vale decir, es la capacidad para percibir detalles. El poder resolutivo aumenta a medida
que disminuye la distancia que separa dichos punto.


7) REFERENCIAS:

http://microbiologiaunq.files.wordpress.com/2008/04/seminario-nc2b02-microscopia.pdf

http://es.scribd.com/doc/19973843/INFORME-Estudio-y-Manejo-Del-Microscopio

http://www.uam.es/personal_pdi/ciencias/bolarios/BiologiaCCAA/Guiones/Practica3.htm