Revista de Investigacin, Vol. 6 (1). Enero - junio 2006.
Frecuencia de Dirofilaria immitis y su relacin con cardiopatas en caninos positivos con la prueba de ELISA 1 MARTA ELENA SNCHEZ KLINGE / PILAR CALVO ROBAYO EDISSON ANDRES BELLO BARBOSA / JUAN CARLOS ROJAS MNDEZ Facultad de Medicina veterinaria, Universidad de La salle, Bogot D.C.,Colombia. La dirofilariasis canina llamada tambin enfermedad del gusano del corazn o heartworm, es ocasionada por la microfilaria Dirofilaria immitis y se presenta en huspedes definitivos como el perro. Esta enfermedad es transmitida por mosquitos vectores de los gneros: Aedes, Anopheles, Culex y Taeniorhynchus; eventualmente puede afectar al hombre. El objetivo fue determinar la frecuencia de ocurrencia de D. immitis en perros de tres pisos trmicos: Bogot (2600 msnm), Fusagasuga (1700 msnm) y Girardot (326 msnm). La deteccin de D. immitis se realiz con la prueba de ELISA, y su presencia se relacion con cambios electrocardiogrficos. Los resultados mostraron una tasa de infeccin en Fusagasuga de 0,96% y del 0,97% en Bogot. En Girardot no se presentaron animales positivos, debido al parecer, al uso continuo de ivermectinas que se hace en esta ciudad. El electrocardiograma del perro positivo a dirofilaria de Fusagasuga mostr un fluter auricular, caracterstico de una distensin, compatible con la presencia de D. immitis, mientras que el de Bogot mostr un segmento S-T deprimido, eje cardiaco desviado a la izquierda y una presunta distensin ventricular izquierda, que es ms compatible con cardiopata valvular comn en los perros Cocker spaniel. Palabras clave: Dirofilaria immitis, dirofilariasis, electrocardiograma. Frequency of Dirofilaria immitis and its correlation with cardiopathies in dogs with positive ELISA test The canine dirofilariasis, also known as heartworm, is caused by the Dirofilaria immitis microfilaria and it is presented in dogs as definitive host. The canine dirofilariasis, is transmitted by vector mosquitoes: Aedes, Anopheles, Culex and Taeniorhynchus; and eventually it can affect human beings. The purpose of this study was to determine the occurrence frequency of D. immitis in dogs in three different climate levels: Bogot (2600m above sea level), Fusagasug (1700m above sea level) and Girardot (326m above sea level). The D. immitis detection was carried out with the ELISA test, and its presence was related with electrocardiographics changes. The results showed a rate of infection of 0.96% in Fusagasuga and 0.97% in Bogota. In Girardot, there were no positive dogs possibly due to the continuous use of ivermectines in this city. The dogs electrocardiogram positive to D. immitis in Fusafasuga showed an atrial flutter, which is characteristic in distension, compatible with the presence of D. immitis, while the dog in Bogot showed an S-T depressed segment, deviated heart axis to left and a possible left ventricular distension which is compatible with valve cardiopathy quite common in the Cocker spaniel dog. Key Words: Dirofilaria immitis, heartworm, electrocardiogram 1 Esta investigacin fue financiada por la Universidad de La Salle. Correspondencia: msanchez@lasalle.edu.co Recibido: Noviembre 03 de 2005. Aceptado: Febrero 03 de 2006. Revista de Investigacin, ISSN 16576772. Vol. 6 (1): 61-65. Enero - junio 2006. 62 Frecuencia de Dirofilaria immitis y su relacin con cardiopatas en caninos positivos con la prueba de ELISA. Snchez ME et al. INTRODUCCIN La dirofilariosis cardiopulmonar canina es causada por D. immitis y tiene una distribucin cosmopolita. Los factores que condicionan la difusin de la enfermedad son: la temperatura y la humedad; la densidad de mosquitos vectores y la presencia de hospedadores definitivos en los que el parsito completa su desarrollo y se reproduce. Su presencia coincide frecuentemente con reas de gran vegetacin, que constituyen un excelente medio para el desarrollo de mosquitos de los gneros Culex, Anopheles y Aedes, y en las que hay amplias poblaciones caninas. En Colombia, se ha reportado la presencia de D. immitis en Cali, en varios municipios del departamento de Crdoba y en zonas de clima fro tales como, Pasto, Ipiales, Manizales y Bogot (Aranda y Merizalde 1990, Patio 1991). Desde el punto de vista clnico, la dirofilariosis cardiopulmonar es una enfermedad grave y potencialmente mortal. Comienza con una afeccin vascular y pulmonar progresiva y muy compleja, que en sus ltimas fases afecta a las cmaras cardacas derechas. Puede presentarse tambin un desarrollo agudo con hemlisis intravascular, anemia, hemoglobinuria y shock cardiocirculatorio denominado sndrome de vena cava, causado por la localizacin sbita de una gran masa de vermes en el atrio ventricular derecho. En algunos casos, los vermes inmaduros alcanzan una rama de la arteria pulmonar, donde posterior a su destruccin; producen un ndulo pulmonar benigno. No obstante, si la persona acude a consulta mdica por causas no relacionadas con la dirofilariosis, el descubrimiento de un ndulo en el pulmn produce sospecha de una causa maligna, por lo que en ocasiones se realizan intervenciones quirrgicas innecesarias y muy agresivas. Por esta razn, en la dirofilariosis pulmonar humana, es fundamental conocer la existencia de este parsito para incluirlo en el diagnstico diferencial de ndulos pulmonares. Despus que una persona es inoculada por un mosquito con larvas del tercer estadio, la mayora de ellas muere en el tejido subcutneo, sin embargo alguna puede escaparse del tejido subcutneo, sobre todo en infecciones repetidas, seguir su desarrollo y migrar hacia los pulmones (Benenson 1994). Al principio, el animal afectado muestra pocos signos de infeccin y estos dependen de la severidad de la infeccin, la ubicacin de la filaria, el tiempo que han estado presentes y la cantidad de daos efectuados al corazn, pulmones, hgado y otros rganos, el animal afectado mostrar cada vez menos tolerancia al ejercicio (Fox et al. 1999). Los signos ms obvios son tos seca y crnica, disnea, debilidad, inquietud y prdida de peso. Se debe prevenir la infeccin en los perros para evitar la infeccin en humanos. Las microfilarias se pueden detectar en sangre. En la actualidad, existen diferentes productos que previenen la enfermedad en perros, los cuales estn basados en derivados de abamectina y son ivermectina, melbemicina y selamectina (Funez 2002). Cada uno tiene una forma de aplicacin y previene adems de otros parsitos, tanto internos, como externos. Todos se administran una vez al mes, ya que actan sobre las larvas que introducen los mosquitos debajo de la piel y que permanecen all durante aproximadamente 30 das. Existen diversas tcnicas de diagnstico como la deteccin de microfilarias en sangre perifrica; se cuenta con la prueba enzimtica de ELISA PETCHEK la cual es especifica para diagnosticar la enfermedad y no presenta reaccin cruzada con otros parsitos lo cual nos brinda un diagnstico rpido y certero de la enfermedad. La prueba enzimtica rpida de ELISA, es usada para detectar Antgenos (Ag) o anticuerpos (Ac) especficos de una enfermedad, mediante una placa de polietileno con celdas o pozos recubiertos con ellos, la placa los mantiene inmovilizados, por lo que el Ag o el Ac presente en el suero se une a ellos. El conjugado que se agrega son enzimas marcadas que se ligan al recubrimiento; la solucin de lavado quita el material que no se ha ligado y la solucin bloqueadora termina con la reaccin y el desarrollo de color. Este trabajo hace parte del proyecto de Investigacin Determinacin de la frecuencia de Dirofilaria immitis en mascotas caninas y su correlacin con parmetros electrocardiogrficos en tres pisos trmicos de Cundinamarca, 63 Revista de Investigacin, Vol. 6 (1). Enero - junio 2006. Colombia, financiado por la Universidad de La Salle. MATERIALES Y MTODOS Para realizar el estudio se tomaron datos al azar en perros sin distincin de raza, sexo, edad o peso. 128 perros en Girardot, 104 en Fusagasuga y 103 en Bogot para un total de 335 perros a cada uno de los cuales se les abri una ficha tcnica, se les tomo un electrocardiograma y una muestra de sangre sin anticoagulante; de la cual se extrajo el suero para la prueba de ELISA. El electrocardiograma se tom con el animal de pie, colocando los cuatro electrodos de las extremidades y los cuatro precordiales, para registrar las seis derivaciones del plano frontal (DI, DII, DIII, aVR, aVL y aVF) y las cuatro precordiales (CV6LL, CV6LU, CV5RL y V10) con una velocidad de papel de 50 mm/s y con una calibracin de 1mv =1 cm. Para la prueba de ELISA se hizo un mapa con cuatro placas con 96 celdas, para ubicar cada suero y se sigui la tcnica del PETCHEK para lector de ELISA. Para validar la prueba en cada placa se calcul el P-N que es la diferencia entre la Densidad ptica (DO) del control positivo y la DO del control negativo, la cual debe ser mayor de 0,150. La DO del control negativo debe ser menor o igual a 0,150. Para verificar el punto de corte, el cual indica los valores corresponden a animales positivos y negativos; se calcul la densidad ptica del control negativo se le sum 0,05; este es el punto de corte, por encima de este valor los sueros son positivos a D. immitis y por debajo de este punto de corte son negativos. RESULTADOS Caninos positivos a Dirofilaria immitis. Al calcular la DO de los sueros caninos en cuatro placas de ELISA, dos caninos resultaron positivos uno de Fusagasuga y otro de Bogot. Figura 1. Derivacin II del electrocardiograma del canino criollo, callejero de la ciudad de Fusagasuga, positivo a Dirofilaria immitis, la flecha indica un fluter auricular. El canino de Fusagasug positivo para D. immitis es una hembra criolla, callejera, que fue recogida por el Hogar del perro de la Calle, su edad era aproximadamente de cuatro aos, con un peso de 4 kg. El suero de este canino, con el test ELISA mostr una densidad ptica de 0,124 que esta por encima del valor del punto de corte; esto indica que es positivo para D. immitis. En su electrocardiograma se observa un fluter auricular (Figura 1). El canino present un ritmo auricular de 330/min, con taquicardia supraventricular, frecuencia cardiaca de 133 latidos/min y el eje cardiaco present +60. 64 Frecuencia de Dirofilaria immitis y su relacin con cardiopatas en caninos positivos con la prueba de ELISA. Snchez ME et al. La Tabla 1, muestra los resultados de la lectura del electrocardiograma en la Derivacion II de este canino. Tabla 1. Datos del electrocardiograma en la derivacin II del canino de Fusagasuga positivo para D. immitis. Lectura de la Figura 1 Amplitud Duracin Onda P 0,15 mv Onda Q 0,2 mv Onda R 1,1 mv Onda S 0,0 mv Onda T 0,2 mv Onda P 0,03 s Complejo QRS 0,04 s Intervalo P-Q 0,08 s Intervalo Q-T 0,18 s Intervalo R-R 0,45 s El canino de Bogot positivo para D. immitis es una hembra de la raza Cocker Spaniel de 9 aos de edad y 5 kg de peso. El suero de este canino, con el test ELISA mostr una densidad ptica de 0,127 que esta por encima del valor del punto de corte; esto indica que es positivo para D. immitis. En su electrocardiograma se observa el segmento S-T incluido en la un complejo QRS ms ancho y una onda T de mayor amplitud (Figura 2). Este ECG sugiere una distensin ventricular izquierda, debido a una desviacin del eje a la izquierda y una depresin del segmento S-T. Las ondas T indican que puede haber una hiperkalemia. Este canino present una frecuencia cardiaca de 120 latidos/min y un eje cardiaco de +30, desviado a la izquierda, lo cual indica una presunta distensin ventricular izquierda. La Tabla 2, muestra los resultados de la lectura del electrocardiograma en la derivacin II del canino positivo para D. immitis procedente de Bogot. Tabla 2. Datos del electrocardiograma en la derivacin II del canino de Bogot positivo para D. immitis. Lectura Amplitud Duracin de la Figura 2 Onda P 0,2 mv Onda Q 0,3 mv Onda R 1,8 mv Onda S 0,0 mv Onda T 0,5 mv Onda P 0,03 s Complejo QRS 0,05 s Intervalo P-Q 0,07 s Intervalo Q-T 0,17 s Intervalo R-R 0,50 s Se encontr una tasa de infeccin por D. immitis en perros de la ciudad de Fusagasug del 0,96% con un animal positivo de 104 animales muestreados; y en perros de la ciudad de Bogot del 0,96%, con un animal positivo de 103 animales muestreados. En la ciudad de Girardot, no se presento ningn canino positivo a D. immitis en 128 caninos incluidos en el estudio. DISCUSIN Con respecto a los patrones electrocardiogrficos en dirofilariosis, Tilley (1998), reporta que por lo general son normales, pero se puede reflejar una hipertrofia ventricular derecha en perros con infestacin grave y en algunas ocasiones se registran disturbios en el ritmo cardiaco, entre ellos la fibrilacin auricular es la ms comn. Lo encontrado en el canino Cocker positivo para D. immitis, no esta de acuerdo con lo reportado por Edwards (1987) para dirofilaria; puesto que en su descripcin del caso, un canino con parsitos del corazn report la presencia de ondas P pulmonares y mitrales, que son compatibles con dilatacin cardiaca, prominentes ondas S, ondas R de baja amplitud y grandes ondas T, frecuencia cardiaca cercana a los 175 latidos minuto y ritmo cardiaco con una ligera arritmia sinusal. Lo Figura 2. Derivacin II del electrocardiograma del canino de la raza Cocker Spaniel de la ciudad de Bogot, positivo a Dirofilaria immitis con aumento de la duracin del complejo QRS. 65 Revista de Investigacin, Vol. 6 (1). Enero - junio 2006. encontrado en el electrocardiograma del canino Cocker en este estudio; son ms bien compatibles con una cardiopata valvular que es prevalente y clnicamente significativa en perros viejos de raza pequea como: Cocker, Poodle, Malts y Yorkshire Terrier; los cuales, estn predispuestos a sufrir procesos degenerativos de las vlvulas del corazn. Cuando las vlvulas del corazn sufren estos procesos degenerativos, su capacidad de cierre se ve alterada, favoreciendo que la sangre regrese y se congestione en alguna de las vlvulas del corazn. Esto hace que el corazn comience a dilatarse en una o varias de sus cmaras, alterando de manera secundaria la capacidad de contraccin del msculo cardaco. Todo esto lleva a una insuficiencia cardiaca. No siempre las causas son degenerativas, hay algunas situaciones en las que se inflaman o se infectan estas importantes vlvulas del corazn (Goldman AA). Esta afeccin, en el caso del Cocker, puede estar enmascarando las lesiones causadas por el parsito D. immitis o puede ser que an este parsito no haya causado efectos sobre el corazn derecho. Los caninos de Girardot se encontraban habitando dentro de casas; a los cuales se les realiza permanentemente un control parasitario, principalmente con ivermectinas para el control de garrapatas (Funez 2005); sin embargo, a nivel de campo, puede estar presentndose dicho nemtodo, por lo que sera de gran utilidad realizar un estudio con caninos de finca. La frecuencia de dirofilariasis en Bogot, al parecer no ha aumentado, (0,97%), contra un 1% reportado por Aranda y Merizalde (1990), no obstante, los caninos de la muestra fueron mascotas a las que se les lleva un control veterinario; en futuros trabajos se recomienda incluir a perros de la calle, a los cuales no se les hace ningn tipo de control parasitario. En Fusagasug no se tienen reportes de prevalencia de dirofilariasis, en el presente se encontr una frecuencia de 0,96%. Se sugiere, para futuros estudios, aumentar la muestra canina, puesto que con un solo animal positivo encontrado en esta investigacin, indica que la enfermedad se puede expandirse en la regin; dado que el animal positivo era un perro de la calle, al cual no se le pudo hacer un control de la enfermedad y por tanto es un portador de la misma. La prevencin de la infeccin con D. immitis es importante, dado que esta parasitosis llega a ser mortal para la mascota; adems del riesgo de transmisin al hombre, como husped ocasional, al cual le puede causar ndulos pulmonares y poner en peligro su salud. AGRADECIMIENTOS A la Universidad de La Salle por el soporte econmico brindado a esta investigacin. A la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad de La Salle por su apoyo incondicional. BIBLIOGRAFA Aranda R, Merizalde M 1990. Evaluacin de la enfermedad del gusano del corazn del perro (Dirofilaria immitis). Comparando la tcnica modificada de Knott con la prueba Dirocheck (ELISA) en Bogot. Trabajo de Grado. Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad de La Salle. 83 pp. Benenson SA 1994. Filariasis. Manual para el Control de las Enfermedades Transmisibles. Organizacin Panamericana de la Salud. Decimosexta Edicin, Publicacin Cientfica No 546. Edwards J 1987. Boltons Handbook of canine and feline Electrocardiography. Second edition. W.B. Saunders Company. 381 pp. Fox R, Sisson D, Mose N 1999.Textbook of Canine and Feline Cardiology. Principles and Clinical Practice. W.B. Saunders Company. Second Edition. 955 pp. Funez FA 2002. Protocolo Diagnstico en Filariosis en pequeos animales. Profesin Veterinaria 54: 26-32. Goldman AA. Enfermedades del corazn: cardiopatias. Consultado en: www.mascotia.com/articulos/1577.htm Patio F, Uribe J, Mendoza J, Guerrero J, Newcomb K 1991. Levantamiento de la prevalencia de parsitos del corazn en poblacin canina. Revista Acovez 16: 27-31. Tilley LP 1998. La Consulta veterinaria en 5 minutos canina y felina. Editorial Intermdica, Buenos Aires Argentina. 1293 pp. 66