OTRAS ESTRUCTURAS CELULARES

EN BACTERIAS

Extracelulares

­ Cápsula (glicocálix)
­ Fimbrias
­ Pili
­ Flagelo
 Glicocálix bacteriano
CÁPSULA – MUCÍLAGO

Muchos procariontes secretan en su

superficie materiales pegajosos cuya función
principal es la adherencia.
• La mayoría está compuesta de polisacáridos.
• Sirve también para evadir las células
fagocíticas del sistema inmune
• Las capas de polisacáridos unen agua, por lo
que les da a las bacterias resistencia a la
desecación.
• Si el glicocálix se deforma fácilmente, no
excluye partículas y es más difícil de ver,
corresponde al MUCÍLAGO (slime layer).

• Si las capas son rígidas y ordenadas en una

matriz muy apretada que excluye partículas
como la tinta china, se llama CÁPSULA
 Fimbria o pili (pili común)
• son apéndices cortos, huecos, rectos que rodean toda la
bacteria en un gran número
• formado por proteínas
• tienen como función la adherencia a superficies
• son factores de virulencia para bacterias patógenas, pues le
permiten adherirse a tejidos y mucosas del hospedero
• pili F o pili sexual: es un tipo especial de pili que participa en
la conjugación bacteriana
• la genes de la expresión del pili F están en un plasmidio
 Fimbrias y pili
• Fimbrias:
– son más cortos que los flagelos
– son más numerosos
– constituidos por proteínas
– función en adherencia
• Pili:
– son más largos que las fimbrias
– sólo uno o pocos
– receptores de algunos virus (se usan para verlos al
microscopio electrónico)
– involucrados en procesos de conjugación y
adherencia a tejidos humanos (bacterias patógenas)
Flagelo bacteriano

Movimiento
 Movimiento bacteriano
• Nado (swimming) por flagelo

• Deslizamiento (gliding) por otro mecanismo

• Posicionamiento en un medio líquido

(vesículas de gas)
 Movimiento gliding
• carecen de flagelos
• movimiento sobre superficie sólida
• velocidad de 10 µ m/s
• las bacterias son filamentosas o bacilares
• el mecanismo no es bien conocido
– Cianobacterias: secreta un polisacárido en la superficie,
se adhiere a la superficie sólida que empuja a la célula
– Flavobacterium johnsoniae: el movimiento de proteínas
ancladas en las membranas citoplasmáticas y membrana
externa (tipo ruedas de tanque)
 Modelo de gliding propuesto para
Flavobacterium johnsoniae
• Presencia de proteínas específicas de
gliding en la membrana citoplasmática y
membrana externa.
• En el peptidoglicán existirían conectores
con proteínas de la membrana
citoplasmática y proteínas de la
membrana externa.
• Estos conectores propulsan a las proteínas
a lo largo de la superficie sólida.
 Flagelo bacteriano
• apéndices largos
• con un extremo unido a la célula
• delgados, cerca de 200 nm
• no se pueden ver al microscopio óptico

• flagelación polar: en un polo bacteriano, puede ser:

– unipolar (un flagelo)
– lofótrico (muchos flagelos)

• flagelación perítrica: alrededor de toda la superficie

• se usa como característica para la clasificación bacteriana

Imagen de
microscopía
electrónica de
un cuerpo basal
de Salmonella
enterica .
L, P, S, M y C
son los discos.
 Estructura flagelar
• Filamento
• Gancho
• Motor

• la parte externa se puede sacar por

acción mecánica (vortex)
• Con tratamiento con calor o ácido: se
obtienen los monómeros
 Filamento
• forma helicoidal rígido
• filamentos constituidos por flagelina
• la flagelina está altamente conservada
• PM subunidad: 40.000 D
• la estructura básica varía muy poco entre las
Bacteria
• en Archae se conocen varias flagelinas
• la forma y curvatura de la hélice está dada en
parte por la flagelina
• el diámetro varía de 12 a 18 nm
 Gancho (hook)

• es la parte más ancha del flagelo que

sobresale de la bacteria
• está constituido por una proteína
• conecta el filamento con el motor
 Motor flagelar
• está anclado en la membrana citoplasmática y
pared celular
• es un filamento corto que pasa por un sistema de
anillos
• En Gram negativo, 3 anillos:
– LPS
– peptidoglicán
– membrana citoplasmática
• En Gram positivo, 2 anillos:
– membrana citoplasmática
– peptidoglicán
 Motor flagelar
• Proteínas Mot: rodean el anillo de la
membrana citoplasmática

• provocan el torque que hace rotar el

filamento

• Proteínas Fli: son el interruptor del motor,

cambiando el sentido de rotación del
motor.
 Síntesis del flagelo
• 40 genes son necesarios, que codifican
para
– proteínas estructurales del flagelo
– proteínas de exportación
– Proteínas de regulación
Etapas de la síntesis del flagelo bacteriano.

Se necesitan 20.000 copias de la proteína flagelina para sintetizar un

filamento. La flagelina recorre el gancho por dentro guiada por pro-
teínas cap que aseguran su crecimiento parejo.
 Movimiento flagelar
• los flagelos son semi-rígidos
• funcionan como rotores helicoidales
• giran CW o CCW, a lo largo de su eje

• si se trata con lisozima la bacteria, los

protoplastos son inmóviles a pesar de
tener intactos los flagelos
– por lo tanto, se requiere de la estructura de
la pared para el movimiento
 Movimiento flagelar
• la evidencia visual de la rotación es con
células unidas a un portaobjeto por la punta
del filamento
• el movimiento proviene de su motor
• la energía proviene de la fuerza motriz de
protones (fmp, teoría de Mitchell)
• los protones que atraviesan la membrana a
través del complejo Mot dan la energía para
el movimiento del motor
• 1.000 protones necesitan ser translocados
para una rotación del flagelo
• pueden aumentar o disminuir la velocidad de
rotación, depende de la fmp
Experimento
celular de
Tetherd: el
flagelo de una
célula es fijado
a un
portaobjetos
y se visualiza
la rotación del
cuerpo celular
 Movimiento flagelar
• tiene marcha adelante y atrás

• velocidad máxima 12.000 rpm

• consumo de energía 10-15 Amperes

• velocidad: 60 largos por segundo, esto es 0,00017 km/h;

20 – 80 µ m /s

• cheetah: 110 km/h = 25 largos por segundo

• las bacterias perítricas se mueven más lento y en línea recta

• las bacterias con flagelos polares se mueven más rápido y a

saltos por diferentes lados
 Determinación de quimiotaxis
• Método del capilar
• Microscopio tracking: se mueve
automáticamente una cámara pequeña
que contiene la bacteria, manteniendo la
célula fija en el espacio. Se reproduce en
tres dimensiones.
 Quimiotaxis bacteriana
• Movimiento de un organismo hacia o
desde un compuesto químico
• Quimiotaxis positiva = el compuesto
químico es beneficioso para la célula
ATRACTANTE
• Quimiotaxis negativa = el compuesto
químico es dañino para la célula
REPELENTE
 E. coli

• Atractantes: aspartato y maltosa

• Repelentes: metales pesados como Co y Ni

 Movimiento flagelar
• Corridas: nada establemente en un camino curvo
amplio
• Vueltas: se detiene y da tumbos en el lugar, y luego
corre de nuevo
• Las vueltas son eventos al azar, ocurren 1 vez
cada segundo y dura 1/10 de seg. La dirección
también es azarosa
• Cuando hay un atractante, el resultado neto es
avanzar hacia el agente químico
• Cuando hay un repelente, el resultado neto es
alejarse del agente químico
 Quimiotaxis
• Las bacterias responden a un gradiente
temporal, no espacial
• En E. coli y S. typhimurium: avanzan cuando
se unen los flagelos
• Rotación ccw: hacia adelante
• Rotación cw: hacia atrás
 ¿Cómo las bacterias usan los cambios
temporales en la concentración química
para controlar la rotación flagelar?

• Estudios bioquímicos y genéticos

• Mutantes quimiotácticas
 Quimiorreceptores

• ubicados en el periplasma (Gram negativo) y/o

membrana citoplasmática
• la especificidad no es absoluta
• estos receptores unen el atractante o repelente
y se unen a proteínas aceptoras de metilo
(MCPs)
• en general, el sistema corresponde a la
transducción de señales de dos componentes
Control de la expresión
génica por el sistema
de dos componentes
 MCPs
• methyl-accepting chemotaxis proteins
• son el primer componente del sistema de
transducción de señales
• son proteínas de transmembrana
• están encargadas de traspasar la información desde
los quimiorreceptores al motor flagelar
• 5 tipos en E. coli: MCPI a la MCPV, responden a
distintos atractantes y repelentes.
• Estas proteínas se metilan y desmetilan, lo que
ocurre en el citoplasma
• en el exterior interactúan con los quimiorreceptores
• pueden unir los atractantes o repelentes
directamente o a través de los quimiorreceptores
 Respuesta a señales

• Los transductores (MCPs) están en

contacto con proteínas citoplasmáticas
(CheW y CheA)
• CheA es una kinasa sensora
• Si se une un compuesto químico, CheA
cambia su conformación y junto con CheW
produce la autofosforilación de CheA
quedando CheA-P
• Los atractantes disminuyen la velocidad
de autofosforilación
• Los repelentes aumentan la velocidad
autofosforilación
• CheA-P fosforila a CheY formando CheY-P
• CheY-P es un regulador de la respuesta
• CheA-P también fosforila a CheB, pero a
una velocidad más baja.
• CheB también es un regulador de la
respuesta
 El MCP cambia su conformación y CheA se fosforila
El atractante se une al MCP

CheA­P fosforila a CheY

CheY­P cambia la rotación del motor
 CheY
• es la proteína central, es una proteína de respuesta
de la regulación para la quimiotaxis gobernando la
dirección de rotación del flagelo
• CheY-P interacciona con el motor flagelar induciendo
rotación CW y tumbos
• CheY no puede unirse al motor flagelar y el motor
rota CCW (corridas)
• CheZ desfosforila a CheY-P, por lo que la rotación
vuelve a ser CCW
• los repelentes aumentan los niveles de CheY-P
• los atractantes disminuyen los niveles de CheY-P
 Estímulo

Receptor

Vía de transducción de señales

Efector

Respuesta
 Adaptación
• Las MCPs se pueden metilar
• CheR (citoplasmática) une grupos metilos a
las MCPs en forma continua usando S-
adenosilmetionina como dador
• CheB-P es una desmetilasa que saca los
metilos
• el nivel de metilación de las MCPs afecta su
conformación
• permite el “reseteo” del receptor, aún en
presencia de la misma concentración del
agente químico
CheR metila continuamente a las MCPs
CheB­P desmetila a MCP
 ↑ atractante ⇒ ↓ fosforilación de CheA, CheY y CheB
nado suave
↓ nivel de CheB-P
↑ metilación de MCPs

MCP totalmente metilada ⇒ no hay respuesta al

atractante
↑ Nivel de CheA-P y CheB-P
⇒ La bacteria da tumbos

La MCP puede ser desmetilada por CheB-P y puede responder

nuevamente a la concentración de atractante
•Toda la situación es contraria con los repelentes
 Otras taxis...
• Fototaxis:
– microorganismos fototróficos se mueven hacia la luz; se
mueven a la longitud de onda donde absorben sus
pigmentos fotosintéticos

• Aerotaxis:
– los microorganismos se mueven hacia o alejándose del
oxígeno

• Osmotaxis:
– se mueven hacia o se alejan de concentraciones iónicas
altas
NUTRICIÓN Y METABOLISMO
BACTERIANO
COMPOSICIÓN ATÓMICA DE UNA CÉLULA

Macronutrientes:  CHONSP,  1% o más

Micronutrientes, elementos trazas:

1% o menos, K, Fe, Ca, Na, Cl, y otros 20 más

 Macronutrientes
• Carbono: compone el 50% del peso seco
-- autótrofos: necesitan el CO2 atmosférico.
-- heterótrofos: compuestos orgánicos como azúcares,
aa, compuestos aromáticos, bases nitrogenadas, etc.
• Nitrógeno: compone el 12% del peso seco
-- fijadoras de nitrógeno: lo obtienen del nitrógeno
atmosférico
-- la mayoría lo obtienen de fuentes inorgánicas como
amonio (NH4 ) o nitrato (NO3-)
+
 Otros macronutrientes
• Fósforo: tanto orgánico como inorgánico,
se requiere para la síntesis de ácidos
nucleicos y fosfolípidos
• Azufre: rol estructural en las proteínas,
presente en muchas vitaminas (tiamina,
biotina, ác. lipoico, coenzima A). La
mayoría lo obtiene de fuentes inorgánicas
como sulfato (SO4-2) o sulfuro (HS-)
• Potasio: es requerido por todos los
organismos, involucrado en la actividad
de enzimas y síntesis de proteínas
• Magnesio: estabiliza los ribosomas,
membrana celular y ácidos nucleicos;
requerido por enzimas
• Calcio: (en muchos casos no es
esencial), estabiliza la pared celular y
indispensable en la estabilidad de las
endoesporas.
• Sodio: (requerido por muchas, pero no
todas), relacionado con la salinidad del
ambiente de crecimiento
 Hierro

• participa en la respiración celular, es parte de los

citocromos y proteínas de Fe-S, catalasas,
peroxidasas, oxigenasas, todas las nitrogenasas
• para su obtención, las bacterias producen agentes
quelantes de hierro (como Fe+3), llamados
SIDERÓFOROS y ENTEROBACTINAS
• los sideróforos son derivados del ác. hidroxámico
• las enterobactinas son complejos fenólicos,
derivados del catecol
Sideróforos
 Enterobactina de E.coli

Aquachelin

Sideróforos
 Otros metales

• Cobalto: vitamina B12, transcarboxilasa

• Cobre: respiración, citocromo c oxidasa, fotosíntesis,
superóxidodismutasas
• Manganeso: activador de muchas enzimas
• Molibdeno: enzimas que contienen flavina, nitrogenasa, nitrato
reductasa, sulfito oxidasa
• Niquel: hidrogenasas, coenzima F430 de metanógenas, ureasa,
COdeshidrogenasa
• Selenio: deshidrogenasa de formiato, hidrogenasas, aminoácido
selenocisteína
• Tungsteno: deshidrogenasa de formiato, oxotransferasa de
hipertermofílicas
• Vanadio: nitrogenasa vanadio, bromoperoxidasa
• Zinc: anhidrasa carbónica, alcohol deshidrogenasa, RNA y DNA
polimerasa y varias prots. de unión a DNA
COMPOSICIÓN MACROMOLECULAR DE UNA CÉLULA
PROCARIÓTICA

Molécula Peso seco % Moléculas/célul Tipos

a diferentes
Macromoléculas 96 24.610.000 ~2500
Proteínas 55 2.350.000 ~1850
Polisacáridos 5 4.300 2
Lípidos 9.1 22.000.000 4
Lipopolisacáridos 3.4 1.430.000 1
DNA 3.1 2.1 1
RNA 20.5 255.500 ~660
Monómeros 3.0 ~350

Aminoácidos 0.5 ~100

Monosacáridos 2 ~50

Nucleótidos 0.5 ~200

Iones inorgánicos 1 18

Total 100%
CLASIFICACIÓN METABOLISMO SEGÚN FUENTE DE CARBONO

AUTOTROFÍA
CO2

HETEROTROFÍA

**Prototrofía CHO

**Auxotrofía
Factor de crecimiento

**Fastidiosos
 Factores de crecimiento
• compuestos orgánicos
• son requeridos en pequeñas cantidades
• sólo los requieren algunas células
• vitaminas, aminoácidos, purinas, pirimidinas
• algunos m.o. no lo pueden sintetizar y lo
necesitan del ambiente
• muchas vitaminas son parte de coenzimas
• las bacterias lácticas tienen un requerimiento
de vitaminas mayor que el propio ser humano
 Vitaminas
• Las más comunes:
– tiamina (vitamina B1)
– biotina
– piridoxina (vitamina B6)
– cobalamina (vitamina B12)
 CARACTERÍSTICAS MEDIOS DE CULTIVO

Mínimos, pobres, definidos, sintéticos:

+ CHO, CO2
+ NH4, NO3, N2
+ H20,  O2
+ Fosfatos, sulfatos
+ Trazas **  Ricos, complejos, indefinidos:

+ CHO en mezclas
+ NH4 y R­NH2
+ H20,  O2
+ Fosfatos, sulfatos
+ Trazas ** 
** generalmente no se agregan a los medios de cultivo,
porque son contaminantes de los demás componentes
¿Medio mínimo o Medio rico?
carbono

carbono carbono