Estructura y funcin de inmunoglobulinas Dra. Snchez.

Estructura y funcin de las Inmunoglobulinas.

(Anticuerpos).
La historia de los anticuerpos parte
Behring y Kitasato en 1890, ellos se
encontraban haciendo estudios para la
toxina diftrica en cobayas sanas y de esos
experimentos obtuvieron el suero de los
animales ue hab!an sobrevivido a la
toxina, y ste suero al inyectarlo
nuevamente en animales sanos" #ntes
observaron ue estos no enfermaban y se
manten!an felices por siempre"
$so los llev% a determinar ue en el
suero de estos animales exist!a un
componente capa& de neutrali&ar la toxina
diftrica y a esto se les conoci% despus como anticuerpo"
Estructura de la
Inmunoglobulina
'amos a usar el nombre anticuerpo
o (g indistintamente" B)sicamente tiene
una estructura tipo *+, en la ue tenemos
dos cadenas pesadas y dos cadenas
livianas" Las dos cadenas L son iguales
entre s! y las dos cadenas - son iguales
entre si"
#l ser una prote!na podemos ser
capaces de degradarla en&im)ticamente,
al digerirla con papaina podemos tener dos fragmentos. un fragmento /#B o
de uni%n al ant!geno y un fragmento /0 ue corresponde a la parte 1nal de
esta +, ue es donde residen las funciones efectoras de la molcula de
anticuerpos"
2e esta manera podemos decir ue el anticuerpo tiene dos funciones,
por un lado reconoce al ant!geno y por el otro lado va a e3ercer una funci%n
efectora cuya 1nalidad es eliminar a ese ant!geno"
(magen 42. correspondiente dos cadenas pesada en celeste y en
a&ul, y las dos livianas
en verde y verde claro"
Las cadenas
pesadas est)n unidas por enlaces
disulfuro, las livianas est)n unidas a las
cadenas pesadas por enlaces disulfuro
5en ro3o6, tambin hay enlaces disulfuro
intracadena determinando *loops, ue
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corresponden a dominios de la (g, es decir, lugar donde se reali&a una determinada
funci%n" 7ambin mantienen unida la estructura de la cadena"
"egiones #ariables
0ada cadena del
anticuerpo tiene una regi%n
variable, tambin llamada
amino8terminal" 7anto la liviana
como la pesada tienen sitios
variables ue son los sitios de
uni%n al ant!geno y el resto se
denomina porci%n constante"
Las regiones variables se
encuentran en la porci%n de
uni%n al ant!geno, ya ue, ah!
hay variabilidad para dar origen
a recepci%n de un alto grupo de
ant!genos, en todo caso el
cuerpo humano puede
sinteti&ar mil millones distintos
de anticuerpos"
9no puede anali&ar la
secuencia de aa" de muchas (g" en esa regi%n y al representar esto en un
gra1co se obtienen distintos porcenta3es de variabilidad y respecto a la
posici%n ue ocupa cada aa" :i hacemos esto vamos a ver tres regiones ue
muestran una alta variabilidad, a estas regiones se le denominan regiones
determinantes de la complementariedad o $%"s y son los sitios de la
molcula de anticuerpo ue m)s interact;an con el ant!geno"
+ si uno los ubica en la
estructura secundaria de la
prote!na ue arro3a una regi%n
variable, los 02<s estar!an
ubicados en los loops ue hay
entre estas estructuras ue
son esas vueltecitas"
5=odelo 42 del anticuerpo6. Los 02<s h!per
variables de locali&an en loops al trmino de las regiones variables >en
amarillo?" Los 02<s son la subregi%n ue mas interact;a con el ant!geno"
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Ubicacin
Las inmunoglobulinas las
podemos encontrar de dos maneras@
una pegada a la membrana del
linfocito B ue la vamos a llamar@
*<eceptor de clula B,"
+ la otra manera ue la
encontramos solubles en los l!uidos
corporales en secreciones externa y en
sangre, ue las vamos a llamar
*anticuerpos,"
&ipos de $adenas
Las cadenas livianas
son de dos tipos@ Kappa 5A6 y
lambda 5B6" Las cadenas
pesadas son todas ue
tenemos en el cuadro y
dependiendo de ue cadena
pesada contiene cada (g es el nombre ue toma, si es cadena pesada Camma
ser) una (gC, y si tiene la cadena pesada =u ser) una (g=" Las cadenas
pesadas dan las propiedades biol%gicas ue le son propias a cada clase de (g"
Estructura y 'unciones generales de los ! istipos de
Inmunoglobulinas
(g" #.
:e encuentra como d!mero y
generalmente esta asociada a las
mucosas, entonces se puede encontrar en
el
intestino, la mucosa nasal y saliva" $s la
(g" de primera defensa en el organismo
frente a los microorganismos" :e
mantiene unida a un componente D
5pptidos6 y adem)s tiene un
componente secretor ue es un peueEo
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pptido ue no permite ser degradada por en&imas proteol!ticas del intestino
en donde e3erce su funci%n"
$s la (g" de mayor relevancia en situaciones externas y su funci%n es
evitar la adhesi%n de ant!genos a super1cie corporales" Ftra cosa importante
de la (g" # es ue se encuentra presente en la leche =aterna, por lo ue es la
principal (g" ue le con1ere inmunidad al recin nacido"
$sta es la imagen como una (g" # atraviesa el epitelio de la mucosa para
depositarse en el lumen de la mucosa"
7enemos au! la cl B ue
est) produciendo (g" # en su
forma dimrica" $sta (g# va a ser
captada por un receptor en la
parte basal de una cl epitelial,
el receptor va a internali&ar la
(g# y la va a liberar hacia el otro
lado, parte apical, y este proceso
se llama transitosis" #l ser
liberada va a salir con un peda&o
del mismo receptor, ue va a ser
el componente secretor y ue va
a impedir ue la (g# sea
degradada por en&imas
proteol!ticas en el lumen del
sistema digestivo" + una ve& all!
va a poder detectar ant!genos y neutrali&arlos f)cilmente"
(g$.
(g principal en las reacciones
alrgicas, es la inmunoglobulina encargada
de la defensa en contra de par)sitos y
gusanos" GF activa el
complemento"
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$3" 2e c%mo funciona la (g$. en el primer contacto con un ant!genoHalrgeno,
>ue en el caso de la alergia 5alergeno6 la cl B produce mucha (g$? no
desarrolla la alergia, entonces IJu necesita para desarrollar la alergiaK Jue
esta (g$ producida por la cl" B sea captada por un receptor de /c" $ste
receptor se ubica en mastocitos y bas%1los" + en un segundo contacto con el
alergeno, esto va a gatillar una serie de reacciones ue va a terminar con la
degranulaci%n de esta clula, ue va a liberar histamina y otras sustancias ue
son las causantes de las reacciones alrgicas"
(gC.
#ct;a como
mon%mero, es la
m)s abundante y
act;a en la defensa
contra los
microorganismos, a
travs de su /c ue
tiene la capacidad de unirse a los
macr%fagos y a algunas clulas linfoides
con receptores /c en su membrana"
7iene L subtipos (gC 5ue di1eren sobre
todo en los puentes disulfuro en la
regi%n bisagra6, representa alrededor del
80M de las inmunoglobulinas y una
caracter!stica importante, es ue puede traspasar la v!a placentaria es
responsable de la inmunidad del feto y tambin se puede encontrar en la
leche" 7ambin puede activar la cascada del complemento"
(g=.
$s como un pent)mero, sus N subunidades
se encuentran unidas a travs de una cadena D"
$n la imagen de aba3o se ve ue la (g= tendr!a
10 sitios de uni%n al ant!geno" 7iene un peso
molecular de 900 mil 2alton, es una (g
aglutinante, es decir, es capa& de poner 3untos
muchos ant!genos, est) con1nada al espacio
intravascular, es decir, ue solo la podemos
encontrar en la sangre, debido a ue es
demasiado grande"
$s la primera (g capa& de
sinteti&ar el feto, y es la ue primero
aparece en la <(" $s la (g m)s
e1ciente para
activar el
complemento
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Interacciones entre el ant(geno y el anticuerpo .
(nteracciones proteicas de entre
los ant!genos y anticuerpos. las
interacciones entre ellos es no
covalente, por e3emplo (nteracciones
por puente de )idrgenos, en el cual
comparten )tomos de ox!geno" Enlace
inico ue son interacciones por
diferencia de carga" Interacciones
)idrofbicas ue se re1eren a
interacciones entre grupos ue repelen
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las molculas de agua" + #an der *aals ue son parecidas a las i%nicas pero
son m)s como nubes electr%nicas"
%eterminantes antig+nicos de las inmunoglobulinas
(g al ser prote!nas tambin pueden funcionar como ant!genos, es decir,
podemos ser capaces de tener anticuerpos, anti O anticuerpos, as! podemos
identi1car tres tipos de variantes antignicos"
2eterminantes (sot!picos@
:e re1ere a variaciones en la
regi%n constante de cadenas livianas y
pesadas, y estas son variaciones ue
distingue una especie de otra, por
e3emplo, si inyecto mi (g a un rat%n los
anticuerpos ue ese rat%n origine van a
ser anticuerpos anti8isotipo" 7odos los
individuos de la misma especie tiene el
mismo set de (g y estos isotipos son
distintos en otras especies"
2eterminantes alot!picos@
:on peueEas variaciones en regiones
constantes de las cadenas pesadas y livianas,
y ue son las variaciones de la (g entre la
misma especie" :i, yo inyecto mi (g en
cualuier persona, los anticuerpos ue
originemos van a ser anticuerpos anti8
alot!picos"
2eterminantes (diot!picos@
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:on variaciones en las regiones variables de las cadenas pesadas y
livianas de la (g en un mismo individuo, por lo tanto existe en cada uno de
nosotros, y sirven para controlar la respuesta inmune y la producci%n de
anticuerpos, para ue la respuesta tenga un stop"
,as funciones efectoras de las mol+culas de
anticuerpo-
#hora veremos las funciones
efectoras de las molculas de
anticuerpos" Por un lado el
anticuerpo reconoce al ant!geno y
por el otro lado est) la regi%n /0,
ue es la regi%n efectora ue tiene
ue desencadenar funciones, ue
van a ir a eliminar el #g"
(nactivaci%n de los ant!genos.
Por e3emplo, si hay un virus este puede
ser neutrali&ado por anticuerpos, todos sus
determinantes antignicos son bloueados"
Ftra manera de neutrali&ar es la aglutinaci%n
por (g=, ya ue es capa& de poner muchos
ant!genos 3untos, aglutinando y bloueando a
ese ant!geno" +, por ;ltimo, tenemos la
precipitaci%n de ant!genos solubles, en la
cual los ant!genos ue son solubles al unirse
con anticuerpos forman comple3os ue pasan
a ser insolubles y pueden ser captados por
clulas fagoc!ticas"
#u! tenemos una toxina ue
puede interactuar con un
receptor en la clula, ser
internali&ada y liberada en el
citoplasma, causando la
destrucci%n de la clula"
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Cracias a la acci%n de los anticuerpos, la toxina es captada antes de ue pueda
actuar con el receptor y se evitan todo el proceso" $n el caso de un virus es lo
mismo, a travs de la neutrali&aci%n, los receptores de estos ant!genos virales
son bloueados antes de ue puedan depositar su material gen%mico en la
clula, y as! no se produ&ca la lisis de sta, lo mismo sucede con la bacteria"
Fpsoni&aci%n de los microorganismo.
La
opsoni&aci%n se
re1ere al
recubrimiento de
la part!cula con
muchas molculas
de anticuerpo, lo
cual facilita su
posterior
fagocitosis y
destrucci%n" $sta
es la segunda
etapa, luego de la
neutrali&aci%n"
#u! tenemos el
e3emplo de una bacteria
ue est) siendo bloueada en sus ant!genos por los anticuerpos, despus de
esto las clulas efectoras del organismo 5macr%fago, monocito. todas poseen
efectores para la porci%n /c del #c6, reconocen el anticuerpo e internali&an el
comple3o ant!genoHanticuerpo y liberan en&imas lisosomales ue van a destruir
a la bacteria"
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#ctivaci%n del sistema del 0omplemento.
La
activaci%n del sistema del complemento, es un con3unto de prote!nas del suero
ue act;an en cascada y ue se unen a la regi%n /c del anticuerpo y originan
una serie de eventos ue van a culminar en la formaci%n de un poro en la
membrana de la bacteria, ue va a producir la lisis del microorganismo"
0itotoxicidad dependiente de anticuerpos.
$n este caso, lo
ue ocurre es el
recubrimiento de una
bacteria con muchas
molculas de #c y una
clula efectora ue
reconoce la porci%n /c
del #c" >$n el caso de la
citotoxicidad
dependiente de
anticuerpo esta clula
receptora siempre va a
ser una Gatural Killer?
Qsta clula entonces es
capa& de liberar su
contenido de gr)nulos ue contienen en&imas ue perforan la
membrana de este microorganismo, como lisina, perforina, etc" $ste
mecanismo se parece a la desgranulaci%n 5(g$6 de mastocitos y
bas%1los, los gr)nulos liberaban histaminas y otros mediadores
alrgicos" + en el caso de la toxicidad dependiente de anticuerpos, lo
ue hay es liberaci%n de perforinas y otras en&imas libres"
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#ctivaci%n de linfocitos.
La (g act;a como receptor de clula B, es decir, va a
actuar pegada en la membrana de la clula B"
7odos los linfocitos B v!rgenes tienen (g pegadas a la
membrana, por lo ue al haber un contacto con el
ant!geno, el LB se transforma en una cl productora de
anticuerpos o c+l plasm.tica ue va a producir
muchos anticuerpos espec!1cos para ese ant!geno"
$n este cuadro tenemos por e3emplo,
un alrgeno ue va a impactar a un LB y lo va
a transformar en una clula productora de #c"
$l LB cambia su citoplasma, se alarga, y va a
producir entonces muchas molculas de (g$
espec!1cas para ese alergeno al ue fue
expuesto, en este caso se reuiere la
activaci%n del LB pero, tambin el LB puede
ser una #P0 y activar al linfocito 7"
/$mo ocurre esto0 $l LB est)
interactuando con su ant!geno y es capa& de
internali&ar este comple3o
ant!genoHanticuerpo, degradarlo en muchos
pedacitos y presentarlos en pptidos
peueEos a un L7 y debido a esta interacci%n
la cl 7 va a producir mucha interleuuina y se va a activar" #dem)s estas
interleuuinas van a producir la diferenciaci%n de la cl B en una cl
plasm)ticas productora de anticuerpos"
%i1ersidad de las Ig.
9n organismo es capa& de producir
alrededor de 1000 millones distintos de
anticuerpos"
/$mo ocurre esta 1ariabilidad0
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Lo ue ocurre es ue las regiones variables, tanto de cadenas livianas
como pesadas, son codi1cadas por m;ltiples segmentos gnicos, un e3emplo es
ue la regi%n variable de la cadena pesada es codi1cada por tres segmentos
distintos 5'828D6 ue despus se van a unir a los segmentos de la regi%n
constante y, a la ve&, las regiones variables de las cadenas livianas son
codi1cadas por dos segmentos distintos 5'8D6"
2regunta segura de prueba- $n el genoma humano existen N0 segmentos
', 40 segmentos 2 y R segmentos D" Lo ue ocurre es ue, cuando el linfocito B
est) recin formando anticuerpo, cualuiera de estos segmentos ' se puede
unir a cualuiera de los segmentos 2 y a cualuiera de los segmentos D, en
distinta regiones variables simplemente por a&ar, no hay nada ue determine
cual reacciona con cual, y al multiplicar N0S40SR tienen ya 9000 regiones
variables distintas por cadena pesada" Por lo tanto 9 mil sitios de uni%n al
ant!geno distinto, y por lo tanto 9 mil anticuerpos diferentes"
$n la cadena liviana podemos hacer el mismo e3ercicio, en las cadenas
Kappa hay L0 regiones ' y N regiones D, au! tendr!amos T00 regiones variables
distintas y, en las cadenas lambda tenemos 40 regiones ' y 4 regiones D, por lo
tanto tenemos 90 regiones distintas"
#l combinar todo@ 9000S5T00U906, eso superar!a los T millones de (g
posibles contra los ant!genos"
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Pero yo les di3e ue hab!an m)s de 1000 millones de (g, as! ue tenemos
ue encontrar mayor variabilidad" #u! est) un e3emplo de c%mo esto ocurre.
5-ay ue recordar ue esto es al a&ar y es algo ue se da de forma natural en
los LB6
#u! con las Vechitas tenemos los segmentos ue se van a coordinar y,
ue son los elementos ', 2 y D de la cadena pesada" $ntonces vamos a unir
este 2T con el DT, as! se forman estas estructuras como loops en el 2G#, ue
son conocidas como recombinasas ue las cortan del 2G#, entonces solamente
se 3unta el elemento de 2T y DT" Posteriormente ocurre la recombinaci%n con el
segmento ', en este caso se va a unir el 'n 81, ocurre de nuevo el loop y, se
3unta este segmento con el 2T y con el DT ue est)n ac)"
$n una etapa posterior se procesa este cantito, todo el extremo NW es
cortado y el 4W tambin, esto se hace antes de ue se recombinen las cadenas
pesadas" Posterior en el genoma tenemos los distintos segmentos ue van a
dar origen a la porci%n constante de la cadena"
$n un principio se forma (g= o (g2 solo por cercan!a en el genoma,
despus m)s tarde durante la respuesta inmune, por seEales gatilladas por el
mismo ant!geno, se produce lo ue se denomina como 3el cambio de clase45
en el cual lo ue se cambia es la regi%n constante pero sigue la misma regi%n
de uni%n al ant!geno" Por e3emplo, au! se est) cambiando de (g= a (g#, todo
este segmento ue est) entre medio, se est) uniendo con un tro&o de #2G ue
va a codi1car para la (g#"
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Entonces /%nde encontramos las otras mil millones de 1ariaciones
6ue dan origen a los anticuerpos0
Adicin 324 y 3N4
#c) hay un segmento 2
ue va a unirse con un
segmento D, son cortados y
ac), la doble cadena de 2G#
se puede desaparear, a esto
se le llama 3ad)esin 24.
cuando la doble hebra se
desaparea y forma estructuras
como bra&os"
$n la 3ad)esin N4 se
insertan al a&ar los
nucle%tidos, hay inserci%n y
deleci%n de nucle%tidos, hasta
ue estas hebras se puedan
aparear y se logre un smatch
5deleci%n e inserci%n6 correcto al a&ar, se pueden unir desde N a 10 nucle%tidos
distintos"
Por lo tanto ac), es donde se origina el mayor porcenta3e de variaci%n, se
sabe ue dependiendo de la secuencia de bases ue tengamos en el 2G# va a
depender la secuencia de prote!na, por lo tanto hay una variaci%n adicional"
7ipermutacin som.tica-
$l otro mecanismo ue
genera variabilidad es la
hipermutaci%n som)tica@ este
mecanismo depende del
ant!geno, el resto no depende
de este" $ste mecanismo se ha
descrito de manera
experimental" #c) por e3emplo,
tenemos un 02< ue est)n en
estas regiones donde hab!a
mayor variabilidad, si
inyectamos un cone3o 5lo
inmuni&amos6 y anali&amos la
variabilidad en los 02< en el d!a
X, >las cosas ro3itas
corresponden al M de los 02<?
y vemos ue a medida ue
avan&a la <"(", en el d!a 1L, se
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ve ue la variabilidad aumenta respecto al d!a X y, el d!a T1 hay mucha m)s
variabilidad" $sto uiere decir ue el mismo ant!geno de alguna manera induce
en el 2G# de los LB reordenamientos nuevos del genoma, ue van haciendo
ue la uni%n ant!genoHanticuerpo sea m)s activo, de este modo, se selecciona
los anticuerpos ue sean m)s a 1n a ellos" + esto se le denomina
-ipermutaci%n som)tica"
$ombinacin con las cadenas pesadas
9na ve& ue se tienen unidas ', 2
y D, estas se une principalmente con
la regi%n =u para dar origen a (g= y
con la regi%n delta para dar origen a
(g2, posteriormente, se van a liberar
interleuuinas de los L7 5y tambin
de los #g6, ue tambin est)n siendo
activados, y dependiendo de ue
(nterleuuina est presente se va a
producir el cambio de clase a otra (g,
por e3emplo (nterleuuina L va a
promover el cambio a (g$" $n este
cuadro vemos ue se est)
produciendo (g= de la (gC, debido a
la prdida de los segmentos ue
estaban entre medio, con la (g$ sucede lo mismo"
El 389itc)4 o cambio de clase
/2uede ocurrir 6ue c+lulas 6ue est+n secretando IgE cambien a
producir Ig:0
Go, porue en el mecanismo
ocurre perdida de los segmentos
del 2G#" 9na (g= o (gC es
pluripotencial y pueden dar
origen a los otros (gs" + la (g$
no puede cambiar a (gC porue
ese segmento se elimin% del
genoma"
-ay ue darnos cuenta ue
en este mecanismo la regi%n
variable para el ant!geno sigue
siendo la misma, Ipor u
necesitamos cambiar la regi%n
pesada constante, s! vamos a
estar reconociendo el mismo
ant!genoK
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2ebido a ue las respuestas son distintas, dependiendo de u porci%n
/c tengamos vamos a tener cada una de las distintas funciones efectoras ue
vimos antes, opsoni&aci%n, degranulaci%n, citotoxicidad dependiente de
anticuerpo, etc"
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