COLEGIO DE POSTGRADUADOS

I nst i t uci n de Enseanza en Ci enci as Agr col as

Campus Montecill o


Entomologa y Acarologa/Ecologa Qumica de Insectos
jcibrian@colpos.mx, tel. 55 58045900-1657, 595 9511580
1
ECOLOGA QUMICA DE INSECTOS
ENT-665
PRCTICA 02
PREPARACIN Y EVALUACIN DE DILUCIONES.

INTRODUCCIN
Al medir un disolvente o en la preparacin de una dilucin existen factores que
influyen en el resultado final, estos son ligados al equipo y al modo de medicin del
operador. Lo anterior ocurre ya que es imposible construir aparatos perfectos, as como
tambin a la falta de agudeza visual, descuido, cansancio y a alteraciones emocionales del
operador. El error ms comn de un operador es el error de paralaje (Guerrero y Daz,
2007), este ocurre debido a la posicin incorrecta del operador con respecto a la escala
graduada del instrumento de medicin, la cual est en un plano diferente. Para reducir este
y otro tipo de errores es necesario calibrar el equipo y adiestrar al operador, as como
tambin, conocer la variacin que se tiene al medir el volumen deseado. Para esto, se
recomienda determinar el peso del volumen que se midi. Por ejemplo, si el volumen de
inters es 100 uL de H2O, considerando que la densidad del agua es 1g/mL, en trminos de
peso volumen 100 uL de H2O equivalen a 0.1 g la diferencia entre ambos es la variacin
que se tiene al medir este volumen de agua.
Por otro lado, las diluciones son concentraciones de una disolucin disminuida al
aadir un disolvente, estas son constantemente preparadas en el laboratorio cuando se
requiere evaluar por ejemplo plaguicidas o en nuestro caso compuesto voltiles como
feromona y kairomonas. Para la preparacin de una dilucin partiendo de compuestos
estndares comerciales se requiere conocer la densidad (mg/uL) y pureza (%) de estos y
del disolvente ya que podran incidir directamente en los resultados (Hill, 2000).
En la preparacin de diluciones partiendo de compuestos puros se emplea la
siguiente formula:
V= (FC)(FV)/d
Dnde:

FC= Concentracin final de la nueva dilucin.
FV= Volumen final de la nueva dilucin.
d= Densidad del compuesto o estndar puro.
V= Volumen necesario del compuesto o estndar puro.

Ejemplo 1: Se requiere preparar una dilucin del compuesto Z,E-9-12-tetradecadienyl
acetato a una concentracin de 10, 000.00 ppm en 1 mL de volumen final.
FC= 10,000.00 ppm =10 mg/mL
FV= 1 mL
d=0.885 mg/uL
V=?
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Sustituyendo estos valores en la formula tendremos:
V= (10mg/mL)(1 mL)/0.885 mg/uL= 11.3 uL
En compuesto tiene 93% de pureza, por lo tanto es necesario determinar la cantidad
necesitada del compuesto a 100% de pureza.
((11.3 uL)(100)/93)=12.15 uL

Para preparar una dilucin del compuesto Z,E-9-12-tetradecadienil acetato a una
concentracin de 10, 000.00 ppm en 1 mL de volumen final, se requieren 12.15 uL del
compuesto puro, este volumen se verter en un matraz de 1 mL, posteriormente, el matraz
ser aforado a 1 mL con el disolvente hexano.

Por otro lado, si se desea preparar diluciones seriadas se debe considera la
siguiente formula:
C1V1=C2V2
Dnde:
V1= Volumen de la solucin inicial necesitado para preparar la nueva solucin.
V2 = Volumen final de la nueva solucin.
C1= Concentracin de la solucin inicial.
C2 = Concentracin final de la nueva solucin.

Ejemplo 2. Se requiere preparar una dilucin de 1000.00 ppm partiendo de una
concentracin de 10,000.00 ppm.

V1= ?
C1= 10,000.00 ppm = 10 mg/mL = 10,000.00 ug/mL
C2 = 1000 ppm= 1mg/mL = 1000 ug/mL
V2 = 1 mL


Sustituyendo estos valores en la formula despejada tendremos.

V1= (1000.00 ug/mL)(1 mL)/(10,000.00 ug/mL) = 0.1 mL = 100.00 uL



Para preparar una dilucin de 1000.00 ppm partiendo de una contraccin de 10,000.00
ppm, se deben tomar 100.0 uL de la concentracin de 10 mg/ ml y aforar a 1 mL con el
disolvente hexano.

Objetivos de la prctica.
Cuantificar la variacin que se tiene al medir un volumen deseado.
Aprender a preparar diluciones con compuestos o estndares de alta pureza, as mismo, a
preparar diluciones seriadas.
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Cuantificacin y evaluacin mediante cromatografa de gas acoplada a espectrometra de
masas (ver encendido y funcionamiento del cromatgrafo de gases, en la prctica
anterior).
MATERIALES Y MTODOS
Disolventes y reactivos
Material y equipo de laboratorio:
1. Matraces aforados de 1 mL
2. Micro-jeringas de 10, 50 y 100 L
3. Viales mbar 2 mL.
4. Pipetas graduadas de 1, 5 y 10 mL
5. Pipetas Pasteur

Ejercicio 1. Determinar la variacin al medir 100 uL, 50 uL, 10 uL y 5 uL de agua.

1. Pesar y tarar un vial mbar de 2 mL en la balanza analtica.
2. Medir 100, 50, 10, y 5uL de agua y depositarlos por separado en un vial de 2 mL.
3. Realizar 10 repeticiones de cada volumen.
4. Obtener el peso del agua y multiplicarlo por la densidad (1 g/mL) de la misma.
5. Calcular la media, desviacin estndar y el coeficiente de variacin de los datos.
Ejercicio 2. Calcular las siguientes diluciones (dividir el grupo en tres secciones).

Cuadro 1. Caractersticas de los compuestos o estndares y diluciones seriadas a preparar.
Compuesto
Densidad
(mg/L) Pureza (%)
Diluciones (ppm)

Z9,E12-14:Ac 0.885 93 1000 100 80 50 20
Z9,E12-14:OH 0.862 93 1000 100 80 50 20


Z9-14:Ac 0.874 96 1000 100 80 50 20


Ejercicio 3. Evaluar y cuantificar mediante cromatografa dos de las diluciones preparadas.
El reporte de esta prctica se realizar tipo artculo usando como gua los
requisitos para publicar en la revista Agrociencia
(http://www.colpos.mx/agrocien/Guias/autores.pdf).
Se anexa copia de un reporte anterior como gua.
Los nombres de las revistas cientficas de acuerdo al Journal Title
Abbreviations (http://www.efm.leeds.ac.uk/~mark/ISIabbr/A_abrvjt.html).



LITERATURA CITADA

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Guerrero, P. A. y G. M. Daz. 2007. Introduccin de errores en la medicin. Editorial: Instituto Tecnolgico
Metropolitano, ITM. Medelln, Colombia.
Hill, A. 2000. Quality control procedures for pesticide residues analysis-guidelines for residues monitoring in
the European Union. 2nd ed, 1999/2000. Document SANCO/3103/2000, European Commission,
Athens, Greece.30 p.
Online Calculators and Solvers. 1999. Dilution Formula Calculator. [en lnea]. Disponible en
http://www.calcul.com/dilution (revisado el 30 de noviembre de 2011).
Wellesley College. 2004. Dilutions. [en lnea]. Disponible en
http://www.wellesley.edu/Biology/Concepts/Html/V1C1.html (revisado el 30 de noviembre de 2011).
Velzquez, G.J. C., J. Cibrin-Tovar, C. Hidalgo M. y T. Vsquez Rojas. 2011. Validacin del mtodo de
aireacin dinmica para la captura de compuestos voltiles de Capsicum spp. Revista Latinoamericana de
Qumica 39 (1): 7-16.