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Microbiologa
23/11/2011
Hoy vamos hablar de mutaciones, los agentes que las causan: promiscuidad bacteriana,
transduccin, transformacin y conjugacin. En la mayora de las bacterias que son
patgenas los factores de virulencia que pueden causar daos, provienen de varias
toxinas que liberan para daar las clulas del husped, adems de factores de
adherencia (adhesina), gran parte de ellos no son codificados por genes que estn en los
cromosomas, son generados por genes extracromosomales, por ejemplo, genes de
plsmidos y fagos, o sea, en algn momento la bacteria lo adquiri a partir de otra
especie que se los transfiri y la torn patgena. Una bacteria puede ser no patgena, sin
causar ningn tipo de dao, ni al ser humano, ni en animales, pero basta que le
transfieran un pedazo de genoma, y se puede volver patgena para siempre, no es
necesario un largo perodo evolutivo (tambin puede pasar, pero no es el mtodo ms
comn para volverse virulenta) .
Mecanismos de cambio y diversificacin gentica en procariotas
Ustedes van a ver que los mecanismos
de cambio (de variabilidad gentica), se
traducen en cambios del fenotipo, se
deben a 2 tipos de mecanismos:
1. Mecanismos lentos, bsicamente son
mutaciones, pueden ser de solo una
base, o de varias, pueden ser
duplicaciones, deleciones, etc., pero
para que la bacteria se vuelva
patgena se requiere una largo
perodo
de
tiempo,
varias
generaciones.
2. Mecanismos rpidos, puede ser por
transferencia
horizontal,
transduccin, conjugacin, transformacin, etc.
Codigo Gentico Cannico. (Tabla de codones estndar)
GENTICA BACTERIANA
Microbiologa
23/11/2011
No necesariamente un cambio en la secuencia de codones genera un cambio de
aminocidos, puede ocurrir que en vez de UUU, cambie a UUC, y codificaran para el
mismo aminocido.
Por estos mecanismos rpidos de variacin gentica, es que es tan difcil definir especie
en bacteriologa, por estos procesos de transduccin, traduccin y transformacin
gentica.
Las bacterias son muy promiscuas.
Los seres humanos, unos ms, otros menos, somos promiscuos. Pero conocen otro tipo
de promiscuidad, fuera de la especie humana? Una vez un cientfico que investigaba
aves, estudiaba desde su ventana el comportamiento de las aves donde el viva, cuando
derepente un pato choc contra su ventana y muri, luego lleg otro pato de la misma
especie, y lo empez a violar (necrofilia), entonces el cientfico mata al pato degenerado
para estudiarlos, descubri que los 2 eran machos, o sea, adems eran homosexuales.
Era un caso nico y el cientfico lo public en una revista buena, como 1 caso de
homosexualidad necrofilica en patos..XD
Estos son casos de promiscuidad, pero no se cruza la barrera de la especiepor mas que
uno vea una linda ovejita en el campo, no se les va a pasar por la mente0.0.
Bueno en ese sentido las bacterias si son las ms promiscuas porque atraviesan esta
barrera entre las especies, y transfieren sus genes por medio de conjugacin, por eso es
tan difcil clasificarlas, atraviesan incluso el nivel de gnero. El nivel de promiscuidad de
las bacterias es tal que incluso atraviesan dominios, hay bacterias que como la E. coli es
capaz de transferir sus genes con
levaduras (eucariotas).
Caso extremo de promiscuidad:
Esta bacteria mezcla genes con
plantas, es una bacteria que causa en
dicotiledoneas agallas en los tallos,
en muchas especies de esta planta.
En la foto se ve una agalla y
bacterias encima del epitelio de una
dicotiledonea, bsicamente le estn
insertando sus genes, lo transforma
con el plsmido Ti que ingresa al
citoplasma y se integra al cromosoma
de la planta, la planta empieza a
producir hormonas (oxina, es la que
inicia la produccin de tumores), lo
que induce a la planta a producir
opinas (nutrientes para la bacteria), la bacteria hace su nicho, su ambiente.
E. coli 0157:H7
Esta E. coli
hemoltico.
normal (no
idntico,
son
llamadas
un plsmido,
produce
un
sndrome
cermico
Este tipo de E. coli es idntica a una
patgena), el 99,9% de su genoma es
tiene ciertos factores de virulencia que
codificados en el genoma, pero son genes
extracromosomales. Genera la toxina
Shiga
(esta
codificada
en
un
bacteriofago), hemolisina (codificada en
que la bacteria adquiri desde otra
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especie), adems tiene fimbrias (factores de adherencia) y flagelos. Las 2 toxinas no las
produce una E. coli normal (no patgena). As ocurre con la mayora de las bacterias, sus
toxinas no son codificadas en el cromosoma, son extracromosomales por fagos que han
tenido un encuentro promiscuo con la bacteria en base a un mecanismo de transduccin.
Puede encontrarse con una E. coli normal, con una patgena y transformarla en una
patgena, a travs, de una relacin conjugativa.
Procesos Lentos:
Tipos de mutaciones
1. Mutacin Puntual: Cambio de una sola base, causa un cambio en la produccin del
aminocido a sintetizar, cambia la secuencia de la protena, eso puede ser un
cambio letal o quizs no, depende a que aminocido cambie.
2. Mutacin puntual sin sentido: Tambin se cambia una sola base, pero en vez de
cambiar a otro aminocido se cambia a un codn de parada, algo peor, porque
abruptamente se para la transcripcin. Vamos a tener una protena muy chiquitita.
3. Inserciones: se agrega una base extra, en la imagen se puede ver que CCC
codificaban para serina, pero se inserta AT, produciendo un cambio en el marco de
lectura.
4. Delecin: lo mismo que en las inserciones pasa cuando se borran bases.
5. Inversin: Bsicamente es un giro en 180, lo que produce un cambio en la
secuencia lineal de la protena.
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Son los tipos de mutaciones mas comunes en bacterias, aunque las mutaciones en
general son muy infrecuentes en las bacterias, es de alrededor de 8 10 -9. Cuando
uno quiere que una bacteria mute en el laboratorio tiene que inducir la mutacin,
porque el organismo tiene mecanismos de correccin, la misma ADN polimerasa va
corrigiendo cuando hay una equivocacin, aun as pueden ocurrir mutaciones, pero
son de baja frecuencia. Si ocurre una mutacin puntual, hay un cambio de
aminocido, si se cambia un aminocido (a) polar por otro polar, quizs no hay
ningn cambio, si es un a totalmente distinto, ah cambia.
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Y finalmente el 5-bromouracilo es un
anlogo de la timina la nica diferencia
esta en que el metilo de la timina es
reemplazado por un bromo. El 5bromouracilo tambin se aparea con
adenina, el problema es que tambin hay
tautmeros del 5-bromouracilo, y cuando
esta en su forma enol se aparea con
guanina, lo que despus de varias
generaciones en vez de formar una A-T, va
a formar C-G. Cuando hay 5-bromouracilo
la clula lo puede corregir, pero sino,
puede aparecer su tautomero y formar esta mutacin.
3. Luz Ultravioleta:
Forma lo que se llama un dimero de timina.
A A C C T T G C En T T se forma un enlace
covalente, que bloquea la replicacin del ADN. Esto se
corrige, la fotoliasa en presencia de luz produce lo que
se llama como fotoreactivacin, corrige el enlace
covalente. Cuando uno quiere mutar en el laboratorio,
debe tapar con papel aluminio, para que no llegue luz
visible y no se active la fotoliasa.
Es casi imposible que una bacteria se vuelva
patgena, a travs de una mutacin, todo lo contrario
puede producir la muerte de la bacteria, ya que una mutacin en una enzima, por
ejemplo, seria una catstrofe.
Procesos Rpidos
Hay intercambio de material gentico, que permiten a una bacteria tornarse patgena
en un minuto, bsicamente hay 3 mecanismos.
1. Transformacin
La bacteria come material gentico, lo puede ocupar como comida, porque el ADN es rico
en P, N, compuestos carbonados, por lo tanto, la bacteria puede ocuparlo como fuente, o
para reparar su propio ADN y eventualmente para incorporar nueva informacin gentica.
Es un proceso muy estudiado en bacterias Gram +, hay bacterias que son competentes
queremos
la E.coli
ingiera el por
plasmidio
con
naturales, desde que nacen hasta Si
que
mueren,que
son
competentes,
ejemplo,
el
gen
de
la
penicilina,
no
se
va
a
poder
porque
Streptococcus. E. coli no es competente de manera natural, hay que hacerla competente.
no es competente, hay que hacerla competente,
una competente artificial. A travs de:
E. coli
a) Electoporacin: aplicndole shock elctrico,
Penicilina
formando poros donde entra el plsmido.
b) Competencia qumica: la bacteria se
mezcla con soluciones en base a Ca+2 y
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Mg+2, con ciclos de fro y calor, se pasa del
hielo a calor (42 C).
GENTICA BACTERIANA
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23/11/2011
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1. Llega un virus, introduce su genoma, comienzan a formarse las protenas que van a
producir otros virus intracelulares,
2. Comienza con el ensamblaje, en este perodo pueden ocurrir errores, puede entrar a
la cpside el ADN del virus o encerrar en la cpside parte del ADN bacteriano (1 en
millones de millones de casos).
3. Estn listos para salir los virus ensamblados.
4. Se liberan las partculas virales, produciendo lisis bacteriana, para ir a colonizar otra
bacteria.
5. Si esa otra bacteria es colonizada por un virus que contiene el ADN bacteriano, va a
recombinar con ese ADN. Slo los fagos que tienen la capacidad de romper el ADN de
la bacteria transportan ADN bacteriano de una bacteria a otra por este mtodo.
Si el ADN codifica para toxinas, va a volver a una bacteria sin toxinas, toxignica, este
mecanismo se denomina Conversin por fagos, convierten cepas no patgenas en
patgenas.
Cualquier parte del genoma puede ser transducida transduccin generalizada
Partes especficas del genoma bacteriano pueden ser trasducidas transduccin
especializada
GENTICA BACTERIANA
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otras bacterias, tiene toda la informacin para ser transferido a otra bacteria y adems
posee un Pili sexual (que es de distintos tamaos, dependiendo de la bacteria).
Va a estar por una lado la clula macho, y por otro la clula hembra (receptora), la clula
macho toma contacto con la clula que no posee el plsmido, el que hace de puente es el
Pili sexual. Cuando ya estn juntitas, se forma lo que se conoce como puente de
conjugacin, un poro bsicamente que conecta ambas clulas, a travs de ese poro el
plsmido va a comenzar a ser transferido de la clula +, a la clula - . No pasa el
plsmido completo sino la clula + quedara sin plsmido. El plsmido es un ADN circular
de doble hebra donde se hace una muesca, unas protenas hacen una pequea incisin,
de esta forma se empieza a desenrollar, y es una de las hebras la que va a ser transferida
a la clula -. A medida que se va transfiriendo la hebra que queda en la clula + se va
replicando (regenera), cuando ya se ha transferido todo, se circulariza y se replica la otra
hebra de la clula -, generndose un plsmido idntico al de la clula +. Terminamos
tendiendo 2 clulas +, la recin transformada se denomina TRANSCONJUGADA.
Ahora ese gen puede codificar para toxina o para resistencia a antibiticos (ms
comn),la conjugacin dura aproximadamente un minuto.
En las bacterias que ms se ha estudiado esto es enterobacterias, pseudomonas, gram
+, etc. A travs de conjugacin se pueden transferir adems de plsmidos, cromosomas,
eso pasa cuando el plsmido se integra al cromosoma, pero no todo el cromosoma,
porque el tiempo que se necesitara, demorara 100 minutos.
Islas de patogenicidad: Segmentos del cromosoma de la bacteria que contienen
muchos genes que codifican para factores de virulencia, toxinas, factores de adherencia,
etc.