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LAS BACTERIAS

1. Estructura de la clula bacteriana


2. Antgenos bacterianos
3. Formas de resistencia: esporas
4. Morfologa y visualizacin de las bacterias
5. Metabolismo bacteriano
6. Divisin bacteriana
7. Medios de cultivo
8. Taxonoma bacteriana
9. Identificacin de bacterias
10. Bacterias de inters en medicina

1
1. Estructura de la clula bacteriana
Las bacterias son clulas procariotas, de un tamao entre 02 y 5 m, envueltas por
una membrana citoplasmtica y una pared externa de estructura caracterstica;
poseen el citoplasma repleto de ribosomas y el material gentico est libre sin
membrana nuclear. Algunas son mviles por poseer flagelos (Figura 1).
Citoplasma. El citoplasma de las clulas procariotas, a diferencia del de las
eucariotas, carece de orgnulos membranosos internos (mitocondrias, retculo
endoplasmtico, aparato de Golgi) y de los microtbulos que forman el citoesqueleto
de las clulas eucariotas. Est constituido por una masa densa, amorfa, con aspecto
granular por estar repleto de abundantes ribosomas.
Los ribosomas de las clulas procariotas son ms pequeos que los de las
eucariotas, aunque de estructura semejante a los de stas, en ellos tiene lugar la
sntesis proteica.
Genoma bacteriano. El genoma bacteriano est formado por una sola molcula de
DNA bicaternario de forma circular, cerrada, y gran tamao (cromosoma). En
Escherichia coli mide 1-2 mm lo que supone unas mil veces la longitud de la
bacteria. Este gran tamao y la ausencia de histonas
1
hace que el DNA se encuentre
aparentemente apelotonado formando un ovillo en el interior del citoplasma.
Esta molcula de DNA no se encuentra separada del citoplasma por una membrana
nuclear sino que est directamente inmersa en el mismo, por lo que no se puede
hablar con propiedad de ncleo bacteriano, refirindose a este acumulo de material
gentico como nucleoide. La ausencia de membrana nuclear permite una
trascripcin muy rpida de la informacin gentica.
Las bacterias pueden albergar material gentico adicional al cromosoma en forma
de pequeas molculas circulares de DNA bicaternario libre en el citoplasma,
denominadas plsmidos, que constituyen material gentico extracromosmico
autnomo. Los plsmidos, como los fagos lisognicos
2
pueden codificar diversos

1
Aunque existen otras protenas asociadas al DNA bacteriano con funcin de soporte

2
Ver leccin de virus. Los bacterifagos, aunque constituyen un fragmento de material gentico
exgeno, en estado lisognico tienden a integrarse en el cromosoma bacteriano. Tambin los
plsmidos pueden circunstancialmente integrarse en el cromosoma bacteriano
2
productos de inters, como enzimas inactivantes de antibiticos, bacteriocinas
3
,
exotoxinas, adhesinas y otros factores de patogenicidad, as como enzimas con
actividades metablicas.
Los plsmidos se replican de forma sincrnica con el cromosoma celular y como l
se transmiten de forma estable a las clulas hijas (transmisin vertical); este tipo de
transmisin tambin se da en otros episomas como los fagos lisognicos.
Algunos plsmidos, conocidos como plsmidos transferibles, pueden transmitirse a
otras clulas bacterianas carentes de ellos mediante un mecanismo de transferencia
horizontal denominado conjugacin, que comporta su replicacin previa, y el paso de
una copia a travs de una fimbria a otra bacteria, por lo que ambas clulas,
donadora y receptora, poseen una copia del mismo.
Membrana celular. Posee las caractersticas generales de las membranas
biolgicas. Est formada por una doble capa de fosfolpidos en la que se encuentran
incluidas protenas de gran importancia funcional relacionadas con la permeabilidad
y el metabolismo (Figuras 2 y 3).
La membrana celular asla al citoplasma del medio externo, en ella se localizan
secuencialmente diversos enzimas implicados en el metabolismo energtico y
biosinttico. Tambin participa en el anclaje y segregacin del cromosoma
bacteriano durante la divisin celular mediante invaginaciones (mesosomas).
Constituye el soporte para los flagelos y tambin aporta la energa necesaria para su
movimiento.
Pared bacteriana. La pared bacteriana es una estructura rgida, que se encuentra
situada por fuera de la membrana citoplasmtica constituyendo un exoesqueleto,
cuya composicin qumica fundamental es una molcula, conocida como
peptidoglicano, que slo se encuentra en el mundo bacteriano.
El peptidoglicano es un largo polmero, filamentoso, constituido por dos
aminoazcares (N-acetil-glucosamina y N-acetil-murmico) alternados. Estos
filamentos polimricos se enlazan entre s por pequeos pptidos. En efecto, del N-
acetil-murmico se originan unos tetrapptidos los cuales se unen entre s por otros
puentes peptdicos.

3
Las bacteriocinas son protenas con actividad antibacteriana para otras bacterias diferentes a las
que las producen, que les permite competir en territorios donde existe una flora mixta
3
Podra imaginarse la membrana celular como el frgil vidrio de una garrafa protegido
por su envoltura de mimbre, que equivaldra a la pared. Los largos mimbres
formados por los polmeros de los azcares estaran unidos entre s por pequeos
pptidos para no desarmarse.
Segn las caractersticas generales de la pared, las bacterias pueden dividirse en
dos grandes grupos, que se diferencian fcilmente entre s al observarlas al
microscopio ptico despus de haber sido teidas por el mtodo de Gram. En la
tincin de Gram se utiliza como colorante el violeta de genciana que tie las clulas
bacterianas de color violeta oscuro. Despus de esta primera tincin, se decolora la
preparacin con alcohol y acetona. Unas bacterias, las grampositivas, resisten la
decoloracin y persisten teidas de violeta intenso, mientras que otras bacterias, las
gramnegativas, se decoloran. Para poder observar estas bacterias decoloradas, se
utiliza un colorante como la safranina que las tie de color rosa plido, contrastando
claramente con el violeta. Este comportamiento distinto depende de diferencias en la
estructura de la pared (Figura 4).
Pared de las bacterias grampositivas. En este grupo de bacterias el
peptidoglicano es muy grueso, constituyendo una ancha malla tridimensional a
travs de la cual emergen radialmente al exterior estructuras fibrilares polisacridas,
entre otras los cidos teicoicos. Tambin existen protenas fibrilares que emergen
desde el peptidoglicano a la superficie
4
. Algunas de estas estructuras constituyen los
antgenos de superficie de las bacterias grampositivas (Figuras 5 y 6).
Pared de las bacterias gramnegativas. El peptidoglicano forma una malla fina,
existiendo por fuera del mismo y unida a l por lipoprotenas, una membrana
externa, que no se encuentra en las bacterias grampositivas. Entre la membrana
externa y la membrana citoplasmtica se delimita un espacio virtual, denominado
periplsmico (Figuras 5 y 7). La membrana externa tiene estructura clsica en doble
capa fosfolipdica y contiene en gran abundancia protenas algunas de las cuales
regulan la permeabilidad (porinas) y lipopolisacridos (LPS).
El lipopolisacrido es una molcula alargada que posee dos fragmentos, uno interno
de naturaleza lipdica, anclado en la membrana, que se conoce como lpido A y otro
que sobresale al exterior, formado a su vez por dos partes: una medial denominada

4
En algunos grupos bacterianos emergen lpidos
4
core y otra distal o externa formada por una secuencia de 2 a 3 azcares que se
repiten y constituyen el antgeno de superficie ms importante de las bacterias
gramnegativas denominado antgeno O (Figura 8).
Algunas bacterias, poseen una pared rica en cidos grasos de cadena larga (cidos
miclicos y ceras) junto a protenas y polisacridos. Estos cidos grasos les
confieren propiedades particulares; entre ellas una mayor resistencia a agentes
qumicos, como los cidos y lcalis
5
. Se tien mal por el mtodo de Gram y lenta
pero intensamente con colorantes como la fucsina (rojo), pero una vez teidas por
este colorante a diferencia del resto de las bacterias, resisten la decoloracin por
cidos y alcoholes denominndose bacterias alcohol-cido resistentes. Esta
caracterstica tintorial se evidencia mediante la tincin de Ziehl-Neelsen en las que
las bacterias alcohol-cido resistentes se tien de rojo y las que pierden la
coloracin al ser tratadas por alcohol y cido se tien con azul de metileno para
contrastarlas con las anteriores.
Slo las micobacterias, nocardias y rodococos entre las bacterias de inters en
medicina, y las esporas bacterianas, son alcohol-cido resistentes, aunque existen
otros grupos como las corinebacterias que no son alcohol-cido resistentes, pero
tambin poseen una pared rica en cidos grasos.
Ciertas bacterias con estructura de gramnegativas como las espiroquetas, poseen
una pared caracterizada por presentar flagelos en el espacio periplsmico que les
confiere una morfologa espirilar caracterstica y colaboran a su movilidad.
Por ltimo, las arqueobacterias y los micoplasmas carecen de pared bacteriana.
Estas bacterias sin pared son de forma variable.
El peptidoglicano constituye un exoesqueleto rgido. Su funcin principal es evitar la
ruptura osmtica de la membrana ya que en condiciones normales la presin
intracelular en las clulas procariotas es ms elevada que la extracelular.
Secundariamente esta pared rgida confiere la forma caracterstica de cada bacteria.
Segn la morfologa pueden distinguirse cuatro tipos de bacterias: cocos, de forma
esfrica; bacilos, de forma alargada; espiroquetas, de forma espiral y bacterias sin
pared de forma irregular.

5
Aspecto muy importante, en relacin a su capacidad de persistencia en el medio ambiente y a las
tcnicas para su cultivo (vase ms adelante)
5
La inoculacin a animales de experimentacin de lipopolisacrido da lugar a una
compleja y grave reaccin txica que puede abocar al shock
6
, por lo que se le ha
denominado endotoxina. Esta toxicidad, a la que tambin es susceptible el hombre,
depende probablemente del lpido A. La cadena distal polisacrida del antgeno O
protege a la bacteria frente a diversos sistemas bactericidas existentes en los
tejidos, en particular el complemento. Se halla especialmente desarrollada en las
bacterias gramnegativas que carecen de cpsula.
La membrana externa constituye una barrera que condiciona el transporte de la
mayora de las sustancias qumicas. La permeabilidad en las bacterias
gramnegativas se efecta a este nivel mediante porinas y protenas de transporte
especfico. Este fenmeno de permeabilidad tiene importancia en microbiologa
clnica ya que es responsable de importantes diferencias en la sensibilidad a los
antibiticos. As, las bacterias gramnegativas, son resistentes a una serie de
antibiticos hidroflicos, a los que son sensibles las bacterias grampositivas, ya que
no pueden atravesar sus membranas externas en funcin de su tamao,
configuracin espacial de la molcula o carga neta. Por otra parte, en el espacio
periplsmico se hallan libres diversas enzimas que an siendo externas al
protoplasma celular no difunden libremente al medio por lo que su eficacia resulta
incrementada por concentracin en este espacio. Las betalactamasas, enzimas que
inactivan los antibiticos betalactmicos (penicilina y otros), se localizan a este nivel.
Exopolmeros bacterianos: Cpsula y glicocalix. Son estructuras fibrilares
polimricas localizadas externamente a la pared, generalmente de naturaleza
polisacrida que pueden ser productos de sntesis celular exportados (cpsula) o
productos sintetizados extracelularmente por exoenzimas bacterianas a partir de
sustratos extracelulares (glicocalix).
La cpsula posee una notable capacidad antignica y su actividad antifagocitaria la
convierte en un importante factor de virulencia para las bacterias que la poseen
(Figura 9).
El glicocalix envuelve a las clulas bacterianas y facilita su adhesividad a diversas
estructuras, como en Streptococcus mutans agente causal de la caries dental al

6
Hipotensin por vasodilatacin, seguida de mala perfusin tisular y fallo multiorgnico
6
esmalte de los dientes. Retiene humedad y nutrientes y puede dificultar el acceso de
los antibiticos y los anticuerpos a los antgenos de superficie.
Muchas bacterias no poseen estos exopolmeros que son estructuras facultativas y
por tanto no son imprescindibles para la vida bacteriana.
Flagelos. Son estructuras fibrilares de naturaleza proteica que constituyen los
rganos de locomocin de las bacterias.
Estn formados por la agregacin de mltiples subunidades de una protena globular
denominada flagelina. La agregacin de estas subunidades da lugar a un largo
cilindro hueco (Figuras 10 y 11). Su naturaleza proteica confiere al flagelo un
carcter muy inmunognico (antgenos H).
Pili y Fimbrias. Son estructuras externas filamentosas, tubulares, huecas formadas
de modo semejante a los flagelos por agregacin de mltiples subunidades
proteicas. Poseen capacidad antignica.
Algunas fimbrias juegan un papel importante en la patognia de las infecciones
bacterianas ya que permiten a las bacterias que las poseen adherirse a las
superficies mucosas, otras poseen funciones semejantes a la cpsula y otras
participan en los procesos de transferencia de plsmidos por conjugacin entre las
clulas (pili sexuales).
2. Antgenos bacterianos
Las estructuras con capacidad antignica en las bacterias son muy numerosas. Sin
embargo las que posen mayor inters en medicina, por las razones que se
sealarn ms adelante, son de localizacin perifrica como la cpsula (K), el
lipopolisacrido (O) y las protenas de la membrana externa en las bacterias
gramnegativas, y los cidos teicoicos y otros exopolmeros de la pared en las
grampositivas. Los flagelos (H), las fimbrias y las protenas de la membrana
citoplasmtica tambin poseen carcter antignico.
Los anticuerpos protectores van dirigidos generalmente a los antgenos capsulares.
Existe evidencia de este hecho ya que se han utilizado purificados como vacunas
eficaces en el caso de neumococo, hemfilos y del agente causal de la fiebre
tifoidea (antgeno capsular Vi de Salmonella typhi).
7
Se conoce menos la importancia protectora de los anticuerpos dirigidos frente a los
antgenos O, H y protenas de membrana externa y el papel que juegan estas
estructuras en la patogenicidad de algunas bacterias.
Todos estos antgenos se han utilizado, dependiendo de los microorganismos, para
la subdivisin de las especies bacterianas en serogrupos o serotipos. As el antgeno
capsular permite subdividir al neumococo, al meningococo y a los hemfilos en
diversos tipos. Los antgenos O y H permiten subdividir las especies de
enterobacterias en serotipos y los antgenos de membrana externa permiten
subdividir los grupos de meningococo en diversos subtipos.
3. Formas de resistencia: Esporas
Algunas bacterias grampositivas , en situaciones ambientales adversas, son
capaces de generar formas de resistencia, denominadas esporas
7
mediante un
proceso complejo de esporulacin. Las esporas constituyen una de las escasas
formas de diferenciacin celular aparecidas en el mundo bacteriano
8
. Una espora
bacteriana posee una forma esfrica u oval y contiene una copia completa del
material gentico de la bacteria, estructuras para la sntesis proteica, parte de los
sistemas enzimticos para la obtencin de energa y sustancias de reserva
energtica, rodeados por varias envolturas concntricas, de diferente composicin
qumica, algunas de las cuales son muy resistentes a los agentes fsicos y qumicos.
Al encontrar condiciones favorables las esporas revierten al estado morfolgico y
metablico normal vegetativo a travs de un proceso de germinacin.
Las esporas, que pueden ser circulares u ovales, segn su localizacin en la
bacteria antes de liberarse pueden clasificarse en centrales, subterminales y
terminales. Estos datos poseen valor para la identificacin de las bacterias
esporuladas.
Las esporas nicamente se producen en algunas bacterias grampositivas y entre
ellas tan slo existen dos gneros, Bacillus y Clostridium, de inters en medicina.

7
Para destruir las esporas se requiere calor hmedo a 121C durante 20 minutos, calor seco a 180C
durante 2 horas o antispticos enrgicos

8
Otras son las variaciones morfolgicas que se producen en el ciclo vital de las clamidias, coxiela y
las estructuras formadas por las mixobacterias

8
4. Morfologa y visualizacin de las bacterias
La mayora de las bacterias poseen un tamao variable entre 0.2 y 5 m pudindose
observar al microscopio ptico en fresco o teidas mediante la tincin de Gram u
otras como la de Ziehl-Neelsen.
Aunque presentan escasa variabilidad morfolgica, pueden adscribirse a varios
grupos segn su forma. Las redondeadas se denominan cocos y las alargadas
bacilos. Los bacilos con forma de coma, se denominan vibriones. Algunos bacilos
poseen forma espirilar denominndose espirilos, que no hay que confundir con las
espiroquetas que presentan una morfologa aparentemente semejante, pero poseen
flagelos en el espacio periplsmico. Las bacterias sin pared, como los micoplasmas,
poseen forma irregular.
Cada bacteria perteneciente a uno de estos tipos morfolgicos (cocos y bacilos)
puede subdividirse segn la tincin de Gram en grampositivas o gramnegativas y
segn la de Ziehl en alcohol-cido resistentes o no.
La morfologa, la coloracin por la tincin de Gram y la de Ziehl-Neelsen, as como la
presencia o ausencia de esporas, que pueden visualizarse como una estructura
morfolgicamente definida, constituyen los caracteres ms elementales para la
clasificacin de las bacterias.
El examen microscpico es muy utilizado para detectar e identificar presuntivamente
las bacterias en las diversas muestras clnicas que se remiten al laboratorio para
estudio. Sin embargo, algunas bacterias como los micoplasmas, las espiroquetas,
clamidias y rickettsias, no se visualizan mediante las tcnicas microscpicas
convencionales, por requerir tinciones especiales o por su pequeo tamao.
5. Metabolismo bacteriano
El metabolismo es el conjunto de reacciones bioqumicas catablicas que producen
energa para el movimiento, el transporte de sustancias en la clula y para la sntesis
de los compuestos celulares estructurales a travs de las reacciones anablicas.
Aunque las bacterias poseen todas las potencialidades metablicas, auttrofas y
hetertrofas conocidas, slo poseen inters en medicina las quimiorgano-
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hetertrofas, que utilizan compuestos orgnicos para la obtencin de energa, como
las existentes en los tejidos y secreciones del cuerpo humano.
Las bacterias quimiorganotrofas obtienen energa de los hidratos de carbono y otros
sustratos orgnicos que se incorporan a las rutas metablicas fermentativas.
La energa se acumula en forma de ATP, que se produce a partir del ADP
(ADP+P=ATP), por dos mecanismos, el de fosfosilizacin a nivel de sustrato o la
fuerza motriz de protones (por gradiente electroqumico membrana). El primero tiene
lugar en las fermentaciones y el segundo en la cadena respiratoria.
La fermentacin es un proceso anaerobio en el que, a travs de diversas vas
metablicas siendo la de Embden-Meyerhof una de las ms universales se
produce cido pirvico a partir de la glucosa y se obtiene una ganancia neta de 2
ATP y 2 NADPH, fuentes de energa y de poder reductor, respectivamente (Figura
12).
El cido pirvico (piruvato) puede ser posteriormente degradado, por fermentacin, a
varios catabolitos como cido lctico, etanol, butilenglicol, cido butrico, cido
propinico y otros (Figura 13).
Del cido pirvico, formado por fermentacin puede an extraerse gran cantidad de
energa mediante un proceso de respiracin aerobia. A partir del pirvico se forma
acetil coenzima A que se incorpora al ciclo de Krebs. A l estn acopladas las
cadenas respiratorias que permiten la sntesis de ATP. En las cadenas respiratorias
el aceptor final de electrones es el oxgeno (Figura 14).
Muchas bacterias hetertrofas pueden obtener energa tanto por va fermentativa
(anaerobia) como por la respiracin (aerobia) por lo que pueden cultivarse y crecer
tanto en ausencia como en presencia de oxgeno, denominndose aerobias y
anaerobias facultativas. Algunas, denominadas aerobias estrictas, slo pueden
crecer en presencia de oxgeno porqu las vas fermentativas no producen suficiente
energa. Otras slo pueden obtener energa por va fermentativa anaerobia y
adems la presencia de oxgeno es letal para ellas. Estas bacterias denominadas
anaerobias estrictas deben cultivarse en una atmsfera carente de oxgeno. Por
ltimo, algunas bacterias denominadas microaerfilas activan su metabolismo a
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concentraciones bajas de oxgeno, pero no crecen a la concentracin atmosfrica y
lo hacen muy lentamente en anaerobiosis estricta.
Las subunidades moleculares necesarias para la biosntesis de macromolculas,
como los aminocidos, azcares, lpidos, bases pricas, pirimidnicas, as como
ciertas vitaminas y otros factores esenciales, pueden ser tomadas del medio y
utilizadas como tales para la sntesis. Sin embargo, la mayora de estas subunidades
pueden ser sintetizadas a partir de catabolitos intermediarios formados en los
procesos catablicos de molculas sencillas y universales como los glcidos y otras.
La glucosa 6-fosfato, el fosfoenol piruvato, el oxalacetato, y el -cetoglutarato,
constituyen metabolitos focales a partir de los cuales, formando diversos
intermediarios, pueden dar lugar a la mayora de las molculas estructurales o
funcionales complejas de las clulas bacterianas, de modo que la combustin de los
azcares adems de aportar energa va formando catabolitos qumicos que son
precursores de subunidades bsicas estructurales. Ello muestra como existe una
profunda interdependencia entre los procesos catablicos bioenergticos y los
biosintticos.
Aspectos aplicados del estudio de metabolismo bacteriano. Aunque el estudio
del metabolismo bacteriano posee gran inters desde numerosos puntos de vista
(terico
9
, farmacolgico, industrial) desde el punto de vista de la microbiologa
mdica aplicada posee valor taxonmico ya que las bacterias, tras su clasificacin
inicial segn la morfologa, Gram, Ziehl, movilidad y esporulacin, se diferencian en
grupos segn el tipo respiratorio: aerobias, anaerobias, facultativas o microaerfilas
y posteriormente pueden clasificarse a nivel de familia, gnero o especie segn
posean o no diversas capacidades metablicas.
El conocimiento del metabolismo bacteriano permite adems comprender el
fundamento de los mtodos de cultivo, el modo de accin de algunos antibiticos
que actan interfiriendo rutas metablicas especficas y otros aspectos de la biologa
relacionados con la enfermedad humana, como la localizacin intracelular obligada
de algunas bacterias (clamidias y rickettsias) por insuficiencia de sus vas
metablicas para permitirles la vida libre.

9
El metabolismo de las bacterias hetertrofas no es esencialmente diferente del de las clulas de
otros organismos como hongos, protozoos y animales
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6. Divisin bacteriana
La divisin bacteriana se hace por un proceso relativamente sencillo en relacin a
las clulas eucariotas que se denomina fisin binaria. La duplicacin del cromosoma
bacteriano constituye el paso previo a la divisin celular. La molcula de DNA se
abre y cada una de las hebras se fija a la membrana, probablemente en un
mesosoma, replicndose. Los dos cromosomas resultantes se separan por
crecimiento de la membrana de la zona intermedia entre los mesosomas que hacen
las funciones de un aparato mittico primitivo. Posteriormente se sintetiza un septo
bacteriano de doble pared que dividir a las dos clulas hijas.
Ver vdeo:
http://www.youtube.com/watch?v=DY9DNWcqxI4&feature=player_detailpage
Nutricin bacteriana. En condiciones naturales las bacterias crecen en lugares en
los que encuentran los elementos necesarios para su multiplicacin, que en las
bacterias quimiorganohetertrofas, como las patgenas para el hombre, son
substratos orgnicos as como agua e iones minerales.
Si bien numerosas bacterias de vida libre son capaces de crecer con substratos
simples como nica fuente de carbono y energa, muchas de las bacterias
adaptadas a la vida parasitaria precisan de la presencia de diversas molculas
orgnicas que no son capaces de sintetizar, por carecer de los sistemas enzimticos
necesarios. A estas molculas se las denomina factores de crecimiento y esas
bacterias se denominan auxtrofas para esta determinada sustancia.
Si se incluyen en un tubo de ensayo todos los elementos necesarios para la
multiplicacin in vitro de una bacteria, como el agua, sales minerales, azcares,
protenas y factores de crecimiento, si son necesarios, se obtiene un medio de
cultivo (Figura 15).
7. Medios de cultivo
Los medios de cultivo, al permitir la multiplicacin bacteriana in vitro facilitan el
aislamiento de las bacterias a partir de sus hbitats naturales y permiten su
propagacin en el laboratorio.
12
Los medios de cultivo pueden ser lquidos, cuando los componentes nutritivos se
hallan disueltos en solucin acuosa, o slidos, cuando esta solucin de nutrientes
se gelifica al aadirle un polisacrido gelificante no degradable por la actividad
metablica de las bacterias como el agar-agar. El agar-agar se disuelve en el medio
de cultivo lquido por ebullicin y al enfriarse por debajo de los 45C solidifica como
una gelatina endurecida dando al medio la consistencia de la carne de membrillo.
Los medios lquidos se dispensan en matraces o tubos de ensayo y los slidos se
reparten en placas circulares provistas de tapa, denominadas placas de Petri, o en
tubos de ensayo.
La ventaja de los medios slidos dispuestos en placas de Petri consiste en que en
ellos pueden aislarse de modo individualizado las distintas bacterias de una mezcla
contenidas en un material clnico (orinas, pus, etc.).
En efecto, si se inocula (siembra) un medio lquido con una mezcla de bacterias (o
una muestra clnica que contenga diversos tipos de bacterias) stas se multiplican
en el medio lquido entremezclado, en suspensin. Si por el contrario mediante un
asa
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se disemina por la superficie de un medio slido el material que contiene las
bacterias (siembra por agotamiento), cada clula bacteriana se multiplica en el lugar
donde ha quedado depositada, dando lugar, al cabo de unas horas o das, a
millones de clulas que forman un conglomerado celular, visible
macroscpicamente, denominado colonia bacteriana (Figura 15).
Ver vdeo:
http://www.youtube.com/watch?v=_1KP9zOtjXk&feature=player_detailpage
Como algunas clulas bacterianas han quedado depositadas en la superficie del
medio aisladas de las dems, a partir de ellas se forman colonias aisladas
constituidas por un solo tipo de bacteria. Las bacterias de estas colonias pueden
transferirse, mediante el asa a otros medios de cultivo, lquidos o slidos, en los que
crecen en cultivo puro. A partir de los cultivos puros se efecta la identificacin, se
evala la sensibilidad a los antibiticos o pude realizarse cualquier otro estudio
biolgico.

10
El asa est formada por un mango semejante a un lpiz con un filamento recto y fina de metal que
acaba en un bucle que permite tocar y sembrar el material biolgico
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Condiciones fisicoqumicas de los cultivos bacterianos. Para que se produzca la
multiplicacin, las bacterias deben sembrarse en medios que posean adems de los
nutrientes necesarios, el pH y la osmolaridad adecuados. Estos medios de cultivo
deben incubarse en estufas a la temperatura ptima de crecimiento que, para la
mayora de las bacterias de inters mdico, se sita entre 35 y 37C (bacterias
mesfilas)
11
.
Asimismo la atmsfera necesaria durante la incubacin depende del tipo respiratorio
de las bacterias, que como se ha sealado pueden ser aerobias, anaerobias,
facultativas o microaerfilas.
Dinmica del crecimiento bacteriano. Cuando se siembra una bacteria en un
medio lquido originalmente transparente, despus de unas horas de incubacin ste
se enturbia como consecuencia del crecimiento bacteriano. En la superficie de los
medios slidos, se desarrollan colonias como ya se ha indicado.
La cintica de la multiplicacin bacteriana se establece experimentalmente midiendo
variaciones de la masa bacteriana en funcin del tiempo. ste clculo conduce a la
obtencin de una curva de crecimiento (Figura 16).
El tiempo de generacin es el tiempo necesario para que tenga lugar una divisin
bacteriana, doblndose por tanto la masa bacteriana existente: De l depende el
mayor o menor tiempo necesario para que se visualice una colonia sobre el medio
slido o se observe el enturbiamiento de un medio lquido. El tiempo de generacin
depende de la presencia de substratos energticos, de la temperatura de
incubacin y otros factores externos, pero es fundamentalmente una caracterstica
propia de cada especie bacteriana, variando de una a otra.
La mayora de las bacterias de inters mdico tiene un tiempo de generacin de
alrededor de 20 minutos detectndose macroscpicamente el crecimiento en los
medios de cultivo (turbidez o colonias) tras 18 o 24 horas de incubacin. Algunas
bacterias poseen tiempos de generacin ms prolongados como Mycobacterium
tuberculosis, causante de la tuberculosis, que posee un tiempo de generacin
superior a 24 horas, requiriendo semanas para formar colonias visibles
macroscpicamente en los medios slidos.

11
Bacterias psicrfilas: crecen entre 4-20C; bacter ias mesfilas: crecen entre 25-35C y bacterias
termfilas: crecen entre 40-45C
14
Utilizacin de los medios de cultivo. Segn su funcin los medios de cultivo
pueden dividirse en medios de aislamiento, medios de propagacin y medios de
identificacin.
Los medios de aislamiento se utilizan para aislar las bacterias a partir de los
materiales o productos donde naturalmente se hallan (tierra, aguas, superficies
cutaneomucosas y tejidos u rganos infectados).
Los medios de aislamiento pueden clasificarse 1) usuales, 2) enriquecidos, 3)
selectivos, 4) diferenciales y 5) de enriquecimiento.
Para su descripcin es preciso comprender el concepto de medio usual al que se ha
hecho referencia anteriormente.
Los medios usuales son medios de formulacin sencilla que incluyen agua,
protenas obtenidas de un extracto o infusin de carne, glucosa y sales minerales,
particularmente cloruro sdico y oligoelementos. Las bacterias que crecen en l son
las que no poseen requerimientos de factores esenciales y se denominan no
exigentes.
Las bacterias exigentes son las que requieren diversos factores esenciales para su
crecimiento y se cultivan en medios enriquecidos que aportan estos factores. Los
medios enriquecidos se preparan aadiendo a un medio usual sangre, suero,
extractos de levadura, que aportan esos factores o incorporndolos purificados,
como el factor V (nicotin-adenin-dincletido, NAD), el factor X (hemina), la cisteina u
otros. Los medios enriquecidos ms utilizados en bacteriologa son el agar usual con
sangre (agar sangre) y el agar-chocolate (agar usual enriquecido con los factores X
y V).
Cuando se pretende aislar todas las bacterias de un producto se siembra por
agotamiento un medio slido usual o preferentemente enriquecido. Sin embargo, es
habitual que de un producto que contenga una mezcla de diversas especies
bacterianas se desee aislar tan solo una especie en particular, que est en
cantidades muy escasas con relacin al resto de bacterias acompaantes, como una
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salmonela de las heces o una legionela del esputo
12
. Para conseguir este objetivo
pueden utilizarse medios selectivos o de enriquecimiento.
Los medios selectivos son medios slidos, usuales o enriquecidos, a los que se ha
aadido alguna sustancia que inhibe el crecimiento de las bacterias, excepto las de
la especie que se desea aislar. Diversos productos consiguen este efecto, siendo los
ms utilizados algunos colorantes con actividad antibacteriana selectiva, las sales
biliares y los antibiticos entre otros.
Los medios de enriquecimiento son medios lquidos que se utilizan para incrementar
la cantidad de clulas bacterianas de una especie existente en una mezcla. Su
actividad depende, como en los selectivos, de la incorporacin de sustancias con
actividad inhibitoria para determinadas bacterias. Durante la incubacin se produce
la multiplicacin en el medio lquido de las bacterias que se desean aislar y se inhibe
la de las dems bacterias. Tras la incubacin, cuando la especie buscada ya est en
una proporcin muy superior a la de las bacterias que le acompaaban inicialmente
en la muestra clnica, se efecta una resiembra en un medio selectivo slido.
Los medios diferenciales son medios slidos que incorporan a su formulacin un
substrato cuya utilizacin o no por las diferentes especies bacterianas da lugar a
colonias de aspecto diferente; especies cuyas colonias en medios usuales
apareceran como idnticos. Los substratos ms utilizados son azcares (lactosa,
sacarosa, etc.) que se aaden al medio junto a un colorante que es indicador de pH
(rojo de fenol, azul de bromotimol, etc.). Las bacterias que no utilizan el substrato
dan lugar a colonias con el color original del medio al no modificar el pH. Las que lo
utilizan acidifican el medio con sus catabolitos y dan lugar a colonias de otro color al
virar el indicador de pH.
Los medios cromognicos son medios diferenciales que incorporan substratos
qumicos sintticos, que unidos a sustancias naturales son incoloros. Algunas
bacterias, mediante enzimas especficas pueden hidrolizar estos enlaces y liberar
compuestos de color intenso (Figura 17).
La mayora de medios selectivos se formulan a la vez como diferenciales, funcionan
por tanto como medios selectivos-diferenciales.

12
Las heces y el esputo contienen decenas o centenas de diferentes especies bacterianas
16
8. Taxonoma bacteriana
Las bacterias se clasifican en grupos taxonmicos, siendo la familia, el gnero y la
especie los ms operativos desde el punto de vista de la microbiologa mdica.
La unidad taxonmica bsica es la especie bacteriana. En la actualidad el criterio
utilizado para establecer que dos bacterias pertenecen a una misma especie es el
de la homologa gentica que existe entre ellas (taxonoma gentica). Si se supone
que la secuencia de bases del DNA de una bacteria es AGTCCGCTAT, se
considerar con una homologa del 100% las que poseen la misma secuencia
AGTCCGCTAT. Si se supone que otra bacteria posee una secuencia
ATTCCTAGTT, en la que slo coinciden con la primera la mitad de las bases su
homologa con ella es del 50%. Se consideran como pertenecientes a la misma
especia aquellas bacterias que poseen una homologa gentica superior al 80%. La
tcnica que permite determinar la homologa gentica entre dos bacterias es la de
hibridacin.
Si se estudian los caracteres metablicos de las bacterias, en la mayora de los
casos puede efectuarse una correlacin entre stos y el grupo taxonmico definido
por hibridacin. Las especies semejantes entre s se agrupan en gneros y estos en
familias.
La familia y el gnero se denominan mediante un nombre cientfico latino (vg: familia
Pseudomonadacae, gnero Pseudomonas). La especie se denomina mediante dos
nombres latinos, el primero de los cuales es el del gnero y el segundo el propio de
la especie (vg: Pseudomonas aeruginosa). A veces se utilizan como sinnimos
nombres coloquiales vernculos (vg: Pseudomonas aeruginosa, sinnimo bacilo
piocinico).
9. Identificacin de las bacterias
La identificacin de una bacteria como perteneciente a una determinada especie se
establece en la prctica basndose en caracteres estructurales, metablicos y
antignicos (fenotpicos). Ello es posible, a pesar de que los grupos taxonmicos se
establecen por criterios genticos, porque cada grupo definido por tcnicas
genticas presenta caracteres fenotpicos y propios del grupo.
17
Los caracteres ms universalmente estudiados son la morfologa, la reaccin al
Gram y al Ziehl, la presencia de esporas y flagelos (movilidad), el tipo respiratorio, su
exigencia en factores esenciales de crecimiento y la presencia de catalasa y
citocromooxidasa que permiten diferenciar las bacterias en grandes grupos.
Otros caracteres estudiados son su actividad metablica sobre diversos substratos
como azcares, aminocidos, lpidos, etc.
Para estudiar estas propiedades metablicas se utilizan medios de identificacin que
incorporan los substratos a estudiar. La metabolizacin de los substratos por la
bacteria se detecta mediante indicadores de pH cuando comporta un cambio
importante del pH del medio o mediante la deteccin de un catabolito especfico
producido en el proceso metablico, mediante reactivos que sufren variaciones de
color (como por ejemplo la deteccin del indol, producido por metabolizacin del
triptfano, mediante el reactivo de Kovacs de color amarillo que vira a rojo).
En la actualidad existen en el mercado sistemas de identificacin que incorporan los
diversos medios de identificacin a micropocillos dispuestos en soportes de plstico.
Estos sistemas han facilitado, mediante la realizacin sencilla de numerosas
pruebas metablicas, la identificacin de las bacterias.
Los antgenos que poseen valor en la clasificacin bacteriana infraespcifica pueden
detectarse, la mayora de las ocasiones, por pruebas sencillas de aglutinacin en
porta mediante antisueros especficos.
Aparte del serotipado existen otros mtodos para la deteccin de grupos bacterianos
diferentes dentro de una misma especie (clasificacin infraespecfica), como son el
fagotipado (lisotipado), el antibiotipado y otros basados en tcnicas de biologa
molecular
13
.
10. Bacterias de inters en medicina
Las bacterias de inters en medicina pueden clasificarse, segn un criterio
patognico, en dos grupos: las que forman parte de la flora normal del hombre en la
piel y las mucosas digestiva, respiratoria y urogenital, como simbiontes inocuos y las
patgenas que poseen capacidad para producir enfermedad. Esta diferencia

13
Polimorfismo de fragmentos de restriccin del ADN, ribotipado, diferencias en isoenzimas, y otros
(ver ms adelante)
18
prctica, en realidad no es tajante ni absoluta, ya que la capacidad patgena de un
microorganismo depende tanto de l como de la capacidad de defensa del
hospedador, lo que se refleja en dos hechos: 1) la existencia de portadores sanos de
bacterias patgenas y 2) que bacterias de la flora normal pueden causar en
determinadas circunstancias infecciones oportunistas graves. Las infecciones
bacterianas se caracterizan por ser de curso agudo, con fiebre, leucocitosis, signos
biolgicos de reaccin de fase aguda (VSG, protena C reactiva y fibringeno
elevados), y dar signos focales dependientes de los rganos afectados por la
infeccin.
Algunas bacterias como las brucelas (fiebre de Malta) o el bacilo de Koch
(tuberculosis), despus de la primoinfeccin, tienen capacidad para persistir en los
macrfagos durante aos en estado latente, pudiendo dar lugar a reactivaciones. Se
dispone de numerosos medicamentos antibacterianos tiles, aunque su uso, en
ocasiones indiscrimado, ha favorecido la seleccin de cepas resistentes. Slo
existen vacunas eficaces frente a algunas bacterias capsuladas y toxignicas.
A continuacin se presentan sucintamente algunas bacterias de inters mdico. La
mayora de estas bacterias se visualizan fcilmente al microscopio ptico y crecen
bien en diversos medios de cultivo a temperatura ptima de 35 a 37C, en caso
contrario se seala en el texto.
Cocos grampositivos
Los cocos grampositivos incluyen tres gneros de gran inters, Staphylococcus,
Streptococcus y Enterococcus.
Gnero Staphylococcus. Los estafilococos son cocos grampositivos que se
agrupan en racimos. La especie Staphylococcus aureus [Sin: estafilococo dorado] es
la que posee mayor capacidad patgena por producir numerosas enzimas
exocelulares involucradas en la patogenicidad. Una de ellas, la coagulasa, permite
diferenciar esta especie del resto de especies de estafilococos de inters en
medicina, como S. epidermidis y otros, denominados colectivamente estafilococos
coagulasa negativa.
Los estafilococos se hallan fundamentalmente en la piel y mucosa nasal. S. aureus
causa por mecanismo invasor, penetrando a las glndulas sebceas y folculos
19
pilosos o a travs de heridas, infecciones cutneas, desde las que puede difundir por
va hemtica, ocasionando infecciones generalizadas. Algunas cepas de S. aureus
producen distintas exotoxinas que dan lugar a enteritis y otros procesos
patolgicos
14
.
Los estafilococos coagulasa negativa son los agentes causales ms frecuentes de
infecciones oportunistas asociadas a cuerpos extraos como catteres
endovasculares, prtesis valvulares cardacas y prtesis articulares, entre otras.
Gnero Streptococcus. Los estreptococos son cocos grampositivos que se
disponen en cadenas o parejas. Al cultivarlos en agar-sangre pueden dar lugar a
diversos tipos de hemolisis de la sangre alrededor de las colonias por liberacin de
hemolisinas, lo que permite diferenciar 1) los estreptococos que poducen hemolisis
total de la sangre y que se denominan -hemolticos, 2) los que producen hemolisis
parcial, denominados -hemolticos o viridans y 3) los no hemolticos.
Entre los -hemolticos, que se diferencian en serogrupos
15
por la estructura
antignica del carbohidrato C de su pared, se incluye Streptococcus pyogenes
(Grupo A), que se halla en la faringe. Puede producir infecciones graves en la propia
faringe y en la piel. Algunas cepas lisognicas producen una exotoxina eritrognica,
que hace que la infeccin local invasora faringitis o piodermitis se acompae de
un exantema cutneo caracterstico causado por la exotoxina dando lugar a un
cuadro clnico denominado escarlatina.
Por otra parte en algunas personas, despus de la infeccin invasora, pueden
aparecer lesiones a distancia como consecuencia del desencadenamiento de una
reaccin inmunopatolgia que da lugar a un cuadro clnico sistemtico, la fiebre
reumtica, que se acompaa de inflamacin asptica local en las articulaciones
(artritis) y en el endocardio (endocarditis). Tambin se puede producir lesin en los
glomrulos renales por mecanismo inmunopatolgico (glomorulonefritis). Obsrvese
pues, que esta especie es capaz de producir infeccin por los tres mecanismos
patognicos conocidos: invasor, toxignico e inmune.

14
El shock txico y el sndrome de la piel escaldada

15
Grupos A, B, C, D, E, F, G, H, K, L, M, N y O de Lancefield. Se sealan en cursiva las que pueden
encontrarse en el hombre
20
S. agalactiae es otro estreptococo beta-hemoltico (Grupo B) que se halla en el tubo
digestivo y vagina pudiendo causar, adems de infecciones urinarias, infecciones
sistmicas perinatales (sepsis y meningitis) cuando el recin nacido se contamina a
su paso por la vagina. No se conoce con precisin la va de penetracin de este
microorganismo a los rganos profundos del recin nacido desde la colonizacin
cutnea e intestinal (deglucin) del que tiene lugar a su paso por la vagina.
Los estreptococos del grupo viridans, que comprende varias especies de taxonoma
mal definida, forman parte de la flora normal de la orofaringe. Streptococcus mutans,
se considera directamente involucrado como agente causal de la caries dental, y el
resto de especies, excepcionalmente pueden causar infecciones oportunistas (Tabla
1).
Una especie particular de estreptococo -hemoltico, el neumococo (Streptococcus
pneumoniae), se halla en la faringe y posee gran capacidad para producir infeccin
pulmonar severa neumona seguida con frecuencia de bacteriemia que puede dar
lugar a meningitis de pronstico muy grave.
Posee una cpsula polisacrida antignica que ha permitido dividir la especie en
ms de 80 serotipos y que est involucrada en la patogenicidad por ser un factor de
resistencia a la fagocitosis. Se ha preparado una vacuna polivalente con los
antgenos capsulares de los 23 serotipos ms frecuentes y otra conjugada
heptavalente
16
.
La conjuntiva y las mucosas de los senos paranasales y del odo medio estn en
comunicacin con la faringe a travs de sus conductos naturales y las infecciones
bacterianas en esas localizaciones (conjuntivitis, sinusitis y otitis) estn causadas
por patgenos que residen en la rino y orofaringe: Streptococcus pneumoniae,
Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes y Staphylococcus aureus.

16
La vacuna 23-valente incluye los siguientes serotipos (nomenclatura danesa): 1, 2, 3, 4, 5, 6B, 7F,
8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19F, 19A, 20, 22F, 23F, 33F. Aunque la prevalencia de
los serotipos patgenos vara segn el pas, se han sealado en cursiva los serotipos ms
prevalentes en nuestro medio. Tambin son frecuentes los serotipos 6A, 7A y 15F, no incluidos en la
vacuna. Recomendada en nios de ms de dos aos y adultos. La nueva vacuna conjugada de
polisacridos y protenas heptavalente es eficaz en nios de corta edad.

21
El gnero Enterococcus, engloba un conjunto de especies (E. faecalis y otras
17
),
semejantes a estreptococos, de hbitat intestinal. Los enterococos poseen creciente
inters en el campo de la infeccin oportunista; ya que por su elevada resistencia a
los antimicrobianos son seleccionados fcilmente por los antibiticos de amplio
espectro.
Cocos gramnegativos
Gnero Neisseria. Los cocos gramnegativos de mayor inters en medicina
pertenecen al gnero Neisseria. Morfolgicamente se presentan formando parejas
con aspecto de granos de caf enfrentados por su cara plana. Son aerobios
estrictos.
El gnero posee varias especies comensales ubicadas en la orofaringe y dos
especies patgenas N. meningitidis (meningococo), y N. gonorrhoeae (gonococo)
cuyo nico hbitat natural es el hombre.
El meningococo se halla en la faringe, se transmite por va area, y bajo
determinadas circunstancias mal parecidas, puede producir bacteriemia para
localizarse en las meninges causando se asocia a shock sptico. La meningitis
meningococica es ms frecuente en la infancia y suele presentarse en brotes
epidmicos.
Basndose en la estructura antignica de los polisacridos de la cpsula se han
diferenciado 13 serogrupos, los ms frecuentes de los cuales son el A, B, C, W-135
y el Y.
Se han ensayado vacunas que han resultado eficaces frente a los serogrupos A y C
pero el hombre responde mal a la inoculacin del antgeno del grupo B que es el
ms frecuente en nuestro medio
18
.
El gonococo causa infecciones genitales: de la uretra (uretritis), del cervix uterino
(cervicitis) y del recto (proctitis) de transmisin sexual
19
. Tras la infeccin clnica

17
Las especies ms frecuentes aisladas en clnica son: E. faecalis (80-90%), E. faecium (5-10%), E.
avium, E. raffinosus y E. gallinarum, que se aslan raramente. El aislamiento de otras especies es
excepcional. Estos microorganismos causan infecciones urinarias, colecistitis, infecciones
intraabdominales y plvicas, sepsis y con menor frecuencia endocarditis bacteriana, as como
infecciones en otras localizaciones

18
Ello ha conducido a ensayar vacunas utilizando como antgenos no el polisacrido, sino las
protenas de membrana externa
22
algunas personas pueden persistir como portadores asintomticos del
microorganismo en la uretra, vagina y recto y transmitir la enfermedad.
En el gnero Neisseria existe un gran nmero de especies que son simbiontes
inocuos en la orofaringe, entre las que cabe destacar N. catarrhalis por su potencial
patgeno recientemente descubierto (infecciones respiratorias). Este micro-
organismo ha sido transferido a otro gnero bajo la denominacin de Moraxella
catarrhalis.
Bacilos grampositivos
Entre los bacilos grampositivos aerobios estrictos o facultativos, los gneros de
mayor inters en medicina son Corynebacterium, Listeria, Bacillus y Lactobacillus
20
.
Corynebacterium diphtheriae causa la difteria que se caracteriza por una faringitis
muy exudativa que puede llegar a obstruir la va respiratoria, con grave
sintomatologa general por produccin de una potente exotoxina que al ser
absorbida afecta al miocardio y nervios perifricos. Existen portadores sanos del
microorganismo, que se transmite por va area. La toxina est codificada por un
bacterifago lisognico (fago ).
El asilamiento de C. diphtheriae de la faringe no es fcil, requiere medios especiales
y un cierto nivel de experiencia. Aunque la disposicin de una vacuna antidiftria
eficaz ha erradicado en nuestro medio la enfermedad y disminuido el nmero de
portadores, la vacunacin inadecuada de la poblacin podra hacerla reaparecer.
Otras especies de este gnero, denominadas colectivamente difteroides o
difteromorfos
21
, forman parte de la flora normal de la piel y mucosas y pueden
causar, como oportunistas, infecciones sobre catteres, sondas , prtesis y otros
cuerpos extraos, una patologa semejante a la de los estafilococos coagulasa-
negativa.

19
Las enfermedades cuya transmisin especfica es por contacto sexual tambin se denominan
venreas

20
Excepcionalmente Erysipelothrix rhusiopathiae, bacilo grampositivo no esporulado que se
encuentra en los peces puede infectar la piel humana a travs de microheridas causando el
erisipelatoide, infeccin cutnea eritematoviolcea que constituye una zoonosis profesional
(pescateros, cocineros, etc.)

21
Corynebacterium jeikeium, C. urealyticum, C. pseudodiphthericum, C. pseudotuberculosis, C.
xeroris, C. striatum, y el grupo no nominado G-2. C. minutissimum, causa una infeccin cutnea
caracterstica: la eritrasma
23
El gnero Listeria posee una especie, Listeria monocytogenes, psicrfila (crece a
4C), que se halla ampliamente distribuida en la naturaleza en particular en el tubo
digestivo de numerosos animales. Puede contaminar al hombre de modo directo o a
travs de los alimentos. Una vez que ha colonizado el tubo digestivo humano puede
persistir asintomticamente o producir una patologa en todo semejante a la del
estreptococo hemoltico del grupo B (contaminacin del neonato, sepsis con
meningitis y meningitis primaria en el inmunodeprimido).
El gnero Bacillus se distingue por su morfologa caracterstica, producir esporas y
crecer en aerobiosis
22
. Dos especies poseen potencial patgeno para el hombre.
Bacillus anthracis causa el carbunco en los animales y el hombre. La puerta de
entrada de la infeccin es cutnea, dando lugar a una lesin local caracterstica la
pstula maligna desde donde puede producir sepsis. La inhalacin de esporas
causa una neumona grave. El carbunco es una enfermedad zoontica y profesional
(pastores, matarifes, curtidores, etc).
Bacillus cereus contamina con sus esporas, abundantes en el suelo, los alimentos y
al germinar y multiplicarse en ellos libera toxinas que al ser ingeridas causan
gastroenteritis. Lactobacillus es un gnero algunas de cuyas especies constituyen
parte de la flora normal de la vagina.
Bacilos gramnegativos
Familia Enterobacteriaceae. Incluye ms de 20 gneros y 100 especies de bacilos
gramnegativos, aerobios y anaerobios facultativos que crecen bien en medios
usuales. La mayora tiene su hbitat natural en el medio ambiente (agua, tierra).
Algunas especies se han adaptado al tubo digestivo de numerosos animales
incluyendo el hombre, como Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae o Proteus
mirabilis, constituyendo parte de la flora normal. Estas bacterias, con E. coli a la
cabeza, pueden causar infeccin oportunista grave (urinaria, abdominal, respiratoria
y sepsis) y son junto a algunas bacterias anaerobias que desde su mismo hbitat
producen infecciones semejantes, a Staphylococcus epidermidis, que causa
infecciones asociadas a cuerpos extraos, los agentes causales ms frecuentes de
infeccin oportunista.

22
Carcter diferencial con el otro gnero esporulado de inters en patologa humana (Clostridium),
que es anaerobio estricto y con el que morfolgicamente es indistinguible
24
Esta familia, incluye, adems varios gneros patgenos para el hombre como
Shigella, Salmonella, Yersinia y algunas cepas de la especie Escherichia coli que
poseen factores de enteropatogenicidad comportndose como patgenos primarios
(Tabla 2).
Esta familia de microorganismos es una de las ms estudiadas en bacteriologa, en
particular E. coli, que es la bacteria aerobia y anaerobia facultativa ms abundante
en el tubo digestivo del hombre, y que por su facilidad de cultivo a sido tomada como
modelo de estudio de las clulas procariotas, siendo probablemente el ser vivo mejor
conocido desde el punto de vista biolgico (estructura , fisiologa y gentica).
Una caracterstica de inters de algunos miembros de esta familia es que distintos
grupos dentro de una misma especie poseen potencialidades patognicas muy
diversas y ello no slo en E. coli sino tambin en Salmonella y Yersinia, como se ha
descrito en la Tabla 2.
En otra familia de bacilos gramnegativos, Pseudomonadaceae, el gnero
Pseudomonas y en particular P. aeruginosa posee caractersticas microbiolgicas y
de hbitat muy semejantes a las enterobacterias telricas. Ocasionalmente pueden
colonizar el tubo digestivo, la orofaringe o la piel del hombre, y causar infecciones
oportunistas semejantes a las causadas por enterobacterias comensales
23
.
Las pseudomonas forman parte de un amplio grupo de bacilos gramnegativos
aerobios que se hallan en abundancia en las plantas y el medio ambiente
denominados colectivamente bacilos gramnegativos no fermentadores
24
. Aparte de
P. aeruginosa se encuentran en este grupo los gneros Burkholderia (B. cepacia, B.
pseudomallei), Stenotrophomonas (S. maltofhilia).
Bacterias de morfologa espirilar. El gnero Vibrio est formado por bacilos
gramnegativos con morfologa curvada y su hbitat natural lo constituyen los
ecosistemas acuticos (marinos y de agua dulce). La especie Vibrio cholerae se

23
Aparte de P. aeruginosa existen otras especies del gnero Pseudomonas que tambin causan
infecciones oportunistas aunque con menor frecuencia, como P. fluorescens y P. putida, P. stutzeri,
etc. Existen dos especies, B. mallei y B. pseudomallei patgenas primarias para los animales y
ocasionalmente el hombre, causantes del muermo y la meliodosis respectivamente; estas especies
patgenas no se hallan en nuestro pas (S. E. asitico, O. Medio, frica, Australia).

24
Entre estos gneros de bacilos gramnegativos no fermentadores telricos, que pueden causar
infecciones oportunistas se hallan Acinetobacter, (A. baumanii), Alcaligenes y Flavobacterium, entre
otros.
25
divide por su antgeno 0 (somtico) en ms de 80 serogrupos, pero slo las cepas
del serogrupo 1 (01) producen el clera mediante liberacin de una potente
exotoxina tras colonizar la mucosa del intestino
25
. El clera, que posee un gran
potencial epidmico (pandemias), es una gastroenteritis toxignica muy grave por la
intensa deshidratacin que causa, y en ausencia de tratamiento presenta una
elevada tasa de mortalidad. Otros vibriones pueden tambin producir patologa al
hombre
26
.
Gnero Campylobacter. Campylobacter jejuni, posee una morfologa espirilar muy
caracterstica, es microaerfilo, se halla en el tubo digestivo de diversos animales,
en particular a aves y causa enteritis al hombre
27
.
Es de destacar que C. jejuni y las salmonelas gastroenterticas son con mucho las
bacterias ms frecuentemente causantes de enteritis en nuestro medio.
Helicobacter pylori, con caractersticas morfolgicas y de cultivo semejantes a las
campilobacterias tiene como hbitat natural la mucosa gstrica del hombre y se ha
relacionado con las gastritis crnica, la lcera duodenal y el cncer de estmago y
otros procesos patolgicos.
Bacterias hemfilas. Los hemfilos (gnero Haemophilus) son bacilos
gramnegativos pleomrficos, que requieren para su crecimiento los factores X y V
que se hallan en la sangre de ah su nombre por lo que se cultivan en agar
chocolate.
La especie que causa infeccin con mayor frecuencia es H . influenzae. En trminos
nemotcnicos puede decirse que su hbitat natural, (orofaringe), y su capacidad
patgena (neumona, sepsis, meningitis, as como otitis, conjuntivitis y sinusitis) es
semejante a la del neumococo. Adems ambas bacterias poseen cpsulas como

25
Recientemente se han descrito cepas de otro serogrupo aparte el 01 (0139) productoras de toxina
colrica

26
Los otros serotipos de V. cholerae y V. parahaemolyticus, pueden infectar al hombre por consumo
de marisco, causando gastroenteritis. Las especies V. vulnificus, V. alginolyticus y otros pueden
causar infecciones de heridas y otitis en baistas

27
Otras especies de Campylobacter que causan enteritis al hombre con menor frecuencia son C. coli
y C. lari. C. fetus puede colonizar el tubo digestivo y causar sepsis primaria oportunista; pero no
causa gastroenteritis
26
factor de virulencia ya que les permite eludir la fagocitosis
28
. Existe una vacuna
preparada con el antgeno capsular del serotipo b, que es el ms prevalente en las
infecciones humanas.
Entre las dems especies del gnero (tabla 3) destaca H. ducreyi que produce el
chancroide (lcera genital con adenomegalia satlite) enfermedad de transmisin
sexual, poco frecuente en nuestro medio.
Bordetella pertussis es un cocobacilo gramnegativo aerobio estricto de morfologa
semejante a Haemophilus. Cuando infecta el rbol traqueobronquial causa una
enfermedad respiratoria local acompaada de sntomas generales severos
(tosferina). La patogenia de la enfermedad es compleja. La disposicin de una
vacuna eficaz, ha hecho que esta enfermedad sea poco frecuente en nuestro medio.
Gardnerella vaginalis, morfologicamente semejante a los hemofilos, se asocia a una
patologa vaginal muy frecuente denominada vaginosis; que se caracteriza por: 1)
desaparicin de la flora normal de lactobacilos de la vagina, con aparicin de
Gardnerella y anaerobios 2) flujo moderado o abundante con olor ftido
caracterstico y 3) molestias vaginales imprecisas. A pesar de la presencia regular
de este microorganismo en la vagina de las pacientes con este cuadro clnico no se
conoce con precisin su papel patgeno en el proceso.
Brucelas. El gnero Brucella est formado por bacilos gramnegativos pequeos,
aerobios estrictos, que crecen bien en medios usuales, pero lo hacen lentamente.
El gnero incluye varias especies siendo B. melitensis la ms frecuente en nuestro
medio. Esta especie infecta a los animales, en particular el ganado caprino y ovino
producindoles diversos procesos patolgicos (aborto epidmico).
Pueden alcanzar al hombre en general a travs de productos lcteos, como la leche
y el queso, causando una grave enfermedad generalizada acompaada de
septicemia persistente conocida como fiebre de Malta
29
.

28
En H. influenzae se han descrito diferentes inmunotipos de cpsula (a, b, c), siendo el b el que
produce con mayor frecuencia infecciones sistmicas en el hombre. Bajo determinadas
circunstancias, cepas no capsuladas pueden tambin producir infecciones invasivas
29
Otras especies que producen al hombre un cuadro clnico semejante son B. abortus (ganado
bovino) B. suis (ganado porcino) y ms raramente B. canis (perros)

27
Las brucelas poseen inters conceptual por varias razones; en primer lugar por
constituir un ejemplo claro de zoonosis (enfermedades de los animales trasmisibles
al hombre) y en segundo lugar porque su capacidad biolgica para persistir en los
macrfagos tras ser fagocitadas caracterstica que comparten con las
micobacterias las faculta para producir infecciones recidivantes, a diferencia de las
bacterias estudiadas hasta ahora cuyas infecciones poseen un carcter agudo.
Legionela. El gnero Legionella est formado por bacilos o cocobacilos con
estructura de bacterias gramnegativas. Se tien mal por el mtodo de Gram. Son
aerobios estrictos y requieren para su cultivo medios especficos en los que crecen
lentamente ( 3 das) .
Su hbitat natural lo constituyen los ambientes acuticos.
Algunas especies de entre las ms de 22 existentes causan infeccin humana, la
ms frecuente es L. pneumophila
30
(14 serogrupos) que al alcanzar al hombre por
inhalacin de vapor de agua contaminada produce una neumona grave, o un
sndrome febril ms benigno, denominado fiebre de Pontiac, en particular en
personas ancianas o con un dficit en las defensas antiinfecciosas. Se han descrito
epidemias en instituciones causadas por el vapor de agua (aerosoles) de las duchas
o calefaccin, y en barrios de ciudades por vapor de agua contaminado eliminado a
partir de industrias.
Bacterias alcohol cido-resistentes
Un conjunto de bacterias cuya pared presenta la estructura bsica de las bacterias
grampositivas, poseen en sta gran cantidad de cidos grasos, entre ellos cidos
miclicos, que les confieren el carcter de la alcohol-cido resistencia, lo que puede
constatarse mediante la tincin de Ziehl-Neelsen. El gnero Mycobacterium es el
ms importante de este grupo
31
.
Gnero Mycobacterium. Las micobacterias son bacilos que se tien difcilmente
mediante la tincin de Gram, pero se observan como alcohol-cido resistentes
mediante la tincin de Ziehl.

30
Seguida por L. micdadei, L.bozemanii, L. dumoffii, L. longbeachae y otras
31
Los gneros Nocardia y Rhodococcus tambin estn constituidos por bacterias dbilmente alcohol-
cido resistentes. Sus especies y en particular N. asteroides y R. equi pueden causar infecciones
oportunistas pulmonares

28
Se hallan ampliamente distribuidas por la naturaleza constituyendo, como sucede en
otras familias bacterianas, un espectro que va desde especies saprfitas telricas no
patgenas, hasta especies estrictamente adaptadas al hombre con gran capacidad
patgena.
Son aerobias estrictas y crecen en medios orgnicos complejos con yema de huevo
y glicerol, siendo sus exigencias nutritivas variables y el tiempo de generacin
tambin variable, diferencindose a este respecto en dos grupos, crecedoras lentas
y crecedoras rpidas (> o < 5 das).
Algunas especies producen regularmente pigmentos carotenoides
(escotocromgenas), otras los producen tras induccin por la luz (fotocromgenas) y
otras no los producen (no cromgenas).
Estos caracteres tiempo de crecimiento y pigmentacin se han utilizado para la
clasificacin inicial de las numerosas especies definidas en la actualidad (Tabla 4).
M. tuberculosis (bacilo de Koch) es la especie ms importante por su capacidad
patgena causando la tuberculosis humana.
Se caracteriza por su crecimiento lento y no producir pigmento. Su husped natural
es el hombre. Se transmite por va area y produce principalmente infeccin
pulmonar desde donde puede difundir a otros rganos por va hematgena
32
.
Otras especies afines a M. tuberculosis, son M. africanum y M. bovis; esta ltima
produce enfermedades en los bvidos y puede transmitirse al hombre, y una
micobacteria (M. bovis), modificada en el laboratorio por cultivos repetidos en
medios glicerinados con lo que se consigui la atenuacin de su capacidad
patgena, se denomina Bacilo de Calmette y Guerin (BCG) y es utilizada como
vacuna.
Otras especies de inters en patologa son M. kansasii, M. scrofulaceum, M. avium
M. intracellulare y M. xenopi, entre los crecedores lentos y M. fortuitum y M.
chelonae entre los rpidos.
Mycobacterium leprae, causa la lepra. No ha podido ser cultivada en medios
artificiales, pero s propagada por inoculacin en el cojinete plantar al armadillo. Su

32
Rin, genitales, meninges
29
husped natural es el hombre, aunque tambin se han documentado infecciones
naturales en los armadillos.
Bacterias anaerobias
Las bacterias anaerobias incluyen un amplio conjunto de gneros y especies (cocos
y bacilos grampositivos y gramnegativos) que crecen nicamente en ausencia de
oxgeno (anaerobiosis) y requieren para su cultivo medios enriquecidos con sangre.
Poseen una morfologa relativamente caracterstica, por lo que un observador
experimentado puede sospechar su presencia al observarlas por el mtodo de
Gram.
Se hallan formando parte de la flora autctona de la orofaringe (surcos
gingivodentales y criptas amigdalares) y del tubo digestivo, particularmente en el
colon, constituyendo el grupo ms abundante de la flora normal del intestino.
Las bacterias anaerobias de mayor inters en medicina son las pertenecientes a los
gneros Peptostreptococcus, que son cocos grampositivos, Bacteriodes, Prevotella,
Porphyromonas y Fusobacterium, que son bacilos gramnegativos, y Eubacterium,
Bifidobacterium, Propionibacterium
33
y Actinomyces que son bacilos grampositivos
no espurulados y Clostridium que es un gnero de bacilos grampositivos
esporulados.
Los gneros sealados, excepto Clostridium y Actinomyces que incluyen especies
patgenas primarias, causan infecciones oportunistas.
El gnero Clostridium est formado por bacilos grampositivos esporulados
34
En l
junto a especies comensales, existen otras de elevado poder patgeno por
produccin de exotoxinas como C. difficile que causa enteritis, C. perfringens y otras
que causan gangrena gaseosa, C. tetani que causa el ttanos y C. botulinum que
produce el botulismo (Tabla 5).

33
En el lenguaje coloquial suele referirse colecticamente como bacteriodes a los gneros
Bacteriodes, Prevotella, Porphyromonas y Fusobacterium y como corinebacterias anaerobias a
Eubacterium, Bifidobacterium y Propionibacterium
34
Recurdese que Bacillus (aerobio) y Clostridium (anaerobio), son los nicos gneros bacterianos
de inters mdico que forman esporas

30
La vacuna antitetnica, elaborada con toxina tetnica inactiva (toxoide), es de
extraordinaria eficacia.
Las bacterias anaerobias no slo requieren la anaerobiosis para su multiplicacin,
sino que el oxigeno es letal para ellas, por lo tanto las muestras clnicas en las que
se sospecha su presencia (exudado, pus, esfacelos, etc) deben tomarse y
trasladarse al laboratorio mediante tcnicas adecuadas para evitar su contacto con
el oxgeno atmosfrico.
Por descontado que la incubacin de los medios de cultivo en que se siembran debe
hacerse en anaerobiosis.
Bacterias sin pared
Gnero Mycoplasma. Los micoplasmas constituyen un grupo de bacterias carentes
de pared, por lo que son pleomrficos, flexibles, frgiles y susceptibles a la lisis
osmtica. Su tamao es de 0.2 0.3 m. por lo que algunas clulas son
submicroscpicas. Poseen un genoma relativamente pequeo.
En la naturaleza se hallan fundamentalmente asociados a las mucosas de los
animales y a las plantas y pueden causar diversas enfermedades.
La especie de mayor inters en medicina en M. pneumoniae que causa infeccin
pulmonar (neumona atpica)
35
.
Los micoplasmas pueden manipularse y estudiarse por tcnicas bacteriolgicas
convencionales, pero debido a que se tien mal con la tincin de Gram, requieren
medios de cultivo complejos y crecen muy lentamente; para su deteccin en
microbiologa clnica se han adoptado tcnicas alternativas al examen directo y el
cultivo fundamentalmente pruebas serolgicas y genticas.
Espiroquetas
Las espiroquetas constituyen un grupo heterogneo de bacterias definidas por su
morfologa espiral, presencia de fibras con estructura flagelar en el espacio
periplsmico y movilidad caracterstica.

35
El concepto de neumona atpica se aplica a las neumonas que presentan una clnica diferente de
la neumona neumoccica, considerada como tpica. Estn causadas Mycoplasma, Chlamidia,
Chlamidophila, Coxiella y virus respiratorios. Las legionelas, presentan un cuadro clnico ms
diferenciado y grave
31
La familia Spirochetaceae incluye tres gneros de inters en patologa humana,
Treponema, Borrelia y Leptospira.
La mayora de las espiroquetosis evolucionan por estadios con manifestaciones
clnicas, separados por perodos de latencia asintomticos de duracin variable. Es
difcil definir la importancia relativa del mecanismo invasor y el inmune en la
patogenia de los estadios clnicamente expresivos.
El gnero Treponema incluye especies patgenas para el hombre como T. pallidum
causante de una enfermedad venrea, la sfilis, otras causantes de enfermedades
no venreas y varias especies no patgenas para el hombre (Tabla 6).
Treponema pallidum, causante de la sfilis, es el patgeno humano ms importante
de este gnero. Tiene al hombre como nico husped natural. No se visualiza por el
Gram, debido a su pequeo dimetro (0,15 x 10 m) pero puede visualizarse por
microscopia de campo oscuro y mediante tinciones argnticas. No crece en medios
artificiales y para su propagacin debe inocularse a animales de experimentacin
(testculo de conejo).
La sfilis es una enfermedad de transmisin sexual, caracterizada porque la lesin
inicial primaria en el lugar de inoculacin, generalmente las mucosas genitales, es
una lcera indolora que cura espontneamente. La enfermedad evoluciona,
progresiva y asintomticamente al estadio secundario y posteriormente con lentitud
al terciario, afectando a numerosos rganos, como la piel, el hgado, el endocardio y
el SNC y pudiendo transmitirse al feto por va placentaria (sfilis congnita). El
diagnstico de la sfilis es fundamentalmente serolgico.
En el gnero Borrelia, B. recurrentis, causa la fiebre recurrente
36
, transmitida por
piojos su reservorio es el hombre. Tras el perodo de inoculacin (7 das) se produce
una espiroquetemia con afectacin del estado general, que suele curar despus de
una semana para reaparecer 2 a 4 das despus. La enfermedad es endmica en
algunas reas, como frica (Etiopia y Sudn), Asia y Amrica del Sur. Otras
especies como B. duttonii y B. hispanica que causan un cuadro clnico semejante,

36
El carcter recurrente de la enfermedad se debe a que cuando la respuesta inmune ha controlado
la infeccin emergen en bacterias con variantes antignicas que reactivan el proceso infeccioso al
evadir la respuesta inmune inicial
32
tienen su reservorio natural en diversos roedores y alcanzan al hombre vehiculados
por garrapatas del gnero Ornithodorus (Tabla 8).
Las borrelias poseen un tamao de 2-4 x 10-30 m y pueden visualizarse en
extensiones de sangre teidas por el mtodo de Giemsa.
B. burgdorferi transmitida por garrapatas desde su reservorio animal (roedores) al
hombre, causa la enfermedad de Lyme. Esta se caracteriza en una fase precoz por
una lesin cutnea, el eritema crnico migrante cerca del lugar de inoculacin por la
garrapata y sintomatologa gripal.
Las manifestaciones tardas, que aparecen semanas o meses ms tarde, son
recurrentes y se caracterizan por producir artralgias, artritis, meningitis y miocarditis
que pueden responder a un proceso preponderantemente inmunopatolgico dada la
escasez de bacterias observadas en esas lesiones.
Aunque B. burgdorferi se tie por el mtodo de Giemsa y puede crecer en medios
artificiales su diagnstico se hace habitualmente por serologa.
En el gnero Leptospira, L. interrogans no se observa por su finura con las tinciones
bacteriolgicas habituales (0,15 x 5-15 m) crece en aerobiosis en medios
enriquecidos. Causa diversas enfermedades en animales (ratas, perros, bvidos)
que las eliminan al medio (charcas) con la orina donde sobrevive varios das.
Ocasionalmente se transmite al hombre desde el medio acutico a travs de
lesiones cutneas o por ingesta causando bacteriemia seguida, tras un breve
periodo asintomtico, de afectacin sistmica. La hepatitis, meningitis, afectacin
renal y vasculitis son las manifestaciones clnicas prominentes.
Clamidias (gneros Chlamydia y Chlamidophila)
Las clamidias son bacterias con estructura semejante a las gramnegativas. Efectan
sntesis proteica y biosntesis, ya que poseen vas anablicas diversas semejantes a
otras bacterias hetertrofas, pero carecen de vas metablicas para la obtencin de
ATP y la reoxidacin del NADH, por lo que dependen de las clulas eucariotas, para
obtener aporte energtico, siendo por tanto parsitos intracelulares obligados.
Presentan dimorfismo entre su estadio de multiplicacin intracelular y la forma libre,
lo que constituye uno de los escasos procesos de diferenciacin celular del mundo
bacteriano.
33
La partcula extracelular infecciosa presenta una estructura celular denominada
cuerpo elemental de 0,3 m, con un nucleoide denso. Es ingerida por la clula
susceptible por endocitosis, situndose en una vacuola endocitaria. Esta partcula
evolucionar a una estructura mayor, de 0,5 m, denominada cuerpo reticulado que
se divide para dar lugar a cuerpos elementales que son liberados por lisis celular.
Se tien mal por el mtodo de Gram, pero pueden colorearse por Giemsa u otras
tinciones, mediante las cuales, adems, puede observarse en las clulas la
presencia de cuerpos de inclusin formados por el cuerpo reticulado. El examen
microscpico convencional no se utiliza rutinariamente para su deteccin en tejidos y
exudados.
Se multiplican en cultivos celulares por lo que se estudian por tcnicas semejantes a
las empleadas en virologa.
El gnero Chlamydophila incluye dos especies de inters: C. psittaci que tienen su
reservorio natural en diversas aves, C pneumoniae con reservorio humano,
causantes de infecciones pulmonares (neumona atpica).
Chlamydia trachomatis, que produce diversos y heterogneos procesos patolgicos
como el tracoma (conjuntivitis crnica folicular maligna), el linfogranuloma venreo,
uretritis, cervitis, conjuntivitis e infeccin pulmonar neonatal. Las clamidias poseen
un antgeno comn de grupo y antgenos especficos de especie o serotipo
37
. En C.
trachomatis se han descrito 15 serotipos (A, B, Ba, C-K, L1-L3). Existe una relacin
especfica entre cada serotipo y los diversos procesos patolgicos sealados (Tabla
7); aunque no se conoce la causa de este hecho ni el porqu de la limitada
distribucin geogrfica del tracoma y del linfogranuloma venreo.
Rickettsias
Las rickettsias son bacilos gramnegativos aerobios, de pequeo tamao, 0.3-2 m,
que se tien mal por el Gram y son parsitos intracelulares obligados, aunque no se
conoce con exactitud las razones de esta dependencia; por todo ello fueron
inicialmente confundidas con virus.

37
El antgeno comn reside en el lipopolisacrido y los especficos en protenas de la membrana
externa

34
La familia Rickettsiaceae comprende cuatro gneros de inters en medicina:
Rickettsia, Coxiella, Rochalimea y Ehrlichia. (Tabla 9).
Todas las rickettsias presentan un reservorio natural animal y alcanzan
accidentalmente al hombre para producir enfermedad a travs de artrpodos
vectores, excepto Coxiella burnetii que se transmite al hombre por inhalacin o
ingesta. Presenta una distribucin geogrfica localizada, o universal segn la
especie.
Las especies del gnero Rickettsia, tras ser inoculadas al hombre mediante la
picadura de un artrpodo producen una infeccin generalizada, afectando a
numerosos rganos, localizndose en las clulas endoteliales de los pequeos
vasos sanguneos en los que se produce una vasculitis caracterstica. Clnicamente
se expresan por fiebre, afectacin del estado general y exantema.
R. prowazekii, cuyo reservorio natural es el hombre, es transmitida por piojos, causa
el tifus epidmico
38
enfermedad inexistente en la actualidad en nuestro pas (frica,
Asia y Sudamrica).
En los pases de la cuenca mediterrnea, incluyendo el nuestro, existe una
ricketssiosis exantemtica causada por R. conorii, transmitida por garrapatas,
denominada fiebre botonosa mediterrnea.
Coxiella burnetii, de distribucin universal, tiene como reservorio diferentes
animales, bvidos, cabras y ovejas en las que causa diversas enfermedades, se
elimina con las excretas y la leche y puede, por inhalacin o ingestin, causar
infeccin sistmica denominada fiebre Q que se manifiesta como un sndrome
febril sin focalidad. En otras ocasiones la infeccin causa neumona atpica y menos
frecuentemente hepatitis.
En la prctica las rickettsias no se visualizan mediante tcnicas de microscopa
convencional y se cultivan en lneas celulares como los virus. Por estas razones y
por su elevada contagiosidad en el laboratorio, su diagnstico suele efectuarse por
mtodos serolgicos y otros.

38
La recurrencia del tifus epidmico que aparece aos despus de la infeccin se conoce como
enfermedad de Brill
35












Figura 1. Estructura de la clula bacteriana
36












Figura 2. Membrana citoplasmtica
Est formada por una doble capa de fosfolpidos en la que se encuentran embebidas
protenas que pueden desplazarse lateralmente.
37















Figura 3. Fosfoglicridos
Estn constituidos por una molcula de glicerol cuyos dos primeros hidroxilos se
encuentran esterificados por molculas de cidos grasos, mientras que el hidroxilo
del tercer tomo de carbono est esterificado por el cido fosfrico el cual esterifica
a su vez a un alcohol o aminocido.
38















Figura 4. Peptidoglicano
Es un polmero de dos aminoazcares (N-acetil-glucosamina y N-acetil-murmico)
que se alternan. Estos polmeros se entrelazan dando lugar a una malla rgida: del
N-acetil-murmico se originan unos tetrapeptidos que se unen entre s mediante
puentes peptdicos.
39


















Figura 5. Diferencias en la pared entre las bacterias grampositivas y gramnegativas
En las bacterias grampositivas el peptidoglicano es muy grueso. En las bacterias
gramnegativas, el peptidoglicano es una malla fina, existiendo por fuera del mismo
una membrana externa que no se encuentra en las bacterias grampositivas.
40













Figura 6. Estructura de la pared celular de las bacterias grampositivas
LTA: cidos teicoicos; WTA: Protenas fibrilares
41












Figura 7. Estructura de la pared celular de las bacterias gramnegativas
42















Figura 8. Liposacarido
Est constituido por el lpido A inmerso en la membrana externa y una cadena
polisacarida que sobresale hacia el exterior. El lpido A es un glicofosfolpido
formado por un disacrido de N-acetil-glucosamina unido a grupos fosfato y a varias
molculas de cidos grasos de cadena larga. En el polisacarido se distingue una
parte interna formada por 5 a 7 azcares comunes a diversos grupos bacterianos y
una parte externa o cadena lateral formada por una secuencia de 2 a 3 azcares
que se repiten n veces.
43











Figura 9. Cpsula
Estructura fibrilar polimrica, de naturaleza generalmente polisacrida que se
sintetiza en el interior de la clula y se exporta al exterior. Por su actividad
antifagocitaria constituye un importante factor de virulencia. Su visualizacin en el
laboratorio de microbiologa suele hacerse por tinciones negativas.
44


















Figura 10. Flagelos
Estructuras fibrilares de naturaleza proteica, formadas por la agregacin de mltiples
subunidades de una protena globular denominada flagelina. Constituyen el rgano
de locomocin de las bacterias.
45

















Figura 11. Disposicin de los flagelos en la superficie bacteriana
Segn esta, las bacterias flageladas pueden subdividirse en: monotricas (un solo
flagelo), periticas (varios flagelos distribuidos por toda la superficie bacteriana) y
lofotricas (varios flagelos formando un penacho).
46















Figura 12. Esquema de la fermentacin de glucosa segn Embden-Meyerhof
Es la va ms universal. Lleva al cido pirvico que es el catabolito central de otras
vas fermentativas (metabolismo anaerobio) y de la va aerobia representada por el
ciclo de Krebs.
47













Figura 13. Vas fermentativas del cido pirvico. Incluye, entre las ms importantes:
lctica, alcohlica, cida mixta, butilenglicolica, butrica, propionica.
En cualquiera de ellas, el aceptor de electrones liberados en los procesos oxidativos
de los sustratos metablicos es un compuesto orgnico.
48


















Figura 14. Ciclo de Krebs
Los microorganismos con metabolismo aerobio pueden llevar los catabolitos
producidos en las fermentaciones a niveles energticos aun ms bajos obteniendo
mayor energa. En este proceso, se produce una oxidacin del sustrato con
transferencia de los electrones al oxgeno a travs de la cadena respiratoria.
49

















Figura 15. Colonia bacteriana
Cuando las bacterias contenidas en un inculo se diseminan por la superficie del
agar, se dividen en el lugar donde han quedado depositadas dando lugar al cabo de
unas horas a una masa celular macroscpicamente visible denominada colonia
bacteriana.
50










Figura 16. Curva de crecimiento
La cintica del crecimiento bacteriano se establece experimentalmente midiendo las
variaciones de la masa bacteriana en funcin del tiempo. Se observan cuatro fases:
a) tiempo de latencia, b) crecimiento exponencial, c) estacionaria y d) muerte celular.
51



Figura 17. Medio cromognico
Las colonias de las bacterias adoptan diferente color, en funcin del sustrato del
medio que pueden hidrolizar.
52
Tabla 1. Estreptococos viridans

Bajo el nombre de estreptococos viridans se incluye un conjunto de estreptococos
para los que no existe unanimidad en su clasificacin, difciles de identificar a nivel
de especie mediante caracteres metablicos convencionales, que son generalmente
alfa-hemolticos, sensibles a la vancomicina y productores de la enzima leucina-
aminopeptidasa. Las distintas especies se han incluido en varios grupos en razn
de la semejanza de sus caracteres metablicos. En la prctica, por las razones
sealadas, no se identifican a nivel de especie y se hace referencia a ellos como
estreptococos viridans.

Son comensales de la cavidad orofarngea y algunos se encuentran en el tracto
respiratorio superior (S. milleri) y tracto intestinal (S. bovis y S. milleri).


Grupos Especie Patologa especfica
1

Grupo del S. mutans: S. mutans
S. sobrinus
S. rattus
S. cricetus

Caries
Endocarditis
Grupo del S. salivarius: S. salivarius
S. vestibularis
S. intestinalis
S. thermophilus

Bacteriemia en pacientes con cncer
Endocarditis
Streptococcus bovis: S. bovis I
S. bovis II
Bacteriemia en pacientes con cncer
Endocarditis

Grupo Streptococcus milleri: S. anginosus
S. constellatus
S. intermedius
Endocarditis
Grupo del S. sanguis: S. sanguis
S. gordonii
S. parasanguis
S. crista

Endocarditis
Streptococcus mitis: S. mitis

Endocarditis
Otros estreptococos viridans: S. acidomininus
S. uberis

Endocarditis
Estreptococos piridoxal dependientes
2
S. defectivus
S. adjacens
Endocarditis

1
Los estreptococos viridans pueden causar caries dental, endocarditis bacteriana subaguda
(endocarditis lenta) y tambin pueden aislarse como contaminantes en hemocultivos y cultivos de
lquido cefalorraqudeo, aunque cada vez con ms frecuencia causan infecciones en neonatos y
pacientes inmunodeprimidos

2
Constituye un grupo de estreptococos auxotrficos para el piridoxal, que slo crecen en presencia
de esta sustancia o en anaerobiosis
53
Tabla 2. Especies patgenas de la familia Enterobacteriaceae


Gneros
patgenos
Especies Patologa Observaciones
Escherichia E. coli Gastroenteritis
Slo algunas cepas de esta especie son
enteropatgenas
Shigella

S. sonnei
S. flexneri
S. boydii
S. dysenteriae


Gastroenteritis
Gastroenteritis
Gastroenteritis
Gastroenteritis

Causan una enteritis invasora (diarrea con
sangre: disenterica).
El nico reservorio natural es el hombre.
S. dysenteriae no es autctona
Salmonella

serotipo Typhi
serotipo Paratyphi A
serotipo Paratyphi B
serotipo Paratyphi C

resto de serotipos:
Enteritidis
Typhimurium
Wirchow
etc. hasta 2000


Sepsis
Sepsis
Sepsis
Sepsis

Gastroenteritis

El nico reservorio conocido de estos
serotipos es el hombre.
El nico serotipo septicemiante que se asla
con frecuencia en nuestro pas es Typhi

Estos serotipos se hallan ampliamente
distribuidos en el tubo digestivo de diversos
animales.

El hombre al infectarse puede quedar como
portador asintomtico y ser a su vez fuente de
infeccin

Yersinia

Y. pestis


Y. pseudotuberculosis


Y. enterocolitica

Peste


Adenitis
mesentrica
Gastroenteritis
Gastroenteritis

La peste es una enfermedad que afecta a los
ratones y puede alcanzar al hombre a travs
de las pulgas.



Slo algunos serotipos de esta especie son
patgenos para el hombre (O3; O5; O27; O8;
O9; entre los ms frecuentes).
54
Tabla 3. Especies de Haemophilus aisladas en patologa humana.

La especie que con ms frecuencia causa infeccin en el hombre es H.
influenzae del serotipo b. Causa una patologa semejante al neumococo
(infeccin respiratoria y de estructuras pararespiratorias), sepsis y meningitis.
Algunas cepas no capsuladas pueden ocasionar infeccin respiratoria y
colonizacin vaginal, contaminando al neonato a su paso por el canal del parto
y causando infeccin neonatal (sepsis con meningitis).

Algunas especies tras producir bacteriemia transitoria pueden causar
endocarditis en pacientes con alteraciones valvulares.

Especie Frecuencia Distribucin Patologa
H. influenzae frecuente Universal
Infeccin respiratoria
Sepsis
Meningitis
H. aegypticus
1
Pases clidos
Conjuntivitis, fiebre purprica
de Brasil
H. parainfluenzae poco frecuente Universal Endocarditis
H. aphrophilus poco frecuente Endocarditis
H. paraphrophilus poco frecuente Endocarditis
H. ducreyi Asia y frica Chancroide
H. hemolyticus raro
H. parahemolyticus raro


1
H. aegypticus corresponde al biotipo III de H. influenzae y causa especficamente conjuntivitis
y la fiebre purprica de Brasil
55
Tabla 4. Principales especies de Mycobacterium

Solo M. tuberculosis tiene su reservorio animal en el hombre. El resto de
especies se hallan en los animales (M. bovis) o son de hbitat telrico.

Los rganos lesionados que se sealan son los afectados con mayor
frecuencia en personas previamente sanas. Las micobacterias pueden alcanzar
otros rganos por va hemtica, particularmente en pacientes
inmunodeprimidos.

Especie
Patologa prevalente
(localizacin)
Crecedores lentos (>5 das)

* No cromgenos

M. tuberculosis complex
(M. tuberculosis, M. bovis, M. africanum, BCG)
M. avium M. intracellulare
M. ulcerans
M. malmoense
M. haemophilum

* Fotocromgenos

M. kansasii
M. marinum
M. simiae

* Escotocromgenos

M. scrofulaceum
M. szulgai
M. xenopi





Pulmn
Pulmn
Piel
Pulmn
Piel



Pulmn
Piel
Pulmn



Ganglios linfticos
Pulmn
Pulmn
Crecedores rpidos (<5 das)

M. fortuitum-chelonae complex



Piel
Cuerpos extraos
Especies no cultivables

M. leprae



Piel, S.N.C.
(lepra)
56
Tabla 5. Principales bacterias anaerobias

Las bacterias anaerobias se encuentran como comensales en la piel, orofaringe,
tracto intestinal bajo, vagina y uretra terminal. Las infecciones causadas por
anaerobios suelen tener un origen endgeno y ser polimicrobianas. La identificacin
de estos microorganismos a nivel de especie no suele ser til a no ser que tengan
caractersticas particulares de patogenicidad o resistencia que les diferencien de las
de su gnero.
Especie Consideraciones Distribucin
Cocos grampositivos
Gen. Peptostreptococcus
P. magnus


Posible resistencia a la
clindamicina


Presentes en cavidad oral, tracto gastrointestinal y
genitourinario

Cocos gramnegativos
Gen. Veillonela


Presente en cavidad oral
Bacilos gramnegativos
Gen. Bacteroides
B. fragilis

B. thetaiotaomicron,
B. distasonis,
B. ovatus,
B. uniformis

Gen. Porphyromonas
Gen. Prevotella
P. disiens
P. bivia
Gen. Fusobacterium
F. necrophorum
F. nucleatum
F. mortiferum
F. varium


Uno de los aislados con mayor
frecuencia
Mayor resistencia a los
antibiticos que B. fragilis





Asociadas a infeccin del tracto
genital femenino

Gran virulencia

Resistencia a la penicilina y
clindamicina


Es el gnero predominante en el tracto intestinal.
El complejo B. fragilis interviene con gran frecuencia en las
infecciones de la cavidad abdominal.
Los bacteroides pigmentados estn presentes en la
cavidad oral y suelen asociarse a infecciones pulmonares


Similar a Bacteroides
Similar a Bacteroides
Presentes en vagina

De distribucin similar a los Bacteroides, suelen aislarse
como causa de infeccin respiratoria
Bacilos grampositivos no
esporulados
Gen. Eubacterium

Gen. Bifodobacterium
Gen. Propionebacterium

Gen. Actinomyces

Gen. Mobiluncus
Gen. Lactobacillus
Gen. Ramibacterium


Asociado a infeccin del tracto
genital femenino

Posible poder patgeno en ciertas
circunstancias
Suele requerir de tratamientos
prolongados
Asociados a vaginosis


Presentes en cavidad oral y en vagina

Presentes en cavidad oral
Presentes en los folculos y en las glndulas sebceas de
la piel


Presentes en vagina
Presentes en vagina
Bacilos grampositivos
esporulados
Gen. Clostridium
C. tetani
C. botulinum
C. septicum

C. perfringens

C. difficile


C. ramosum
C. clostridioforme,
C. innocum



Causante del ttanos
Causante del botulismo
Se ha asociado con tumores
malignos gastrointestinales
Puede causar infecciones graves

Causa de colitis
pseudomembranosa asociada a
teraputica antibitica
Posible resistencia a la penicilina,
clindamicina y cefalosporinas



Presentes en el tubo digestivo del hombre y la mayora de
animales, sus esporas se encuentran en gran nmero en
el suelo
57
Tabla 6. Treponematosis humanas

El pin, la pinta y el bejel son infecciones cutneas que se transmiten por contacto
directo. El reservorio natural de sus agentes es el hombre.

Especie Distribucin Patologa
T. pallidum ss pallidum Mundial Sfilis
T. pertenue
Trpicos
(frica, Amrica, Asia)
Frambesia (Pin)
T. carateum Trpicos (Amrica)
Pinta

T. pallidum ss endemicum
Distribucin irregular en
zonas clidas y pobres
frica sahariana, Asia)
Bejel

58

Tabla 7. Infecciones por Chlamydia y Chlamydophila

Especie Patologa
Chlamydophila psittaci
Muchos serotipos mal sistematizados
(Distribucin universal)

Su principal reservorio lo constituyen las aves domsticas y
salvajes. La infeccin humana es una zoonosis contrada por
la inhalacin de secreciones respiratorias o polvo de las
excretas de aves infectadas. El cuadro clnico es de
neumona atpica.

Chlamydophila pneumoniae
Un serotipo
(Distribucin universal)

Su reservorio es humano. Causa infeccin del tracto
respiratorio alto (faringitis, sinusitis) y bajo (bronquitis,
neumona atpica). Su transmisin es area.

Chlamydia trachomatis

Serotipos A, B, Ba, C
(Prevalente en regiones desrticas o
semidesrticas de frica, India,
Pakistn, Indonesia y Australia)

Serotipos D, E, F, G, H, I, J, K
(Distribucin universal)







Serotipos L
1
, L
2
, L
3

(Prevalentes en frica y Sudamrica)


Causan el tracoma; grave conjuntivitis folicular crnica, que
constituye una de las causas ms importantes de ceguera
evitable en las areas endmicas.


Uretritis y cervicitis de transmisin sexual que pueden
complicarse con epidedimitis en el varn, endometritis,
salpingitis y pelviperitonitis (enfermedad inflamatoria plvica)
en la mujer, y proctitis en ambos sexos.
Conjuntivitis de inclusin en adultos. El neonato puede
contaminarse a su paso por el canal del parto. La mayora
presenta conjuntivitis de inclusin. En el 5-10% puede
observarse una neumona neonatal.

Dan lugar a linfogranuloma venreo, de transmisin sexual.
Se caracteriza por una lesin inicial ulcerada en los
genitales, que se resuelve espontnea y rpidamente.
Posteriormente aparece linfoadenopata regional fistulizada
que se sigue tardiamente de reaccin fibrtica y alteracin
del drenaje linftico.


59
Tabla 8. Especies de Borrelia causantes de fiebre recurrente

Las fiebres recurrentes estn causadas por numerosas especies de Borrelia que
tienen como reservorio al hombre o diversos roedores y son transmitidas por piojos y
garrapatas. Su distribucin geogrfica es irregular.

Especie Vector Reservorio Distribucin Patologa
B. recurrentis Pediculus humanus
humanus (piojo
1
)
Humano Mundial Fiebre
recurrente
epidmica
B. duttoni Ornithodoros
moubata
Humano frica (C, E y S) Fiebre
recurrente
endmica de E-
Africa
B. hispanica Ornithodoros
erraticus
Roedores Espaa, Portugal,
Marruecos, Argelia
y Tnez

Fiebre
recurrente
hispano-africana
B. burgdorferi Garrapatas del
gnero Ixodes
Roedores E-O Estados
Unidos, Europa,
Asia y Australia
Enfermedad de
Lyme
Otras bacterias:
B. crocidurae,
Ornithodoros spp Roedores y
otros
pequeos
mamferos
frica, Asia,
Amrica y
cacaso (segn
hbitat del vector)
Fiebres
recurrente
B. merionesi, B. microti
B. dipodilli, B. persica,
B. caucasica, B. latyschewii,
B. hermsii, B. turicatae,
B. parkeri, B. mazzottii,
B. venezuelensis



1
El piojo se infecta al ingerir sangre de un enfermo, pero la infeccin no se transmite por va
transovrica
60
Tabla 9. Rickettsias y rickettsiosis
R. sibirica (Asia Central) y R. australis (Australia) causan infecciones sistmicas con
exantema transmitidos por garrapatas. R. akari (V.S. Rusia) es transmitida por
caros.

Organismos Vector Reservorio Distribucin Patologa
R. prowazekii Piojo humano Humano
frica, Asia,
S. Amrica
Tifus exantemtico
epidmico
R. typhi Pulgas Roedores Mundial Tifus marino
R. rickettsii Garrapata Roedores, perros N. y S. Amrica
Fiebre exantemtica
de las Montaas
rocosas
R. conorii
2
Garrapata Roedores
Cuenca
mediterrnea
Fiebre botonosa
mediterrnea
Rochalemaea
quintae
Piojo humano Humano
Europa, Asia,
frica
Fiebre de las
trincheras
Erlichia, Anaplasma
y Neorikettsia
1


Coxiella burnetii
2
Inoculacin Ganado Mundial Fiebre Q


1
Son un grupo de zoonosis transmitidas por garrapatas. Con excepcin de N. sennetsu, especie
confinada al rea de Malasia-Japn, que produce un cuadro similar a la mononucleosis infecciosa, y
de la que desconocemos su ciclo, las Erlichia spp y Anaplasma spp se mantienen en un ciclo
garrapata, rumiante, roedor.
Provocan un cuadro pseudogripal consistente en fiebre, malestar general, artromialgias y cefalea.
Algunos pacientes desarrollan neumona atpica y en el caso de E. chaffeensis alteraciones del
S.N.C. (meningitis).
2
Microorganismos que causan enfermedad en nuestro medio