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UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGA
Profesor: Bioq. Farm. Carlos Garca MSc. Alumno: Bastidas Guerrero Tania Lorena Curso: Quinto Paralelo: A Grupo: 4 Fecha de Elaboracin de la Prctica: Lunes 16 de Junio del 2014 Fecha de Presentacin de la Prctica: Lunes 23 de Junio del 2014
PRCTICA N 3
Ttulo de la Prctica: INTOXICACIN POR METANOL. Animal de Experimentacin: Cobayo. Va de Administracin: Va Parenteral. OBJETIVOS DE LA PRCTICA
1. Observar la reaccin que presenta la rata ante la Intoxicacin por Metanol. 2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que acta el metanol en el cobayo. 3. Conocer mediante pruebas de identificacin la presencia de metanol.
MATERIALES
Jeringuilla de 10cc Panema Campana Cronmetro Equipo de diseccin Tabla de diseccin Bistur Vaso de precipitacin Erlenmeyer Nuez de metal Aro de metal Lmpara de alcohol fsforos Perlas de vidrio 10
SUSTANCIAS
1. Cianuro de Sodio 5% 2. Agua destilada 3. Acido tartrico 4. Hidrxido de sodio 0.1N
EQUIPOS: 5. Balanza analtica
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Probeta Equipo de destilacin. Cinta aislante Agitador Pipetas Tapn de corcho Tubos de ensayo Soporte universal Guantes de ltex Mascarilla Mandil
PROCEDIMIENTO
1. Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo 2. Administrar 5 ml NaCN al 5% por va peritoneal 3. Colocar al cobayo en la panema. 4. Observar las manifestaciones que se presentan y en qu tiempo hasta su muerte. 5. Con la ayuda del bistur procedemos abrir al cobayo y a observar las manifestaciones que se han presentado tras la administracin 6. Colocando las vsceras (picadas lo ms finas posibles) en el recipiente adecuado (Vaso de precipitacin). 7. Aadir 50 ml de agua destilada y se colocan las 50 perlas. 8. Se procede a destilar por 30 minutos. 9. El residuo de la destilacin, se recoge en un Erlenmeyer con, se practican las diferentes reacciones de reconocimiento. Reacciones: Reconocimiento en medios biolgicos Las reacciones particulares para reconocer al metanol como tal, prcticamente no existen, por lo que es necesario transformarlo en el respectivo aldehdo con tal propsito. Esto se consigue mediante un sencillo mtodo que consiste calentar al rojo una lmina de cobre (exenta de grasa y otras impurezas) e introducirla en el destilado, repitindose la operacin hasta cuando la lmina comienza a desprender pequeas partculas color gris en el destilado, lo cual nos indica que hemos conseguido el propsito de trasformar el metanol en metanal. En consecuencia, las reacciones que se practican son las mismas que se realizan para el reconocimiento del formaldehido, as: 1. Reaccin de Schiff: A una pequea porcin de la muestra, se aade 1ml de permanganato de potasio al 1% despus de mezclar se adiciona unas gotas de cido sulfrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solucin saturada de cido oxlico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 3
luego de agregarle nuevamente algunas gotas de cido sulfrico puro. Finalmente se le aade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo. 2. Reaccin de Rimini A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solucin de nitroprusiato de sodio al 2.5% recin preparado y 1ml de solucin de hidrxido de sodio, se produce una coloracin azul intensa. 3. Con la Fenilhidracina En un medio fuertemente acidificado con cido clorhdrico a una pequea cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solucin de ferricianuro de potasio al 5 10% y algunas gotas de hidrxido de potasio al 12% se obtiene una coloracin rojo grosella. 4. Reaccin de Marquis Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de cido sulfrico concentrado, se agita luego con una solucin sulfrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de cido sulfrico concentrado), se obtiene enseguida o despus de algn tiempo un color violeta. 5. Con el cido Cromotrpico Con este cido en un medio fuertemente acidificado con cido sulfrico, el formaldehido produce una coloracin roja despus de calentarla ligeramente. 6. Reaccin de Hehner Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con cido sulfrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro frrico (5 gotas de cloruro frrico en 500ml de cido sulfrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta. GRFICOS DEL PROCEDIMIENTO
Inyectar 5 ml de solucin al cobayo Colocar al cobayo en la panema para observar Se procede a la diseccin del cobayo Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 4
GRFICOS DE LAS REACCIONES DE RECONOCIMIENTO Reaccin de Shiff
Reaccin Positivo no caracterstico. escaso color violeta
Reaccin de Rimini
Reaccin Positivo no caracterstico da color azul intenso.
Se recogen las vsceras en un vaso y se las pica fino Se colocan las vsceras en el baln para destilar con las perlas de vidrio Se procede a destilar por 30 minutos recogiendo el residuo en un erlenmeyer Se calienta al rojo vivo una lmina de cobre Se coloca la lmina en la solucin recogida hasta desprendimiento de partculas grises. ANTES DESPUES ANTES DESPUES Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 5
Con la fenil hidracina
Reaccin Positivo caracterstico cambio a color rojo grosella
Con el cido cromotrpico
Reaccin Negativo da coloracin rojo intenso
Reaccin de Hehner:
Reaccin Negativo da coloracin violeta o azul violeta
OBSERVACIONES Antes de administrarle el txico el animal se tornaba inquieto. Luego de la administracin se puso observar lo siguiente:
A penas se inyecta el metanol se queda inmvil. A las 8:28 se le caen las orejas. ANTES DESPUES ANTES DESPUES ANTES DESPUES Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 6
A las 8:32 disminuye el ritmo respiratorio. No responde a los estmulos. 8:36 no responde a estmulos oculares. A las 8:49 se le administra una segunda dosis de 5m del txico. A las 9:10 se le administran 5ml de txico adicional. Se observa hinchazn abdominal. A las 9:24 se le administran 5ml ms del txico. A las 9:45 el animal muere. Durante la diseccin se observa el intestino grueso distendido, el hgado con ulceraciones, pulmn afectado y el estmago distendido.
CONCLUSIONES
Al trmino de la prctica aprendimos a identificar los sntomas que produce una intoxicacin por metanol, pudimos reconocer el nivel de toxicidad de la sustancia observando el tiempo en que le produjo la muerte al animal. Asimismo se pudo determinar la presencia del txico en la muestra biolgica al realizar las reacciones de identificacin. RECOMENDACIONES
Utilizar el equipo de proteccin adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar pipetas especficas para cada reactivo. Tener mucho cuidado a la hora de administrar el txico al animal Trabajar en la campana extractora de gases en todo momento.
CUESTIONARIO
1. Cules son las caractersticas fsicas del metanol? El metanol es un lquido incoloro, ligero, inflamable a temperatura ambiente que contiene menos carbono y ms hidrgeno que cualquier otro combustible lquido. Es una sustancia qumica estable biodegradable. 2. Cmo se difunde el metanol en el ambiente? El Metanol es una sustancia de volatilizacin rpida en el aire an a temperatura ambiente; tambin se evapora con rapidez a partir de mezclas acuosas o terreno contaminados o humedecidos con esta sustancia. El Metanol se degrada fcilmente en el medio ambiente mediante procesos de foto oxidacin y biodegradacin. La vida media para el Metanol en la atmsfera se ha reportado entre 7 y 18 das para la reaccin atmosfrica con radicales hidroxilo. El Metanol es fcilmente degradable en condiciones tanto aerobias como anaerobias en una amplia variedad de medios naturales, entre ellos agua dulce y salada. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 7
3. Enumere las principales aplicaciones del metanol.
Se usa como solvente industrial, fabricacin de formol, acetato de metilo y plastificantes. Extraccin de grasas. Solvente en fabricacin de colesterol, estreptomicina, vitaminas y hormonas. Como aditivos para gasolinas. Desnaturalizante para alcohol etlico. Deshidratador para gas natural. Gran disolvente para aceites, grasas y resinas. Es el nico alcohol que disuelve la nitrocelulosa. Se aplica en la preparacin de soluciones de nitrocelulosa de baja viscosidad, ceras y colorantes para plsticos. En la industria en general se usa como solvente en la fabricacin de lacas, pelculas, plsticos, jabones, textiles, cuero artificial. En la preparacin de removedores de pinturas barniz, para soluciones anticongelantes.
GLOSARIO
3. Acidosis: trmino clnico que indica un trastorno hidroelectroltico que puede conducir a acidemia, y que viene definido por un pH sanguneo inferior a 7.35. La acidosis puede ser metablica o respiratoria.
4. Edema: hinchazn causada por la acumulacin de lquido en el espacio tejido intercelular o intersticial, adems de las cavidades del organismo y los tejidos del cuerpo
5. Hemodilisis: La hemodilisis es un proceso de eliminacin de toxinas y exceso de fluidos de la sangre y los tejidos haciendo circular de forma continua la sangre a travs de un filtro. El filtro, conocido como dializador o rin artificial, se utiliza con una mquina que hace las funciones del rin
6. Metabolitos: Un metabolito es cualquier molcula utilizada, capaz o producida durante el metabolismo. El trmino metabolito tambin se puede referir al producto que queda despus de la descomposicin (metabolismo) de un frmaco por parte del cuerpo.
7. Perfusin: es un trmino vinculado con el verbo perfundir, cuya accin consiste en hacer que un lquido ingrese de manera lenta pero sostenida en el organismo.
WEBGRAFA
Grupo Solquim. Metanol. La Loma. Mxico. Recuperado de http://www.solquim.com/pdf/metanol.pdf Gua de txicos. Metanol. Colombia. Recuperado de http://www.minambiente.gov.co/documentos/Guia19.pdf
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WEBGRAFA Bioq. Carlos Garca M.Sc Machala 16 de junio de 2014