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LECTURA N3

CLULAS Y MEMBRANAS
Toda membrana es topolgicamente esfrica tanto en eucariotas (bicapa lipdica) como
procariotas (monocapa lipdica). Toda membrana delimita a la clula una regin intracelular y
otra extracelular
CLULAS PROCARIOTAS: Est compuesto por una sola membrana, el ADN como el citoplasma
se encuentra en el interior de dicha membrana.





Generalmente las bacterias tienen una pared celular rodeada por membrana.

El ADN a pesar de medir 1 mm extendido puede estar dentro de la membrana que mide 2
micras ya que esta plegado dentro de la clula.
CLULA EUCARIOTA: La clula est rodeada por la membrana plasmtica. Los compartimentos
internos (tambin denominados orgnulos) tambin estn rodeados de membrana.
Citosol: reas acuosas fuera del ncleo de las clulas; el citosol no incluye orgnulos.
La clula tiene muchos compartimentos; cada uno est definido por una membrana.
Lisosoma: Vescula dentro del cual se degradan protenas y otras molculas; contiene
enzimas digestivas. El interior del lisosoma es muy cido (Ph 5.5). El lisosoma contiene
proteasas y tambin nucleasas.

Ncleo: Compartimento de la clula que contiene el ADN. El ARN se fabrica en el
ncleo y luego se enva al citoplasma para ser traducido.

Mitocondria: Orgnulo de las clulas eucariotas. Lugar principal donde se genera el
ATP (fuente de energa). La mitocondria est compuesta por una membrana externa y
por una extensa membrana interna plegada.



Membrana plasmtica: Constituida por una bicapa lipdica. Tanto el ncleo como las
mitocondrias estn rodeados de 2 membranas (interna y externa).

Estructura de la membrana:
- Bicapa fosfolipdica.
- Contiene protenas (algunas son protenas intrnsecas; otras son protenas
transmembrana que transportan molculas entre el interior y el exterior de las
clulas o actan como receptores en la superficie celular).
- Todas las membranas estn compuestas de una bicapa lipdica que contiene
fosfolpidos formados por cidos grasos saturados o insaturados.
- Los cidos grasos insaturados aportan ms fluidez a la membrana ya que
contienen C=C adems de C-C.
- Los cidos grasos son largas cadenas de hidrocarbono ligadas a un grupo
carboxlico.
- Los fosfolpidos se forman cuando una molcula de glicerol se esterifica en dos
cidos grasos.

- El empaquetamiento de cadenas de cidos grasos se debe a enlaces de Van der
Vaals y a efectos hidrofbicos.
- La distancia total de la bicapa lipdica es de aproximadamente 3 nm o 30 angstrom.
- Los fosfolpidos forman bicapas en soluciones lquidas de modo espontneo. Las
cadenas de hidrocarbnicas nunca se exponen al agua; las bicapas lipdicas
generalmente forman compartimentos cerrados, topolgicamente semejan
esferas.
- Los fosfolpidos suelen adquieren tres formas diferentes en las soluciones:
Micelas, vescula con un interior hidrofbico.
Liposomas, vescula con interior acuoso.
- Observa el potencial elctrico de una membrana celular:
La membrana acta como capacitador: almacena una carga a travs de la
membrana. La regin hidrofbica acta como aislante; no permite el traspaso de
agua ni de iones.
Aislante, regin hidrofbica (cadenas de cidos grasos).
Capacitador, cabezas hidroflicas (grupos fosfato).

- En prcticamente todas las clulas, el interior es negativo con respecto al exterior.
El potencial elctrico a travs de la membrana es de -70 mV.

Caractersticas de la membrana:
- Es relativamente impermeable para la mayora de las molculas que la clula
necesita tener en su interior.
- La membrana plasmtica contiene protenas que se emplean para introducir
molculas dentro de la clula y excretar pequeas molculas.
- Las protenas de la membrana ayudan a unir las clulas: molculas adhesivas
que cohesionan clulas entre s para formar tejidos.
- Ciertas molculas atraviesan la membrana plasmtica a travs de las protenas.
- La membrana plasmtica contiene muchas protenas diferentes: algunas
protenas se llaman receptores (unen molculas, ej. hormonas), otras se
denominan protenas de transporte (transportan molculas al interior y al
exterior de la clula).

Cmo entran las protenas dentro de la membrana (cuyo interior es hidrofbico)?
- Todas las protenas tienen enlaces C=O y N-H que son polares. Esto no
debera constituir un problema en el interior hidrofbico de la membrana?

- El -hlice, que permite que los grupos C=O y N-H se unan mediante puentes
de hidrgeno y no interaccionen con la regin hidrofbica de la membrana
plasmtica.

Dos aspectos que tener en cuenta sobre la Estructura Hlice :
- Abundantes puentes de hidrgeno entre los grupos NH y C=O.
- Los grupos polares NH y C=O estn en el interior de la hlice. Los grupos R
(cadenas laterales) de los aminocidos sobresalen de la hlice.

Qu tipo de aminocidos se encuentran en la regin transmembrana de una
protena?
- Aminocidos con grupos R hidrofbicos. Los grupos R
hidrofbicos interactan favorablemente con el interior
hidrofbico de la membrana plasmtica, como la leucina,
valina, etc.

Ejemplos de protenas transmembrana:
- Observa el receptor de la insulina (hormona) situado en la membrana
plasmtica de una clula.


- Transportador de glucosa:

Las Alfa-hlices no estn alineadas sino que estn agrupadas para formar un
poro a travs del cual se puede transportar la glucosa.
Estos transportadores son protenas especficas de la membrana que
transportan la molcula a travs de la membrana. Las protenas ligan la
molcula, transportan la molcula a travs de la membrana y luego la sueltan
en el otro lado.

- La membrana del lisosoma contiene protenas especializadas que se emplean
para mantener la naturaleza cida del interior (lumen) del lisosoma.

Bombeo de protones (H+) al interior de la clula dependiente de ATP:
a. Bombea iones H+ el interior del lisosoma.
b. Emplea la energa obtenida a partir de la hidrlisis de ATP (ATP ADP + Pi)
para bombear iones H+ al lumen del lisosoma. El aumento de [H+] resulta en el
bajo pH (acidez) del lisosoma.

Canal de Cl-
a. Permite que el Cl- fluya a favor de gradiente al interior del lisosoma.
b. Los iones Cl- equilibran el aumento de carga + que generan los iones H+.

- Observe otra clula especializada, el eritrocito:
Fundamentalmente contiene hemoglobina (protena portadora de oxgeno). -
La vida media (t1/2) del eritrocito es de 120 das aprox. Aunque el eritrocito
tiene unas 7 micras de dimetro, tiene una forma flexible, que le permite
escurrirse a travs de algunos de los capilares ms estrechos del sistema
circulatorio.












LECTURA N4
ELASTICIDAD DE LAS MEMBRANAS BIOLGICAS
INTRODUCCIN: Entre las propiedades mecnicas destaca la elasticidad de las membranas,
fenmeno que est relacionado de una manera parcialmente conocida por el momento con la
endocitosis y exocitosis, y que juega un papel relevante en la forma que adquieren algunos
organelos en la clula (retculo endoplsmico, complejo de Golgi).
El estudio de las propiedades elsticas de membranas est relacionado con el problema de
predecir tericamente la forma de los hemates, estas clulas, y por tanto la membrana que las
rodea, tienen forma discoidal, con una concavidad caracterstica en sus caras.
La comunidad de cientficos de la materia condensada aprovech las teoras relativamente
maduras de la fsica de cristales lquidos termtropos para aplicarlas al estudio de membranas,
esto es posible debido a que localmente una membrana se comporta como una celda de cristal
lquido nemtico en alineamiento hometropos.

Agregados y bicapas lipdicas: Modelo del mosaico fluido. Este modelo, propuesto por
S.J. Singer y G. Nicolson en 1972, es el ms aceptado para describir a las membranas
biolgicas. La bicapa lipdica es una mezcla de varias clases de molculas, en particular
fosfolpidos y glicolpidos, ms otras molculas pequeas como colesterol. Las
protenas de membrana se encuentran incrustadas en la bicapa lipdica.

La estructura de la membrana es posible a los fosfolpidos que son anfteros la cabeza
polar es soluble en agua, mientras que la otra parte la cola hidrofbica es insoluble en
dicho solvente. Las protenas que se pueden insertar en dicha bicapa, tienen
segmentos hidrofbicos que tampoco pueden solubilizarse en agua, los cuales se
asocian con el centro hidrofbico de la membrana.

Es importante subrayar que algunas propiedades fsicas (mecnicas y termodinmicas)
de las membranas de fosfolpido dependen crucialmente del tipo de lpido. Esto se
refleja principalmente en la denominada temperatura de transicin, Tm, de los
fosfolpidos. Por debajo de esta temperatura, las molculas del fosfolpido adquieren
una estructura tipo gel (slido amorfo bidimensional) y para temperaturas mayores
que Tm, la membrana es fluida.

El modelo, propuesto por Israelachvili, estipula que la forma del agregado est
determinada por el llamado parmetro de empaquetamiento, el cual se relaciona
con la geometra de la molcula. Segn este modelo simple, la asociacin de molculas
de forma cnica da lugar a un agregado con gran curvatura, como las micelas. En
cambio, la asociacin de molculas relativamente cilndricas da lugar a agregados con
poca curvatura, como las membranas. Este modelo permite explicar algunas
transiciones observadas en las fases de molculas anfiflicas. Por ejemplo, si se tiene
un surfactante cargado que forme micelas esfricas, esto es debido a la forma
efectivamente cnica de la molcula, magnificada por la repulsin electrosttica entre
cabezas polares.

MODELO DE HELFRICH: La membrana se encuentra sujeta a las fluctuaciones debidas a la
energa trmica del solvente. Si suponemos que la bicapa se encuentra en equilibrio con la
solucin acuosa, entonces su energa est caracterizada por las deformaciones que la
membrana puede sufrir:
a) La compresin o expansin de la bicapa en la direccin lateral.
b) Las deformaciones en la direccin normal a la superficie.
Conceptos matemticos previos: Considrese un plano P, perpendicular al plano
tangente (en un punto cualquiera) a la superficie que representa a la membrana. A la
interseccin de la superficie con el plano P se le llama una curva normal. Esta curva
normal puede ser una lnea recta, sin curvatura, o puede poseer cierta curvatura, a la
cual se le llama curvatura normal, c.

Se debe definir a la curvatura como el inverso del radio de curvatura: c = 1/R. Como es
de esperarse, para una lnea recta c = 0, puesto que R = . A la curvatura as definida
se le asocia un signo para distinguir las dos posibles orientaciones de la curva:
concavidad hacia un lado o concavidad hacia el otro, direcciones a las cuales se asigna
arbitrariamente el signo positivo o negativo.

Todas las deformaciones locales de la superficie en la direccin normal al plano
tangente pueden ser caracterizadas a primer orden por las curvaturas principales c1 y
c2. Estos son los dos parmetros necesarios para caracterizar la curvatura de una
membrana fluctuante. Sin embargo, es ms conveniente matemticamente realizar un
cambio de variable, de c1 y c2, a dos combinaciones de ellas, la llamada curvatura
media, H = (c1+c2)/2, y la llamada curvatura gaussiana, K = c1.c2. H es el parmetro
mencionado al comentar el modelo de Canham en la introduccin [Ec. (1)]. Donde H y
K son las nicas cantidades invariantes. Es importante sealar que, dado que tanto c1 y
c2 tienen asociado un signo, el valor de H depende de la orientacin elegida como
positiva para la curvatura. El signo de K, por su parte, es independiente de esta
eleccin. La Fig. 5 muestra algunas superficies con valores diferentes de las curvaturas
media y gaussiana.





En el equilibrio las bicapas pueden considerarse aproximadamente planas, el radio de
curvatura correspondiente es mucho mayor que el espesor de la bicapa. Esto permite
desarrollar la funcin f = f(H;K) mediante una serie de Taylor (a segundo orden en las
curvaturas c1 y c2):



Donde las constantes f0, f1, f2 y f3 dependen en principio del rea promedio por
molcula; en particular, f0 corresponde a la energa libre de una bicapa plana. Ntese
que el trmino lineal en H depende de la orientacin de la superficie.

Completando el binomio cuadrado respecto a H, la Ec. (2) puede reescribirse como



La energa total de la bicapa (conocida como la energa de Helfrich) puede ser
calculada integrando sobre el rea total de la misma:

Se basa en una analoga con la energa libre para cristales lquidos. Es importante notar
que si no hay fuerzas externas que tensen la membrana, el rea de la bicapa puede
considerarse constante.

Significado fsico de los parmetros en la energa de Helfrich: Para comentar la fsica
que se desprende del mdulo de curvatura media k, es conveniente empezar haciendo
algunas observaciones acerca del trmino de la curvatura gaussiana, el segundo de la
Ec. (3). El llamado teorema de Gauss-Bonnet muestra que este trmino es una
constante si la topologa de la membrana no cambia.

Donde p denota el gnero de la superficie, concepto topolgico que est relacionado
con la cantidad de poros o perforaciones que tiene la superficie. La energa de
curvatura asociada al mdulo gaussiano no cambia mientras la topologa de la
membrana sea la misma.


En esas condiciones, la energa elstica de Helfrich toma la forma de un potencial
armnico.

Que depende de la curvatura media H en forma anloga a como la energa potencial
de un resorte depende de su deformacin.
Entonces, el mdulo de curvatura media k, es anlogo a la constante de rigidez de un
resorte, y puede interpretarse como una constante de rigidez (ante deformaciones de
curvatura) de la membrana. Cuando tiene valores pequeos, la membrana es flexible;
cuando asume valores grandes, la membrana es rgida. Por su parte, la curvatura
espontnea c0 es la curvatura media que adquiere la bicapa cuando est libre de
tensin. La Ec. (3) establece que cuando no hay cambios de topologa en el sistema la
curvatura media que minimiza la energa libre corresponde a la curvatura espontnea.
El radio de equilibrio de la membrana es R0 = 1/c0.

Finalmente, para tener una idea del significado fsico del mdulo de curvatura
gaussiana k, imaginemos una bicapa formada por monocapas idnticas (c0 = 0) que
puede cambiar de topologa.


El trmino de la curvatura media, es mnimo para una superficie con H = 0, que puede
ser un plano pero tambin una superficie localmente de tipo silla de montar.
Puede ahora notarse que el trmino de la curvatura gaussiana, favorece superficies
con distintas topologas, dependiendo del valor del mdulo elstico gaussiano.


En efecto, cuando K >0, la energa relacionada con el trmino gaussiano se minimiza si
los radios de las curvaturas principales tienen diferente signo, es decir, si la curvatura
gaussiana es negativa.

Medicin experimental de la constante de curvatura media: Existen algunas maneras
de medir el mdulo de curvatura media k de una membrana. En los diferentes
mtodos se aprovecha el hecho de que valores diferentes de k hacen que la
membrana sea ms o menos flexible y por lo tanto tenga diferente susceptibilidad a
las fluctuaciones trmicas del solvente.

- Energa de Helfrich en la parametrizacin de Monge, lo primero que veremos es la
forma que adopta la curvatura media en la representacin de Monge. Comencemos
por analizar un caso ms simple: una curva unidimensional en un espacio
bidimensional. Dicha curva puede pensarse como la trayectoria de un mvil, R(x),
donde el parmetro x puede pensarse momentneamente como un tiempo. La
velocidad del mvil seria v = R(x) y su aceleracin, a = R(x). El apstrofe denota
derivada con respecto a x. La aceleracin centrpeta es igual al cuadrado de la
velocidad por la curvatura en el punto en cuestin.

Por tanto, para calcular la curvatura necesitamos calcular de manera independiente
la aceleracin centrpeta.
Ahora recordemos que el rea (orientada) del paralelogramo formado por los
vectores R(x) y R(x) es igual al determinante (el signo del determinante
est relacionado a la orientacin de un vector respecto al otro). Por lo tanto, la
aceleracin centrpeta est dada por:

Tenemos que la energa de Helfrich para membranas dbilmente curvadas puede
escribirse en forma aproximada como:

Donde estamos ignorando el trmino constante. Esta ecuacin supone adems que
las fluctuaciones trmicas afectan la forma de la membrana pero no provocan
cambios en su topologa.

- Fluctuaciones de forma de una membrana, Fourier de la funcin que describe la
forma de la membrana en la parametrizacin de Monge, h(r). Esta expansin queda
de la siguiente forma:


Para calcular la amplitud total en forma aproximada la suma se puede transformar en
una integral:


Vemos entonces que el cuadrado de la amplitud total de las fluctuaciones es (en
promedio) proporcional a la temperatura e inversamente proporcional al mdulo
elstico de curvatura media.



- Medicin experimental del mdulo de curvatura media de una vescula mediante
manipulacin con micropipetas, Tanto el cambio de rea de la membrana, como la
tensin de la vescula pueden escribirse en trminos de parmetros controlables o
medibles en el experimento.

Para evaluar el cambio del rea de la vescula al someterse a una presin de succin,
recordemos que la membrana presenta fluctuaciones trmicas que la deforman
ligera pero constantemente.
Cuando la tensin a la cual est sometida la membrana es pequea, el efecto de la
presin aplicada es reducir la amplitud de las fluctuaciones trmicas.
Cuando la tensin aplicada a la membrana es grande, esto trae como efecto,
adems de desaparecer las fluctuaciones de curvatura de la membrana, un
estiramiento del rea de la misma.








- Conclusiones, en este artculo presentamos una derivacin de la energa de Helfrich,
la cual describe las propiedades elsticas de membranas. Segn este modelo, toda
membrana tiene dos mdulos elsticos: el de curvatura media y el de curvatura
gaussiana. El primero de ellos est relacionado con la rigidez de la membrana y
determina que tanto se deforma, sin cambiar de topologa, debido a las fluctuaciones
trmicas. Las propiedades elsticas de membranas juegan un papel importante en la
forma que adquieren las membranas biolgicas en la clula. Diversos grupos de
investigacin han explotado estos conceptos para predecir con cierto xito la forma
tanto de clulas como los hemates, o de organelos como el complejo de Golgi. Sin
embargo, en la literatura hay extensiones del modelo, las cuales rescatan como limite
el modelo de Helfrich. Sin embargo, pese a sus limitantes, el modelo de Helfrich ha
sido muy exitoso y es una referencia fundamental en el estudio de membranas
biolgicas.






































INJERTO DE TEJIDO CONECTIVO PARA DEFECTOS
MUCOGINGIVALES ALREDEDOR DE IMPLANTES
Defectos mucogingivales
del reborde suelen
presentarse muy
comnmente y pueden ser
el resultado de
extracciones dentarias
traumticas.
As como una evaluacin
meticulosa de todos los
tejidos blandos y duros en
cuanto a la calidad y
cantidad, evaluacin
radiogrfica completa
Presente caso clnico
muestra el abordaje de un
defecto anterior de
reborde Clase II mediante
la utilizacin de un
injertode tejido conectivo.
Presente caso clnico trata de un paciente
varn de 38 aos de lleg con la intencin
de que se le coloque una corona sobre un
implante que reemplazaba a la pieza 21,
no sin antes que se le d solucin a un
defecto bucal que presentaba en dicha
zona, un hundimiento o depresin de la
mucosa sobre el hueso adyacente.
Diagnstico definitivo
- Gingivitis localizada en piezas dentarias 11 y 22.
- Defecto horizontal del reborde Seibert Clase I.
- Maloclusin dentaria Clase II.
Vez terminada su terapia de mantenimiento
teniendo los ndices de higiene oral adecuados
se le procedi a realizar el procedimiento de
reconstruccin de reborde mediante laciruga.
el defecto horizontal del reborde mediante el
aumento de tejido mejorar el aspecto esttico
de la zona eliminando la traslucidez del metal
Preparacin de la zona del defecto,
bajo anestesia local se realiza una
incisin a espesor parcial paracrestal
sobre la cima del reborde. Esta
incisin se contina con dos
incisiones verticales liberantes
biseladas que atraviesan la unin
mucogingival
Preparacin de la zona dadora, esta
plantilla se traslada al paladar a la altura
de las premolares entre la cara distal del
canino y la cara distal de la 1era molar.
Se obtiene el injerto de tejido conectivo
subepitelial utilizando la tcnica de
recoleccin
Cuidados posoperatorios, al paciente
se le prescribi amoxicilina y un
antinflamatorio no esteroideo. Se
realiz control de placa mediante
profilaxis una vez por semana durante
las 4 primeras semanas.
Objetivo, de este presente caso
clnico es de proponer una
alternativa de rgimen de
tratamiento para la correccin
clnica de estos defectos
devolvindole funcionabilidad y
esttica.
Discucion, el manejo
cuidadoso del tejido
blando alrededor de
implante es considerado
esencial por los clnicos.
Varias opiniones de
expertos proponen
diferentes tcnicas para la
reconstruccin
Presente caso clnico ha
demostrado que con una
sustancial cantidad de
tejido blando injertado se
logr reconstruir el defecto
horizontal
Conclusin, el aumento
de reborde mediante el
uso de los injertos de
tejido conectivo pueden
ser considerados en
algunas situaciones
clnicas.
El
Los
Es
El
El
La
La
Los
La
El
La
El
Una
LECTURA N6
Pre-operatorio Pos-operatorio