ILUMINACION DE KHLER

La iluminacin es una variable crtica que hay que considerar al poner en

funcionamiento el microscopio. Con frecuencia el uso incorrecto de la iluminacin, an
en equipos sofisticados, conduce a la obtencin de imgenes defectuosas. El
espcimen debe ser iluminado mediante una fuente de luz artificial, la cual puede
producir artificios en la imagen que se observa.
En el ao 1893, el profesor August Khler propuso un mtodo de iluminacin para
optimizar la observacin microscpica y la microfotografa (15), que permite
aprovechar al mximo las capacidades de las lentes (objetivos) iluminando la muestra
en estudio con un campo de luz uniforme cuyo dimetro sea igual al del rea de
captura del objetivo.

PRINCIPIO Y METODOLOGA DE LA DETERMINACIN
La iluminacin Khler consiste en regular la marcha de los rayos de luz, centrando la
mayor intensidad de luz y cubriendo exactamente el dimetro frontal de cada lente
objetiva en su apertura numrica especfica, de esta manera, poder aprovechar al
100% la luz emitida por la fuente emisora.
Los microscopios modernos estn diseados para aplicar la iluminacin Khler y los
requerimientos son (figs. 4-12 y 4-13):
Condensador que sube y baja para enfocar el cono de luz.
Bombilla con lente colectora.
Dos diafragmas, un diafragma de campo situado a nivel de la lmpara y un
diafragma de apertura (iris), colocado debajo del condensador. El diafragma de
campo sirve para regular la abertura de la iluminacin, es decir, el contraste, la
profundidad de campo y el poder de resolucin y el diafragma iris controla el
ngulo de los rayos luz que emergen del condensador y que alcanzan la
muestra, tiene gran ingerencia en la resolucin, contraste, profundidad de foco
y en el brillo de la imagen.











El condensador se desplaza verticalmente hasta obtener una imagen ntida del
diafragma de campo. La iluminacin ideal se consigue cundo el condensador se
encuentra lo ms cerca de la preparacin. El diafragma de campo regula el dimetro
de la apertura de la iluminacin y al cerrarlo se incrementan los contrastes (15). Una
vez ajustada la iluminacin Khler no se debe regular la intensidad de la luz o el brillo
bajando el condensador o cerrando la apertura de diafragma-iris, por el contrario, se
regula la intensidad de la lmpara mediante un ajuste de voltaje.








Figura 4-12.-Iluminacin Khler. Se debe iluminar el espcimen siguiendo el
esquema. La lmpara posee un filamento (S) incandescente cuya luz es captada
por la lente colectora L1 y regulada por el diafragma de campo D1. La imagen S
del filamento de la lmpara es proyectada al plano del segundo diafragma D2.
Este primer paso se realiza con D1 completamente abierto. La altura del
condensador L2 se regula de manera que su punto focal est en el plano D2. La
imagen del diafragma de campo D1 es proyectada en el plano de la preparacin
por el condensador.
Figura 4-13.-
Trayectoria de la luz en
la iluminacin
Khler. Modificado de
Davison M, Abramowitz
M. Optical Microscopy.
Olympus Microscopy
Resource Center (15).