CROMATOGRAFA DE GASES

Introduccin
A pesar de que como ya se indicado, la cromatografa es bsicamente una tcnica de separacin, su gran
capacidad para resolver muestras complejas ha conducido a utilizarla cada vez ms como tcnica
analtica. Esta utilizacin ha conducido al desarrollo de instrumentacin, que utilizando siempre la
separacin por elucin, puede operar en continuo, con mayor eficiencia en la separacin y con un mayor
control de las condiciones cromatografas para incrementar la reproducibilidad de los resultados.
Entre las tcnicas cromatograficas utilizadas con fines analticos, la cromatografa de gases es
probablemente la tcnica de ms amplia utilizacin; ninguna tcnica analtica puede ofrecer su capacidad
de separacin o su sensibilidad a la hora de analizar compuestos voltiles.
Por otra parte, el hecho de que con esta tcnica las mezclas sean separadas en fase gaseosa, establece los
lmites de utilizacin, que estarn marcados fundamentalmente por la estabilidad trmica de los
compuestos a separar. Por lo general, la utilizacin de la cromatografa de gases est restringida a la
separacin de compuestos con un peso molecular menor de 1000 a una temperatura mxima de trabajo
de aproximadamente 400C; dentro de estos lmites, como ya se ha mencionado, la nica limitacin
existente ser la estabilidad trmica de la muestra.
Para realizar una separacin dentro de cromatografa de gases, se inyecta una pequea cantidad de
muestra a separar en una corriente de gas inerte a elevada temperatura; esta corriente de gas, atraviesa
una columna cromatografica que separa los componentes de la mezcla por medio de un mecanismo de
particin (cromatografa de gas- lquido), de adsorcin (cromatografa de gas -solido) o, en muchos casos,
por medio de una mezcla de ambos. Los componentes separados, emergern de la columna a intervalos
discretos y pasaran atravez de un sistema de deteccin adecuado, o bien sern dirigidos hacia un
dispositivo de recogida de muestras.
Tipos de cromatografa de gases (GC)
Existen dos tipos de cromatografa de gases (GC): la cromatografa gas-slido (GSC) y la cromatografa gas-
lquido (GLC).
Cromatografa gas-lquido (GLC).
Fase estacionaria liquida inmovilizada sobre un slido inerte.
Equilibrios de reparto.
Se utiliza ms ampliamente, y que se puede llamar simplemente cromatografa de gases (GC).
Cromatografa gas-slido (GSC).

Fase estacionaria slida
Equilibrio de adsorcin fisica.
En la GSC la fase estacionaria es slida y la retencin de los analitos en ella se produce mediante el
proceso de adsorcin. Precisamente este proceso de adsorcin, que no es lineal, es el que ha provocado
que este tipo de cromatografa tenga aplicacin limitada, ya que la retencin del analito sobre la
superficie es semipermanente y se obtienen picos de elucin con colas. Su nica aplicacin es la
separacin de especies gaseosas de bajo peso molecular. La GLC utiliza como fase estacionaria molculas
de lquido inmovilizadas sobre la superficie de un slido inerte.
Descripcin del equipo
Componentes fundamentales de un cromatografo de gases
Contenedor de gases.
Regulador de presin o caudal.
Sistema de inyeccin.
Columna cromatografica.
Horno termostatizado.
Detector.
Registrador de datos.

El gas carrier o portador
Caractersticas Modo de trabajo
Elevada pureza Flujo constante: se mantiene el flujo regulando
la presin a medida que cambia la T en la
columna.
Inerte Fluo programado.
Compatible con el detector empleado Presin constante en cabeza de columna.
Los gases ms empleados son: He, H2, N2,Ar. Presin constante en cabeza de columna.
Trampas para humedad, hidrocarburos y O2.

El gas carrier suele ser He, H2 o N2. Viene normalmente en un tubo a presin (150 atm) que se conecta
con reguladoras de presin, vlvulas aguja (de caudal) y medidores de presin y de flujo. Se le suele poner
un filtro con tamiz molecular para eliminar el agua y alguna impureza que el gas pueda tener.

Sistema de inyeccin
La inyeccin debe ser rpida y ocupar lo menos posible en el inicio de la columna (como cuando se
siembra en una capa bien fina en una columna separativa manual).
Lo ms comn es inyectar con una jeringa dentro de un septum de goma o silicona, pero tambin se usan
llaves de 6 vas como las de HPLC que tienen mayor repetibilidad que una jeringa.

Sistemas de inyeccin
Hay 3 tipos bsicos de inyeccin:
Sin divisin (non split)
Con divisin (split injection)
Directa o en columna (column injection).
Ventajas y desventajas:
La inyeccin con divisin sirve para analitos en concentracin apreciable, ya que diluye mucho la
muestra.
Es la que da los picos ms finos y la mejor separacin.
Mal lmite de deteccin y baja repetibilidad para anlisis cuantitativo.
La inyeccin sin divisin es para analitos en muy baja concentracin y no diluye la muestra.
Baja repetibilidad.
Baja separacin, y si no se tiene cuidado con al atrapamiento del disolvente enfriando el inicio de la
columna, los picos salen muy anchos.
La inyeccion directa en columna es la mejor para cuantificar (no se pierde analito). Tambin hay que
atrapar el disolvente.
Util cuando no se puede calentar el analito por descomposicion.
La calidad de separacion es intermedia.
Columnas cromatograficas
Empacadas o de relleno:
Tubo de metal, vidrio o tefln relleno de la fase estacionaria.
Longitud: 2-4m.
Dimetro intrno: 4-9mm
Soporte solido:
Pequeas partculas esfricas de tierra de diatomeas.
Semicapilares: 0.53 mm d.i.
Capilares:
Tubo capilar relleno de la fase estacionaria.
Longitud: 25-100 m.
Dimetro interno: 0.1-0.5 mm.
Fase estacionaria
Para separar diversos componentes, se usan fases afines con los analitos a resolver: lo similar disuelve lo
similar.
Las fases polares tienen grupos funcionales como CN, -CO- and OH. Las no polares son de tipo
hidrocarburos o dialquilsiloxanos.
Segn la polaridad encontramos:
Fases no polares: Fases de polaridad intermedia: Fases polares:
100% metil siloxano (DB-1) 35% fenil (DB-35) 50% cianopripilfenil(DB-225)
5% fenil (DB-5) 50% fenil (DB-17) Polietilenglicol (DB-WAX)
El % indica el nmero de grupos unidos a los tomos de Si, el resto son grupos metilo.


El horno
La temperatura de la columna debe ser posible de cambiar a voluntad, en lo posible de forma
programada. La programacion de temperatura variable puede usarse para mejorar la separacion, como
los gradientes de solventes en HPLC.
Una temperatura apenas arriba del promedio de los puntos de ebullicion de la muestra suele dar
tiempos de elusion razonables (2-30 min). Para muestras con analitos de rango amplio de volatilidad casi
siempre hay que usar temperatura programada.
Conexiones al inyector
Dependiendo del tipo de inyeccin, la longitud de la columna que penetra en el inyector ser distinta.
Tipo de inyeccin Longitud de la columna en el inyector (mm)
Modo split 40
Modo splitless 64


Detectores
El detector ideal tiene:
1. Buena sensibilidad
2. Buena estabilidad y reproducibilidad.
3. Respuesta lineal de varios ordenes de magnitud.
4. Rango de temperaturas de 25oC a 400 oC.
Ningn detector es ideal
De tipo diferencial. Se clasifican segn su sensibilidad:
Sensibilidad elevada o de ionizacin
Ionizacin no radiactiva:
Ionizacin de llama: FID, FPD.
Termoinicos: NPD.
Ionizacin radiactiva:
De captura electrnica: ECD.
Sensibilidad media:
De conductividad trmica.
Balanza de densidad de gases.
Detector: FID Detector: NPD. Detector:ECD Detector
fotometrico de
llamas(FPD)
Detector de
conductividad
termica(TCD)
Detector de
espectrometria
de masas(MS)
Muy sencible y
muy estable.
Amplio rango
lineal.
Elevada sencibilidad. Emision de
electrones
primarios()
*+N
2

+N
2
+
+e
-
e
-
+ABAB
-
+
hv
e
-
+ABA.+ B
-

Uno de los
detectores mas
selectivos.
Dos modos de
trabajo:
A temperatura
cte.
A voltaje cte.
Analito al
detector, se
producen iones
que son
expulsados y
dirigidos al
analizador.
Respuesta a la
mayoria de
compuestos
hidrocarbonados.
Elevada
selectividad(compuestos
de NyP)
Respuesta:
perdida de
electrones
termicos atraidos
por moleculas de
soluto.
Determinacion de
compuestos que
sostienen SyP en
concentracion de
trazas.
Area de pico
proporcional a la
concentracion.
No responde o
respuesta minima
a oxidos de
nitrogenos,
Muy estables. Elevada
sencibilidad.
Amplio rango
lineal.
Identificacion
mediante el
espectro de
masas, por
compuestos
sulfurados,
amonio y agua.
comparacion con
espectros de
librerias
comercia.
La
temperatura
de trabajo
alta para
prevenir la
condensacion
de los
vapores de
gaua
producto de
la combustion
del hidrogeno
en llama.
Desgaste de la fuente. Basado en el
principio
fotometrico de
emision.
Trabajo en modo
TIC(total ion
current),
SIR(masa
selecsionada),
MSMS.
Aire, H2O, N2. Alta sencibilidad.

Aplicaciones
Medioambiente: hidrocarburos, pesticidas, herbicidas, HAPs, VOCs, PCBs, dioixinas, etc.
Anlisis de alimentos: composicionales (esteroles, cidos grasos, alcoholes), aromas y aceites esenciales
(terpenos, terpenoides), residuos (pesticidas, herbicidas, HAPs).
Anlisis farmacutico: principios activos, impurezas, disolventes residuales.
Industriales: migracin de compuestos voltiles, disolventes residuales.
Bibliografa
anlisis instrumental ribson.
high performance liquid chromatography. Lindsay
fundamentos de quimica analiticavol.2. douglas A. skoog, donaldM. West,F. james holler.
Catalogos de cromatografa varian, scharlab aguilent.
Manuales de usuario de thermo scientific Y hp.
laboratorio de anlisis instrumental. Universidad de valencia.