Propiedades fenotpicas para la diferenciacin de especies
de Candida, levaduras y hongos levaduriformes en infecciones cutneas.
Especie Temperatura de crecimiento Tubo germinal Urea CHROMagar 37 C 42 C 45 C C. albicans + + + + - Verde claro C. glabrata + + + - - Violeta intenso C. guillermondii + + - - - Violeta plido C. krusei + + - - - Violeta plido C. parapsilosis + - V - - Blanco-crema C. tropicalis + + + - - Azul oscuro C. dubliniensis + ND - +
Verde oscuro Rhodotorula spp. V - - - + No aplica Saccharomyces spp. + V - - - No aplica Trichosporon spp. + V - - + Azul-gris Geotrichum spp. - - - - - Violeta
Tabla 4. Propiedades fenotpicas para la diferenciacin de C. albicans y C. dubliniensis
Propiedad C. albicans C. dubliniensis Crecimiento en Sabouraud + 6.5% NaCl + - Produccin de clamidoconidias en agar Corn Meal con 1% tween 80 Forma clamidoconidias: terminales o intercalares Forma clamidoconidias: mltiples o en racimos, pares o tripletas. Pero no todas las cepas lo hacen Crecimiento a 45C + - Crecimiento en agar tabaco
Ausencia de hifas Color blanco- crema Hifas alrededor de la colonia. color amarillento- marrn Utilizacin del medio cromognico (marca CHROMagar) Produce colonias verdes-azuladas claras en 48 horas a 37C Produce colonias verde oscuro en 48 horas a 37C. (solo en cultivos primarios, en repiques esta caracterstica se pierde)
Tabla 1. Diferenciacin de las colonias de Candida en CHROMagar. Especie Caracterstica de la colonia Color C. albicans Lisa, crece a 45C Verde esmeralda C. dubliniensis Lisa, no crece a 45C Verde esmeralda C. tropicalis Lisa Azul oscuro con halo marrn C. krusei Rugosa Rosa con halo blanco C. glabrata Brillante y cremosa Violeta
Vaginosis bacteriana La vaginosis bacteriana (VB) es la causa ms comn de infeccin vaginal (vaginitis). El sntoma ms comn de la VB es una secrecin anormal de la vagina con un desagradable olor a pescado. 1 Sin embargo, casi la mitad de las mujeres con VB no notan ningn sntoma. 2
Una vagina saludable contiene muchos microorganismos, uno de los ms comunes es el Lactobacillus acidophilus (LA). El LA evita que otros microorganismos vaginales se reproduzcan a un nivel en donde pudiesen causar sntomas. Los microorganismos relacionados con la VB incluyen Gardnerella vaginalis, Mobiluncus, bacteroides y Mycoplasma. Por razones desconocidas el nmero de stos organismos crecen con la VB mientras el nmero de organismos LA baja. La mayora de los casos de VB ocurren en mujeres sexualmente activas entre los 15 y 44 aos, especialmente tras el contacto con una pareja nueva. Los condones no parecen ser efectivos brindando proteccin aunque el uso de espermicidas parece reducir en algo el riesgo. Aunque sea "adquirido" por contacto sexual no hay evidencia que sea una enfermedad de transmisin sexual (ETS). Mujeres embarazadas y mujeres que sufren de algn ETS tienen un riesgo mayor para el desarrollo de esta infeccin. La VB no suele afectar a las mujeres despus de la menopausia. Un estudio de la Universidad de Ghent en Blgica concluy que una deficiencia de hierro (anemia) era una fuerte indicacin de la VB en embarazadas. Otro estudio americano publicado en el American Journal of Obstetrics and Gynecology demostr una relacin entre el estrs psicosocial y la VB independiente de otros factores de riesgo. La VB puede ser curada por antibiticos como metronidazol y Tetraciclina; an hay un alto nivel de reinfeccin.
UTILIDAD DE AGAR MICOTIC USOS Micobitico agar es un medio para el cultivo selectivo de hongos patgenos de diversas muestras clnicas y otros materiales contaminados con una flora asociada mixta.
Este medio es bsicamente un agar Micologa a la que se ha aadido cloranfenicol para inhibir el desarrollo de bacterias, y cicloheximida para inhibir el crecimiento de hongos saprofitas. Micobitico agar es muy til en el aislamiento de hongos patgenos de diversos tipos de muestras altamente contaminadas con diferentes tipos de flora acompaante, tales como los de la cabeza, raspaduras de la piel, las uas, los lavados bronquiales, los jugos gstricos, el suelo, etc
Peptona de soja proporciona nitrgeno, vitaminas, minerales y aminocidos esenciales para el crecimiento de aminocidos. La dextrosa es la fermentable hidratos de carbono como fuente de carbono y energa. Agar bacteriolgico es el agente solidificante. El cloranfenicol es un antibitico que ayuda en el aislamiento de hongos patgenos de un material fuertemente contaminada, ya que inhibe ms contaminante bacterias. Es un antibitico recomendado para su uso con los medios de comunicacin debido a su estabilidad trmica y espectro bacteriano de ancho. La cicloheximida es un antibitico que inhibe hongos saprofitos pero permite el crecimiento de los hongos patgenos.
Se recomienda para inocular varias placas o tubos con la misma muestra en estudio y los incuban a 22 - 25 C y en 35 C. El efecto txico de la mezcla antimicrobiana es mayor a 20 - 25 C, razn por la cual el nmero de aislamientos positivos es mayor a temperaturas inferiores a 35 C.
Se recomienda para inocular otros medios de cultivo al mismo tiempo como Biggy Agar (Cat. 1006) con el objetivo para obtener un mayor nmero de cepas. Los dermatofitos y otros numerosos grupos de hongos patgenos crecen rpidamente en el Micobitico Agar ya que inhibe la mayora de las bacterias y hongos saprofitos o contaminantes comensales. AZUL DE LACTOFENOL Usado para la observacin de hongos :-El fenol destruye la flora acompaante, el acido lctico conserva las estructurasfngicas al provocar un cambio de gradiente osmtico con relacin al interior delfngico generando una pelcula-Azul de algodn posee la capacidad de adherirse a la quitina presente en lashifas y conidios y delos hongos microscpicos Examen de hidrxido de potasio en lesin de piel Es un examen utilizado para diagnosticar una infeccin mictica de la piel. Forma en que se realiza el examen El mdico raspa el rea del problema de la piel, utilizando un borde romo como el del portaobjetos de un microscopio. Los raspados de la piel se colocan en un lquido que contiene el qumico hidrxido de potasio(KOH) y se examina bajo el microscopio. El hidrxido de potasio destruye todas las clulas no micticas, lo cual hace ms fcil ver si hay cualquier hongo presente. MEDIOS DE CULTIVO MICOLOGICOS Todos los medios de cultivo utilizados en micologa han de contener los nutrientes suficientes para asegurar el desarrollo de los hongos (carbono, nitrgeno, vitaminas,etc). El ph ha de ser ligeramente cido para facilitar el crecimiento de los hongos e inhibir al mismo tiempo el desarrollo de otros microorganismos. Se aadirn antibiticos antibacterianos parainhibir el crecimiento de las bacterias saprofitas que suelen contaminar las muestras. Los ms usados son el cloranfenicol y la gentamicina. Se aade tambin cicloheximida que inhibe el desarrollo dehongos saprofitos ambientales (aunque tiene el inconveniente de que inhibe tambin el crecimiento de cryptococcus neoformans). Generalmente se utiliza varios medios de cultivo diferentes, ya sea en enplaca o en tubo. * Medios de cultivo en placa: tienen la ventaja de ofrecer una gran superficie para el aislamiento y para soportar la deshidratacin durante el largo perodo de incubacin a que vana ser sometidos (un mes o ms), contienen una gruesa capa de medio (25 a 40 ml). Son ms peligrosos a la hora de su manipulacin y fciles de contaminar. * Medios de cultivo en tubo: tienen unasuperficie de trabajo mucho ms pequea, pero ofrecen mxima seguridad en su manipulacin y buena resistencia a la deshidratacin y a la contaminacin. Medios de Cultivo: * Generales: SDA, agardextrosado de saboraud * Enriquecidos: BHI, agar con infusin cerebro corazn * Selectivos: contienen antibiticos, cloranfenicol, gentamicina y tambin inhibidores de hongos, como lacicloheximida * Diferenciales: sustancias cromgenas * Especializados: contienen algn componente (guizotia abyssinica) destinado a aislar un agente concreto (cryptococcus neoformans)
AGAR SABOURAUD Esun medio de amplia utilizacin y parcialmente selectivo para hongos debido a las peptonas que son fuente de nitrgeno, su bajo ph y alta concentracin de glucosa que es una fuente de energa para