ANTIBIOGRAMA: SUCECTIBILIDAD ANTIMICROBIANA

Un agente antimicrobiano es una sustancia qumica natural o sinttico, los cuales varan segn de
acuerdo a su toxicidad selectiva, los cuales matan o inhiben el crecimiento de los microorganismos
(Madigan et al. 2004).

Un antibiograma es una tcnica donde se observa la actividad in vitro de un antibitico frente a un
microorganismo determinado estableciendo la sensibilidad, resistencia o capacidad de inhibir el
crecimiento de una bacteria o poblacin bacteriana (Garca et al., 2012). Uno de los objetivos de este
tipo de estudio monitorizar la evolucin de la resistencia bacteriana con objeto de revisar el espectro
del antimicrobiano y poder actualizar los tratamientos empricos (Sham, 2002). Es til en el control de
calidad y en la validacin de los resultados y se facilita con los sistemas automticos de estudio de
sensibilidad y paquetes informticos asociados (Canton, 2010). Para realizar los estudios de
sensibilidad de los microorganismos a los diferentes antibiticos se utilizan tcnicas o mtodos
cuantitativos como dilucin en caldo y agar, y cualitativos como difusin por discos.

Un antibiograma necesita de unas condiciones para su buen funcionamiento, usualmente se utiliza el
agar Mueller-Hinton en las pruebas de sensibilidad de microoganismos aerbicos de rpido
crecimiento. Cuando se trata de estreptococos u otros microorganismos exigentes, se le aade al
Mueller-Hinton, 5% de sangre desfibrinada (www.ucv.ve). Este debe contener una baja concentracin
en inhibidores; la profundidad del agar debe ser de 3 a 5mm; de igual manera los aminoglicosidos y
macrolidos que se encuentran en el pH acido deben estar en menor potencia; los sensidiscos y
concentracin de ATB deben ser de alta calidad y por ltimo el inculo bacteriano debe estar
estandarizado (Malbrn, 2001).

De los mtodos existentes, el ms popular es el mtodo de difusin en disco de papel. La variante ms
utilizada de este mtodo es la de Kirby Bauer, la cual consiste en utilizar una sola concentracin de
antibitico y medir el tamao de la zona de inhibicin (www.ucv.ve). En esta prueba se enfrenta la
bacteria inoculada sobre la superficie de un medio de agar a una solucin antibitica absorbida en
discos de papel de filtro o en pastillas. Se observa el halo o circulo de inhibicin que aparece alrededor
del disco de antibitico de tal manera se puede clasificar a los microorganismos como sensibles (S),
intermedios (I) o resistentes (R) segn sea la eficacia obtenida por el agente antimicrobiano frente al
microorganismo (Gamazo et al., 2004).

Segn Malbrn (2001) Un ejemplo de este tipo de procedimientos es el recomendado y estandarizado
por el Subcomit de la NCCLS encargado de las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos de uso
veterinario, en el cual se emplea agar por Bauer y Cols y se usa una cantidad constante de
antimicrobiano en un reservorio (discos de papel) aplicado sobre la superficie del agar en el cual en el
cual se ha cultivado el microorganismo a estudiar. Para interpretar los resultados se observa el tamao
de la zona de inhibicin del crecimiento alrededor de los discos de antibitico. Sin embargo, se tiene
que considerar que el dimetro obtenido del halo de inhibicin depender no solo de la sensibilidad del
microorganismo al antibitico, sino tambin del espesor de la capa del agar, su pH y composicin y la
capacidad de difusin de la droga en ese medio, adems de la temperatura, la velocidad de duplicacin
bacteriana, y el tamao y fase de crecimiento del inculo. Para este mtodo se han desarrollado tablas
de interpretacin respaldadas por datos clnicos y de laboratorio.

El procedimiento de dilucin en caldo o agar es un mtodo cuantitativo donde se utilizan diferentes
concentraciones de un agente antimicrobiano en una serie de tubos de ensayo y se observa el
crecimiento de los microorganismos mediante la aparicin de turbidez, o el cambio de color del
indicador incorporado al medio (Gamazo et al., 2004). La sensibilidad del microorganismo al
antibitico esta evaluada por el CMI (concentracin mnima inhibitoria), la cual constituye la cantidad
minina de antimicrobiano utilizado para impedir el crecimiento visible de un microorganismo luego de
18 a 24 horas de incubacin (Madigan et al., 2004; Errecalde, 2004) En este procedimiento se agrega
una cantidad progresiva de antibitico en los diferentes tubos de ensayo. El tubo que contiene menor
concentracin de agente que inhibe completamente el crecimiento del organismo es usado como
referencia que define la CMI. Sin embargo este procedimiento no es invariable para un determinado
agente ya que va a depender del tipo de microorganismo usado, el tamao del inoculo, la temperatura
de incubacin, el pH y la aireacin del medio de cultivo (Madigan et al., 2004) Por su parte la CMB
(concentracin mnima bactericida) representa la mnima concentracin de antimicrobiano capaz de
matar al 99,9 por ciento de los microorganismos inoculados luego de entre 18 y 24 horas de cultivo
(Errecalde, 2004).

BIBLIOGRAFA

Canton, R. 2010 "Lectura interpretada del antibiograma: una necesidad clnica." 1. Elsevier
Espaa, S.L. 11. Web. 6 Apr. 2014.
<http://www.microcsalud.us.es/web/docencia/master/medicina/bases-
microbiologicas/temas/1314/02/I1 EIMC 2010 375 Lectura Interpretada RCantn.pdf>.
Errecalde, J. O. 2004. Uso de antimicrobianos en animales de consumo. FAO. ISBN 92-5-
305150-7.
Gamazo, C. Lpez-Goni, I & R. Daz. 2005. Manual prctico de microbiologa. Tercera
edicin. Masson S.A. Barcelona, Espaa. 264 p.
Garca, Ma. Crdenas, M & A. Urbano. 2012. Manual de laboratorio de microbiologa para el
diagnstico de infecciones respiratorias. 1
a
edicin. OmniaScience. 132 p. ISBN 978-84-695-
0921-0.
Madigan, M. Martinko, J & J. Parker. 2004. Brock Biologa de los microorganismos. Pearson.
10
a
Edicin.
Malbrn, C. 2001. Manual de procedimientos para la determinacin de la sensibilidad a los
antimicrobianos en bacterias aisladas de humanos. Disponible en:
http://www.cdc.gov/ncidod/dbmd/gss/publications/documents/Argentina-LevelI/Manual
_procedimientos.pdf
Sham, D. 2002.The role of clinical microbiology in the control and surveillance of antimicrobial
resistance. En: Malbrn, C. 2001. Manual de procedimientos para la determinacin de la
sensibilidad a los antimicrobianos en bacterias aisladas de humanos.
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/
10_Antibiograma.pdf. Consultado en web: 08/04/2014