1 INTRODUCCIN AL CONCEPTO Y

CONTENIDO DE LA MICROBIOLOGA
La Microbiologa se puede definir, sobre la base de su etimologa, como la ciencia
que trata de los seres vivos muy pequeos, concretamente de aquellos cuyo tamao se
encuentra por debajo del poder resolutivo del ojo humano. Esto hace que el objeto de esta
disciplina venga determinado por la metodologa apropiada para poner en evidencia, y
poder estudiar, a los microorganismos. Precisamente, el origen tardo de la Microbiologa
con relacin a otras ciencias biolgicas, y el reconocimiento de las m!ltiples actividades
desplegadas por los microorganismos, hay que atribuirlos a la carencia, durante mucho
tiempo, de los instrumentos y t"cnicas pertinentes. #on la invencin del microscopio en el
siglo $%&& comien'a el lento despegue de una nueva rama del conocimiento, ine(istente
hasta entonces. )urante los siguientes *+, aos su progreso se limit casi a una mera
descripcin de tipos morfolgicos microbianos, y a los primeros intentos ta(onmicos, que
buscaron su encuadramiento en el marco de los -sistemas naturales. de los /einos 0nimal
y %egetal.
El asentamiento de la Microbiologa como ciencia est1 estrechamente ligado a una
serie de controversias seculares 2con sus numerosas filtraciones de la filosofa e incluso de
la religin de la "poca3, que se prolongaron hasta finales del siglo $&$. La resolucin de
estas pol"micas dependi del desarrollo de una serie de estrategias e(perimentales fiables
2esterili'acin, cultivos puros, perfeccionamiento de las t"cnicas microscpicas, etc.3, que a
su ve' dieron nacimiento a un cuerpo coherente de conocimientos que constituy el n!cleo
aglutinador de la ciencia microbiolgica. El reconocimiento del origen microbiano de las
fermentaciones, el definitivo abandono de la idea de la generacin espont1nea, y el triunfo
de la teora germinal de la enfermedad, representan las conquistas definitivas que dan carta
de naturale'a a la joven Microbiologa en el cambio de siglo.
4ras la Edad de 5ro de la 6acteriologa, inaugurada por las grandes figuras de
Pasteur y 7och, la Microbiologa qued durante cierto tiempo como una disciplina
descriptiva y aplicada, estrechamente imbricada con la Medicina, y con un desarrollo
paralelo al de la 8umica, que le aportara varios avances metodolgicos fundamentales.
9in embargo, una corriente, en principio minoritaria, dedicada a los estudios b1sicos
centrados con ciertas bacterias del suelo poseedoras de capacidades metablicas especiales,
incluyendo el descubrimiento de las que afectan a la nutricin de las plantas, logr hacer
ver la ubicuidad ecolgica y la e(trema diversidad fisiolgica de los microorganismos. )e
esta forma, se estableca una cabe'a de puente entre la Microbiologa y otras ciencias
biolgicas, que lleg a su momento decisivo cuando se comprob la unidad qumica de
todo el mundo vivo, y se demostr, con material y t"cnicas microbiolgicas que la mol"cula
de la herencia era el 0):. #on ello se asiste a un ntimo y f"rtil intercambio entre la
Microbiologa, la ;en"tica y la 6ioqumica, que se plasma en el nacimiento de la 6iologa
Molecular, base del espectacular auge de la 6iologa desde mediados del siglo $$.
Por otro lado, el -programa. inicial de la Microbiologa 2b!squeda de agentes
infectivos, desentraamiento y aprovechamiento de los mecanismos de defensa del
hospedador3 condujeron a la creacin de ciencias subsidiarias 2%irologa, &nmunologa3 que
finalmente adquirieron su mayora de edad y una acentuada autonoma.
Por !ltimo, la vertiente aplicada que estuvo en la base de la creacin de la
Microbiologa, mantuvo su vigencia, enriquecida por continuos aportes de la investigacin
b1sica, y hoy muestra una impresionante -hoja de servicios. y una no menos prometedora
perspectiva de e(pansin a m!ltiples campos de la actividad humana, desde el control de
enfermedades infecciosas 2higiene, vacunacin, quimioterapia, antibioterapia3 hasta el
aprovechamiento econmico racional de los m!ltiples procesos en los que se hallan
implicados los microorganismos 2biotecnologas3.
0s pues, la sencilla definicin con la que se abri este apartado, esconda todo un
c!mulo de contenidos y objetos de indagacin, todos emanados de una peculiar manera de
apro(imarse a la porcin de realidad que la Microbiologa tiene encomendada. En las
pr(imas p1ginas ampliaremos y concretaremos el concepto al que hemos hecho r1pida
referencia. /eali'aremos un recorrido por el desarrollo de la Microbiologa a lo largo de su
historia, que nos permitir1 una visin concreta de algunos de sus caractersticos modos de
abordar su objeto de estudio< finalmente, estaremos en disposicin de definir este !ltimo,
desglosado como objeto material y formal.
2 DESARROLLO HISTRICO DE LA
MICROBIOLOGA.
La Microbiologa, considerada como una ciencia especiali'ada, no aparece hasta
finales del siglo $&$, como consecuencia de la confluencia de una serie de progresos
metodolgicos que se haban empe'ado a incubar lentamente en los siglos anteriores, y que
obligaron a una revisin de ideas y prejuicios seculares sobre la din1mica del mundo vivo.
9iguiendo el ya cl1sico esquema de #ollard 2l=>?3, podemos distinguir cuatro etapas
o periodos en el desarrollo de la Microbiologa@
Primer periodo, eminentemente especulativo, que se e(tiende desde la antigAedad hasta
llegar a los primeros micros copistas.
9egundo periodo, de lenta acumulacin de observaciones 2desde l?>+ apro(imadamente
hasta la mitad del siglo $&$3, que arranca con el descubrimiento de los microorganismos
por LeeuBenhoeC 2l?>+3.
4ercer periodo, de cultivo de microorganismos, que llega hasta finales del siglo $&$,
donde las figuras de Pasteur y 7och encabe'an el logro de cristali'ar a la Microbiologa
como ciencia e(perimental bien asentada.
#uarto periodo 2desde principios del siglo $$ hasta nuestros das3, en el que los
microorganismos se estudian en toda su complejidad fisiolgica, bioqumica, gen"tica,
ecolgica, etc., y que supone un e(traordinario crecimiento de la Microbiologa, el
surgimiento de disciplinas microbiolgicas especiali'adas 2%irologa, &nmunologa, etc3,
y la estrecha imbricacin de las ciencias microbiolgicas en el marco general de las
#iencias 6iolgicas. 0 continuacin se reali'a un breve recorrido histrico de la
disciplina microbiolgica, desglosando los perodos DE y FE en varios apartados
tem1ticos.
2.1 PERIODO PREVIO AL DESCUBRIMIENTO DEL
MICROSCOPIO
9i bien el descubrimiento efectivo de seres vivos no visibles a simple vista debi
aguardar hasta el !ltimo tercio del siglo $%&&, sus actividades son conocidas por la
humanidad desde muy antiguo, tanto las beneficiosas, representadas por las fermentaciones
implicadas en la produccin de bebidas alcohlicas, pan y derivados l1cteos, como las
perjudiciales, en forma de enfermedades infecciosas.
)iversas fuentes escritas de la antigAedad griega y romana hablan de g"rmenes
invisibles que transmiten enfermedades contagiosas. Lucrecio 2=?G++ a.#.3, en su -De
rerum natura. hace varias alusiones a -semillas de enfermedad.. En el /enacimiento
europeo, ;irolamo Hrascatorius, en su libro -De contagione et contagionis 2*+F?3 dice
que las enfermedades contagiosas se deben a -g"rmenes vivos. que pasan de diversas
maneras de un individuo a otro. Estos inicios de e(plicacin que renunciaban a invocar
causas sobrenaturales fueron probablemente catali'ados por la introduccin en Europa de la
sfilis, una enfermedad en la que estaba clara la necesidad de contacto para su contagio.
Pero la -cosa. que se transmite en la enfermedad sigui siendo objeto de conjeturas durante
mucho tiempo.
2.2 EL PERIODO DE LOS PRIMEROS
MICROSCOPISTAS.
Ia en el siglo $&%, con la invencin de las primeras lentes para corregir la visin,
surgi una cierta curiosidad sobre su capacidad de aumentar el tamao aparente de los
objetos. En el siglo $%& surgieron algunas ideas sobre aspectos de la fsica ptica de las
lentes de aumento, pero no encontraron una aplicacin inmediata. 9e dice que ;alileo hi'o
algunas observaciones -microscpicas. invirtiendo su telescopio a partir de lentes
montadas en un tubo, pero en cualquier caso est1 claro que no tuvieron ninguna
repercusin.
La primera referencia segura sobre el microscopio 2*?J*3 se debe a #onstantijn
Kuygens, quien relata que el ingl"s #ornelis )rebbel tena en su taller un instrumento
magnificador, que recibi el nombre de microscopium en l?J+, en la 0ccademia dei Lincei,
de /oma.
Antonie van Leeuwenhoek
El descubrimiento de los microorganismos fue obra de un comerciante holands de
tejidos, 0ntonie van LeeuBenhoeC 2*?DJG*>JD3, quien en su pasin por pulir y montar
lentes casi esf"ricas sobre placas de oro, plata o cobre, casi lleg a descuidar sus negocios.
Habric unos cuatrocientos microscopios simples, con los que lleg a obtener aumentos de
casi D,, di1metros. En *?>+ descubri que en una gota de agua de estanque pululaba una
asombrosa variedad de pequeas criaturas a las que denomin -anim1lculos.. En *?LD
descubre las bacterias, por lo que se considera el -padre de la Microbiologa.. )urante
varias d"cadas LeeuBenhoeC fue comunicando sus descubrimientos a la /oyal 9ociety de
Londres a trav"s de una serie de cartas que se difundieron, en traduccin inglesa, en las
-Philosophical 4ransactions.. 9us magnficas dotes de observador le llevaron asimismo a
describir proto'oos 2como Giardia, que encontr en sus propias heces3, la estructura
estriada del m!sculo, la circulacin capilar, a descubrir los espermato'oides y los glbulos
rojos 2por lo que tambi"n se le considera el fundador de la Kistologa animal3, as como a
detallar diversos aspectos estructurales de las semillas y embriones de plantas.
LeeuBenhoeC se percat de la abundancia y ubicuidad de sus anim1lculos, observ1ndolos
en vinagre, placa dental, etc.
Microscopio simple de Leeuwenhoek



Microscopio compuesto de Hooke
0unque los descubrimientos de LeeuBenhoeC despertaron inter"s al ser
comunicados, pocos intentaron o pudieron reproducirlos seriamente. 0dem1s, la fabricacin
de lentes sencillas de gran aumento era difcil y el manejo de los microscopios simples,
bastante engorroso.
9imult1neamente el ingl"s /obert KooCe 2*?D+G*>,D3 usando microscopios
compuestos, describi los hongos filamentosos 2*??>3, y descubri la estructura celular de
las plantas 2Micrographia, *??+3, acuando el t"rmino c"lula. Pero el trabajo con
microscopios compuestos aplicados al estudio de los -anim1lculosM languideci durante
casi J,, aos, debido a sus imperfecciones pticas, hasta que hacia *LD, se desarrollaron
las lentes acrom1ticas.
2.3 EL DEBATE SOBRE LA GENERACIN
ESPONTNEA.
La autoridad intelectual de 0ristteles por un lado, y la autoridad moral
representada por la 6iblia, por otro, junto con las opiniones de escritores cl1sicos como
;aleno, Plinio y Lucrecio, a los que se citaba como referencias incontrovertibles en la
literatura m"dica en la Edad Media y /enacimiento, dieron carta de naturale'a a la idea de
que algunos seres vivos podan originarse a partir de materia inanimada, o bien a partir del
aire o de materiales en putrefaccin. Esta doctrina de la -generatio spontanea o
abiog"nesis, fue puesta en entredicho por los e(perimentos de Hrancesco /edi 2*?J*G*?=>3,
quien haba acuado la e(presin -Omne vivum ex ovo 2*??L3, tras comprobar que los
insectos y nematodos procedan de huevos puestos por animales adultos de su misma
especie. )emostr que si un tro'o de carne era cubierto con gasa de forma que las moscas
no podan depositar all sus huevos, no aparecan -gusanos., que "l correctamente
identific como fases larvarias del insecto. Los descubrimientos de /edi tuvieron el efecto
de desacreditar la teora de la generacin espont1nea para los animales y plantas, pero la
reavivaron respecto de los reci"n descubiertos -anim1lculos., de modo que aunque se
acept la continuidad de la vida en cuanto a sus formas superiores, no todos estaban
dispuestos a admitir el m1s amplio -Omne vivum ex vivo aplicado a los microorganismos.
Kubo que esperar un siglo m1s hasta que una serie de naturalistas recomen'aran el
ataque a la teora preformacionista. La''aro 9pallan'ani 2*>J=G*>==3 sostuvo una disputa
con N.4. :eedham 2*>*DG*>L*3 en la que el primero demostr que los -infusorios. no
aparecan en muestras de maceraciones animales o vegetales sometidas durante tiempo
suficiente a ebullicin en frascos herm"ticamente cerrados, pero volvan a aparecer si se
practicaban agujeros en el recipiente. 9in embargo los preformacionistas no se daban por
vencidos< el mismo :eedham, recogiendo una idea ya e(presada por Kuygens, amigo de
LeeuBenhoeC, replic Gcon argumentos vitalistas muy propios de la "pocaG que el calor
haba destruido la -fuer'a vegetativa. de las infusiones y haba cambiado la -cualidad. del
aire dentro de los frascos.
)urante el primer tercio del siglo $&$ la doctrina de la arqueg"nesis o generacin
espont1nea recibi un !ltimo refuer'o antes de morir, debido por un lado a ra'ones
e(tracientficas 2el auge del concepto de transmutacin producido por la escuela de la
filosofa de la naturale'a3, y por otro al descubrimiento del o(geno y de su importancia
para la vida, de modo que los e(perimentos de 9pallan'ani se interpretaron como que al
calentarse las infusiones, el o(geno del aire se destrua, y por lo tanto desapareca la
-fuer'a vegetativa. que originaba la aparicin de microorganismos. 4heodor 9chBann
2*L*,G*LLJ3 present en *LD? un m"todo seguro para refutar la teora abiog"nica@ calent
maceraciones en frascos a los que se haba eliminado previamente el aire, pero no continu
trabajando en esta lnea.
Para complicar m1s las cosas, la publicacin de -Sobre el origen de las especies
por )arBin en *L+=, fue utili'ada por algunos preformacionistas para apoyar sus
argumentos. El mismo KaecCel, en una fecha tan tarda como *L??, se mostraba esc"ptico
ante las pruebas aportadas por Pasteur.
Pasteur
Fue, efectivamente Louis Pasteur (182218!"# el $ue asest% el &olpe
definitivo ' (an)% la cuesti%n a favor de la teor*a +io&,nica- .n un informe
a la Acad,mie des /ciences de Par*s, en 1801 (2Expriences rlatives aux
gnrations dites spontanes# ' en escritos posteriores comunica sus
sencillos ' ele&antes e3perimentos4 calent% infusiones en matraces de
vidrio a los $ue estira+a lateralmente el cuello, haci,ndolo lar&o, estrecho
' sinuoso, ' de)5ndolo sin cerrar, de modo $ue el contenido estuviera en
contacto con el aire6 tras esta operaci%n demostr% $ue el l*$uido no
desarrolla+a microor&anismos, con lo $ue elimin% la posi+ilidad de $ue un
2aire alterado7 fuera la causa de la no aparici%n de &,rmenes- Antes +ien,
compro+% $ue los &,rmenes del aire $ueda+an retenidos a su paso por el
lar&o cuello sinuoso, en las paredes del tu+o, ' no alcan(a+an el interior
del recipiente donde se encontra+a la infusi%n, $uedando ,sta est,ril
indefinidamente- /%lo si se romp*a el cuello lateral o si se inclina+a el
frasco de modo $ue pasara parte de l*$uido a la porci%n de cuello, los
&,rmenes pod*an contaminar la infusi%n ' ori&inar un r5pido crecimiento-
Frasco con 8cuello de cisne8 de Pasteur, con el
$ue refut% las ideas so+re la &eneraci%n
espont5nea
En *L?* Pasteur publica otro informe en el que e(plica cmo se pueden capturar los
-cuerpos organi'ados. del aire con ayuda de un tubo provisto de un tapn de algodn como
filtro, y la manera de recuperarlos para su observacin microscpica. )e esta forma
quedaba definitivamente aclarado el origen de los microorganismos, y se abra la Edad de
5ro del estudio cientfico de las formas de vida no observables a simple vista.
Los !ltimos esc"pticos quedaron silenciados cuando en *L>> Nohn 4yndall 2*LJ,G
*L=D3 aplic su sistema de esterili'acin por calentamiento discontinuo 2hoy conocida
precisamente como tindali'acin3, que evidenci la e(istencia de formas microbianas de
reposo muy resistentes al calor, lo cual fue confirmado poco m1s tarde por Herdinand #ohn
al descubrir las esporas bacterianas.
2.4 EL DEBATE SOBRE LOS FERMENTOS
On segundo factor contribuyente al nacimiento de la ciencia microbiolgica fue el
establecimiento de la relacin que une ciertas transformaciones qumicas que se dan en las
infusiones con el crecimiento de los g"rmenes en ellas e(istentes. #agniardGLatour en *LD?,
y 9chBann y 7At'ing en *LD> haban sugerido que las levaduras eran las causantes de la
fermentacin alcohlica por la que el a'!car pasa a alcohol etlico y di(ido de carbono,
pero se encontraron con la crtica adversa de los grandes qumicos de la "poca 26er'elius,
Pohler y Liebig3. Liebig, hacia *LF,, haba reali'ado importantes confirmaciones a la
-teora mineral. sobre la nutricin de las plantas, enfrent1ndose a la -teora del humus.
sostenida por 4haer, asestando un golpe a las ideas vitalistas heredadas de Leibni'. Puesto
que se consideraba a las levaduras como plantas microscpicas, se supona que los procesos
de fermentacin y putrefaccin se deban a fenmenos qumicos de descomposicin y
muerte encuadrables en el marco de la teora mineral de la fisiologa vegetal. 9u
convencimiento de que toda actividad vital se poda e(plicar en t"rminos de qumica y
fsica retras por alg!n tiempo la adscripcin de estos fenmenos a c"lulas vivas.
Hue Pasteur 2que, desde sus primeros estudios sobre las propiedades pticas de los
cristales de tartrato, vena suponiendo que estos compuestos tenan un orgen org1nico3
quien de nuevo intervino en el debate de forma decisiva. En *L+> demostr que los agentes
de la fermentacin l1ctica eran microorganismos, trabajando sobre un problema que haba
surgido entre los destiladores de Lille cuando en sus cubas la fermentacin alcohlica se
vio sustituida por una indeseable fermentacin l1ctica. Este fue el inicio de una larga serie
de estudios que habra de durar hasta *L>?, en los que Pasteur identific distintos
microorganismos responsables de diferentes clases de procesos fermentativos. 0s, en *L?,
adscribe inequvocamente la fermentacin alcohlica a ciertos tipos de levaduras, y en
*L??, en sus tudes sur le vin resume sus halla'gos al respecto, inaugurando la
Microbiologa 0plicada, una de las primeras derivaciones pr1cticas no empricas emanadas
de la 6iologa. 0 finales del siglo $&$ eminentes bilogos como Kansen, en #openhague, y
6eijerinC, en )elft, desarrollaban su actividad en industrias y destileras.
4rabajando sobre los agentes de la fermentacin butrica, Pasteur descubri la
presencia de microorganismos que se desarrollaban en ausencia de o(geno, lo cual
desmenta la creencia de que todas las formas de vida necesitan aire para crecer. 0cu los
t"rminos aerobiosis y anaerobiosis para denominar, respectivamente, a la vida en presencia
y en ausencia de o(geno.
4ras el descubrimiento de la anaerobiosis, el mismo Pasteur comprendi las
distintas implicaciones energ"ticas subyacentes a la utili'acin de sustratos org1nicos en
presencia y en ausencia de o(geno, demostrando que, en el segundo caso el rendimiento
2medido como crecimiento microbiano3 era siempre menor, al no poder reali'arse la
degradacin total de las correspondientes sustancias.
Ona profundi'acin en los fenmenos de fermentacin lleg cuando en *L=>
6uchner obtuvo, a partir de levaduras, una preparacin en'im1tica 2'imasa3 que era capa'
de reali'ar la misma transformacin de -fermentacin. que las c"lulas vivas. Este
descubrimiento, que evocaba las propuestas de 6er'elius y Liebig, supuso en realidad la
confluencia de los enfoques qumico y biolgico@ las fermentaciones eran procesos
qumicos catali'ados por en'imas presentes dentro de c"lulas vivas, que podan ser
estudiados e(tracelularmente. )e esta forma, la 6ioqumica, nacida como una rama de la
qumica fisiolgica, que se vena especiali'ando en la en'imologa, encontr una alian'a
fructfera y duradera con la joven Microbiologa.
2.5 LOS AVANCES TCNICOS
La doctrina del pleomorfismo, vigente durante buena parte del siglo $&$, mantena
que los microorganismos adoptaban formas y funciones cambiantes dependiendo de las
condiciones ambientales. 0 estas ideas se oponan frontalmente investigadores como 7och,
Pasteur y #ohn, que estaban convencidos de la especificidad y constancia morfolgica y
fisiolgica de cada tipo de microorganismo 2monomorfismo3. El pleomorfismo haba
surgido como una e(plicacin a la gran variedad de formas y actividades que aparecan en
un simple frasco de infusin, pero ya Pasteur, en sus estudios sobre la fermentacin, se
haba percatado de que los cultivos que aparecan podan considerarse como una sucesin
de distintas poblaciones de microorganismos predominantes, que, a resultas de sus
actividades, condicionaban la ulterior composicin de la comunidad microbiana. La
solucin definitiva a esta cuestin dependa, de nuevo, de un desarrollo t"cnico, que a su
ve' iba a suministrar una de las herramientas caractersticas de la nueva ciencia@ los
m"todos de cultivo puro.
Los primeros cultivos puros fueron obtenidos por el miclogo 6refeld, quien logr
aislar esporas de hongos y cultivarlas sobre medios slidos a base de gelatina. Por su menor
tamao, este m"todo se haca inviable para las bacterias, por lo que se recurri a un m"todo
basado en diluciones@ Lister, en *L>L reali' diluciones secuenciales de cultivos mi(tos,
hasta lograr muestras en las que e(ista una sola c"lula. Pero la t"cnica era larga y tediosa y,
adem1s, normalmente slo se lograban aislar c"lulas del tipo bacteriano m1s abundante en
el cultivo original< sin embargo, el e(perimento sirvi para confirmar la naturale'a
-particulada. de los agentes de las fermentaciones.
9o+ert :och
Por a$uella ,poca :och +usca+a con ah*nco m,todos m5s
sencillos de cultivo puro, indispensa+les para prose&uir sus
investi&aciones so+re +acterias pat%&enas- Primero (' $ui(5
de forma un tanto casual# emple% roda)as de patata como
sustrato s%lido nutritivo so+re el $ue se pod*an desarrollar
colonias macrosc%picas de +acterias $ue presenta+an
morfolo&*a caracter*stica, $ue :och interpret% como
resultantes del crecimiento a partir de c,lulas individuales-
Pero ense&uida recurri% a compactar el t*pico caldo de cultivo
a +ase de carne (dise;ado por Loeffler# a;adi,ndole &elatina
(1881#- .l medio s%lido as* lo&rado era transparente, lo $ue
permit*a visuali(ar f5cilmente los ras&os coloniales, ' conten*a
los nutrientes adecuados para el crecimiento de una amplia
&ama de +acterias- <stas eran inoculadas en la superficie del
medio con un hilo de platino pasado previamente por la llama,
por la t,cnica de siem+ra en estr*a- /in em+ar&o, la &elatina
presenta+a los inconvenientes de ser atacada por
determinados microor&anismos, ' de tener un +a)o punto de
fusi%n6 am+os pro+lemas se solventaron cuando en 1882 el
m,dico alem5n =alter Hesse, si&uiendo una su&erencia de
su mu)er Fann', introdu)o el a&ara&ar (polisac5rido e3tra*do
de al&as ro)as# como nuevo a&ente solidificante- .l tra+a)o de
:och 'a citado tuvo la trascendental consecuencia de derri+ar
las ideas pleomorfistas, ' supuso la primera propuesta del
concepto de especie dentro del mundo +acteriano- .n 188>
Petri, un a'udante de :och, sustitu'% las en&orrosas
+ande)as de vidrio cu+iertas con campanas, usadas hasta
entonces para los cultivos s%lidos, por un sistema mane)a+le
de placas de cristal planas, $ue se conoce como ca)as de
Petri-
El desarrollo de los medios selectivos y de enriquecimiento fue una consecuencia de
las investigaciones llevadas a cabo por 6eijerincC y PinogradsCy entre *LLL y los primeros
aos del siglo $$, sobre bacterias implicadas en procesos biogeoqumicos y poseedoras de
caractersticas fisiolgicas distintivas 2quimioauttrofas, fijadoras de nitrgeno, etc.3. Estos
medios, donde se aplica a pequea escala el principio de seleccin natural, se disean de
forma que su composicin qumica definida favore'ca slo el crecimiento de ciertos tipos
fisiolgicos de microorganismos, !nicos capaces de usar ciertos nutrientes del medio.
5tra importante aportacin a este -perodo de cultivo. dentro del desarrollo de la
Microbiologa surgi del uso de medios diferenciales, en los que se manifiesta alg!n rasgo
bioqumico o metablico, lo que contribuye a la identificacin microbiana. Hue PArt'
quien, en *L=J, introdujo el uso de indicadores de pK, incorporados en los medios, lo cual
permita revelar la produccin de acidificaciones por fermentacin en ciertas bacterias.
Mientras tanto, en la ciudad de Nena se haba creado una atmsfera de progreso
donde confluan grandes naturalistas como KaecCel, 9trassburger o 0bb" interaccionando
con una pujante editorial especiali'ada en 6iologa y Medicina 2;ustav Hischer3 y con una
poderosa industria ptica y qumica. Estas influencias recprocas se plasmaron en
numerosos proyectos que reflejaban la efervescencia de las ciencias naturales tras la estela
de )arBin 2cfr. Nahn et al., *=L+3. #oncretamente, la industria ptica de 0bb" y Qeiss, que
se mantena en cone(in con la compaa vidriera 9chott, pudo satisfacer la necesidad de
7och de perfeccionar el microscopio compuesto, introduciendo lentes acrom1ticas y una
iluminacin inferior provista de condensador. El mismo 0bb" desarroll en *L>L el
objetivo de inmersin en aceite. Por otro lado, la industria qumica 609H, que por aquella
"poca se encontraba en pleno auge de patentes de nuevos colorantes, sumistr al laboratorio
de 7och una serie de derivados de anilina que tean las bacterias permitiendo su f1cil
visuali'acin al microscopio en frotis de tejidos infectados. En *L>+ #arl Peigert ti
bacterias con pirocarmn, un colorante que ya vena siendo usado desde haca unos aos en
estudios 'oolgicos. En aos sucesivos se fueron introduciendo el a'ul de metileno 27och,
*L>>3, la fuchsina, y el violeta cristal. En *LLJG*LLD Qiehl y :eelsen desarrollan su m"todo
de 1cidoGalcohol resistencia para teir Mycobacterium tuberculosis. En *LLF el patlogo
dan"s #hristian ;ram establece una tincin de contraste que permite distinguir dos tipos
bacterianos en funcin de sus reaccin diferencial de tincin y que, como se vera mucho
m1s tarde, reflejaba la e(istencia de dos grupos de bacterias con rasgos estructurales
distintivos. En *L=, Loeffler logra visuali'ar flagelos bacterianos por medio de su t"cnica
de impregnacin arg"ntica. #omo veremos m1s adelante, la misma industria de colorantes
alemana previa a la primera guerra mundial fue decisiva tambi"n para los comien'os de la
quimioterapia.
?luminaci%n del
microscopio, fruto de
la cola+oraci%n entre
:och ' A++e
@+)etivo de
inmersi%n, fruto de la cola+oraci%n entre
:och ' la ?ndustria %ptica Aarl Beiss
Estas innovaciones t"cnicas 2m"todos de cultivo, microscopa y tinciones3 fueron
fundamentales 2junto con los sistemas de esterili'acin abordados en el anterior apartado3
para la consolidacin de la Microbiologa como ciencia, permitiendo eliminar las grandes
dosis de especulacin que hasta entonces haban predominado.
2. EL PAPEL DE LOS MICROORGANISMOS EN
LAS ENFERMEDADES.
)urante el siglo $&$ la atencin de muchos naturalistas se haba dirigido hacia las
diversas formas de animales y plantas que vivan como par1sitos de otros organismos. Este
inter"s se redobl tras la publicacin de los libros de )arBin, estudi1ndose las numerosas
adaptaciones evolutivas que los distintos par1sitos haban adquirido en su peculiar estilo de
vida. 9in embargo, la adjudicacin de propiedades de par1sitos a los microorganismos vino
del campo m"dico y veterinario, al revalori'arse las ideas sobre el origen germinal de las
enfermedades infecciosas.
En *LD+ 0gostino 6assi 2*>>DG*L+?3 demostr que cierta enfermedad del gusano de
seda 2mal di segno3, que haba hecho su aparicin en Lombarda, se deba a un hongo
2Botrytis bassiana3. #uatro aos m1s tarde N.L. 9chRnlein descubri la asociacin de un
hongo con una enfermedad humana de la piel. En *LF, Kenle, de la escuela fisiolgica de
Nohannes MAller, plante la teora de que las enfermedades infecciosas est1n causadas por
seres vivos invisibles, pero de nuevo la confirmacin de estas ideas tuvo que esperar a que
la intervencin de Pasteur demostrara la e(istencia de microorganismos especficos
responsables de enfermedades.
Kacia mediados del siglo $&$ otra enfermedad infecciosa 2pebrina3 comen' a
diseminarse por los criaderos de gusano de seda de toda Europa, alcan'ando finalmente a
#hina y Napn. 0 instancias de su maestro Nean 6aptiste )umas, Pasteur acept el reto de
viajar a la Proven'a para investigar esta enfermedad que estaba dejando en la ruina a los
industriales sederos, a pesar de que nunca hasta entonces se haba enfrentado con un
problema de patologa. Es m1s que probable que Pasteur viera aqu la oportunidad de
confirmar si sus estudios previos sobre las fermentaciones podan tener una e(tensin hacia
los procesos fisiolgicos del hombre y de los animales. Es sorprendente que, al principio no
se mostrara dispuesto a aceptar la idea de que la pebrina fuera una enfermedad ocasionada
por un agente e(trao, creyendo durante los dos primeros aos que se trataba de
alteraciones meramente fisiolgicas. 4ras una serie de tanteos, y en medio de una intensa
actividad intelectual que le obligaba a repasar continuamente los e(perimentos y las
conclusiones e(tradas, inmerso en el drama personal de la muerte de su padre y de dos de
sus hijas en un corto lapso de tiempo, Pasteur llega finalmente, en *L?=, a identificar al
proto'oo Nosema bombycis como el responsable de la epidemia, y por medio de una serie
de medidas de control, "sta comien'a a remitir de modo espectacular.
La intervencin de bacterias como agentes especficos en la produccin de
enfermedades fue descubierta a ra' de una serie de investigaciones sobre el carbunco o
1ntra(, enfermedad que afecta a ganado y que puede transmitirse al hombre. #. )avaine,
entre *L?D y *L?L, encontr que en la sangre de vacas afectadas aparecan grandes
cantidades de microorganismos a los que llam bacteridios< adem1s, logr inducir la
enfermedad e(perimentalmente en vacas sanas, inocul1ndoles muestras de sangre infectada.
En *L>J el m"dico alem1n #.N. Eberth consigui aislar los bacilos filtrando sangre de
animales carbuncosos. Pero fue /obert 7och 2*LFDG*=*,3, que haba sido alumno de
Kenle, quien con su reciente t"cnica de cultivo puro logr, en *L>?, el primer aislamiento y
propagacin in vitro del bacilo del 1ntra( 2Bacillus anthracis3, consiguiendo las primeras
microfotografas sobre preparaciones secas, fijadas y teidas con a'ul de metileno. M1s
tarde 2*LL*3, 7och y sus colaboradores confirmaron que las esporas son formas
diferenciadas a partir de los bacilos, y m1s resistentes que "stos a una variedad de agentes.
Pero m1s fundamental fue su demostracin de que la enfermedad se poda transmitir
sucesivamente a ratones sanos inocul1ndoles bacilos en cultivo puro, obtenidos tras varias
transferencias en medios lquidos.
Este tipo de estrategias para demostrar el origen bacteriano de una enfermedad fue
llevado a una ulterior perfeccin en *LLJ, con la publicacin de -Die thiologie der
!uber"ulose, donde se comunica por primera ve' la aplicacin de los criterios que Kenle
haba postulado en *LF,. Estos criterios, que hoy van asociados al nombre de 7och, son los
siguientes@
*. El microorganismo debe de estar presente en todos los individuos enfermos.
J. El microorganismo debe poder aislarse del hospedador y ser crecido en cultivo puro.
D. La inoculacin del microorganismo crecido en cultivo puro a animales sanos debe
provocar la aparicin de sntomas especficos de la enfermedad en cuestin.
F. El microorganismo debe poder ser reaislado del hospedador infectado de forma
e(perimental.
Hue asimismo 7och quien demostr el principio de especificidad biolgica del
agente infeccioso@ cada enfermedad infecciosa especfica est1 causada por un tipo de
bacteria diferente. Estos trabajos de 7och abren definitivamente el campo de la
Microbiologa M"dica sobre firmes bases cientficas.
)urante las dos d"cadas siguientes la Microbiologa e(periment una aut"ntica edad
de oro, en la que se aislaron y caracteri'aron muchas bacterias patgenas. La 0lemania del
/eich, que a la sa'n se haba convertido en una potencia poltica y militar, se decidi a
apoyar la continuidad de los trabajos del equipo de 7och, dada su enorme importancia
social y econmica, creando un &nstituto de investigacin, siendo 7och su director en el
)epartamento de 9alud. )e esta forma, en la Escuela 0lemana se aislaron los agentes
productores del clera asi1tico 27och, *LLD3, de la difteria 2Loeffler, *LLF3, del t"tanos
2:icolaier, *LL+ y 7itasato, *LL=3, de la neumona 2HraenCel, *LL?3, de la meningitis
2Peichselbaun, *LL>3, de la peste 2Iersin, *L=F3, de la sfilis 29chaudinn y Koffman, *=,+3,
etc. &gualmente se pudieron desentraar los ciclos infectivos de agentes de enfermedades
tropicales no bacterianas que la potencia colonial se encontr en ultramar@ malaria
29chaudinn, *=,*G*=,D3, enfermedad del sueo 27och, *=,?3, peste vacuna africana
2debida al ingl"s 6ruce, *L=+G*L=>3, etc.
Por otro lado, la Escuela Hrancesa, nucleada en el &nstituto Pasteur, se concentr en
los estudios sobre los procesos infectivos, la inmunidad del hospedador, y la obtencin de
vacunas, sobre todo a ra' de la vacuna antirr1bica ensayada por Pasteur 2*LL+3,
contribuyendo al nacimiento de la &nmunologa.