Metodologa:

Para la extraccin de pigmentos vegetales

utilizamos dos plantas diferentes: Espinaca y
Borrachero (Brugmansia Candida Pers), a
continuacin se har una breve descripcin del
procedimiento realizado para los dos organismos.
Materiales:
2 vasos de precipitado de 250 mL .
Un vidrio reloj.
1 probeta de 100 mL.
Recipiente para bao de Mara.
Un embudo de separacin
Un matraz de fondo redondo.
Pipetas de 1, 5 y 10 mL.
Un gotero.
Papel filtro.
Un embudo de filtracin.
Hielo.
Placa calefactora.

Biolgico:

Hojas de espinaca.
Flores de Borrachero.

Reactivos:

Mezcla de metanol 90%, ter dietlico 10%.
Mezcla de metanol 70%, ter dietlico 30%.
Eter dietlico.
Eter de Petrleo.
Solucin saturada de NaCl.
NaCl al 10%

Procedimiento: (Espinaca)

Cortar en pequeos trozos una hoja de espinaca y
pesar en un vidrio reloj aproximadamente 2 g.
(Tener en cuenta que cada uno de los trozos debe
ir sin venas).

Luego colocarlas en un vaso de precipitado,
adicionar 50 mL de agua y dejar hervir por dos
minutos.

A continuacin, en un recipiente para bao de
mara colocar varios pedazos de hielo con agua y
sumergir el vaso de precipitado hasta que enfre.
Descartar el agua y dejar slo las hojas.

Extraer los pigmentos de las hojas, utilizando 50 mL
de la mezcla metanol 90% - ter dietlico 10%.
Calentar a bao de Mara por 5 minutos.


Retirar el agua de nuevo, y repetir la extraccin con
50 mL de la mezcla metano 70%- ter dietlico 30%.
Calentar a bao de Mara por 5 minutos.


Los extractos obtenidos en las dos anteriores
extracciones se deben mezclar en un embudo de
separacin y aadirles 50 mL de ter de petrleo.

Ahora, aadir 50 mL de solucin acuosa de NaCl y
agitar. Dejar separar las capas.

Espinacas:



Borrachero:



Cuando estn muy bien separadas, descartar la
capa inferior. Las dos porciones que quedan se
lavan con 50 mL de agua destilada, y la capa verde
superior se vierte en un matraz as:



En sta imagen podemos observar la extraccin de
las dos plantas (Espinaca y Borrachero
respectivamente).

El ltimo paso es realizar una mezcla de N-Propanol
al 0,5% en ter de petrleo, con el fin de
depositarla en dos vasos de precipitado y realizar la
respectiva cromatografa en capa fina. Para este
procedimiento se necesitan varios capilares y dos o
tres placas de capa fina. (Tambin se puede utilizar
papel filtro).


En cada una de las placas se siembran 4 puntos de
los extractos, se sumergen en un vaso de
precipitado con la mezcla de N-Propanol-ter de
petrleo, y se cubre con vinipel para la
cromatografa.

Finalmente la muestra corre y el resultado ser as:


.
Nota: El procedimiento mencionado se realiza para
la extraccin de los pigmentos de cada una de las
plantas por separado.