CATEDRA DE FISIOLOGIA Y FISICA BIOLOGICA

GUIA DE TRABAJOS PRACTICOS DE FISIOLOGIA TRABAJO PRACTICO N 4

LEY DE STARLING EN EL CORAZON DE SAPO

CORAZN
1.- OBJETIVOS DEL TRABAJO PRCTICO
Los alumnos al terminar el trabajo prctico, estarn en condiciones de:
a) Reconocer y utilizar el material correspondiente al trabajo prctico.
b) Utilizar animales de laboratorio
c) Planificar y ejecutar los siguientes modelos experimentales
1) Corazn perfundido, con el fin de evaluar regulacin heteromtrica.
2) Corazn aislado con el fin de evaluar regulacin de la frecuencia cardaca.
d) Expresar las conclusiones a que han arribado con los resultados obtenidos en los
modelos utilizados.
2.- OBSERVACIONES
El alumno debe conocer para realizar el trabajo prctico:
1) Las propiedades del corazn:
a. Automatismo
b. Contractilidad
c. Conductividad
d. Excitabilidad
2) Origen y conduccin de la despolarizacin en el corazn.
3) Mecanismo de despolarizacin y repolarizacin de las membranas en general y las
particularidades en el corazn.
4) Accin sobre las propiedades del corazn de:
a. Calcio
b. Acetilcolina
5) Respuesta mecnica del corazn a:
a. Despolarizacin iniciada en cualquier fibra cardaca (ley del todo o nada).
b. Cambio en la frecuencia de despolarizacin (fenmeno de la escalera).

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4.- DESARROLLO DEL TRABAJO PRCTICO

Corazn perfundido de sapo
Se sujeta el sapo haciendo pinza con la mano, formada de un lado por el pulgar y del otro
por el dedo medio. Esta pinza sujeta al animal por la columna vertebral, detrs de los
miembros anteriores, oprimiendo los flancos con los dedos.
Posteriormente se sujeta con la mano izquierda fuertemente sobre la mesa. El ndice libre
se lo desliza por la columna hasta percibir la interlnea de la articulacin occipito
atloidea, se deja el dedo marcndola con la ua. Se hunde en el punto, una aguja larga
exactamente en la lnea media. Se reconoce que la aguja ha tocado la mdula por los
movimientos convulsivos del animal. Se flexiona entonces la cabeza del animal llevando
la aguja hacia abajo, y se hace penetrar sta a lo largo del canal vertebral. Se sabe que
la aguja est dentro del canal porque se desliza fcilmente; provoca al avanzar
movimientos convulsivos y extensin de los miembros posteriores con evacuacin de
orina (irritacin medular). Cuando la destruccin medular es completa, el animal no
responde a los estmulos externos (pellizcar la pata), no tiene movimientos voluntarios e
involuntarios, presentando atona. Si existiesen fibrilaciones musculares, stas son
debidas a una incompleta destruccin medular.
Una vez desmedulado, el animal se fija a una plancha de corcho con el vientre hacia
arriba, mediante cuatro alfileres que se clavan uno en cada pata. Las patas tienen que
quedar lo ms estiradas posibles para que el animal quede bien fijado. Con una pinza
diente de ratn, se hace un pliegue en la piel del bajo vientre; en la lnea media y con una
tijera se abre un ojal, a partir de ste se sigue contando una lnea vertical hasta la parte
superior del esternn; se ampla este corte con cortes transversales a la altura de los
miembros, se separa la piel de los msculos.
Con una pinza diente de ratn se hace un pliegue en los msculos abdominales del bajo
vientre, pero no en la lnea media para cuidar la vena que pasa por all; se hace un ojal
con una tijera y se prolonga en lnea vertical hasta llegar al esternn, al que se separa de
los planos inferiores levantndolo con una pinza y cortando las inserciones musculares
que tenga hasta llegar a las clavculas, las que se cortarn verticalmente separando todo
el colgajo. Nos va a quedar en descubierto el corazn con el pericardio cubrindolo, con
una pinza y en forma muy cuidadosa se hace un pliegue en el pericardio, con una tijera
se abre un ojal y a travs de ste se contina un corte vertical de todo el pericardio.
Terminando esto, vamos a tener el corazn de sapo al descubierto.

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1. CONTRACTILIDAD
1.1. FUNDAMENTO DEL EXPERIMENTO
La contractilidad cardaca es una de las propiedades del corazn que ms vagamente se
define. Al contraerse el corazn, puede desarrollar fuerza (contraccin isovolmica) y/o
acortarse (eyeccin). Caracterizar contractilidad (o el inotropismo) en un corazn entero
es complicado, pero podemos hacer una aproximacin ligera si decimos que a mayor
fuerza desarrollada o a mayor acortamiento, mayor es la contractilidad miocrdica,
siempre que no se modifiquen, la presin arterial, la frecuencia cardaca y la longitud de
las fibras al final de la distole. Los mecanismos fisiolgicos por los cuales se regula la
fuerza contrctil del corazn, son: el mecanismo de Frank Starling y los cambios de la
contractilidad. El mecanismo de Frank Starling es el de mayor importancia para ajustar
la fuerza de contraccin latido a latido y se debe a aumentos de la fuerza de contraccin
cuando aumenta la longitud de la fibra al fin de la distole. Esto permite al corazn
expulsar toda la sangre que le llega durante la distole. Tambin se conoce con el
nombre de regulacin heteromtrica. Este mecanismo no implica mayor contractilidad, ya
que como vimos se cumple modificando la longitud de las fibras.
Cuando se debe ajustar la fuerza de contraccin en forma sostenida, el corazn modifica
la contractilidad, mecanismo conocido como regulacin homeomtrica.
Este mecanismo aumentar el inotropismo por permitir al corazn desarrollar ms fuerza
o acortarse ms, ante igual frecuencia cardaca, igual presin artica y la misma longitud
de las fibras a fin de distole.
Una de las intervenciones inotrpicas positivas ms conocidas, la constituye el aumento
del calcio del lquido extracelular.
En un corazn de sapo perfundido se verificar la regulacin de la fuerza de contraccin
por el mecanismo de Frank Starling y variaciones de la contractilidad producidas por
medio de un aumento de calcio extracelular.
1.2. MATERIAL NECESARIO
1 Sapo desmedulado y con el corazn descubierto segn tcnica anterior
1 pinza de diente de ratn
1 tijera de punta fina
1 jeringa de 20 ml. unida a un catter de aproximadamente 60 cm. de longitud
1 soporte graduado con abrazaderas
1 catter corto de 5 cm. de longitud
1 probeta graduada de 25 ml.

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1.3. TECNICA
a) Se preparan 3 vasos de precipitado con las siguientes soluciones:
1) Ringer batracio 100 ml con calcio 2mM
2) Ringer batracio 100 ml + 300 l de Cl2 Ca 2 M
b) Se localiza la vena cava inferior tirando de la grasa amarilla subheptica, se diseca
cuidadosamente (es muy frgil), se pasa por debajo de ella dos hilos: con el inferior se
liga el extremo distal de vena. Con una tijera de punta fina se hace un ojal pequeo en la
vena por donde se introduce el catter largo unido al recipiente hasta la aurcula.
ATENCIN! Previo a la introduccin del catter, llenar el recipiente con Ringer
batracio, verificando que el catter no tenga aire y que el recipiente se encuentre a
5 cm., por encima del sapo, fijado a la abrazadera del soporte.
c) Se disecan cuidadosamente las dos aortas, por debajo de una de ellas se pasa un hilo
y por debajo de la otra dos hilos. En la aorta que se han colocado dos hilos, uno de ellos
se liga lo ms distalmente posible, con una tijera de punta fina se hace un ojal y se
introduce el catter corto, que se fija con el otro hilo. Se liga la aorta en la que se ha
pasado un hilo para desviar todo el flujo hacia la aorta cateterizada.
d) En este momento el lquido del recipiente perfunde el corazn, por va de la vena cava
y se recupera en su totalidad por la aorta cateterizada.
1.4. DESARROLLO
1) Mecanismo de Frank Starling
a) Dejando estabilizar la preparacin, se determinar el volumen minuto cardaco,
recogiendo el lquido de perfusin de la aorta cateterizada durante 30 y
multiplicndolo por dos para obtener el resultado en ml/min. El recipiente deber
colocarse en la marca 0 de la escala del soporte, con solucin de Ringer batracio.
b) Se aumentar la altura del reservorio, llevndolo a las marcas siguientes (1,2,3),
determinando en cada situacin el volumen minuto.
c) Se proceder de igual forma con solucin de Ringer batracio con alto Ca2+
d) Perfundido con la solucin de alto Ca2+ y realizado el experimento, se volver a
colocar el Ringer batracio normal en el reservorio, dejando prefundir hasta volver
aproximadamente al volumen minuto control.

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RESULTADOS
a) Ringer batracio
Altura
0
1
2
3
Frecuencia cardaca durante la prueba:

Volumen latido Volumen minuto

b) Ringer batracio + Cl2Ca

Altura

Volumen latido Volumen minuto

0
1
2
3

1.5. APLICACIN
Realizar una curva de funcin ventricular. En abscisas se colocar la altura del reservorio,
que podra equivaler a la presin diastlica final ventricular. Esta presin distlica final
puede relacionarse con la longitud de la fibra a fin de distole. En ordenadas se pondrn
los valores del volumen latido que pueden corresponder al trabajo latido, dado que se
mantienen constantes la presin arterial y la frecuencia cardaca.
Observar el desplazamiento de la curva, cuando se ejerce sobre el corazn un efecto
inotrpico positivo (con aumento de la concentracin Ca2+ en el medio extracelular).
Al mantener el retorno constante (la altura del reservorio no vara) junto a la frecuencia y
la presin, observe como la administracin de Ca 2+ provoca un aumento del volumen
minuto, lo que correspondera a un efecto inotrpico positivo.

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2. AUTOMATISMO Y CONDUCTIVIDAD
2.1. Fundamentos del experimento
El corazn tiene tejido especializado que es autoexcitable, es decir, que hay grupos de
clulas cardacas (Ndulos sinusal, Aurculoventricular y Sistema de conduccin), que
tienen la propiedad de despolarizarse espontneamente.
Las fibras especializadas se diferencian de las contrctiles principalmente en que durante
la fase 4 se produce una despolarizacin espontnea hasta llegar al potencial umbral,
momento en que se genera un nuevo potencial de accin.
Los cambios de temperatura modifican esta actividad espontnea de las fibras
especializadas.
La actividad espontnea de las fibras especializadas se encuentra a su vez modificadas
por el Sistema Nervioso Autnomo (simptico y parasimptico); el simptico, cuyos
mediadores qumicos son la adrenalina y la noradrenalina, y el parasimptico cuyo
medidor qumico es la acetilcolina.
Una vez generado el estmulo, este se propaga a travs de las vas especializadas en la
conduccin del mismo. A nivel del ndulo aurculoventricular, la velocidad de conduccin
se retarda para permitir la correcta secuencia de contraccin auricular y ventricular. La
conduccin auricular toma el miocardio comn y algunas fibras especializadas, en tanto
que superado el retraso del ndulo aurculo ventricular, el impulso vuelve a acelerarse
para recorrer el haz de His, sus ramas y la red de Purkinje, arribando al miocardio comn.
Utilizando un corazn aislado de sapo se verificar el automatismo cardaco y se
evaluar su regulacin por temperatura, adrenalina y acetilcolina.

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SEMINARIO DE FISIOLOGA N4
Ciclo Cardaco
Conocimientos necesarios:
Ciclo cardaco: definicin y descripcin de sus fases
Presin sangunea: Variaciones de la misma durante el ciclo cardaco, en aurculas,
ventrculos y aorta (curvas de presin).
Cambios del volumen ventricular durante el ciclo cardaco (curva de volumen)
Cuestionario:
1) Qu entiende por ciclo cardaco? Nombre sus fases.
2) Defina el concepto de presin sangunea y explique como hara para registrar las
variaciones de presin durante el ciclo cardaco, en aurculas y ventrculos.
3) Detalle cada uno de los accidentes aparecidos en esos registros.
4) Existen diferencias entre las curvas de la presin registradas en cavidades derechas
respecto a las cavidades izquierdas?
5) Explique el porqu de las variaciones de volumen ventricular registradas a lo largo del
ciclo cardaco.
6) Qu importancia tiene la contraccin auricular en el lleno ventricular?
7) Defina el concepto de volumen diastlico final, volumen latido, volumen residual, e
ndice cardaco.
8) Cules ruidos cardacos conoce? Explique la gnesis de los mismos.
9) Slo con una curva de presin intraventricular se puede determinar el momento de
apertura de las vlvulas semilunares?
10) Detenga imaginariamente la actividad cardaca en una fase del ciclo (elija una
durante la sstole y otra durante la distole), y describa qu ocurre en ese momento con
la presin en las diferentes cavidades, el volumen ventricular y los ruidos cardacos.