Trabajo Introduccion

UNIVERSIDAD AUTONOMA BENITO JUAREZ DE OAXACA
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

FITOQUIMICA

IDENTIFICACION Y CARACTERIZACION DE UNA ESPECIE VEGETAL ENDEMICA DE OAXACA | LIC.QUIMICO
FARMACEUTICOBIOLOGO

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INTRODUCCION
El conocimiento y conservacin de los recursos biolgicos de Mxico son de
inters relevante porque representan sus principales bienes y servicios. La riqueza
florstica de Mxico es muy elevada; se estima que el nmero probable de
especies de plantas oscila entre 25,000 y 30,000, de las cuales cerca del 60% son
endmicas (Rzedowski, 1998). La alarmante y creciente modificacin de las
comunidades naturales hace necesario un inventario biolgico lo ms completo
posible, a corto plazo (Dirzo y Raven, 1994), y la taxonoma vegetal es
fundamental en la catalogacin de esta biodiversidad (Chiang, 1989; Dvila y
Sosa, 1994).
Oaxaca cuenta con una inmensa y an poco estudiada y sabiamente aprovechada
diversidad de especies vegetales, la investigacin en plantas, as como la
utilizacin de los recursos del medio ambiente bajo condiciones de racionalidad
(mnimo costo y alto grado de satisfaccin social), se han convertido, actualmente,
en una premisa fundamental que debe ser considerada para orientar la
incorporacin sistemtica de los conocimientos cientficos y tecnolgicos a las
actividades econmicas, sociales y culturales. No obstante, a pesar de la gran
utilizacin de las plantas medicinales por la poblacin, cada vez mayor, pocas de
ellas han sido estudiadas siguiendo mtodos cientficos vlidos y atendiendo a las
normas ticas definidas internacionalmente. Pues, si bien el uso popular es un
indicador importante, no es garanta de la actividad teraputica, existiendo,
adems, factores muy importantes como son las variaciones ecolgicas, por las
cuales una misma especie puede presentar concentraciones diferentes de los
mismos principios activos, debido a que el metabolismo secundario de los
vegetales superiores es responsable de la sntesis de sustancias qumicas, con
poca accin, del propio vegetal, aunque orientadas por las caractersticas
genticas de las plantas. La sntesis qumica de estas sustancias, es controlada
por factores del ecosistema (luz, calor, temperatura, humedad y suelo) siendo
importante reconocer que, muchas veces, no es posible encontrar la misma
proporcin relativa de esos constituyentes en las mismas especies recogidas en
pocas y lugares diferentes (CYTED, 2000; Ibez, 2002).
Asimismo, es necesario comprobar el potencial de toxicidad de una planta para su
posible aceptacin como medicamento, adems de la garanta de su efecto
especfico, evaluando su relacin riesgo/beneficio, en la especie humana,
siguiendo las normas ticas. (Ministerio de Salud Pblica de Cuba, 1993; Comitee
of the European Communities, 1992). Las tcnicas cientficas modernas permiten
la evaluacin adecuada de los metabilitos precentes en las plantas, en la especie
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humana. De modo general, los criterios son extensos, pero permiten obtener
resultados cuantificables, eliminando los falsos positivos o falsos negativos.
La Fitoterapia es el tratamiento mdico con plantas o productos vegetales no
purificados, como por ejemplo: el uso de la corteza de quina usada en polvo o en
infusin, comparada con el sulfato de quinina y los derivados sintticos de esta
molcula. En el primer caso, hay el uso basado en la observacin de causa-efecto
de los productos de la corteza, en el segundo es la aplicacin de una molcula
antiparasitaria especfica derivada de su hallazgo en la corteza del rbol de la
Quina. En la actualidad hay dos formas de usar las plantas. Una es la tradicional o
folklrica, que sigue las lneas de la etnografa. La otra es el uso cientfico que se
basa en los caminos usuales de la experimentacin biolgica, siendo la seguridad
de principios activos, presentes en las plantas, de vital importancia para su
posterior uso en la clnica; por lo tanto, los valores obtenidos en el ensayo
toxicolgico son referenciales, para establecer la inocuidad de los principios
activos presentes en la planta, extracto o fraccin estudiada.
Se han desarrollado una serie de mtodos para la deteccin preliminar de los
diferentes constituyentes qumicos, basados en la extraccin de estos con
solventes apropiados y en la aplicacin de pruebas de coloracin.
El anlisis fitoqumico tiene como objetivo determinar los metabolitos secundarios
presentes en la especie vegetal a estudiar, por ejemplo en las plantas medicinales,
aplicando para ello una serie de tcnicas de extraccin, de separacin y
purificacin y de determinacin estructural de los compuestos presentes en las
plantas.
Las especies vegetales del gnero Solanum, pertenecientes a la familia Solancea
, han sido objeto de un gran nmero de investigaciones fitoqumicas, en diferentes
partes del mundo [Wu, 2004]. Estos estudios han revelado que sus extractos y
presentan diversas actividades biolgicas, entre las cuales figuran: propiedades
analgsicas, desinflamatorias y desinfectantes [Otero, 2000; Wu, 2004]. Esto se
debe seguramente a la amplia variedad de compuestos presentes en las especies
de este gnero.
Se realizo un estudio para la identificacin y caracterizacin de la planta Solanum
verbascifolium L., el cual comprendi desde su recoleccin en la localidad de
hasta su procesamiento en el laboratorio de Fitoqumica perteneciente a la
Facultad de Ciencias Qumicas, en la Universidad Autnoma Benito Jurez de
Oaxaca.
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Solanum verbascifolium L. es un arbusto de 2 m o ms de altura, con el tallo ms
o menos grueso y ramas que tienen pelillos lanoso-estrellado. Sus hojas son ms
anchas en la base y ms angostas en la punta, con el haz y el envs
aterciopelados al tacto, de color verde. Tiene flores de color morado o blanco y los
frutos son globosos y amarillos. Es originaria del sur de Florida a Centroamrica,
est presente en climas clido, semiclido y templado, desde el nivel del mar
hasta los 1865m. Asociada a vegetacin perturbada de bosques tropicales y
templados. (Atlas de las Plantas de la Medicina Tradicional Mexicana).
El estudio comprendi inicialmente un proceso de colecta y herborizado
respetando y tomando como lnea base los parmetros principales para esta
actividad.
Para la Botnica, las tcnicas de colecta y herborizacin son una herramienta
fundamental para la obtencin de muestras de plantas, que al terminar su proceso
de trabajo son colocadas en un herbario. Un herbario es una coleccin de plantas
secas debidamente preparadas y usualmente montadas llevando una etiqueta
donde se anotan datos especficos del ejemplar.
Dado que el material vegetal es clasificado de acuerdo a sus caractersticas
sensoriales, macroscpicas y microscpicas; se realizo un proceso denominado
Diafanizado que permite una mejor visualizacin de tejidos celulares como pared
celular, cristales, etc., de esta manera se identifico caractersticas microscpicas
esenciales y distintivas pertenecientes a este espcimen, esto es la forma de sus
tricomas, agrupacin de estomas y presencia de componentes como oxalatos y
almidones; componentes que le brindan una identidad especifica y que permite
diferenciarla de otras plantas que podran ser pertenecientes a su misma familia.
La transparentacin o diafanizado consiste en hacer translucidos los tejidos por
medio de la aplicacin de algn agente aclarante, provocando la eliminacin de
pigmentos y/o algunas otras estructuras. Es til para estudiar la anatoma
vascular de los rganos vegetales, tambin para elucidar la organizacin
tridimensional de los rganos. Los aclarantes son mezclas que degradan diversos
compuestos, como pigmentos, contenidos celulares, etcetera, y se tornan ms
transparentes los rganos enteros de una planta o parte de ellos. Con este
tratamiento, muchas estructuras celulares se eliminan y el material deja de ser
adecuado para otros estudios. El tiempo de aplicacin de los aclarantes requieren
atencin, porque estos pueden hidrolizar o macerar parcial o totalmente los
tejidos. El mtodo de diafanizacion nos sirve para la identificacin de una especie
de manera microscpica. Hay diferentes mtodos de diafanizacion existe el
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mtodo de diafanizacin de Sorensen este nos permite observar las
caractersticas histolgicas de la muestra, de tal manera de poder compararla con
los patrones ya existentes, y el mtodo que utilizamos nosotros fue el mtodo de
Dizeo de Strittmater este nos permite la clarificacin del material vegetal.
Posterio a este proceso se realizaron tcnicas para la identificacin de estomas,
tricomas, presencia de cristales y almidon.
Los tricomas son apndices epidrmicos con diversa forma, estructura y funcin.
Su nombre proviene del griego trichos, que significa cabellera. Pueden estar en
cualquier rgano de la planta, pueden persistir durante toda la vida de esos
rganos o ser efmeros. Las clulas pueden permanecer vivas o perder el
protoplasto; hay varios tipos de tricomas en la misma planta, y varan entre
distintas especies. Son tiles en taxonoma, para caracterizar especies, gneros o
a veces grupos ms grandes.
Algunas especies de plantas tienen inclusiones celulares que varan en su
composicin qumica. Almidones, taninos, cristales de slice, oxalatos o
carbonatos son algunos ejemplos. Los cristales de oxalato de calcio mono y
dihidratado (CaC2O4H2O, CaC2O42H2O) y cuerpos de slice (SiO2), se
consideran como el material inorgnico ms comn presente en tejidos de
diversos rganos vegetales.
Existen mltiples hiptesis respecto a la formacin de cristales como depsitos
celulares, aunque la mayora de los autores coinciden en que dicha formacin es
un proceso intracelular altamente controlado e importante al influir en funciones
que son vitales en el organismo vegetal, tales como crecimiento, soporte
mecnico, defensa contra agentes depredadores, balance inico, proteccin
contra excesiva radiacin solar, entre otras. Los cristales varan en forma, tamao,
composicin y distribucin, por ello tambin son importantes en estudios
taxonmicos de especies de plantas. La ultraestructura, qumica o composicin y
morfologa de cristales ha sido documentada empleando procedimientos que
incluyen diversos tipos de microscopa, espectroscopa, difraccin de rayos X, etc.
De igual forma se someti a procesos cromatograficos para la separacin e
identificacin de procesos, estos fueron cromatografa en capa fina y de columna.
Las cromatografas son un grupo de tcnicas de separacin selectiva de
molculas, en las que los componentes de una mezcla compleja de componentes
pueden ser identificados y/o purificados. Existen varios tipos de cromatografas,
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segn los criterios que se usan para hacer los anlisis, pero todas consisten de
una fase estacionaria y una mvil.
En la cromatografa de columna las molculas de una mezcla son separadas en
base a la afinidad de las molculas por la fase estacionaria o por la fase mvil. Si
una molcula A tiene ms afinidad por la fase estacionaria que la B, B bajar ms
rpido que A. Existen muchos tipos de cromatografa de columna.
La cromatografa de capa fina es un procedimiento que se utiliza para separar
molculas relativamente pequeas. En la biologa celular se utiliza frecuentemente
para separar azcares simples, lpidos, aminocidos, nucletidos, metabolitos, y
ocacionalmente para separar cadenas cortas de polipptidos y cidos nucleicos.
Al igual que otras cromatografas, consiste de una fase estacionaria y una fase
mvil y el principio es el mismo: la sustancia de inters se adherir a la fase
estacionaria o se mover con la fase mvil, viajando una distancia que es
inversamente proporcional a la afinidad por la fase estacionaria.
La fase estacionaria puede ser variada. Puede ser de papel, de celulosa o de un
gel de silicato (vidrio molido bien fino) unido a una superficie slida (una placa de
vidrio, aluminio, plstico o papel). Esta superficie slida puede ser rgida o flexible.
El tipo de fase estacionaria que se utilice en un experimento depender del tipo de
molculas que se quieran separar. Incluso vienen algunas placas con indicadores
fluorescentes. La fase estacionaria consiste de un solvente que puede ser agua,
un solvente orgnico o una mezcla de ambos.
Y como punto final se realizo una marcha fitoqumica, esto fue la identificacin y
extraccin de metabolitos contenidos en la planta en distintos tipos de solventes.
La extraccin es un proceso de transferencia de materia. Los mtodos de
extraccin implican el tratamiento del material vegetal con el disolvente adecuado,
que solubilice dentro de lo posible, nicamente el principio activo deseado. Una
vez obtenido el extracto crudo habr que separar los distintos grupos fitoqumicos
presentes en l, es decir realizar un fraccionamiento. Para ello se recurre a
distintos procedimientos: particin, precipitacin, variacin de pH, cristalizacin,
destilacin, sublimacin, cromatografa, reacciones colorimetreicas.
En general este trabajo tiene la finalidad de identificar y caracterizar una especie
vegetal endmica de nuestro estado (Oaxaca, Oax.), para poder brindar esta
informacin esencial a la poblacin y tengan una idea ms amplia de los
componentes y usos que se le pueden atribuir a este espcimen que es, ha sido y
seguir siendo de uso popular.
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OBJETIVOS
Objetivo General
Identificar y Caracterizar una planta endmica del estado para poder brindar
conocimientos bsicos acerca de este espcimen especifico.

Objetivos especficos

Realizar los aspectos bsicos del anlisis fitoqumico que permitan explicar
algunas propiedades de la planta.

Desarrollar las tcnicas de colecta y herborizacin.

Conocer las plantas mas comunes de nuestra localidad.

Desarrollar la tcnica de Dizeo de Strittmater (diafanizado) para permitir la
clarificacin del material vegetal.

Reconocer caractersticas especficas a travs de una marcha que
involucra pruebas microscpicas.

Realizar tcnicas cromatografcas para separar componentes e identificar
una muestra vegetal. (Determinar la composicin de una mezcla de
aminocidos.)

Identificar los principales metabolitos de las planta.

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MARCO REFERENCIAL
El estudio sistemtico de una droga vegetal de la que se conocen usos populares
o descripciones de toxicidad se puede realizar desde diferentes enfoques:
etnofarmacognstico, farmacolgico, microbiolgico, toxicolgico y fitoqumico.
Este ltimo tiene como finalidad aislar e identificar los diferentes tipos de
compuestos que biosintetiza la planta (los que podrn tener o no alguna actividad
o toxicidad), y recibe el nombre de screening fitoqumico, tamizaje fitoqumico,
marcha fitoqumica o estudio fitoqumico sistemtico.
.Los vegetales en general tienen su importancia en diferentes campos, por
ejemplo; como fuente de Oxigeno y energticos, adems de ser uno de los
recursos naturales ms utilizados por el hombre como lo son en plantas
alimenticias, medicinales, energticas, ornamentales, para la construccin entre
otras.
Tambin son importantes por los estudios cientficos que la Botnica ha realizado
con ellas. Se tiene referencia que nuestros ancestros, tenan una clasificacin muy
avanzada de los vegetales y comercializaban las mismas en las grandes plazas de
las regiones donde vivan e influenciaban.
En este trabajo se procedi primeramente a la colecta del espcimen a estudiar
siguiendo el protocolo respectivo para la colecta y herborizacin.
Preparacin de un Ejemplar de Herbario
Pasos para que una planta llegue a formar parte de una coleccin de herbario.
a. Colecta
b. Prensado y Secado
c. Montaje
d. Identificacin
e. Etiquetado
f. Encamisado
g. Entrada al Herbario
a.- Colecta. Elegir un lugar a donde se piensa ir a colectar. Aqu necesita
llevar libreta de campo, bolsas de plstico, tijeras de podar y lpiz para hacer
anotaciones. Dependiendo de las caractersticas de las plantas, por ejemplo: si
son leosas o herbceas. Se toma la muestra de la planta con las
caractersticas que se necesitan para una buena muestra de herbario. Todas
las muestras se colocan al interior de una bolsa de plstico, en una zona
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adecuada para trabajar las muestras se sacan de las bolsas. Se anotan los
datos de la colecta, como la fecha, condiciones del sitio de colecta, condiciones
del tiempo imperante en el momento de la colecta y si se conocen las plantas
que estn al rededor se anotan los nombres. Color de la flor si la tiene y si se
considera la abundancia.
De cada planta se cortan de tres a cuatro ejemplares, estos forman una colecta
y se le asigna un nmero de colecta y as sucesivamente hasta completar
todas aquellas plantas colectadas. Para tener un mejor control de las colectas,
el nmero de colecta se anota en la libreta de campo y por lo mismo en las
hojas de papel peridico donde se colocaron las plantas para secarse. Si lo
anterior no es posible, se anotan en el papel peridico la fecha y el sitio de
colecta adems del nombre comn que le dan a la planta en la comunidad.
b.- Prensado y secado. Se coloca la muestra colectada, con cuidado entre
las hojas de papel peridico. Asegurndose que las hojas de la planta estn
acomodadas en un sentido haz-enves, para poder observar las formas de las
hojas por ambos lados. A continuacin se coloca el papel peridico sobre el
cartn, cubrir con papel peridico la muestra, luego con cartn y as
sucesivamente hasta prensar todas las hojas (fig. 1). Posteriormente colocar
los cartones entre dos rejas de madera resistente y se amarra fuertemente con
un cordn (figuras 2 y 3). De esta manera ya se tiene lista la planta toxica
prensada y
se coloca en la secadora, donde se le proporciona calor a la prensa y en el
transcurso de tres a cuatro das se revisa la prensa para determinar cules
muestras de plantas estn secas.

Figura 1: Material que se usa para el secado de una planta. El espcimen debe
extenderse y arreglarse correctamente y llevar un rtulo de identificacin. El cartn
corrugado permite el paso del aire por su interior, acelerando la prdida de
humedad.

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Figura 2. La prensa porttil. Las correas sirven para cerrar y dar presin a la
prensa.

Figura 3. Prensa botnica comn, diseada para usarse en el campo.

Figura 4. Dispositivo de laboratorio, til para el secado de varias plantas
prensadas a la vez.

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Figura 5. Prensa botnica diseada para usarse en el laboratorio. Permite una
presin ms uniforme que la de la prensa de campo; pero el secado de las plantas
depende bsicamente de una buena fuente de calor.

NOTA: Las que an no se secan, se sujetan nuevamente y se meten a la
secadora par que al siguiente da se revise hasta completar que todas las plantas
estn secas.

c.- Montaje. Cuando la planta ya se encuentra seca totalmente se coloca
sobre una cartulina blanca y se sujeta con puntadas de hilo blanco. Sin que se
vaya a romper la muestra ya que en este momento es muy quebradiza. Tambin
se puede pegar con resistol u potro pegamento como el silicn.

d.- Identificacin. Las plantas generalmente tienen dos nombres. Un libre o
comn y un nombre cientfico. El nombre comn es el que le otorga la vox populli y
es del dominio pblico, adems una planta puede tener mas de un nombre comn
en diferentes comunidades. El nombre cientfico es el que le asigne un taxnomo,
por lo general un bilogo especialista en el estudio y clasificacin de las plantas es
el que clasifica la planta especificando la Familia, genero y especie. El nombre
cientfico identifica a la planta y con este es conocida en todo el mundo.

e.- Etiquetado. Al identificar la planta se hace necesario elaborar una
etiqueta de herbario, en esta se escriben los datos que se anotaron en la libreta de
campo cuando se realizo la colecta.
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Familia
Nombre cientfico
Nombre comn
Fecha de colecta
Sitio de colecta
Fenologa de la planta
Abundancia
Caractersticas
Nombre de quin colecto y numero de colecta
Nombre de quin identifico
Usos. Medicinal, alimento, cerca viva, ornamental entre otros
Forma de uso
La etiqueta se coloca y pega en la parte inferior esquina izquierda
f.- Encamisado. Despus del montaje y etiquetado a la planta colectada se
le llama ejemplar de herbario. El cual se protege con papel de china, este debe
cubrir por completo el ejemplar para evitar que se deteriore por el manejo de
consulta y estudio.
g.- Entrada al herbario. Previo tratamiento de fumigacin es colocado en la
coleccin del herbario. El principal herbario en Mxico es conocido como
Herbario Nacional y sus siglas son MEXU y en este se tienen concentradas la
mayora de las plantas que existen en Mxico.

Figura 6. Ejemplar de herbario. La planta desecada est fijada a la cartulina con
delgadas tiras de papel engomado.
Posteriormente se proceso el espcimen vegetal en el laboratorio debido a que se
tena que realizar pruebas para su identificacin.
La determinacin taxonmica no puede basarse slo en la morfologa floral, ya
que los caracteres son inconstantes y conectan con formas intermedias, por lo que
un estudio anatmico a nivel de raz, tallo y hoja, as como la morfologa del polen
ayudarn a una identificacin ms precisa.
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La primera tcnica desarrollada fue el Diafanizado, mtodo que se basa en el
propuesto por Stittmatter y Dizeo, (1973) y se aplic a la mayora de las especies
latifoliadas herbceas (hierbas).
El diafanizado permiti desarrollar las tcnicas de identificacin microscpicas y
caractersticas de la planta, para el reconocimiento en drogas no pulverizadas
(enteras o troceadas) es generalmente suficiente el control de caractersticas
organolpticas y botnicas macroscpicas para caracterizar (identificar) la droga,
mientras que en drogas pulverizadas suele ser imprescindible el uso de mtodos
microscpicos.
Caracteres morfolgicos: Forma, tamao, color y forma de las hojas
Caracteres organolpticos: olor, sabor, color.
estudio macro morfolgico no siempre es posible ya que con frecuencia la
droga a reconocer llega ya pulverizada.
Anlisis microscpico:elementos celulares como pelos, vasos, esclereidas,
estomas, y acelulares, como cristales y granos de almidn. Con ellos se
puede confirmar la identidad de las drogas cuando los anlisis
macroscpicos han sido insuficientes. Tambin son necesarios para
descartar la presencia de adulteraciones.
Cortes histolgicos. No se puede aplicar siempre, solo en droga entera o
fragmentos, pero no en droga pulverizada. En ellos se pueden observar
contenidos celulares, estructuras. Drogas pulverizadas. Las caractersticas
organolpticas y macroscpicas son insuficientes para su identificacin, por lo que
se hace necesario el estudio microscpico. Se observan los contenidos celulares
(granos de fcula y aleurona, cristales, grasas y esencias), los elementos celulares
(vasos, traqueidas, clulas epidrmicas, estomas, parnquima, colnquima, sber,
esclernquima, clulas ptreas, fibras y pelos o tricomas).
Oxalato clcico: Se pueden presentar de diferentes formas segn la droga de que
se trate. Las formas pueden ser:
Aciculares: Se denominan RAFIDIOS y pueden encontrarse:
Aislados Agrupados ,Paquetes, Estrella ,Haz
Prismticos: de formas muy diversas
Cristales agrupados en forma de roseta: DRUSAS
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Cristales arenceos.
Carbonato clcico: se denominan cistolitos, y se encuentran en la base
ensanchada de ciertos pelos caractersticos de algunas especies vegetales
(Camo Indiano).
Granos de almidn (fculas)
Para estudiar el almidn es necesaria la observacin de las siguientes
Caractersticas:
1. Frecuencia: abundantes, poco abundantes o escasos
2. Granos simples o compuestos, aislados o agrupados
3. Forma: Lenticular, elptica, polidrica, ovoide...
4. Tamao de los granos: pequeo, medio, grande, variable...
5. Hilo:
Posicin
Cntrico
Excntrico

Forma
Lineal
Puntiforme
Estrellado
4. Zonas de hidratacin: Son visibles en algunos casos y otros no.
Si los granos son escasos o pequeos, se puede facilitar su visin con agua de
lodo, que los teir de azul si los hubiera.
Clulas epidrmicas
Las plantas herbceas y en general todos los tejidos jvenes, que no
experimentan un desarrollo secundario, tienen su superficie constituida por clulas
de epidermis y su forma vara segn las distintas especies.
Existen distintos tipos de epidermis y entre ellas destacaremos:
Epidermis de clulas poligonales, con paredes finas, rectas o
ligeramente sinuosas
Epidermis con grandes clulas de paredes finas y contorno sinuoso
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Epidermis formada por clulas rectangulares con paredes
irregularmente engrosadas o arrosariadas
Epidermis de clulas con paredes ligeramente sinuosas y cutcula
fuertemente estriada.
En la epidermis es frecuente que se observen ESTOMAS: aberturas de la
epidermis rodeadas por dos clulas oclusivas, y en muchos casos dos o ms
clulas adyacentes de epidermis (clulas anexas) suelen estar rodeando a las
clulas oclusivas del estoma.
Se pueden clasificar en 4 tipos:
A. Anomocitico: Las clulas epidrmicas que rodean al estoma, no presentan
una disposicin particular.

B. Anisocitico: Poseen tres clulas epidrmicas alrededor del estoma y una de
ellas es ms pequea que las otras dos.

C. Paracitico: Con una o ms clulas epidrmicas a cada lado del estoma, en
posicin paralela al eje longitudinal del mismo.

D. Diacitico: clulas epidrmicas que envuelven al estoma y su membrana
comn forman ngulos rectos con el eje longitudinal del mismo.
Clulas ptreas:
Son clulas muertas de parnquima con formas muy variadas y con las paredes
engrosadas lignificadas. Pueden encontrarse aisladas o en grupos.
Pelos
Se presentan en clulas epidrmicas y tienen estructuras y formas muy diversas.
Poseen un gran valor de diagnstico en el anlisis de drogas pulverizadas.
Posteriormente se desarrollaron dos tcnicas cromatografcas importantes para
separacin de componentes elementales estas fueron: cromatografa en capa fina
y de columna.
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Estas tcnicas han sido las ms desarrollada en los ltimos aos, empleada en la
qumica analtica. Su empleo presenta notables ventajas:
1. Es sencilla, rpida y no requiere aparatos complicados.
2. Abarca escalas microanalticas hasta escalas industriales.
3. Es una tcnica poca o nada destructiva que puede aplicarse a sustancias
lbiles.
Constituye una metodologa imprescindible en estudios bioqumicos, toxicolgicos,
estructurales, etc. No solo utilizando como tcnica de separacin e identificacin,
sino como mtodo preparatorio, incluso a escalas industriales.
La palabra cromatografa proviene de kromatos, color y graphos, escrito. Una de
las definiciones de la tcnica ms correcta seria, la dada por Keulemans:
"Mtodo fsico de separacin en el que los componentes a separar se distribuyen
en dos fases, una de las cuales constituye un hecho estacionario de gran
desarrollo superficial y la otra un fluido que pasa a traves o a lo largo del lecho
estacionario (fase mvil)."
En todo proceso cromatografico la fase mvil es la que provoca un movimiento de
las distintas especias para que abandonen el medio soporte, y la fase estacionaria
la que suministra el efecto retardador, selectivo para cada componente, que
condiciona que cada uno de ellos se desplace con distinta velocidad.

El estudio basado en una marcha fitoqumica consiste en efectuar una extraccin
(del material previamente colectado, secado y molido) que permita obtener la
mayor parte de los constituyentes qumicos (extracto total o crudo o bruto). Por
ello se debe utilizar un solvente universal que solubilice (y cosolubilice) la mayora
de los compuestos, siendo los ms utilizados el metanol y el etanol.
Posteriormente el extracto total se fracciona mediante un cambio de pH y particin
con solvente de menor polaridad (generalmente cloroformo), obtenindose una
serie de fracciones sobre las que se realizan ensayos que permitirn obtener
datos sobre los grupos fitoqumicos presentes.

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Requisitos de la marcha
1.- Debe ser simple y rpida.
2.- Debe ser reproducible.
3.- Utilizar equipos sencillos.
4.- Ser relativamente sensible y especfica para la/s sustancias a detectar.
5.- Podr dar informacin adicional sobre los grupos detectados.
6.- Ser cualitativa y semicuantitativa.
Los datos positivos obtenidos en general no ofrecen dudas, salvo en el caso de
falsos positivos. Un resultado negativo puede resultar necesario asegurarlo
considerando que tal vez no se ha realizado un perfecto fraccionamiento, teniendo
en cuenta las posibles variaciones estacionales y ecolgicas de la planta, y la
metodologa de la extraccin que puede no haber alcanzado a extraer todos los
componentes sobre todo si se hallan en muy baja concentracin.
Tecnicas generales a aplicar en un analisis fitoqumico
I. De extraccin:
En soxlhets.
Maceracin.
Percolacin.
Arrastre de vapor.
Fluido supercrtico.
II. De separacin y purificacin:
Cromatografia de papel CP
Cromatografia de capa
Delgada, CCD
Cromatografia liquida (de
columna:CC)
Cromatografia en
contracorriente, CCC
Ascendente CPA
Descendente CPD
Circular CPC
Preparativa CPP
Analtica CCD
Preparativa CCDP
Bidimensional CCDB
Adsorcin Particin Exclusin
Flash Al vaco
Intercambio inico Alta
Performance, HPLC
A la gota (DCCC)
Alta velocidad (HSCCC)
Cromatografia gas-liquida,CGL
Electroforesis

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III De determinacin estructural Espectromtricas
Ultravioleta-visible, UV- Vis
Infrarrojo, IR
Resonancia magntica nuclear
De protn y de carbono-13
RMN- H
RMN- C
De masa, EM
Rayos X
Reacciones de coloracin y de
precipitacin Propiedades
fsicas

Metabolitos secundarios frecuentes en las plantas.
Los constituyentes qumicos se agrupan segn su origen biosinttico comn, y as
podemos mencionar a los terpenos y esteroides, flavonoides, crmenos y
benzofuranos, cumarinas, quinonas, alcaloides entre otras.
Terpenos y esferoides
El trmino terpeno se refiere a un grupo de sustancias que se biosintetizan
siguiendo la llamada regla del isopreno, esbozada por Wallach en 1866. Pueden
clasificarse como monoterpenos ( C 10 ), sesquiterpenos (C 15), diterpenos (C
20). triterpenos (C 30) y tetraterpenos (C 40), segn el nmero de unidades de
isopreno (2,3, 8) que los forman.
Monoterpenos.
Constituyen un importante grupo de hidrocarburos, alcoholes y cetonas, que son
los compuestos mayoritarios de los aceites esenciales obtenidos de hojas, races,
corteza y flores de diversas plantas; pueden presentarse como compuestos
aciclicos, monocclicos y cclicos.
Dentro de los monoterpenoides debemos considerar a los iridoides y secoiridoides
que tienen como caracterstica presentar un grupo B-glucosiloxi-en el carbono- 1 y
un doble enlace entre los carbones 3 y 4. Presentan tambin diversos grupos
funcionales y pueden encontrarse bajo la forma de agliconas y glicsidos.
Sesquiterpenlactonas
Las sesquiterpenlactonas, derivadas biogenticamente de los sesquiterpenos, son
una clase de productos naturales distribuidos menos ampliamente que estos
ltimos y de ocurrencia predominante en la familia Asteraceae (notablemente en
gneros Artemisia y ambrosia), de all que su distribucin permite ser aplicada a
problemas taxonmicos especialmente en los gneros nombrados y en otras
taxas.
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Son sustancias amargas que se encuentran en todas las partes de las plantas, en
concentraciones que varan entre 0,01 y 8% del peso seco, siendo las
concentraciones mayores generalmente en las hojas; son bastantes solubles en
cloroformo y en eter etlico. Presentan gran importancia por la variada accin
biolgica que han demostrado: accin citotxica, antitumoral, analgsica,
inhibidoras del crecimiento de bacterias, entre otras.
Estos compuestos lactnicos son primariamente clasificados en base a su
esqueleto carbocclico como germacronlidos, guaianlidos, eudesmanlidos y
pseudo-guaianlidos, entre otros (el sufijo olido se refiere a la funcin lactona ).
Diterpenos
Comprende un grupo de compuestos de 20 tomos de carbono que puede
presentarse en forma de hidrocarburos, alcoholes, cetonas, lactonas y cidos
carboxlicos, siendo estos ltimos conocidos desde tiempo atrs como cidos
resnicos y obtenidos como componentes de las oleorresinas exudadas por cortes
en los troncos de pinos y abetos.
Se subdividen atendiendo al tipo de esqueleto carbonado, entre otros, como
bicclicos (tipo lbdano y clerodano); trieclicos (tipo primario, abietano, cassano,
totarona y podocarpano); tetracclcos (tipo Kaurano,beyerano,atisano,giberelano).
Los diterpenos han sido clasificados tambin en base a sus propiedades; entre los
cidos resnicos ya nombrados, tenemos los cidos abitico, y agtico a los que
se les atribuye funcin protectora en la planta; los diterpenos txicos como las
grayanotoxinas que ocurren en las hojas de rhodadendron y son los responsables
de la naturaleza venenosa de ellas; y las giberelinas, un grupo de hormonas que
estimulan el crecimiento vegetal, de las cuales el ms comn es el cido
giberlico.
Algunos diterpenos muestran actividad antitumoral como la taxodiona aislada de
Taxodium distichum, la jatrofona de Jatropha gossypifolia, la gnidicina de Gnidia
lamprantha, el ingenol del Euphorbia escula; siendo quizas el taxol del Taxu$
brevifolia Nutt, el de mayor importancia a la fecha; otros muestran actividad
irritante, txica o carcinognica como los esteres de forbol aislados de especies de
Croton y Euphorbia, actividad antiinflamatoria como el cajucarinlido de Croton
cajucara; edulcorante como el steviosidio de Stevia rebaudiana. Otro ejemplo es el
forskolin de Coleus forskohlii, que en vista de sus propiedades ha sido
considerado para ser desarrollado como un agente para el tratamiento de
cardiomiopatas congestivas, glaucoma y asma.

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Triterpenoides y Esteroides.
Los triterpenoides son compuestos con un esqueleto carbonado basado en seis
unidades de isopreno que derivan biogenticamente del escualeno, hidrocarburo
aciclico de 30 carbonos. Son de estructura relativamente compleja generalmente
tetraciclicos o pentaciclicos y pueden contener grupos hidroxilo, cetona o aldehido
y cido carboxilico. Muchos se encuentran como glicsidos formando las llamadas
saponinas triterpenoides.
Los esteroides, biogenticamente muy relacionados a los triterpenoides, y con un
esqueleto cclico base al igual que los triterpenoides tetraciclicos, de
ciclopentanoperhidrofenantreno, pueden ser clasificados como esterles (C27
ms), saponinas esteroidales (o sus agliconas sapogeninas), glicosidos cardiacos,
esterocaloides y las llamadas hormonas esteroidales, las que hasta la dcada del
60 eran consideradas exclusivamente de origen animal, pero que a partir de 1966
se han aislado de tejidos de plantas aunque en concentraciones muy pequeas, y
en algunos casos como trazas. Por poseer estos ltimos el grupo de hidroxilo en el
carbono 3 son considerados por algunos autores dentro del grupo de esterles y
ms especificamente como zooesteroles para diferenciarlos de los fitoesteroles,
aquellos que desde sus inicios son considerados de origen vegetal.
Los triterpenoles y esterles son slidos, incoloros, cristalinos, pticamente
activos, de alto punto de fusin; los esterles, generalmente tienen punto de fusin
menor que 200C y los triterpenoles mayor que 200C.
Las saponinas son glicosidos de ambos, triterpenos y esterles, dan soluciones
jabonosas, y algunos extractos crudos de plantas han encontrado uso como
detergentes, y para la produccin de espumas estables. Ellos causan hemolisis de
la sangre an en soluciones muy diluidas, una propiedad que ha sido utilizada
para su deteccin en extractos de plantas. Las saponinas no son fciles de aislar
por ello muchas veces se prefiere hidrolizar el extracto crudo de la planta y aislar
la sapogenina libre de azcares. Con pocas excepciones el azcar est unida a la
aglicona a travs del grupo - OH en C-3
Las saponinas del grupo triterpeno se encuentran extensamente distribuidas, y
constituyen la mayora de las saponinas encontradas en la naturaleza; una gran
variedad de ellas difieren nicamente en el nmero y tipo de unidades de azcares
unidas a las sapogeninas; generalmente pertenecen al grupo de la B-amirina,
otras pocas son derivadas de la &-amirina, del lupeol y del grupo de triterpenos
tetraciclicos.
Fuentes ricas de saponinas triterpenoidales y sus genuinas son el ginseng, la
alfalfa, la avena, la quinua y la soya entre otras. Las saponinas esteroidales son
materia inicial para la preparacin de varios productos muy potentes y
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ampliamente usados como productos farmacuticos , entre ellos cortisona,
anticonceptivos, estrgenos.testosterona, etc. Fuentes ricas de saponinas
esteroidales son especies de las familias Dioscoreaceae, Liliaceae y
Escrofularaceae. Algunos ejemplos son; digitonina (Digitalis purpurea y D. lanata),
gitogina (D.purpurea) tigonenina (D.lanata), sarsapogenina (Radix sarsaparrilla,
Yucca schott); dioscina (Dioscorea tokora), etc.
Los glicsidos cardiacos o principios activos cardiacos tienen la habilidad de
ejercer una especfica y fuerte accin sobre el msculo cardiaco, son llamados
tambin principios cardiotnicos. Ocurren en pequeas cantidades en las semillas,
hojas, tallos y races de plantas de las familias Escrofularaceae, Liliaceae,
Moraceae.Ranunculaceae, Apocinaceae. Muchas especies crecen en regiones
tropicales y han sido empleadas por los nativos de Africa y Sur-amrica para
preparar flechas venenosas para la caza y la pesca. Las drogas hechas de las
hojas secas han encontrado uso desde la antigedad y quizas sea la Digitalis
purpurea la ms usada.
Los estereoalcaloides ocurren frecuentemente como glicsidos en especies del
gnero Solanum y otros. La solanidina y tomatidina son dos ejemplos tpicos de
este grupo de compuestos.
Flavonoides
Los pigmentos flavonoides, son uno de los grupos ms numerosos y ampliamente
distribuidos de constituyentes naturales.
Se conoce como diez clases de flavonoides , todos contienen quince atomos de
carbono en su ncleo bsico y estn arreglados bajo un sistema C6- C3- C6, en el
cual dos anillos aromticos llamados A y B estn unidos por una unidad de tres
carbonos que pueden o no formar un tercer anillo, que en caso de existir es
llamado anillo C.
Los flavonoides se encuentran generalmente en mezclas como agliconas y/o
glicsidos, an de las diferentes clases siendo este ltimo ms comn, en muchos
casos debido a la complejidad de la mezcla es ms frecuente el estudio de estos
compuestos en forma de agliconas en extractos de plantas previamente
hidrolizados. Se hallan presentes en todas las partes de las plantas, algunas
clases se encuentran ms ampliamente distribuidas que otras, siendo ms
comunes las flavonas y flavonoles, y ms restringidas en su ocurrencia las
isoflavonas, las chalconas y auronas.
Los flavonoides se emplean desde hace mucho tiempo como colorantes de lana, y
actualmente se usan en la conservacin de grasas o jugos de frutas debido a las
propiedades antioxidantes de algunas polihidroxiflavonas. Entre otras aplicaciones
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mencionaremos la de los glucsidos de dihidrochalconas como edulcorante, de la
rotenona como insecticida, etc.
La accin farmacologa es tambin extensa y variada , son bien conocidas sus
actividades como la fragilidad capilar (bioflavonoides del gnero Citrus: rutina y
derivados) dilatadores de las coronarias (proantocianidinas de Crata egus, rnica
y Gingko), espasmolitica (glicsidos de arpigenina), antihepatotxica (silimarina de
Sylybum), colertica, estrgena y diurtica. Destacaremos asi mismo la actividad
antimicrobiana de flavonoides prenilados y otros fenoles y la accin fungitxica de
las isoflavonas.
Cumarinas
Las cumarinas son compuestos ampliamente distribuidos en las plantas,
principalmente en as familias Umbeliferae y Rutaceae; se encuentran en todas las
partes de la planta desde la raz a flores y frutos siendo ms abundante en estos
ltimos; se presentan a menudo como mezclas, en forma libre o como glicsidos.
Los desarrollos en los procesos de aislamiento y anlisis estructural en estos
ltimos aos han conducido a un marcado incremento en el nmero de cumarinas
aisladas de plantas; ello unido al inters despertado por el amplio rango de
actividad biolgica que muchas cumarinas han mostrado, como por ejemplo la
accin anticoagulante y antibacterial del dicumarol, la accin antibitica de la
novobiocina, la aguda hepatotoxidad y carninogenicidad de ciertas aflatoxinas, la
actividad astrognica del cumestrol, la accin fotosensibilizadora de
furanocumarinas como el bergapteno y la xantotoxina, la accin insecticida de los
surangin A y B, entre otros; cabe destacar tambin las aplicaciones de las
cumarinas como saborizantes y en perfumera.
Las cumarinas de las cuales solo el 5% aproximadamente carece de oxgeno en la
posicin -7, pueden clasificarse como:
Simples, o sus derivados hidroxilados, alcoxilados y alquilados, y sus
glicsidos.
Furanocumarinas, lineales o angulares.
Piranocumarinas, anlogas a las anteriores con un anillo de pirano,
pueden ser tambin lineales o angulares.
Cumarinas preniladas.
Cumarinas sustituidas en el anillo de pirona.
Cromenos y benzofuranos
Los crmenos y benzofuranos son productos naturales que se han encontrado en
algunas especies de Rutaceae, Liliaceae, Ciperaceae y principalmente en ciertas
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tribus de las Asteraceae, entre las cuales parece ser exclusivos de las Astereae,
Eupatorieae, Heliantheae, Inulaeae y Senecioneae.
Estos compuestos se encuentran presentes generalmente en hojas y tallos, y
menos comnmente en races habindose encontrado en los primeros hasta un
5% sobre el peso seco.
Muchos crmenos y benzofuranos han mostrado ser biolgicamente activos como
el toxol y la dehidrotremetona que son bacteriostticos; la tremetona, la
dehidrotremetona y la hidroxitremetona son txicos a los peces; el toxol y el
angelato de toxilo exhiben una dbil actividad antitumor contra la leucemia
linfocitica P- 388; el encecalin, el 7- hidroxiencalin y la 6- metoxieuparina son
fototxicos a varios hongos y bacterias; el encecalin tambin ha mostrado accin
insecticida; as mismo los precocenos I y II actan como hormonas antijuveniles
en los insectos.
Xantonas
Son pigmentos fenlicos amarillos; qumicamente son diferentes a los flavonoides,
pero son muy similares en sus reacciones de coloracin y en su movilidad
cromatogrfica. Se presentan especialmente en ciertas familias: Gutiferae,
Gentianaceae, Moraceae, y Polignonaceae, al estado libre o como O-
glicosidadas, siendo menos comunes las C- glicosidadas.
Las Xantonas aisladas a la fecha pueden ser clasificadas en cinco grupos
mayores: xantonas simples oxigenadas, glicosidadas. Preniladas, lignoides y
miscelneos.
El inters creciente de estos compuestos es explicado por su actividad
farmacolgica; inhibidor de la monoaminoxidasa, actividad antipsictica, efecto
tuberculosttico, entre otros.
Quinonas
Las quinonas naturales son un grupo de compuestos cuya coloracin puede ser
desde el amarillo plido hasta casi negro. Se encuentran frecuentemente en la
corteza, en el corazn de la madera o de la raz, y en algunos casos en las hojas,
donde su color est enmascarado por otros pigmentos. En general, estn
ampliamente distribuidas pero contribuyen en muy pequea extensin a la
colaboracin de las plantas superiores, a diferencia por ejemplo de los carotenoide
y antocianinas; en cambio hacen mayor contribucin en las bacterias, hongos y
liqenes. Para su mejor estudio las quinonas se subdividen en benzoquinonas,
naftoquinonas, antraquinonas, quinonas isoprenoide. Pueden adems contener
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diversos grupos funcionales, anillos de furanos o pirano, encontrarse como
dmeros, ser parcialmente reducidos como los antranoles y antronas, etc.
Las quinonas han sido reconocidas desde la Antigedad por sus propiedades
tintreas; algunos presentan adems otras propiedades como la emodina que es
catrtica; shikonina, antimictica, plumbagina, activa para la leshmaniasis,
lapachol, cilosttica, bacteriosttica, etc.
Alcaloides
Los alcaloides constituyen el grupo ms grande de metabolitos secundarios de
plantas.
Se encuentran en las semillas, races, cortezas y hojas; al estado libre o como
glicsidos, o formando sales con cidos orgnicos. Al ao 1970 se reportaba
alrededor de 5000 alcaloides aislados de aproximadamente 40 familias de plantas,
principalmente de Apocinaceae (ca. 800), Papaveraceae (ca. 400),
Ranunculaceae (ca. 300), Solanaceae (ca. 150), Rutaceae (ca. 250) y Rubiaceae
(ca. 150); al ao 1990 se reporta alrededor de 7,000.
Aunque no hay una definicin exacta pero el termino alcaloide, en l se incluyen
aquellas substancias bsicas que contienen uno ms tomos de nitrgeno como
parte de un sistema cclico, que manifiesta significante actividad farmacolgica y
han sido biosintetizados de aminocidos como precursores; compuestos que
llenan estas caractersticas, se dice que son verdaderos alcaloides, para
diferenciarlos de los protoalcaloides aminas biolgicas, como las alquilaninas,
biosintetizadas tambin de aminocidos, y de pseudoalcaloides, aquellos que
tambin poseen nitrgeno en un ciclo, pero no son originados por aminocidos,
por ejemplo : los derivados de purina y los esteroalcaloides.
La funcin de los alcaloides en las plantas es an no muy conocida, como ocurre
con la mayoria de los productos naturales, aunque se reporta que algunos
intervienen como reguladores del crecimiento, o como repelente o atractores de
insectos; el hecho que aproximadamente el 80% de las plantas no contienen
alcaloides hace suponer que estos no son vitales para los organismos vivientes.
Sin embargo, por aos, es conocida la accin fisiolgica de muchos de ellos.

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Tabla 1. Principales alcaloides en el comercio. Su accin fisiolgica
ALCALOIDES ACCION FISIOLGICA
Atropina antiespasmdico, estimulante, analgsico
Cocana estimulante, anestsico local, sedante
Codena analgsico, sedante, hipntico
Emetina emtico, expectorante, antipirtico, amebicida
Escopolamina hipntico, sedante
Espartena estimulante cardaco, diurtico
Hiosciamina hipntico, sedante cerebral. Midritico
Morfina narctico, sedante, hipntico, antipirtico
Quinina tnico, emenagogo, antisptico, antipirtico
Efedrina vasoconstrictor, asma, insuficiencia circulatoria
Papaverina . relajante muscular
Lobelina expectorante, emtico, estimulante respiratorio
Reserpina control de la presin alta de la sangre
Tubocurarina relajante muscular
Tabla 1. Principales alcaloides en el comercio. Su accin fisiolgica
Debido a la complejidad de estructuras que presentan los alcaloides, su
nomenclatura no ha sido esquematizada y su clasificacin ha sido generalmente
en base a la similitud con estructuras moleculares ms simples y as con
clasificados, por ejemplo como alcaloides indlicos, alcaloides quinolnicos,
alcaloides del tropano, etc. Otras veces son designados segn su origen, gnero o
especie de la planta por ejemplo: papaverina del Papaver, berberina del Berbers,
senecina del Senecio, coniina del Conium, vincaleurocristina, del Vinca, deljasina
de Delphinium ajacis, millaurina de Millettia laurentii, kopsinina de Kopsia teoi,
estrignina de Strychnos, tubocuranina, de Curare, cocana del Erytroxyllum coca,
tambin la calsificacin es por la accin fisiolgica que presentan: morfina (de
Morpheo, Dios del sueo) narctina (del griego narkoo, entorpecer), emetina (del
griego emtico, vomitar); o por el nombre de su descubridor, como la pelletierina
de Pelletier, etc.
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El conocimiento de estos compuestos contina desarrollndose y as en los
ltimos aos se han encontrado nuevas estructuras que tambin muestran
diversas acciones, por ejemplo: jatrofano y maitansina presentan accin
antitumoral; codonopsina, cocculina y hovena, hipotensivas; shikinianina,
sedativa; carpaina, antibacterial; mitragina, analgsica; criogenina, anti-
inflamatoria; foliosodina para la arritmia cardaca; vincristina y vinblastina,
antileucmicas, pilocarpina, para el tratamiento del glaucoma, etc.
Los extractos organicos y acuoso se sometieron a una secuencia de pruebas
qumicas de coloracin y precipitacin para la deteccin de compuestos orgnicos.
Estas pruebas se pueden utilizar los siguientes reactivos.
Acetato de plomo bsico para flavonoides. Este reactivo precipita los flavonoides
como sales de plomo por lo que puede ser usado como mtodo de extraccin y de
separacin.
Cloruro frrico para fenoles y cidos hidroxmicos. Los fenoles reaccionan con el
tricloruro de fierro (FeCI3) para dar sales frricas fenoxdicas coloreadas (azul-
verde-violeta). Los cidos hidroxmicos presentan coloracin roja.
Hidrxido de sodio para cumarinas voltiles. Las cumarinas son sustancias
fluorescentes y comnmente fotosensibles. Como son lactosas, se pueden
disolver en soluciones alcalinas acuosas o alcohlicas con aparicin de una
coloracin amarilla que presenta fluorescencia azul bajo la luz UV.
Ninhidrina para aminocidos, sales de amonio y anilina. Los alfa aminocidos en
solucin acuosa calentados en presencia de ninhidrina producen un color azul-
violeta. La ninhidrina reacciona con el aminocido formando una base de schiff, la
que se descompone liberando anhdrido carbnico dando el 2 amino-1,3-diceto
hidrindeno y un aldehido. La amino dicetona (a un pH adecuado) se condensa con
la ninhidrina dando un producto coloreado.
Prueba de espuma para saponinas esferoides y saponinas triterpenoides. Las
saponinas tienen la propiedad de disminuir la tensin superficial del agua, por lo
que sus soluciones acuosas producen espuma, de manera similar al jabn.
Prueba de Shinoda para flavonoides. Los flavonoides al ser tratados con cido
clorhdrico y magnesio dan complejos coloreados (de rojo plido a oscuro). Al
aadir un poco de alcohol isoamlico y agitar, el color pasa a la capa isoamlica.
Reactivo de Bortranger para naftoquinonas, antraquinonas, antronas o antranoles.
Las soluciones bencnicas de naftoquinonas, antraquinonas, antronas o
antranoles son amarillas y colorean de rojo las soluciones alcalinas, la presencia
de varios hidroxilos o dobles enlaces conjugados tienen un efecto batacrmico.
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Reactivo de Dragendorff para alcaloides y aminas terciarias
Formacin de yoduro doble colorido y en algunos casos, insoluble, de frmula
general BI3B.HI donde B es la molcula de alcaloide.
Reactivo de Gelatina-sal para taninos. Ocurre la hidrlisis del tanino dando un
compuesto fenlico y un azcar.
Reactivo de Kedde para g-lactonas y glicsidos cardacos. En medio alcalino se
forma un intermediario de ion cardenlido, que se acondiciona nucleoflicamente
en la posicin orto a los grupos nitro del aromtico; se forma un anin de color rojo
violeta estabilizado por mesomera (complejo Meisenheimer).
Reactivo de Liebermann-Burchard para esteroides y glicsidos triterpnicos.
Ocurre una deshidratacin con formacin de un doble enlace conjugado a un
segundo doble enlace, lo que da un producto coloreado.
Reactivo de Mayer para alcaloides. Precipitacin con un in grande, formacin de
un yoduro doble, de frmula general Hgl2-B.HI, donde B es la molcula de
alcaloide (precipitado blanco).
Reactivo de Molish para monosacridos. El cido sulfrico con las pentosas y
hexosas da furfural o 5-(hidroximetil)-furfural. Estos furfurales con el alfa-naftol se
condensan formando cromgenos, que con el cido sulfrico dan compuestos
quinoides de color violeta.
Reactivo de Rosenheim(NaOH 5%) para flavonoides. Las sales de oxonio de
todas las antocianinas y antocianidinas se disocian hidrolticamente cuando estn
en soluciones diluidas, formndose la base libre de oxonio (II) que se isomeriza
formando la pseudo-base incolora (I).
Reactivo de Wagner (yodo-yoduro de potasio) para alcaloides. Formacin de
yoduro doble de alcaloide (precipitado caf).
Vainillina-cido clorhdrico para catequinas. Formacin de un derivado coloreado
que se intensifica por la presencia del cido.
Vainillina-cido sulfrico para alcoholes superiores, fenoles esteroides y aceites
etreos. Formacin de derivados coloreados. Este reactivo detecta desde
hidrocarburos hasta esteroides sustituidos. El rango de coloraciones que se
presenta es muy amplio y aparecen coloraciones de todo el espectro.

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MARCO METODOLGICO
Se realizo una visita a Santo Tomas Mazaltepec, Etla Oaxaca, con la finalidad de
realizar una colecta de un espcimen vegetal, con el cual se realizara una
caracterizacin e identificacin.
Una vez estando en esa comunidad se procedi a la colecta y prensado de una
planta con hojas color verde obscuro, anchas y conocida por los habitantes como
hoja de manteca.
Se prensaron y secaron 10 especmenes de este material vegetal que
posteriormente fue procesado en el laboratorio de Fitoquimica de la Facultad de
ciencias Qumicas de la UABJO.
Se realizo una investigacin de acuerdo a sus caractersticas morfolgicas para
encontrar su clasificacin y se encontr que esta planta pertenece a la familia
Solanaceae, con nombre cientfico Solanum verbascifolium L.
Se procedi a su herborizado y encamisado una vez obtenidos los datos
pertinentes para su etiquetado.
Como procedimiento complemental y convinindose en el apartado ms
importante se analizo en el laboratorio para su caracterizacin, siendo el
diafanizado la primera tcnica aplicada a la planta.
Se coloc en un vaso de precipitados hojas del material seco de nuestra eleccin
y se le agrego alcohol de 96 y se llev a ebullicin durante 10 minutos, enseguida
se llev a partes iguales de hidrxido de sodio al 5% y alcohol, donde se puso a
ebullicin nuevamente por 10 minutos ms, despus de eso se esper un
momento a que el ejemplar se enfriara, inmediatamente se hicieron varios lavados
con agua de la llave hasta que el agua quedo limpia, los lavados se realizaron con
mucho cuidado ya que la hoja se encontraba muy frgil, a continuacin se pas el
material a un cuadro de vidrio y se realiz un lavado con agua destilada por
duplicado, inmediatamente se le aplico al material una solucin de hipoclorito de
sodio al 50%, se dej en reposo aproximadamente por una hora hasta que la
muestra tomo un color trasparente, despus de haber quedado el material
transparente se agreg agua destilada y se hicieron 5 cambios de esta cada tres
minutos, posteriormente se coloc el material en hidrato cloral durante 10 minutos,
para quitar cualquier opacidad, terminado dicho proceso se le agrego glicerina de
modo que cubriera toda la hoja, esta con la intencin de fijarla al vidrio.
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Posteriormente se realizo la identificacin de caractersticas microscpicas, para
esto se coloco la hoja previamente diafanizada en el estereoscopio y se
comienza a raspar con un cter hasta que quedara casi transparente, cuidando
que el envs quede hacia dentro, se corta el pedazo de hoja ya raspado y se
coloca en el portaobjeto (figura 7). Se tio un minuto con safranina y se lava
cuidadosamente, se coloco en un cubreobjetos y se observa en el microscopio.
Finalmente e procedi a observar estomas.

Figura 7. Raspado de la hoja.
Determinacin de almidn.
Se trituro una hoja de la planta hasta que quedara casi polvo (figura 8). Se coloc
un poco de muestra en el portaobjeto y le agregamos 1 gota de HCl 2N, despus
lo colocamos en el estereoscopio con la finalidad de observar oxalatos. En otro
portaobjetos se coloc otro poco de muestra y le agregamos lugol y observamos
en el estereoscopio esto con la finalidad de poder observar almidn en la planta.
Finalmente en otro portaobjetos agregamos otro poco de muestra y le
adicionamos una gota de H
2
SO
4
con la finalidad de observar carbonatos en el
estereoscopio, se observ efervescencia a la hora de agregar el cido.

Figura 8. Pulverizacin de la muestra

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Cromatografa
Se inicio con machacar 15 gr de hoja de manteca en un mortero pase a la masa
obtenida a un matraz apropiado se aadi 45ml de ter de petrleo, mas 5 ml de
tetra clorur de carbono y 15 ml de alcohol metlico, posteriormente se sacude
continuamente el matraz por media hora y se decanta. Enseguida se lava el
residuo vegetal con 10 ml de la mezcla del solvente; se decanta nuevamente y el
lquido obtenido con el anterior se tapa y se guardan.
Preparacin de columna se coloco un pedazo de algodn en la punta de una
columna de cromatografa, cuidando as que el algodn no quede muy
comprimido, posteriormente se agrego a la columna de 15 a 20 gr de silicia de gel
60 (0.063-0.200mm), golpeando as suavemente la columna para que quede bien
empacada, y as evitar la formacin de grietas o burbujas de aire. Enseguida se
agrego 5 gr de carbonato de calcio finalmente molido tomando as precauciones,
ms otros 5 gr de azcar glass, bien molido y colocamos un pedazo de algodn
sobre esta ltima capa por ltimo se coloca sobre un soporte universal.

Elucin de columna se abre la llave de la columna y se coloco debajo de un
matraz, con una pipeta se coloco en la parte superior de la columna 5 ml del
extracto vegetal, cuando el nivel del extracto casi coincida con el nivel del
absorbente agregamos unos mililitros de una mezcla de tetra clorur de carbono y
metanol. Aparte se preparo 500 ml de de la mezcla de disolvente (CCl
4
, CH
3
OH)
cuando el nivel baje nuevamente se continuo agregando la mezcla anterior, se
recolecto las fracciones en matraces, cambiando as el matraz cada vez que
aparezca un nuevo color, identificando as la fraccin ms verde como clorofila y
las otras fracciones identificndolas con las pruebas de carotenos y xantofilas.
Nota: Para hacer ms rpida la separacin se aplica aire al sistema.
Como punto final se procedi a realizar una extraccin de metabolitos con distintas
clases de solvente que permitan su adecuada obtencin.
Primeramente se procedi a preparar 100ml de HCl al 5% reactivo necesario para
las extracciones posteriores. 50 gr de material vegetal seco fue molido en una
licuadora, se macero en etanol y reposo durante 24 horas en una botella de vidrio
color mbar. Una vez transcurrido el tiempo necesario se reflujo durante una hora,
una vez obtenido el extracto reflujado se procedi a filtrar en vacio caliente y se
desecho el residuo; el filtrado se guardo en un frasco de vidrio color mbar y se le
denomino fraccin A.
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Fraccin A
Sobre esta fraccin se investigan:
Flavonoides
Taninos
Lpidos
Hidratos de carbono
80 ml del filtrado se llevo a sequedad en el rotavapor a una temperatura de 59C
el residuo caliente se re disolvi con 20ml de agua destilada y se filtro al vacio. Se
guardo en frasco mbar.
Sobre esta fraccin se investiga:
Compuestos fenolicos.
Taninos.
Leucoantocianinas
Flavonoides.
Se llevo a sequedad al resto en el rotavapor, se redisolvio con 30 ml de HCl 5%,se
calent a bao maria a 60C y se filtro al vacio. Se guardo en frasco de vidrio
ambar con el nombre de filtrado acuoso I, el residuo insoluble se lavo con HCl al
5% y se guardo en el mismo filtrado.El residuo se disolvi en 30 ml de cloroformo
y se deshidrato con Na
2
SO
4
anhidro y filtro.
Filtrado Fraccin B:
Terpenos
Cardiotnicos
Quinonas
Flavonoides
El filtrado acuoso acido se alcalinizo con NH
4
OH hasta alcanzar un pH 11;
posteriormente se vaci a un embudo de separacin con 15ml de cloroformo,
procedimiento que se realizo por duplicado y al final se separo la fase acuosa
bsica.
La fase orgnica se lavo con 10ml de agua destilada y se deshidrato con Na
2
SO
4

anhidro, se guardo con el nombre de filtrado fraccin C. Se separo 15 ml.
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Cardiotnicos
Terpenos
Al resto de la fraccin C se le llevo a sequedad, y se disolvi en 10ml de HCl al 5%
en bao mara y se filtro al vacio.
Alcaloides.
La fase acuosa bsica se realizo con particin de 15ml de cloroformo por
duplicado, se separo fase acuosa Fraccin E. la fraccin E se reparti en tres
partes iguales y cada una se llevo a distintos pH.
Fraccin E
1
: Neutralizada con HCl alcanzo un pH acido igual a 1.
Flavonoides.
Leucoantoacianinas.
Alcaloides.
Fraccin E
2:
Neutralizada con HCl alcanzo un pH ligeramente acido igual a 5.
Compuestos fenolicos.
Fraccin E
3
: Neutralizada con HCl alcanzo un pH neutro igual a 7.
Taninos.
La fase orgnica fue lavada con 20 ml de solucin semisaturada de NaCl,
posteriormente fue deshidratada con Na
2
SO
4
anhidro y se filtro; se obtuvo filtrado
fraccin D, se reparti en tres porciones iguales D
1
, D
2
y D
3
y se llevaron a
sequedad, esto consisti en poner un papel filtro con pequeos agujeros y dejarlo
por una semana.

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Fraccin D
1
: Redisolver en 4ml de etanol.
Flavonoides
Cardiotnicos
Leucociantidinas
Fraccin D
2
: Redisolver en 1 ml de cloroformo.
Terpenos.
Fraccin D
3
: redisolver n 5 ml de HCl 1%.
Alcaloides.
En la ltima parte de este trabajo se procedi a la identificacin de metabolitos
utilizando los extractos obtenidos.
DETERMINACION DE METABOLITOS SECUNDARIOS EN LA FRACCION A
RECONOCIMIENTO DE FLAVONOIDES
Reaccin de Shinoda
Se llevaron a seco 0.5 ml de la fraccin A que se retomaron con igual volumen de
agua destilad. Despus se agregaron unas granallas de Zn y 0.2 ml de HCl
concentrado. (Resultado positivo: color purpura variando del rosa tenue al guinda).
RECONOCIMIENTO COMPUESTOS FENLICOS
Reaccin de FeCl
3
Se llevaron a seco 3 ml de la fraccin A calentado a Bao Mara.El residuo se
redisolvi en 1 ml de agua destilada y se agregaron 3 gotas de FeCl
3
al
1%acuoso. (Resultados: 1OH amarillo, 2 OH adyacentes verde risceo, 3 OH
adyacentes azul negro).

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RECONOCIMIENTO DE DE TANINOS
Reaccin con gelatina
Se llev a sequedad 3 ml de la fraccin A calentado a Bao Mara. El residuo seco
se redisolvi en 1 ml de agua destilada y se le agreg 10 gotas de gelatina al
0.5%. (Resultado positivo: aparicin de turbidez hasta precipitado abundante).
RECONOCIMIENTO DE LPIDOS
Se coloc una gota de la fraccin A sobre papel filtro, dejndose secar, y se
expuso a Vapores de I
2.
(Resultado positivo: mancha marrn-naranja)

RECONOCIMIENTO DE HIDRATOS DE CARBONO

Se agregaron a 2 ml de la fraccin A seca retomada con agua, a la que se agreg
0.5 ml de una solucin acuosa de fenol al 5% y 2.5 ml de H
2
SO
4
concentrado.
(Resultado positivo: color naranja, pardo).

DETERMINACIN DE METABOLTOS SECUNDARIOS EN LA FRACCIN B
RECONOCIMIENTO DE ESTEROIDES Y TRITERPENOS.
Prueba de Liebermann-Buchard.
Se mezclaron 1 ml de anhdrido actico y 1 ml de cloroformo, enfrindose a bao
de Hielo. A continuacin se puso en contacto la fraccin B con la mezcla de
reactivos anterior y el tubo se coloc nuevamente en bao de Hielo, entonces se
agreg por las paredes 1 gota de H
2
SO
4 .
Enfrindose nuevamente como ltimo
paso.( Resultado positivo: coloracin verde indica la presencia de grupo esteroide,
coloracin rojo-naranja evidencia al grupo triterpeno).

RECONOCIMIENTO DE ANTRAQUINONAS
Reaccin de Borntrger
Se agitaron suavemente 3 ml de la Fraccin B con 5 ml de NaOH al
5%.(Resultado positivo: fase acuosa roja o amarilla, con fluorescencia roja).
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DETERMINACION DE METABOLITOS EN LA FRACCIN C
RECONOCIMIENTO DE ALCALOIDES
Reaccin de Dragendorff.
Se tomaron 0.2 ml de la fraccin C llevndose enseguida a sequedad, se
retomaron con 2 ml de HCl 1%, a continuacin se agregaron 2 gotas de reactivo
Dragendorff. (Resultado positivo: formacin de un precipitado pardo aaranjado).
RECONOCIMIENTO DE CARDENLIDOS
Reactivo de Kedde
Se ensayaron sobre papel filtro 1 gota de Fraccin C (llevada a seco y retomada
con alcohol) y 0.1 ml de reactivo Kedde. (Resultado positivo: cloracin prpura o
violeta persistente).
RECONOCIMIENTO DE LEUCOANTOCININAS
Reaccin de Rosenheim
Se llevaron a seco 2 ml de la fraccin C retomndose con el mismo volumen de
HCl al 1% en agua. Se agreg continuacin 1 ml de HCl concentrado y se calent
en Bao Mara durante 10 minutos. Se enfro y se agreg despus un pequeo
volmen de alcohol amlico. (Resultado positivo: color desde carmes hasta rosa
plido).
DETERMINACIN DE SAPONINAS, CUMARINAS Y AMINOCIDOS.
RECONOCIMIENTO DE SAPONINAS
Se calent en Bao Mara 0.5 gr. De droga seca (Solanum verbascifolium) y
pulverizada con 8 ml de agua destilada, durante 30 minutos. A continuacin se
filtr en caliente. Tomndose 1 ml de la solucin se coloc en un tubo, se tap
con el dedo agitndose fuertemente durante 15 segundos.
RECONOCIMIENTO DE PROTENAS - AMINOCIDOS
Reaccin de Ninhidrina
A1 gr. De droga (Solanum verbascifolium) se agreg 50 ml de agua, calentar a
ebullicin durante 2 min. Se filtr en caliente y se concentr a 5ml.Sobre papel
filtro se coloc 1 gota de solucin y se dej secar. A continuacin se agreg una
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gota de solucin etanlica de Ninhidrina al 0.2%.( Resultado positivo: Mancha azul
violeta de igual, menor o mayor intensidad que el testigo. Y deber ser de mayor
intensidad que el blanco de reactivo).
RECONOCIMIENTO DE CUMARINAS
En un vaso de precipitados se coloc 1 gr. De droga (solanum verbasifolium)
macerada y se agreg cantidad suficiente de etanol, cubriendo el material vegetal.
En seguida se cubri la boca del vaso con papel filtro y se coloc a ebullicin
donde se le agregaron unas gotas de NaOH diluido, al papel. Despus de la
emisin de los vapores de ebullicin se, espero a que secara el papel y se observ
bajo la luz ultravioleta a 365 Nm. (Resultado positivo: aparicin de una coloracin
fluorescente que puede ser verde, amarilla, o roja en el papel filtro).
A continuacin se muestran unos diagramas para esquematizar el desarrollo de
los procedimientos empleados en la extraccin.

Diagrama 1. Obtencin de la fraccin A.
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Diagrama 2. Anlisis de la fracciones A residual y B.

Diagrama 3. Obtencin y anlisis de la fraccin C.
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Diagrama 4. Obtencin y anlisis de las fracciones D y E.

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RESULTADOS Y DISCUSIN
Desde poca prehispnica los usos medicinales de S. verbascifolium se asocian a
los efectos desinflamante y desinfectante de sus hojas y ramas. En la actualidad
continan siendo estas propiedades para las que con mayor frecuencia se les
utiliza, incluyendo el uso como analgsico. Sin embargo, experimentalmente
ninguno de estos efectos ha sido comprobado. (Atlas de las Plantas de la
Medicina Tradicional Mexicana UNAM)
Durante el desarrollo de este trabajo se obtuvieron datos importantes de la planta
que ayudan a entender muchas de sus caractersticas y usos ms comunes, por
ejemplo coloquialmente a esta planta se le identifica por contener muchos aguates
o pelillos, caracterstica explicada por su contenido abundante de tricomas
estrellados. (Figura 9), y se observaron de igual manera estomas anomociticos
(figura 10).
Figura 9. Tricomas en forma estrellados

Figura 10. Estomas anomociticos.

A pesar de que el diafanizado es una tcnica que ofrece muchos beneficios en lo
particular fue un poco complicado aplicarla a este espcimen, dado que tiene una
acumulacin grande de estomas tuvo que ser observada en verde.
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39
El diafanizado no permite expandir y ablandar la hoja adems de la observacin
por trasparencia que fue el resultado al cual llegamos aunque tuvimos ciertas
complicaciones con la hoja, ya que no se logr obtenerla completa y esta se
rompi justamente cuando se realiz el lavado consideramos que fue por el
tamao grande de esta y decidimos repetir la prctica pero esta vez con hojas de
menor tamao la cual se lograron esta vez sacarla completamente.
Segn Estela Sandoval Z. define como diafanizado al proceso que consiste en
hacer translucidos los tejidos por medio de la aplicacin de algn agente
aclarante, provocando la eliminacin de pigmentos y/o algunas otras estructuras.
La ventaja de esta tcnica es que podemos observar diferentes estructuras de la
planta como son estomas y tricomas, la desventaja principal es que se pierde la
clorofila. La planta a la que se realiz esta tcnica fue a la hoja de manteca y se
logr un aclarado casi al 100%, aunque se tuvieron problemas al momento de
retirar la hoja del vaso, ya que esta se encontraba demasiado frgil y con un mal
manejo se despedazaba.
Una vez obtenido el material vegetal diafanizado se procedi a raspar, despus de
muchos raspados y tinciones se pudieron observar al final estomas que parecan
anisoctico o crucfero (con 3 clulas anexas, 1 ms pequea) y tetractico (4
clulas subsidiarias), pero despus de observar bien se diferenciaron a tetracitico.
Los tricomas fueron fciles de observar y diferenciar siendo que en nuestras hojas
se encontraban tricomas estrellados.
Se determino presencia de carbonatos de calcio la cual fue positiva, al momento
de agregar el acido sulfrico se observaron unas burbujas caractersticas de este
compuesto; la prueba para almidn fue positiva al administrar lugol se pudieron
observar fcilmente el almidn presente, fue la prueba ms sencilla.
En cuanto a oxalatos se procedi a realizar la prueba agregando acido clorhdrico,
lo cual nos resulto un poco difcil al observar los cristales que se formaron, debido
a que la muestra se debe procesar lo ms rpido posible, despus de muchos
intentos al final la prueba fue positiva pudiendo observar los cristales.

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Los resultados se resumen en la tabla 2 presentada a continuacin.
Prueba realizada Resultado
Determinacin de tricomas Tricomas estrellados
Determinacin de estomas Estomas anisociticos
Determinacin de almidon Positivo (+)
Determinacin de carbonato de calcio Positivo (+)
Determinacin de oxalatos Negativo (-)
Tabla 2. Resultados de pruebas microscpicas realizadas con material seco,
molido y diafanizado.
Las muestras de Solanum verbascifolium L. se analizaron, empleando como
tcnica analtica, la cromatografa de columna, empleando una columna
constituida por slice gel, azcar glas y CaCO
3
constituyendo as una columna
polar.( Smith I, Feinberg JG (1965) Paper & Thin Layer Chromatography and
Electrophoresis. Shandon Scientific Company Ltd. ). La planta mostr un mximo
de absorcin en su es pectro ultravioleta en 410 nm, lo cual est de acuerdo con
lo reportado por Silverstein (1978).

La serie de pasos ms tardados y complicados fueron los desarrollados en la
extraccin de metabolitos, que conllevo a su identificacin posterior.
Es importante tomar en cuenta que los metabolitos deben ser extrados en
solventes adecuados que permitan su obtencin, por lo cual en cada extracto
acuoso, orgnico, acido o bsico se ensayan metabolitos distintos.
En cuanto a las pruebas para la identificacin de metabolitos los resultados fueron
dados mayormente por pruebas de coloracin y precipitacin.
DETERMINACION DE METABOLITOS SECUNDARIOS EN LA FRACCION A
RECONOCIMIENTO DE FLAVONOIDES
Reaccin de Shinoda
RESULTADO: negativo.
RECONOCIMIENTO COMPUESTOS FENLICOS
Reaccin de FeCl
3
RESULTADO: positivo, 3 OH adyacentes /azul negro.

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RECONOCIMIENTO DE DE TANINOS
Reaccin con gelatina

RECONOCIMIENTO DE LPIDOS

RESULTADO: positivo.

RECONOCIMIENTO DE HIDRATOS DE CARBONO

DETERMINACIN DE METABOLTOS SECUNDARIOS EN LA FRACCIN B
RECONOCIMIENTO DE ESTEROIDES Y TRITERPENOS.
Prueba de Liebermann-Buchard.

RECONOCIMIENTO DE ANTRAQUINONAS

DETERMINACION DE METABOLITOS EN LA FRACCIN C
RECONOCIMIENTO DE ALCALOIDES
Reaccin de Dragendorff.

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RECONOCIMIENTO DE CARDENLIDOS
Reactivo de Kedde

RECONOCIMIENTO DE LEUCOANTOCININAS
Reaccin de Rosenheim

DETERMINACIN DE SAPONINAS, CUMARINAS Y AMINOCIDOS.
RECONOCIMIENTO DE SAPONINAS
RESULTADO: escasas
RECONOCIMIENTO DE PROTENAS - AMINOCIDOS
Reaccin de Ninhidrina
RECONOCIMIENTO DE CUMARINAS
Los resultados fueron resumidos en la tabla presentada a continuacin para un
manejo ms sencillo. (Tabla 3).

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Metabolito ensayado. Resultado de la prueba.
Alcaloide Negativo (-)
Antraquinonas Negativo (-)
Cardenolidos Negativo (-)
Compuestos fenolicos Positivo (+)
Cumarinas Positivo (+)
Esteroides y terpenos Positivo (+)
Flavonoides Negativo (-)
Hidratos de carbono Positivo (+)
Leucoantocianidinas Negativo (-)
Lpidos Positivo (+)
Protenas y aminogrupos Positivo (+)
Saponinas Positivo (+) Escasas
Tabla 3. Resultados de la identificacin de metabolitos.

Conclusiones
Desde poca prehispnica los usos medicinales de S. verbascifolium se asocian a
los efectos desinflamante y desinfectante de sus hojas y ramas. En la actualidad
continan siendo estas propiedades para las que con mayor frecuencia se les
utiliza, incluyendo el uso como analgsico. Sin embargo, experimentalmente
ninguno de estos efectos ha sido comprobado.
De esta planta se han aislado un grupo de alcaloides esferoidales: solamargina,
solanidina, solanina, solasodina y solasosina los tejidos las hojas, tallos, fruto y
races. En las partes areas se encuentran tambin la diosgenina, solafloridina-
verpertilina y dos componentes de pregnenolona. En la raz se han detectado los
alcaloides cuscohigrn y solamina.
Muy pocos estudios farmacolgicos se han realizado sobre esta planta. Se ha
investigado la actividad antibitica de un extracto acuoso de hojas y tallos,
metanol-acuoso de hojas y flores contra diversas bacterias gram positivo, negativo
y hongos, detectndose actividad slo para la bacteria gram positiva
Staphylococcus albus. El extracto acuoso obtenido de l00mg de Solanum
verbascifolium, administrado por va intraperitonial en ratas, increment los niveles
de fosfato de vitamina D en suero de 8.1 a l0.0mg/l00ml. En el mismo estudio la
administracin oral de extractos acuosos de S. verbascifolium incrementaron el
fosfato seroso en ratas a las que se indujo hipofosfatemia mediante la dieta. Se ha
detectado un efecto estimulante ligero sobre el msculo de tero de rata con un
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extracto acuoso de hojas y tallos. Y por ltimo, un extracto etanol-acuoso obtenido
de la raz, no inhibi a la enzima glutamato-piruvato transamina al ser probado en
hepatocitos de rata.
Se ha demostrado que el extracto alcohlico-acuoso obtenido de las ramas
potencia la actividad del barbiturato en ratones por intubacin gstrica, a la dosis
de 135 y 275mg/ml. Tambin se describe que el jugo de las hojas por la misma va
en ratones, ejerce una accin antimalrica siendo el Plasmodium berghei el
parsito infectante (Atlas de las Plantas de la Medicina Tradicional Mexicana
UNAM).
Tomando todos estos datos como referencia nos dispusimos a hacer una
evaluacin detenida de los resultados obtenidos de nuestros procedimientos, lo
que nos permiti identificar que esta planta tiene sus caractersticas morfolgicas
procedentes de su gran numero de tricomas y la disposicin de sus estomas, en
cuanto a las tcnicas desarrolladas en el diafanizado la planta quedo
completamente transparente esto nos ayuda a que diversos componentes de ella
se observen claramente, y nos deja ver que la tcnica fue aplicada correctamente.
En cuanto a la identificacin de caractersticas microscpicas podemos decir que
esta tcnica nos resulto un poco complicada pues tardamos demasiado en poder
observar los estomas debido a que para poder encontrarlos se debe de llevar a
cabo un raspado cuidadoso pero eficaz, lo que siempre nos fallaba porque un mal
raspado no permite encontrar los estomas ya que la hoja debe de estar
adelgazada para al momento de la tincin poder diferenciarlos.
En la identificacin de carbonatos y almidn resulto muy sencillo pues las
burbujas que se formaron eran muy fciles de identificar, pero resulto difcil
identificar los oxalatos pues el calor de la lmpara del estereoscopio secaba
demasiado rpido la muestra y no se podan observar los cristales, pero despus
de varios intentos se pudieron identificar los cristales.
As que podemos concluir de manera general que para una buena identificacin es
necesario ser meticuloso en los raspados, tinciones y al observan en el
microscopio en cuanto a los estomas, y para los oxalatos se necesita mucha
velocidad para observar pues una muestra seca ya no se puede procesar; en
definitiva este procedimiento requiere mucho cuidado y paciencia al momento de
su realizacin.
El proceso de extraccin fue tardado y complicado pues el manejo inadecuado de
este mtodo no daba paso al resultado requerido.Por tanto los mtodos aqu
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expuestos para la caracterizacin, identificaci y clasificacin de la Droga solanum
verbascifolium fueron los adecuados para el manejo adecuado del espcimen
seleccionado.

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FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

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