IMPORTANCIA DEL CNCER PULMONAR

1.1.1 Cncer pulmonar.

El trmino cncer pulmonar designa a los tumores que se originan del epitelio
respiratorio (bronquio, bronquiolo y alvolo), existiendo dos grupos celulares de los
que se derivan el 88% de las neoplasias del pulmn: el cncer de clulas
pequeas (CPCP) y el de clulas no pequeas (CPCNP). Este ltimo se divide en
los tipos epidermoide, adenocarcinoma y el cncer de clulas grandes.

1.1.2 Morbilidad y Mortalidad.
El cncer pulmonar representa uno de los principales problemas de salud pblica
a nivel mundial, particularmente en los pases industrializados2. En Mxico, al
igual que en otras partes del mundo, los tumores malignos son la segunda causa
de mortalidad entre la poblacin general, antecedida por las enfermedades
cardiovasculares. Dentro de las neoplasias malignas, el cncer pulmonar ocup en
1997 el primer sitio como causa especfica de muerte a nivel nacional, con 6,385
defunciones y una tasa de mortalidad de 6.7 por cada 100,000 habitantes3. Cabe
mencionar que entre 2010 y 2012 se observ un incremento en la tasa de
mortalidad debida a este tipo de cncer de 6.3 a 6.7 por cada 100,000 habitantes,
siendo de esperarse que esta tendencia ascendente contine en los prximos
aos.

1.1.3 Clasificacin histolgica e histognesis del CPCP.
La clasificacin histolgica para las neoplasias pulmonares de la Organizacin
Mundial de la Salud describe ocho variedades de carcinomas, de las cuales cuatro
incluyen la gran mayora de los tumores (clulas grandes, adenocarcinoma,
escamoso y clulas pequeas). Los subtipos histolgicos del CPCP son el
avenular, intermedio y avenular mixto o combinado de clulas grandes y pequeas
(Tabla 2).
El CPCP representa del 20 al 25% y el CPCNP del 75 a 80% de todos los tumores
de pulmn. En nuestro pas, la frecuencia de los diferentes tipos histolgicos del
cncer de pulmn se desconoce. Tambin se desconoce la histognesis del
CPCP, pero algunos de estos tumores tienen clulas con grnulos
neurosecretores idnticos a los encontrados en tumores carnoides, que sugieren
un origen a partir de las clulas neuroendcrinas o de Kulchistky.
Estas clulas desarrollan tumores que liberan sustancias bioactivas como
pptidos, aminas vasoactivas, neuropptidos, cininas y endorfinas, por mencionar
solo algunas.

Clasificacin histolgica del cncer pulmonar*.
1. Carcinoma de clulas escamosas
Variant carcinoma de clulas escamosa con cambios fusiformes
2. Carcinoma de clulas pequeAas
a. Carcinoma de clulas avenulares
b. Tipo celular intermedio
c. Carcinoma de clulas avenulares combinado o mixto
3. Adenocarcinoma
a. Adenocarcinoma acinar
b. Adenocarcinoma papilar
c. Carcinoma broncoaiveolar
d. Carcinoma stido con formacin mucosa
4. Variantes de carcinoma de clulas grandes
a. Carcinoma de clulas gigantes
b. Carcinomas de clulas claras
5. Carcinoma adenoescamoso
8. Tumor carcinoide
7. Carcinomas de glndulas bronquiales
a. Carcinoma qustico adenoideo
b. Carcinoma mucoepidermoide
c. Otros
8. Otros


ANTECEDENTES



1.2 Carcinognesis.
Como ya se ha descrito antes, la malignizacin de tejido pulmonar comienza
cuando un agente carcingeno o sustancia qumica presente en el humo del
cigarrillo se une covalentemente al ADN e inicia el dao celular. Se postula que el
dao al ADN se refleja en rearreglos cromosmicos, deleciones, amplificaciones o
mutaciones puntuales de genes, que pueden activar oncogenes o inactivar genes
supresores de tumor. Para que esto ltimo ocurra se requiere de mltiples eventos
genticos (10 a 20), para que se inicie un desajuste en el crecimiento celular que
conlleve posteriormente a la malignidad. Estos eventos pueden durar varias
dcadas, lo que se conoce como perodo de latencia, el cual abarca desde el
tiempo de exposicin inicial hasta el desarrollo clnico de la neoplasia.

1.3 Predisposicin gentica y marcadores moleculares.
A pesar de que el patrn de herencia mendeliana no es claro, existen varias
implicaciones de una asociacin familiar, como son las mutaciones hereditarias en
Rb (pacientes adultos con retinoblastoma) y en p53 (sndrome Li-Fraumeni), en
donde existe de 2 a 3 veces mayor riesgo a desarrollar CP u otros cnceres, sin
ser fumadores. Adems, varios estudios epidemiolgicos han propuesto una
asociacin entre la enzima P450 o genotipos de fragilidad cromosmica
(sensiblidad al mutgeno) y el CP. Es bien sabido que con la acumulacin de
cambios genticos, el epitelio pulmonar presenta de manera secuencia! cambios
fnotpicos durante la transformacin maligna (epitelio normal -> metaplasia -
displasia -> carcinoma in situ carcinoma invasor), pero el orden y el tipo de
cambios moleculares no es claro.
1.3.1 Alteraciones cromosmicas.
Se han observado prdida de heterocigocidad (LOH en ingls) en las regiones
cromosmicas 3p, 5p, 11p, 13q y 17p. La regin 3p14-23 est asociada
particularmente a CPCP. En este segmento residen varios genes que podran
estar involucrados en este tipo de tumor, como el gen tumor-supresor FHIT, que
se encuentra en la regin 3p14.2 y cuya expresin est ausente en el 91-100% de
todos los casos.
Adicionalmente se ha encontrado que la extensin y frecuencia del dao en esta
regin cromosmica se correlaciona con la progresin tumoral y severidad del
cuadro clnico.

1.3.2 Genes supresores de tumor asociados a CPCP.
Los genes supresores de tumor proporcionan seales que inhiben la proliferacin
celular, principalmente cuando ocurre dao al ADN. Si el dao es muy extenso,
estos genes inducen apoptosis. Cuando ocurre una inactivacin en ambos alelos
del gen (mecanismo recesivo), se promueve la transformacin maligna. Los genes
supresores de tumor FHIT, Rb y p53 estn casi umversalmente inactivados en
CPCP.
El gen supresor p53 es uno de los puntos clave en la investigacin actual en el
cncer, de ah que muchos estudios se han enfocado a ste y su implicacin en el
CPCP. p53 es conocido como el maestro guardin del genoma y se declar
molcula del ao en 1993 por la revista Science. Su estructura molecular fue
conocida en 1985 cuando McBride y Benchimol asignaron el locus del gen al
brazo corto del cromosoma 17 en la banda 13. El gen tiene 11 exones y se han
identificado dos promotores de transcripcin, uno localizado 100 a 200 pb antes
del primer exn (no codificante) y el segundo es un promotor muy fuerte localizado
en el primer intrn62. La protena que codifica es llamada con el mismo nombre y
contiene 393 aminocidos. Su forma tridimensional es parecida a un "sandwich".
Presenta tres dominios principales, siendo el segundo el de unin a la secuencia
especfica del ADN donde suceden cerca del 40% de las mutaciones de sentido
errneo (principalmente en los aminocidos 175,248 y 273) (Figura 1).




Figura 1. Caractersticas de p53. Gen localizado en el cromosoma 17p13.1. Tiene 11 exones (de
los cuales el primero no es codificante), l a cadena polipeptdica se divide en cuatro regiones, la
primera corresponde a ios aminocidos 1-42 que forman el dominio de activacin transcripcional
que media interacciones protena-protena. La segunda corresponde a los aminocidos 102-292 y
es la regin central que se une a la secuencia especifica del ADN. La tercera corresponde a ios
aminocidos 234-355 y es la que permite su oligomerizacin al ADN. La cuarta es la porcin
carboxiterminal que comprende los aminocidos 367-393 y es un sitio no especfico de unin a
cidos nuclicos, con una funcin muy importante en la regulacin alostrica.



La expresin normal del gen p53 regula el crecimiento celular y evita la
transformacin neopisica. Esta expresin se activa en respuesta a estmulos
genotxicos (incluido el dao al ADN, deficiencia de oxgeno, radiacin, estrs
oxidativo y depsitos alterados de ribonudetidos). Su funcin se lleva a cabo
por diversos mecanismos, tales como interrumpir el ciclo celular en fase G1, iniciar
la reparacin del ADN, propiciar la difereciacin celular e inducir la muerte celular
programada, previniendo as que se perpete el dao celular.En cuanto a la
inactivacin de p53, Volgestein y Kinzler69 propusieron cinco mecanismos: a)
delecin de uno o ambos alelos del gen que provoca reduccin en la expresin de
genes inhibidores del crecimiento, b) mutaciones que alteran la estructura
tridimensional de las protenas y que no permiten su oligomerizacin (como ocurre
con frecuencia en el CP y cncer de esfago), c) mutaciones con sentido errneo
que destruyen la funcionalidad de la protefna, d) degradacin Iftica de la protefna,
y e) amplificacin del oncogen MDM2 que tiene un efecto inhibitorio sobre la
actividad de p53.
La incidencia de mutaciones de p53 en CPCP vara segn los reportes desde un
45-57% a un 60-70%, o bien mayor del 80%. La mayora de las mutaciones
reportadas se encuentran dentro de los exones 5-8 y se les ha asociado con una
vida media mayor de la protena nuclear, lo que las hace permanecer ms tiempo
y favorece su deteccin por inmunihistoqumica, aunque es importante destacar
que para la deteccin de alguna alteracin cuantitativa o cualitativa de p53, deben
realizarse estudios conjuntos por mtodos moleculares y de inmunihistoqumica



1.3.3 p53 y terapia gnica.
El mayor alcance que se ha logrado con el conocimiento de la biologa molecular
del cncer y que cambia la perspectiva en la teraputica mdica en general es el
uso de la terapia gnica. El uso de p53 en la terapia gnica no slo est
restringido a tumores que presentan ausencia o mutacin de dicho gen, sino que
tambin es til en tumores en los que ste se encuentra intacto; por ejemplo,
aumentando la fosforilacin del extremo carboxiterminal de p53 se aumenta su
capacidad de activar a p21 para finalmente propiciar la detencin del ciclo celular
G1. La aplicacin ideal es la introduccin del gen que se encuentra alterado en la
clula cancerosa, en este caso p53, a travs de un vector retroviral o adenoviral, al
que se le ha sustrado su maquinaria replicativa y que tiene como funcin insertar
el gen p53 normal dentro del genoma celular. Hay varios estudios donde se han
utilizado vectores adenovirales o liposomas catinicos con p53 de tipo silvestre en
lneas celulares cancergenas y en modelos murinos donde se encontraba
ausente, observndoce la supresin de la actividad tumoral y aumento en la
sensibilidad a la radioterapia tanto in vitro como in vivo.

1.4 Carcingenos
Se le llama carcingeno a cualquier sustancia que pueda inducir la mitosis
descontrolada en una clula. En el mundo existen muchos carcingenos, y
estamos en constante contacto con varios de ellos. Unos son metales pesados
como el cromo y el cadmio, mientras que otros son venenos que en determinadas
dosis pueden inducir cncer, como el arsnico o el cianuro.

1.4.1 Cromo
El cromo es un metal de transicin con nmero atmico 24, es utilizado
generalmente en la metalurgia, usado especialmente en las fabricas de acero
inoxidable. El cromo produce translocacin del ADN al alterar los puentes diester
de la cadena, pero esto solo lo produce en un estado de oxidacin de +6, ya que
se encuentra en el cuerpo como parte del metabolismo en un estado de +3.

1.4.2 Cloruro de Mercurio (Hg
2
Cl
2
)
El mercurio es un metal pesado con nmero atmico 80, es altamente txico y
muy peligroso, es usado principalmente en la fabricacin de venenos y explosivos,
el mercurio por si solo no es carcingeno pero si altamente txico, uno de sus
compuestos, el cloruro de mercurio (Hg
2
Cl
2
), es altamente carcingeno, usado en
la antigedad como un tratamiento para la sfilis. El Hg
2
Cl
2
produce cncer por
delecin del ADN e inducir su mitosis descontrolada, el mecanismo molecular
exacto es desconocido..

1.4.3 Arsnico
Es un metaloide con nmero atmico 33, generalmente es usado en la fabricacin
de insecticidas, conductores y cigarrillos. El arsnico desacopla la cadena
respiratoria al introducirse entre el tercer complejo y el cuarto complejo de la
cadena respiratoria, produciendo as un estado de hipoxia en la clula y
conduciendo la generalmente a su muerte, en dosis bajas, en lugar de matar a la
clula puede producir mutacin del ADN debido a los pocos niveles de energa en
la clula, los mecanismos moleculares son aun desconocidos.

1.5 Radiaciones
Todos los tipos de radiaciones (UV, Gamma, Rayos X, etc.) producen el mismo
efecto en el ADN, al ser bombardeado por una onda de luz a una frecuencia
extremadamente alta, este pierde estabilidad e induce a la clula a una mitosis
descontrolada produciendo as el cncer en el paciente.

1.5.1 Rayos X
La denominacin rayos X designa a una radiacin electromagntica, invisible,
capaz de atravesar cuerpos opacos y de imprimir las pelculas fotogrficas. Los
actuales sistemas digitales permiten la obtencin y visualizacin de la imagen
radiogrfica directamente en una computadora sin necesidad de imprimirla.
La longitud de onda est entre 10 a 0,01 nanmetros, correspondiendo a
frecuencias en el rango de 30 a 30000 PHz. Este generalmente produce cncer
solo si se expone durante un largo periodo de tiempo, afecta piel y rganos
internos.

Objetivo General
Evaluar el papel que desempea el gen p53 en el cncer pulmonar de rata
inducido por rayos x y carcingenos.

Objetivos Particulares
1. Definir la etapa del desarrollo del cncer en la que tiene ms papel el gen
p53.
2. Evaluar si existe diferencia de expresin del gen p53 en cncer inducido de
diferentes formas.
3. Determinar si la expresin del gen p53 va variando conforme la edad.
4. Determinar dosis necesarias exactas de cada carcingeno y de los rayos x
para producir el cncer.
5. Hacer conteo de bases nitrogenadas para saber que parte del ADN fue
alterada.
6. Definir el principio de la participacin del gen p53 en el desarrollo del tumor.
7. Determinar si existe alguna parte en la que el gen p53 deje de expresarse
en el desarrollo del tumor.
8. Definir si aparte del gen p53, existen otros genes que participen en el
desarrollo del tumor.
9. Proponer alguna medida para poder diagnosticar mas tempranamente le
cncer.
10. Determinar el tiempo de vida media de la rata con el cncer inducido por
diferentes formas.

Hiptesis
El gen p53 tiene un importante papel a lo largo del desarrollo del tumor y puede
ser utilizado como un patrn de comportamiento del tumor.

Bibliografa
Tsongalis JG, Kaufmann KW, Wilson JS, Friedman JK, Silverman ML. Rapid
screening for p53 mutations with a sensitive heteroduplex detection technique.Clin
Chemistry.2013;40(3):485-486.

Brandon, N 2010, Oncogenes y genes supresores de Tumores, Universidad
Nacional de Noresta, 10,(2) , Recuperado el: 20 junio 2013 de
http://med.unne.edu.ar/catedras/bioquimica/pdf/oncogenes.pdf