El antibiograma es la prueba microbiolgica que se realiza para determinar la susceptibilidad

(sensibilidad o resistencia) de una bacteria a un grupo de antibiticos. Las tcnicas de

antibiograma son las utilizadas en el laboratorio de microbiologa para estudiar la actividad de
los antimicrobianos frente a los microorganismos responsables de las infecciones.
Se considera como antimicrobiano cualquier sustancia con capacidad de matar o al menos de
inhibir el crecimiento de los microorganismos y que sea susceptible de utilizacin como
tratamiento en los pacientes. Pueden ser naturales, sintticos o semisintticos (modificacin
qumica de un compuesto natural). La historia moderna de los antibiticos comienza con el
descubrimiento de sustancias presentes en unos microorganismos capaces de matar a otros
microorganismos. La utilizacin de antibiticos supuso un avance enorme en la esperanza de
vida de las personas que padecan procesos infecciosos, aunque tambin supuso un aumento
en los niveles de resistencia antibitica.
2 Sensibilidad bacteriana a los antibiticos
La determinacin de la Concentracin Inhibidora Mnima (CIM) es la base de la medida
de la sensiblidad de una bacteria a un determinado antibitico. La CIM se define como
la menor concentracin de una gama de diluciones de antibitico que provoca una
inhibicin de cualquier crecimiento bacteriano visible. Es el valor fundamental de
referencia que permite establecer una escala de actividad del antibitico frente a
diferentes especies bacterianas.
Hay diferentes tcnicas de laboratorio que permiten medir o calcular de rutina, y de
manera semicuantitativa, las CIM (mtodos manuales y mtodos automatizados o
semiautomatizados). Estos diferentes mtodos de rutina permiten categorizar una
cierta cepa bacteriana en funcin de su sensibilidad frente al antibitico probado. Esta
cepa se denomina Sensible (S), Intermedia (I) o Resistente (R) al antibitco.
Para un determinado antibitico, una cepa bacteriana es, segn la NCCLS:
Sensible, si existe una buena probabilidad de xito teraputico en el
caso de un tratamiento a la doss habitual.
Resistente, si la probabilidad de xito teraputico es nula o muy
reducida. No es de esperar ningn efecto teraputico sea cual fuere el
tipo de tratamiento.
Intermedia, cuando el xito teraputico es imprevisible. Se puede
conseguir efecto teraputico en ciertas condiciones (fuertes
concentraciones locales o aumento de la posologa).
Ciertas molculas son representativas de un grupo de antibiticos. Los resultados (S, I,
R) obtenidos con estas molculas pueden ser ampliados a los antibiticos del grupo,
que en ese caso no es necesario ensayar (Ejemplo: Equivalencia entre la cefalotina que
se ensaya y las restantes cefalosporinas de 1 generacin que no es necesario probar,
ya que el resultado puede deducirse del obtenido en la cefalotina).
Este hecho permite ensayar un nmero reducido de antibiticos, sin limitar por ello las
posibilidades teraputicas.
Mtodos para realizar atb
El estudio de la sensibilidad in vitro de las bacterias a los antimicrobianos se realiza mediante
mtodos fenotpicos (tcnicas de dilucin y de difusin), bioqumicos y genticos
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Los mtodos fenotpicos (antibiograma) son los ms utilizados. Consisten en enfrentar un inculo
bacteriano estandarizado a una nica o a diferentes concentraciones de antibitico. La
interpretacin de los resultados obtenidos permite clasificar a los microorganismos en categoras
clnicas: sensibles, intermedios o resistentes. Hay que tener en cuenta que no siempre un valor
de CMI ms bajo indica mayor actividad de este antimicrobiano, ya que las CMI que definen la
sensibilidad o resistencia son diferentes para cada especie bacteriana y cada antimicrobiano. Si
un microorganismo es sensible indica que con las dosis habituales se espera una evolucin
favorable de la infeccin, siempre que se alcancen valores adecuados en el lugar de la infeccin,
lo que en ocasiones no es posible (p. ej., en el sistema nervioso central). Por el contrario, si el
microorganismo es intermedio o resistente, es probable que la evolucin sea desfavorable. La
interpretacin de la sensibilidad predice mejor el fracaso (cuando es resistente) que el xito de un
tratamiento.
Entre los mtodos fenotpicos, las tcnicas de dilucin determinan la CMI utilizando un medio
lquido (dilucin en caldo) o un medio slido (dilucin en agar) para disolver las diferentes
concentraciones del antimicrobiano. El medio estandarizado para la realizacin del antibiograma
es el medio Mueller-Hinton, al que se le aade sangre u otros suplementos para bacterias que no
crecen en l. La CMI es la dilucin ms baja de antimicrobiano en la que no se observa
crecimiento bacteriano. La dilucin en caldo suele realizarse en micromtodo (microdilucin), en
paneles multipocillos, y es el sistema mayoritariamente adoptado por los sistemas automticos
comerciales para determinar la sensibilidad a los antimicrobianos. En estos sistemas, la lectura
de los valores de CMI y la interpretacin de resultados se realizan de forma automtica.
Las tcnicas de difusin emplean discos de papel impregnados con una solucin estandarizada
de antibitico que se disponen sobre la superficie de un medio slido previamente inoculado en
su superficie con una suspensin bacteriana. Tras un perodo de incubacin de 18 h, el dimetro
del halo formado est en relacin con el grado de sensibilidad del microorganismo. La carga del
disco est ajustada para que los halos de inhibicin permitan diferenciar los microorganismos
sensibles de los resistentes y pueda establecerse una correlacin con los valores de CMI: halos
pequeos se relacionan con valores altos de CMI (resistentes) y halos grandes con CMI bajas
(sensibles) (fig. 1A). Otra tcnica de difusin es el E-test, que adems permite la determinacin
directa del valor de la CMI (fig. 1B). Utiliza tiras de plstico impregnadas con un antibitico en
concentraciones decrecientes. Al contacto de la tira con el agar, el antibitico difunde e impide el
crecimiento del microorganismo. Despus de la incubacin se observa una zona de inhibicin en
forma de elipse: el valor de la CMI es el punto de interseccin de la elipse con la tira y est
indicado en la escala impresa sobre la superficie de la tira. Esta tcnica puede utilizarse
directamente sobre muestras clnicas para obtener resultados preliminares en menos de 24 h,
que siempre deben confirmarse mediante pruebas de sensibilidad estandarizadas con bacterias
en cultivo.