ESPECTROFOTOMETRA

I. Objetivos:
Determinar el espectro de absorcin de una solucin coloreada.
Determinar la concentracin de una solucin problema a travs de mtodos
colorimtricos.
II. Materiales:
-Espectrofotmetro.
-pipetas de 5 y 10mL
-K
2
Cr
2
O
7
0,120g%
-Tubos de ensayo.
-Papel milimetrado.
-cubetas.
-Calculadora.
-Lpiz.
-Regla.
III. MARCHA EXPERIMENTAL:
Ensayo 1: Determinacin de la longitud de onda ptima (espectro de absorcin).
Un espectro consiste en una representacin de la absorbancia de la radiacin en funcin, de la
longitud de onda; es decir se selecciona la longitud de onda, donde existe un mximo de
absorcin.
Se deposit en dos tubos 0.5mL y 1mL de la solucin de K
2
Cr
2
O
7
respectivamente y
diluir hasta 10mL con agua destilada.
Leer en el espectrofotmetro desde 390 a 520nm.
Graficar los espectros de absorcin para cada tubo (Absorbancia & longitud de onda) y
encontrar el punto de mxima absorcin.





Ensayo 2: Determinacin de la concentracin de una solucin problema (curva de
calibracin).
Tomar cinco tubos y colocar: 0.5, 1, 1.5,2,2.5mL de la solucin de K
2
Cr
2
O
7
y diluir hasta
10mL en cada caso. Mezclar.
Leer en el espectrofotmetro a la longitud de onda ptima del compuesto
determinada en el ensayo.
Hallar la concentracin de cada tubo luego de la dilucin y graficar: Absorbancia &
concentracin.
Tubo problema: Tomar una alcuota de los 5 tubos, mezclar y leer su absorbancia.






















IV.DISCUSION:




VI.CONCLUSION:


VII.CUESTIONARIO:
1. Se quiere averiguar el contenido de tiamina en la achira morada, se realiza un extracto y se
determina una absorbancia de 600nm, al igual que de 4 estndares, los datos son los
siguientes:
TUBOS CONCENTRACIN DE
TIAMINA (mg%)
ABSORBANCIA
Estndar 1 10 0.10
Estndar 2 20 0.20
Estndar 3 30 0.30
Estndar 4 40 0.40
Problema x 0.32
Calcular la concentracin de tiamina en la muestra problema y expresar el resultado en mg%.
Observar si esta concentracin se cumple la ley de Lambert-Beer.











LEYES DE LA ESPECTROFOTOMETRA:
Ley de Lambert o Bouger: Establece que cuando un rayo de luz monocromtica atraviesa un
medio absorbente, la intensidad de la radiacin transmitida decrece exponencialmente a
medida que se incrementa el espesor de la capa absorbente atravesada por la luz.
L K
o
I I

10

L K
I
I
Log
o

Donde:
I: Intensidad de la luz transmitida
I
o
: Intensidad de la luz transmitida
K: Coeficiente de extincin
L: espesor de la capa
K se refiere a las sustancias en general, sin estar en disolucin.
Ley de Beer: Esta ley relaciona la concentracin de una sustancia en solucin, con absorcin de
luz. Establece que la intensidad de la radiacin monocromtica transmitida por una solucin,
decrece exponencialmente al incrementarse la concentracin de la sustancia.
C K
o
I I


'
10 C K
I
I
Log
o
'
Donde:
C: Concentracin de la sustancia absorbente
Estas dos leyes se combinan en la ley de Lambert-Beer:
L C
o
I I



10 L C
I
I
Log
o

Donde:
: Coeficiente de extincin molar
es el coeficiente de extincin cuando la solucin contiene un mol por litro.
El coeficiente de las intensidades se conoce como Transmitancia (T) y se suele expresar como
un porcentaje:
L C
o
I
I
T



10 100 %
o
I
I
T
La expresin
I
I
Log
o
se conoce como absorbancia (A) o densidad ptica (DO)
L C
I
I
Log DO A
o

T y A quedan relacionados de la forma: A = -LogT = 2 -Log%T