Lab Quimica Clinica III

Fac. Cs. Qs. Dpto.
De ANLISIS CLNICOS
LABORATORIO DE QUMICA CLNICA III
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1

BENEMRITA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE PUEBLA
FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS
LICENCIATURA: QUMICO FARMACOBILOGO

REA ESPECFICA DE ANALISIS CLINICOS

MANUAL DE PRCTICAS DE LABORATORIO

ASIGNATURA DE: QUIMICA CLINICA III

CDIGO: LQF 416 L

FECHA DE ELABORACIN: MARZO 2002

NIVEL EN EL MAPA CURRICULAR: FORMATIVO

TIPO DE ASIGNATURA: CP

PROFESORES QUE PARTCIPARON EN SU ELABORACIN:

M.C. NORMA ELONA LARA ROSANO
M.C. SILVIA GARCA GONZLEZ
QFB.LUCILA JUAREZ PEREZ

HORAS PRCTICA. 3 TOTAL DE CRDITOS: 0

Fac. Cs. Qs. Dpto. De ANLISIS CLNICOS
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OBJETIVOS GENERALES.-
El principal objetivo del curso es que el alumno sea capaz de llevar a cabo
diversas pruebas de laboratorio que sean tiles en el diagnstico de alteraciones en el
equilibrio cido-base y en la funcin renal, as como de enfermedades de la glndula
tiroides y paratiroides. As mismo conocer y realizar diversas determinaciones tiles
en el diagnstico prenatal y embarazo.

SISTEMA GENERAL DE EVALUACIN.-
Se deber cumplir con el 100% de asistencia al laboratorio.

Participacin: 20 %
Seminario
Desempeo
Pre-reportes y
Reportes (equipo) 30 %
Examen 50 %

Total 100 %

NOTA: Una calificacin aprobatoria corresponder al 20% de la calificacin final en la
materia.

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MEDIDAS GENERALES DE SEGURIDAD EN EL

La seguridad es una parte fundamental en el desempeo de cualquier
laboratorio. En el caso de Anlisis Clnicos Especiales II, los especmenes biolgicos
que se manejan, se consideran potencialmente infecciosos. Es por ello que los
alumnos deben cumplir con ciertos requisitos para trabajar en el mencionado
laboratorio.
El primer requisito inviolable es que los estudiantes deben trabajar con bata,
guantes y perillas de seguridad en cada una de las prcticas.
En las ocasiones en que manejen reactivos txicos, tambin debern portar
cubrebocas.
Tambin ser obligatorio que cada equipo cuente con una franela para limpiar
la superficie donde trabajen antes y despus de realizada la prctica.
La forma de desechar material punzocortante, torundas y muestras biolgicas
ser la siguiente:
El material punzocortante (agujas, lancetas y capilares) se colocarn en los
contenedores especiales (rgidos rojos).
Las torundas, papel y aplicadores que hayan estado en contacto con las
muestras biolgicas, se colocarn en las bolsas rosas especiales.
La sangre, suero o plasma sobrante se depositar en tubos bien tapados y se
colocarn en el mismo contenedor del material punzocortante.
Los tubos con restos de muestras biolgicas se introducirn en una palangana
con hipoclorito de sodio, para que despus sean lavados por el personal de
intendencia.
Todas estas medidas de seguridad se deben seguir rutinariamente, para evitar
cualquier accidente que ponga en peligro la salud de los alumnos y personal que
labora en los laboratorios del departamento de Anlisis Clnicos.

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SESIN No. 1
SEMINARIO SOBRE LA RECOLECCIN DE MUESTRAS (UREA,
AMONIO, CREATININA Y CIDO RICO)

Objetivo: Conocer el control de calidad en la fase preanaltica en
la determinacin de urea, amonio, creatinina y cido rico.

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SESIN No. 2
SEMINARIO RESPECTO A INTERFERENCIAS EN LAS
DETERMINACIONES DE UREA, AMONIO, CREATININA Y CIDO RICO

Objetivo: Que el estudiante, conozca los fundamentos de diversos
mtodos para la cuantificacin de urea, amonio, creatinina y cido rico,
investigue ventajas y desventajas de cada uno, as como las interferencias en
cada uno de los mtodos.

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SESIN No. 3
DETERMINACIN DE UREA, CREATININA Y CIDO RICO

Objetivo: Aprender a efectuar las determinaciones de urea, creatinina y
cido rico detectando causas de interferencias y de error que se pueden presentar en
dichas determinaciones. Discutir e interpretar los resultados para as llegar al
diagnstico de una alteracin renal.

Introduccin.- Una de las principales funciones del rin consiste en la
eliminacin de los productos nitrogenados del catabolismo proteico. En presencia de
un trastorno de la funcin renal, la disminucin de la capacidad de excrecin de los
productos de desecho nitrogenados es un factor fundamental en la aparicin de los
sntomas. Las enormes reservas renales para la excrecin de productos del
catabolismo proteico se refleja en la ausencia de sntomas hasta que la funcin renal
se encuentra reducida a menos de un tercio de la capacidad normal.

Urea.- La Urea es el principal producto final del catabolismo de las
protenas y aminocidos, se genera en el hgado y representa el 45 por ciento del
nitrgeno no proteico total. La concentracin de Urea en sangre es determinada en la
forma de nitrgeno ureico sanguneo BUN. La produccin de Urea y el BUN se
encuentran aumentados cuando existe una mayor cantidad de aminocidos
metabolizados en el hgado. Esto puede observarse en casos de una dieta con
elevado contenido proteico, de degradacin tisular o de disminucin de la sntesis
proteica. Y se encuentran disminuidos en los casos de una dieta pobre en protenas y
en enfermedad heptica severa.

Creatinina.- Los niveles sricos de creatinina y su excrecin urinaria
dependen de la masa magra corporal del individuo normal. Exhiben una respuesta
escasa o nula a las modificaciones dietticas o a las alteraciones del equilibrio
electroltico. La creatinina es un derivado de la creatina que se forma por reaccin
espontnea o irreversible. La creatinina

libre no se reutiliza en el metabolismo del cuerpo, y por lo tanto funciona nicamente
como producto de excrecin de la creatina. La formacin de la creatinina es constante,
y aproximadamente un 2 por ciento de creatina es transformada de esta manera cada
24 horas. Dado que la creatinina es un reflejo directo de la masa muscular, su nivel
srico es ms elevado en los hombres que en las mujeres.
La creatinina es libremente filtrada a nivel glomerular y no es
reabsorbida por los tmulos, la depuracin de esta sustancia puede ser empleada para
estimar el ndice de filtracin glomerular.

cido rico.- En el catabolismo de los cido nucleicos las bases
purnicas liberadas por hidrlisis de sus nucletidos son parcialmente reutilizadas en el
proceso de sntesis metablica, pero sufren en parte un proceso de oxidacin a cido
rico pasando por la formacin de xantina (2,6-dioxipurina). En la mayora de los
mamferos el cido rico (sustancia muy poco hidrosoluble) prosigue su degradacin
catablica dando lugar a la alantona, compuesto de excelente solubilidad que es
rpidamente excretado por va renal. En el hombre y en los antropoides falta la enzima
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necesaria para este ltimo paso catablico, la uricasa, y en consecuencia se elimina el
cido rico como producto final del metabolismo de las purinas. La solubilidad mxima
del cido rico en plasma sera de unos 8.5 a 8.8 mg/dL, y a un pH de 7.4
aproximadamente el 98 por ciento del cido rico total se encuentra bajo su forma de
sal monoalcalina.
Tambin se encuentra presente en los hemates, y en condiciones de
equilibrio su concentracin eritrocitaria es aproximadamente la mitad de la plasmtica.
Debido a su muy mala solubilidad en los lquidos orgnicos, el cido rico es un
catabolito potencialmente peligroso capaz de conducir a la constitucin de formaciones
cristalinas.
El adulto medio tiene un contenido total aproximado de 1.2 g de cido
rico en el cuerpo, lo cual puede considerarse una reserva miscible con un recambio
alto. El cido rico de esta reserva procede de tres orgenes: Catabolismo de Purinas
endgenas, catabolismo de purinas exgenas y excrecin renal/intestinal.
La mayor parte de la formacin de cido rico tiene lugar en el hgado,
por su gran actividad de xantino oxidasa; el adulto medio excreta aproximadamente de
0.4 a 0.8 g de cido rico en orina cada 24 horas. Los valores de referencia varan con
el mtodo, edad, factores raciales, sexo, factores sociales y factores geogrficos.

Material y Mtodos.-

Reactivos: Equipo:
Reactivo para Urea Espectrofotmetros c/celdas
Reactivo para Creatinina RA-50
Reactivo para cido rico Baos Mara c/termmetros
Suero Control DC-Trol
Los reactivos podrn ser Serapack-Plus

Material por Seccin: Material por Equipo:
2 pizetas con agua destilada Equipo Vacutainer
3 Pipeta de 1000 L c/puntas Pipeta 10 L c/ puntas
Algodn y alcohol Pipeta 25 L c/ puntas
2 pipetas 10 mL Pipeta Pasteur c/chuzo
Cronmetros Gradilla

Tcnicas.-
Se anexan los insertos para Creatinina, urea y cido rico.

Bibliografa.-
Angel M.G., Angel R.M., Interpretacin clnica del laboratorio,
Ed.Panamericana, S.A. Bogot, Colombia.
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Henry J.H., Tood-Sanford-Davidsohn, Diagnstico y tratamiento clnico por el
laboratorio, Ed. Salvat, Barcelona, Espaa.
Wallach J., Interpretacin de los diagnsticos de laboratorio, Ed. Salvat,
Barcelona, Espaa.

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SESIN No. 4
SEMINARIO SOBRE EL EXAMEN GENERAL DE ORINA
FUNDAMENTOS DE MTODOS

Objetivo: Que el alumno comprenda los fundamentos de los mtodos
para las pruebas qumica en el examen general de orina, as como las interferencias
en dichas determinaciones.

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SESIN No. 5
SEMINARIO SOBRE EL CONTROL DE CALIDAD EN EL EXAMEN
GENERAL DE ORINA

Objetivo: El conocimiento del control de calidad en el examen
general de orina, durante las diversas fases: preanaltica, analtica y posanaltica.

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SESIN No. 6
EXAMEN GENERAL DE ORINA

Objetivo: Que el alumno aprenda la metodologa para realizar el
examen general de orina, que se familiarice e identifique las diferentes estructuras que
se presentan en el sedimento urinario, y correlacione los resultados para llegar al
diagnstico de diversas patologas donde dicho examen se altera.

Introduccin.- El examen general de orina comprende el anlisis de las
caractersticas fsicas, caractersticas qumicas y el examen microscpico del
sedimento. El EGO es una de las pruebas ms frecuentemente realizadas en el
laboratorio de Qumica Clnica, siendo utilizada como prueba de escrutinio para la
deteccin temprana de enfermedades del tracto urinario. Tradicionalmente el EGO ha
consistido de un examen fsico-qumico que es barato y simple de realizar, y del
examen microscpico del sedimento urinario que es costoso, consumidor de tiempo,
adems de ser difcil de estandarizar debido a que depende de la subjetividad del
operador.

CARACTERSTICAS FSICAS:
COLOR.- La orina normal presenta una amplia gama de colores, lo cual est
determinado por su concentracin. El color puede variar de amarillo plido a mbar,
segn la concentracin de los pigmentos urocrmicos, y en menor medida de la
urobilina y de la uretrita. Cuanto ms pigmento tenga mayor ser la intensidad del
color.
ASPECTO.- La orina normal habitualmente es clara, pero se torna turbia por
precipitacin de partculas de fosfato amorfo en orinas alcalinas o de uratos amorfos
en orinas cidas.
GRAVEDAD ESPECFICA.- La densidad es la relacin o cociente entre el peso de un
volumen de orina y el peso del mismo volumen de agua medidos a una temperatura
constante. Constituye un ndice de la concentracin del material disuelto en la orina,
sin embargo, no slo

depende del nmero de partculas, sino tambin del peso de stas en la solucin.
La gravedad especfica se utiliza para medir el poder concentrador o diluyente del
rin en su esfuerzo por mantener la homeostasis en el organismo. La capacidad de
concentracin del rin es una de las primeras funciones que se pierde como
consecuencia de un dao tubular.
CARACTERSTICAS QUMICAS.- Desde la introduccin de las tiras reactivas simples
y mltiples, el examen qumico de la orina se ha convertido en un procedimiento
sensible y rpido. Actualmente es posible analizar hasta 10 pruebas diferentes en
menos de 60 segundos.
La Tira Reactiva es una banda angosta de plstico con pequeos tacos
adheridos, cada taco contiene reactivo para una reaccin diferente, lo que permite la
determinacin simultnea de varias pruebas. Un requerimiento crtico es que las
reacciones de las tiras sean ledas en el momento prescripto despus de haber sido
sumergidas en la muestra, y luego deben ser comparadas cuidadosamente con la
carta de colores proporcionada por el fabricante. Con el objeto de obtener resultados
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exactos y confiables con las tiras reactivas, deben tomarse ciertas precauciones para
ayudar a mantener la reactividad de los reactivos. Las tiras no deben ser expuestas en
medios hmedos, a la luz directa del sol, al calor, a sustancias voltiles, debiendo ser
almacenadas en su envase original. Dicho envase no debe ser almacenado en la
heladera ni ser expuesto a temperaturas superiores a 30C.
El procedimiento para usar las tiras reactivas es el siguiente:
1. Sumergir completamente las reas de prueba de la tira en orina fresca, bien
mezclada y sin centrifugar y retirar la tira en forma inmediata. Debe tenerse
cuidado de no tocar las reas reactivas.
2. Eliminar el exceso de orina de la tira tocando con el borde de sta el frasco
que contiene la muestra.
3. En el momento apropiado comparar las reas reactivas con la
correspondiente carta de colores del envase. La lectura debe hacerse con
buena iluminacin para lograr una comparacin exacta del color. De
preferencia debe emplearse un lector de tiras reactivas como el Urilux.
En el examen qumico determinamos las siguientes pruebas: pH, Glucosa,
Protenas, Hemoglobina, Bilirrubina, Cuerpos cetnicos, Urobilingeno,
Gravedad especifica, Nitritos y Leucocitos.

EXAMEN MICROSCPICO DEL SEDIMENTO.- Constituye una parte vital del anlisis
de orina de rutina, es una herramienta diagnstica valiosa para la deteccin y
evaluacin de trastornos renales, as como del tracto urinario y otras enfermedades
sistmicas.
Un buen examen microscpico del sedimento depende de dos factores: una
muestra adecuada y un analista experimentado.
La mejor muestra para el anlisis de orina de rutina, es la primera miccin de la
maana; ya que los cilindros y los hemates tienden a disolverse o a lisarse en
muestras de baja densidad o de pH alcalino. La primera muestra de la maana por lo
general proporciona el medio concentrado y cido necesario para mantener esas
estructuras. El sedimento debe examinarse lo antes posible despus de su recoleccin
pero si no es posible hacer el examen en forma inmediata, puede refrigerarse la
muestra durante unas horas.

Material y Mtodo.-
Reactivos: Equipo:
Tiras reactivas Lector de tiras reactivas
Centrfuga
Microscopio
Tcnica:
Se anexa el inserto de las tiras reactivas

Bibliografa:
Henry J.H., Tood-Sanford-Davidsohn, Diagnstico y tratamiento clnico por el
laboratorio, Ed. Salvat, Barcelona, Espaa.
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Kaplan L., Pesce A ., Qumica Clnica: Teora, anlisis y correlacin, Ed. Mdica
Panamericana, Buenos Aires.

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SESIN No. 7
RESOLUCIN DE CUADROS CLNICOS SOBRE ALTERACIONES
RENALES

Objetivo: Que el estudiante mediante los conocimientos
adquiridos, sea capaz de analizar casos clnicos reales relacionados con
alteraciones renales y los sepa interpretar.

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SESIN No. 8
SEMINARIO SOBRE TOMA DE MUESTRA PARA DETERMINACIN
DE GASES SANQUNEOS ARTERIALES

Objetivo: Conocer todos los requisitos para una toma adecuada de
sangre arterial. As tambin familiarizarse con la informacin que se obtiene con una
determinacin de gases sanguneos arteriales.

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SESIN No. 9
DETERMINACIN DE GASES SANGUNEOS ARTERIALES Y
ELECTROLITOS

Objetivo: Que el alumno se familiarice con el manejo del gasmetro, aprenda a
efectuar la determinacin de gases sanguneos arteriales as como de electrolitos,
conociendo las posibles interferencias en dichas deterinaciones.

Introduccin.- La determinacin de gases sanguneos arteriales (DGSA) es til
para conocer: 1) la oxigenacin de la sangre, 2) evaluar el intercambio gaseoso, 3) la
ventilacin alveolar, 4) el equilibrio cido-base y 5) para valorar la entrega tisular de
oxgeno.
Por lo anterior esta determinacin se solicita en pacientes con datos clnicos de
falla respiratoria, con inestabilidad hemodinmica, con alteracin del estado de
conciencia o dentro de las pruebas preoperatorias.
Los gases sanguneos deben determinarse en la sangre arterial con el fin de
obtener toda la informacin antes mencionada, de modo que es importante desarrollar
un razonamiento para decidir los criterios para determinar el sitio apropiado y la
tcnica de muestreo. Dichos criterios son:
1.-Flujo sanguneo colateral. La puncin arterial puede acarrear espasmo,
coagulacin intraluminal o hemorragia con formacin de un cogulo perifrico
(hematoma). Cualquiera de estos factores puede reducir o interrumpir por completo el
aporte sanguneo a los tejidos del respectivo territorio vascular. Por lo tanto, una
consideracin importante al elegir los sitios de puncin arterial es la circulacin
colateral disponible en caso de que la arteria se obstruya.
2.- Accesibilidad del vaso. Es ms fcil palpar, estabilizar y punzar una arteria
superficial que otra un tanto profunda. Las arterias superficiales estn en los extremos
distales de las extremidades, en sitios que suelen ser accesibles en el paciente
externo y tambin en el paciente muy grave.
3.- Tejidos periarteriales. Los msculos, tendones y grasa son bastante
insensibles al dolor, en tanto que el periostio y los nervios son muy

sensibles. As, las arterias rodeadas de tejidos comparativamente insensibles son
mejores porque la puncin duele menos. Adems se prefieren las arterias que no
tienen venas satlites para reducir la probabilidad de punzar por accidente una vena.
La arteria radial, a nivel de la mueca, satisface los criterios precedentes
porque es la ms segura y accesible para la puncin arterial. Este vaso est en la
superficie de la mueca y no lo acompaan venas importantes. Suele haber una
adecuada circulacin colateral por la arteria cubital y, si no se punza el periostio, el
procedimiento es bastante indoloro.
Con el fin de verificar la circulacin colateral, se lleva a cabo la Prueba de
Allen. El paciente cierra con firmeza el puo para expulsar de la mano la mayor
cantidad posible de sangre y se comprimen directamente en la mueca las arterias
radial y cubital para obstruirlas al mismo tiempo. Al abrir entonces la mano (sin
extenderla del todo) la palma y los dedos aparecen blanqueados. Se suelta la arteria
cubital solamente mientras se observan la palma y los dedos; deben sonrosarse en 15
segundos al llenarse los capilares con la sangre proveniente de la arteria cubital. Este
sonrojo de toda la mano significa que la arteria cubital sola abastece a toda la mano,
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porque la arteria radial contina ocluida. Esto es la prueba de Allen positiva, lo que
indica que si al punzar la arterial radial sta se obstruye, el aporte sanguneo para la
mano no habr de disminuir.
La heparina es el anticoagulante de eleccin para la recoleccin de la muestra.
Bastan 0.05 ml de heparina sdica (1,000 unidades/ml o 10 mg/ml) para anticoagular 1
ml de sangre. Se recomienda extraer de 2 4 ml de sangre arterial para este tipo de
estudio.
Una vez extrada la muestra, se debe tapar la jeringa con un tapn de corcho o
caucho y conservarla a una temperatura por debajo de 4 C por no ms de 1 hora.

Material y Mtodo.-
Equipo: Tcnica.-
Gasmetro Gasometra arterial
Se darn las indicaciones al momento de la
prctica.
Bibliografa:
Shapiro; Manejo Clnico de los gases sanguneos, Ed,.Panamericana

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SESIN No. 10
RESOLUCIN DE CASOS CLNICOS SOBRE EQUILIBRIO CIDO-
BASE

Objetivo: Que el estudiante analice casos clnicos relacionados
con desequilibrios cido-base, y sea capaz de interpretar los resultados,
llegando a un diagnstico presuntivo.

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SESIN No. 11
SEMINARIO SOBRE FUNDAMENTOS DE MTODOS PARA LA
CUANTIFICACIN DE HORMONAS

Objetivo: Conocer los fundamentos de los diversos mtodos para
la cuantificacin de hormonas, as como las interferencias y control de calidad
en dichas determinaciones.

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SESIN No. 12
CUANTIFICACIN DE HORMONAS TIROIDEAS Y SEXUALES

Objetivo: Que el alumno lleve a cabo la cuantificacin de hormonas tiroideas y
sexuales, aprenda el manejo y mantenimiento adecuado del equipo empleado en
dichas determinaciones.

Introduccin:
Hormonas Tiroideas.- Las hormonas tiroideas son producidas en el interior de
las clulas de los folculos a partir de protenas, del aminocido tirosina y del elemento
halgeno iodo. Las dos hormonas tiroideas ms importantes son la tiroxina (T
4
), la
cual contiene 4 tomos de iodo, y la triiodotironina (T
3
), que posee 3 tomos de iodo.

Las hormonas tiroideas son liberadas del coloide y segregadas en la circulacin
en respuesta a estmulos de la glndula tiroidea como consecuencia de la accin de la
hormona hipofisaria denominada tiroideoestimulante (TSH).

Las iodotironinas en circulacin en gran medida estn unidas a la protena, esto
es, la globulina unidora de tiroxina (TBG), prealbmina con capacidad de captar
tiroxina (TBPA) y albmina. La T
4
muestra una afinidad mayor por la TBG y TBPA,
pero la T
3
tambin se une a las protenas. As pues, los cambios en el nivel de TBG
producen cambios en las concentraciones sricas totales de T
4
y T
3
( en el mismo
sentido).

Las funciones fisiolgicas de dichas hormonas incluyen la regulacin de las
necesidades de oxgeno, temperatura y peso corporal. Tambin regulan (en forma
directa e indirecta) una variedad de parmetros del metabolismo de carbohidratos,
lpidos y protenas. Las anomalas de la funcin tiroidea incluyen secrecin excesiva o
insuficiente de hormonas tiroideas y aumento de tamao de la tiroides, generalizado o
focal.

Determinaciones tpicas de la funcin tiroidea en diversas condiciones:

T
4
T
4
libre T
3
TSH Interpretacin Comentarios

! ! N, ! Hipotiroidismo primario + 20% T
3
normal

! ! N, ! N Hipotiroidismo secund TRH no es til

N Hipertiroidismo En tiroiditis hay
discrepancia entre
T
4
y PBI
N N N Tirotoxicosis T
3

! = disminudo ; N = normal; = aumentado
TRH = hormona liberadora de Tiroides; PBI = iodo ligado a protenas

Las determinaciones que se llevarn a cabo como perfil tiroideo sern: T
3
total, T
4
libre
y T
4
total y TSH.

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Hormonas Sexuales.- En particular, todos los procesos reproductivos son
regulados ntimamente por una serie de complejos sistemas interrelacionados que
incluyen el hipotlamo, la hipfisis y las gnadas masculinas y femeninas.

Entre las acciones ms complejas llevadas a cabo por las hormonas se
encuentran los mecanismos que tienen lugar a nivel del sistema reproductor.

Contrariamente a la creencia popular, tanto los hombres como las mujeres
segregan las mismas hormonas esteroides sexuales, es decir, andrgenos,
estrgenos y progesterona. La diferencia de la secrecin hormonal sexual entre los
dos sexos no es absoluta, sino ms bien una cuestin de grado. La testosterona
representa el principal esteroide sexual en los hombres, mientras que el estradiol es la
principal hormona sexual en la mujer.

Los rganos reproductores femeninos se clasifican como estructuras externas
e internas. Los rganos externos y la vagina desempean funciones en la copulacin,
mientras que los rganos internos localizados en el interior de la pelvis permiten el
desarrollo y nacimiento del feto. Los rganos externos consisten en la vulva, vello
pubiano, labios vaginales (mayor y menor), cltoris, vestbulo vaginal y glndulas
mamarias como accesorios del sistema reproductor.

Los componentes internos del aparato reproductor femenino estn
representados por los dos ovarios, dos trompas de Falopio, el tero y la
vagina.

Los ovarios se encuentran localizados a cada lado del tero y cumplen la
funcin dual de generacin del vulo y de secrecin de las hormonas
esteroides sexuales femeninas, estrgenos y progesterona. Al nacer, cada
mujer posee aproximadamente 400,000 folculos inmaduros de tamao
microscpicos en los ovarios, cada uno de los cuales contiene un vulo
inmaduro. El folculo maduro est compuesto por tres capas de clulas, la teca
externa, la teca interna y la capa de clulas de la granulosa. Las clulas de la
teca interna representan la principal fuente de estrgenos.

Por otro lado el sistema reproductor masculino consiste en dos testculos
que producen esperma y andrgenos, un pene y un sistema de glndulas
exocrinas cuyas secreciones constituyen el volumen de lquido seminal en el
que es vehiculizado el esperma. Estas glndulas estn representadas por las
dos glndulas bulbouretrales (glndulas de Cowper), dos vesculas seminales y
una prstata y un sistema de conductos bilaterales a travs de los cuales el
esperma es expulsado hacia el exterior del cuerpo, el epiddimo, los vasos
deferentes y el conducto eyaculatorio.

El testculo maduro normal est cubierto por una espesa cpsula blanca.
que mantiene la presin sobre aproximadamente 250 lobulillos piramidales
compuestos por tbulos seminferos los cuales estn separados por tabiques
fibrosos. Estos tbulos componen ms del 85 % del volumen testicular.

Dichos tbulos estn rodeados por una delgada membrana basal, una
tnica propia fibrosa y clulas mioides. El tejido intersticial intertubular contiene
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clulas de Leydig, las cuales son responsables de la formacin de andrgenos
testiculares.

Las gonadotrofinas hipofisiarias, FSH (Hormona foliculoestimulante) y
LH (luteinizante), desempean un importante papel al influir sobre diferentes
funciones a nivel de los rganos sexuales internos masculinos y femeninos. En
la mujer, la FSH induce el crecimiento de los folculos ovricos y estimula la
secrecin folicular de estrgenos, mientras que la LH acta en las fases finales
del crecimiento folicular para inducir la

ovulacin (o liberacin del vulo desde el folculo) y acta como estimulante de
las clulas del cuerpo amarillo para inducir la formacin de progesterona. Por
otra parte, en los hombres, la FSH induce la espermatognesis, mientras que la
LH estimula la produccin de testosterona.

Las hormonas esteroides sexuales en ambos sexos estimulan en la
adolescencia el crecimiento corporal y la unin de las epfisis con las difisis
seas. Adems, estas hormonas inducen la sntesis proteica. Mientras los
andrgenos afectan a los msculos esquelticos, lo que confiere el aspecto
muscular a los hombres, los estrgenos actan en mayor grado a nivel del
msculo liso.

Los andrgenos inducen las caractersticas sexuales secundarias tpicas
del hombre, mientras que los estrgenos estimulan las de la mujer, as como el
crecimiento y desarrollo de los rganos reproductores femeninos. La
progesterona puede ser considerada como la hormona materna, pues junto con
los estrgenos inducen el desarrollo caracterstico durante el ciclo menstrual.

En esta prctica se realizarn las cuantificaciones de las siguientes hormonas:
Estradiol, FSH, LH, Progesterona , Prolactina y Testosterona.

Material y Mtodo.-

Reactivos:
Equipos para las determinaciones mencionadas por ELISA

Equipo:
CODA BIO-RAD

Tcnicas.-
Se anexan los insertos de las determinaciones

Bibliografa:
Kaplan-Pesce: Qumica Clnica, Ed. Panamericana, Buenos Aires Argentina

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SESIN No. 13
PRUEBAS QUE EVALAN EL METABOLISMO SEO

Objetivo: Conocer las pruebas de laboratorio adecuadas para la
evaluacin de trastornos del metabolismo seo, como calcio, fsforo, fosfatasa
alcalina, dihidroxipiridinolinas y PTH. Correlacionar los resultados para llegar al
diagnstico adecuado.

Introduccin.- El tejido seo se compone de osteoide (sustancia
fundamental no mineralizada) y hueso calcificado. Es un tejido dinmico que
sufre remodelacin continua. El proceso de remodelacin se produce por
sntesis de la sustancia fundamental o la colgena por osteoblastos,
mineralizacin o depsito de fosfato de calcio en la sustancia fundamental para
formar hueso calcificado, y resorcin o destruccin del hueso calcificado por
efecto de los osteoclastos. Estos procesos ocurren sobre todo en las
superficies seas. Se cree que las clulas mesenquimatosas cerca de la
superficie son los precursores de osteoclastos y osteocitos.
Cierto nmero de hormonas influyen sobre el metabolismo de las clulas
seas. La hormona paratiroidea (PTH) estimula la transformacin de las clulas
madre seas en osteclastos, aumenta el cAMP en el esqueleto y fomenta la
resorcin sea osteoclstica.
Los estrgenos inhiben la resorcin sea inducida por PTH, pero al
parecer no estimulan la formacin sea o mineralizacin.
Al haber PTH, la Vitamina D incrementa la formacin de osteoclastos,
que depende de la PTH. La Vit.D sola es capaz de estimular la ostelisis
(movilizacin de calcio) y la sntesis de la sustancia fundamental por
osteoblastos.
Un factor no hormonal importante es la hipofosfatemia, que puede inhibir
la sntesis de la sustancia fundamental por osteoblastos.
Es clsico dividir la enfermedad sea metablica en osteomalacia,
osteoporosis y ostetis fibrosa. Antes se pensaba que los trastornos
metablicos especficos de importancia patgena eran la deficiencia de Vit.D en
la osteomalacia, deficiencia de la transformacin de la sustancia fundamental
en la osteoporosis, y exceso de hormona paratiroidea en la ostetis fibrosa.

Ahora es claro que las diferentes formas de la enfermedad sea
metablica pueden ocurrir en forma simultnea (en especial osteoporosis y
osteomalacia) y de que los trastornos del metabolismo de la Vit.D tal vez
jueguen un papel en las tres formas de enfermedad sea metablicas.

Q.F.B
24
Datos clnicos de la patologa qumica en enfermedades del metabolismo seo

Suero Orina
Enfermedad Ca
++
HPO
4
=
Fosfatasa Alca. Ca
++
H
2
PO
4
-

Hiperparatiroidismo ! N,
primario

Osteodistrofia renal !, N !
!

Deficiencia Vit.D N, ! ! !

Osteoporosis N N N N, N
idioptica

Enf. de Paget N, N N, N

Hipofosfatasia N, N ! ! N N

= aumento; N = normal; ! = disminucin; !! = gran disminucin

En esta prctica se llevarn a cabo las siguientes determinaciones: Calcio,
Fsforo , Fosfatasa Alcalina, Hidroxipiridinolinas y PTH.

Material y Mtodos.-

Reactivos: Equipo:
Equipo para Calcio Centrfuga
Equipo para hidroxipiridinolinas
Equipo para Fsforo Espectrofotmetros c/celdas
Equipo para Fosfatasa Alcalina CODA BIO-RAD
Equipo para PTH (ELISA)

Material por Seccin: Material por Equipo:

Pizetas con Agua destilada 12 tubos 16x150
Pizeta con SSI 3 tubos 10x100
3 pip. 10 ml 1 pip. 1 ml 1/100
2 pip. 5 ml 1 pip. 0.1 ml 1/100
2 pip. 2 ml Tubo Vacutainer rojo
2 pip. 1 ml 1/100 Torniquete,soporte y aguja
1 pip. 0.1 ml 1/100 1 pip. Pasteur corta c/chuzo
Pip. De 25, 50 L 1 gradilla

Tcnicas.-
Calcio.-
Se anexa el inserto del Equipo
Q.F.B
25

Fsforo.-

Fosfatasa Alcalina.-

Bibliografa:
Greenspan, F.S.: Endocrinologa Bsica y Clnica, Ed.Manual Moderno, Mxico
Henry, J.H.: Tood-Sanford-Davidsohn Diagnstico y tratamiento clnico por el
laboratorio, Ed. Salvat, Barcelona Espaa

Q.F.B
26
SESIN No. 14 y 15
PRUEBAS PARA EL DIAGNSTICO DE EMBARAZO

Objetivo: Realizar las pruebas de laboratorio para el diagnstico del embarazo,
as como para el seguimiento de una mujer embarazada, previniendo con ello
cualquier complicacin de la madre durante la gestacin. Interpretar los resultados.

Introduccin.- El embarazo se establece de modo definitivo con la implantacin,
que es el proceso por el cual el blastocisto (gran cavidad llena de lquido con una capa
superficial de clulas externas y una masa celular interna), se introduce en el
revestimiento interno del tero (endometrio) y establece conexiones con la circulacin
materna. La implantacin y crecimiento del cigoto requiere un medio hormonal
adecuado, el cual se logra por la precisa sincronizacin de las funciones ovricas,
embrionarias y endometrial durante los primeros das del embarazo. Tres o cuatro das
despus de la fecundacin el cigoto ejerce un efecto luteotrfico directo sobre los
ovarios mediante la secrecin de la gonadotrofina corinica humana (hCG) la cual
estimula al cuerpo amarillo para que aumente su produccin de progesterona y
prolongue su vida til hasta que la sntesis de progesterona y estrgenos placentaria
se halle desarrollada lo suficiente.
La deteccin de la hCG se ha empleado como una prueba clnica del embarazo
desde 1927. La hCG srica alcanza niveles detectables en 24 hrs. despus de la
implantacin y aumenta rpidamente hasta niveles mximos (70 - 100 UI/ ml) unos 70
das despus de la ltima mestruacin normal.Despus los niveles disminuyen
rpidamente y se estabilizan entre 5 y 10 UI/ml, alrededor de los 120 das despus del
ltimo perodo menstrual.
La medicin de la hCG no slamente se usa para el diagnstico del embarazo,
sino tambin para el tratamiento de mujeres en riesgo de aborto espontneo o para la
evaluacin de tumores trofoblsticos.
La gonadotrofina corinica sub-unidad beta ( hCG) es producida por el
trofoblasto normalmente. Es de gran utilidad en el diagnstico

precoz del embarazo, en su control, en la mola hidatiforme, coriocarcinoma y
embarazo ectpico.

El vulo fecundado alcanza su madurez de implantacin alrededor del 6o. da y
empieza su actividad trofoblstica normal en el 8o. da por lo que pueden dosificarse
millonsimas de mg desde el 10o. da de su implantacin.
En la primera semana de embarazo se encuentran hasta 30 mUI/ml y se van
incrementado hasta la 9a. semana donde alcanza hasta 304,000 mUI/ml.
Posteriormente bajan sus unidades hasta el 6o. mes de embarazo (50,000mUI/ml) y
luego ascienden al 9o. mes a 106,200 mUI/ml. Esta concentracin normal, permite por
medio de la cuantificacin de las unidades internacionales apreciar la evolucin del
embarazo.
Cifras superiores a 350,000 mUI/ml en el 1er.trimestre o 150,000 mUI/ml
despus del 4o. mes hacen diagnstico en mola hidatiforme. Despus del tratamiento
por histerectoma por ejemplo a los 2 meses debe hacer negatividad total. La
dosificacin puede verificarse en orina o suero, aunque el procedimiento de eleccin
es en suero.
Durante el embarazo se debe llevar tambin un control hematolgico, ya que la
hemodilucin o sea el aumento de volumen sanguneo producido por un aumento del
volumen plasmtico conduce a anemia normoctica normocrmica. Y se puede
presentar anemia hipocrmica al haber mayor demando de hierro, sin la
Q.F.B
27
correspondiente compensacin en la dieta principalmente en embarazos y lactancias
frecuentes.
En el caso de diagnstico ectpico puede ser de utilidad el dato de
Hemoglobina (Hb) y eritrocitos cada 6 hrs (al menos en 3 ocasiones), donde se
observar una baja relativamente apreciable en el Hto, eritrocitos y Hb ya que se
presenta un sangrado considerable. En este mismo caso de embarazo ectpico, se
encuentra amilasemia despus de 5 hrs de evolucin, ya que las trompas de Falopio
tienen una gran cantidad de amilasa y la ruptura de la mucosa libera cantidades
suficientes para ser detectadas.
Ahora bien, dentro de las pruebas de control prenatal, debe conocerse el grupo
sanguneo de la madre y de ser posible del padre. Esto es sobre todo para tener un
concepto evaluativo de la ausencia o presencia del factor Rh, y prevenir en casos
posteriores Enfermedad Hemoltica del Recin Nacido (EHRN).
Por lo anterior en esta prctica, se efectuarn las siguientes pruebas de
laboratorio: hCG, Grupo Sanguneo (ABO y Rh), Amilasa, Biometra Hemtica .

Material y Mtodos.-
Sesin No.1
Determinacin de -hCG y Citometra hemtica

Reactivos: Equipo:
Reactivo para hCG Lafon Centrfuga
Amortiguador para Wright Microscopios
Colorante de Wright Gradilla para VSG
Capilares para QBC QBC Auroreader o
KX 21 Sysmex

Material por Equipo
2 portaobjetos nuevos
2 pip. 0.1 ml 1/100
1 gradilla
1 tubo Vacutainer lila
torniquete, aguja y soporte
1 gradilla

Tcnicas de la Sesin No.1
hCG y/o hCG.-
Se anexa el inserto del equipo.

Citometra Hemtica (BH).-
Se seguir la metodologa aprendida en Hematologa I. Revisar .

Sesin No.2
Determinaciones de Amilasa y Gpo. Sanguneo ABO y Rh

Reactivos: Equipo:
Equipo para Amilasa Bioxon Centrfuga
Reactivos para Gpo. Sanguneo ABO Lafon Espectrofotmetro c/celdas
Rectivos para Gpo.Sanguneo Rh Lafon Bao Mara a 37 C
Albmina bovina al 30% Lafon Termmetro
Q.F.B
28

Suero de Coombs Lafon
Pizetas con SSI Material por Seccin:
3 pip. 10 ml

Material por Seccin:
Material por Equipo: 2 pip. 5 ml

1 tubo Vacutainer rojo 2 pip. 1 ml 1/100
torniquete, aguja y soporte 1 pip. 0.1 ml 1/100
2 pip. Pasteur corta c/chuzo 1 vaso de p.p. 600 ml
14 tubos 13x100
3 tubos 16x150
1 pip. 1 ml 1/100
2 pip. 0.1 ml 1/100
1 gradilla

Tcnicas de la Sesin No.2
Amilasa.-
Se anexa el inserto del equipo.

Grupo Sanguneo.-

Determinacin del grupo sanguneo ABO en tubo. Prueba Directa.
Se denomina as a esta determinacin del grupo sanguneo ABO porque
se realiza directamente sobre los glbulos rojos de la muestra.
Para ello se centrifuga la muestra de sangre coagulada durante 5 min. a
3,000 r.p.m. a fin de que se separe el suero del paquete globular y se pasa el
suero a otro tubo previamente rotulado.
Se prepara una suspensin de glbulos rojos problema al 2% en
SSI.(0.1 ml de glbulos rojos + 4.9 ml de SSI o bien 1 gota de eritrocitos + 2 ml
de SSI).

Determinacin del grupo sanguneo ABO en tubo. Prueba Inversa.
Se denomina as porque consiste en verificar el grupo ABO, pero en el
suero problema, es decir, segn los anticuerpos que presente el suero

problema, podemos saber qu gpo. ABO tiene la sangre. Esto es posible
debido a que todas las personas de un determinado gpo. ABO tienen
anticuerpos naturales contra los otros grupos.

Instrucciones:
1.- Suspensin eritrocitos 2%
2.- Prueba Directa e Inversa
Q.F.B
29

Directa (celular) Inversa(serolgica)
Tubo Reactivo(2 gotas) G.R. 2% Tubo Suero (2 gotas) Clulas 2%(1gota)
1 Suero anti-A 1 gota 5 Suero problema A1+
2 anti-B 1 gota 6 A2+
3 anti-AB 1 gota 7 B+
4 problema 1 gota 8 O+

3.- Mezclar agitando suavemente la gradilla que los contiene y centrifugar a
3,400 r.p.m. durante 30 seg.
4.- Observar aglutinacin, leer cada tubo y anotar los resultados.

Sistema Rh.-
1.- Tubo Reactivo (2 gotas) G.R. problema2 %
9 Suero anti RhoD 1 gota
10 Albmina bovina 30% 1 gota (Tubo control Alb.)

2.- Mezclar, centrifugar 60 seg. a 3,400 r.p.m.
3.- Leer los tubos uno a uno y anotar los resultados.
4.- Si no aglutinan, incubar 30 min a 37 C; centrifugar 60 seg. a 3,400 r.p.m.
5.- Si no aglutinan, lavar 3 veces con SSI.
6.- Tubo Suero de Coombs
9 2 gotas
10 2 gotas
7.- Mezclar, centrifugar 20 seg. a 3,400 r.p.m.
8.- Leer cada tubo y observar aglutinacin.

INTERPRETACION:
Sistema ABO:
Prueba Directa Prueba Inversa Gpo. Sanguneo
Anti-A Anti-B Anti-AB AT G.R.: A1 A2 B O
+ - + - - - + - A
- - - - + + + - O
- + + - + + - - B
+ + + - - - - - AB

AT = autotestigo

Q.F.B
30

Sistema Rh:
Anti-Rh
o
D Control Interpretacin
+ - Rh
o
Positivo
- - Posible Du
Despus de Suero de Coombs:
+ - Rh(-) Du(+)
- - Rh(-) Du(-)

Bibliografa:
Albarrn C., Albarrn, L.: Manual Tcnico de Banco de Sangre, Ed.Prensa
Mdica Mexicana, S.A. Mxico
Griffin J.E.: Manual Clnico de Endocrinologa y Metabolismo, Ed.McGraw-Hill,
Mxico

Q.F.B
31

SESIN No. 16 y 17

PRUEBAS PARA EVALUAR EL ESTADO PRENATAL

Objetivo: Efectuar diversas pruebas de laboratorio que ayudan a evaluar
el estado prenatal, colaborando con ello a prevenir complicaciones en el
producto. Interpretar los resultados.

Introduccin.- Una prueba para evaluar la funcin placentaria es la
cuantificacin de fosfatasa alcalina termoestable, ya que presenta importantes
elevaciones en el suero materno durante el tercer trimestre.
Por otra parte es importante un Examen General de Orina (EGO) ya que
al final del embarazo puede presentarse albuminuria ortosttica, huellas de
glucosa y lactosa. La piuria del sedimento, generalmente es de contaminacin
vaginal. Tambin es frecuente un aumento de descamacin leucocitaria
vaginal, que hay que tener en cuenta en los exmenes de orina. Si sta
persiste en forma muy notable , es preciso verificar urocultivo por la frecuencia
de infecciones tipo Coli en este estado.
El embarazo tambin ejerce una accin diabetgena definitiva en las
mujeres as predispuestas. Al principio, la diabetes se hace aparente slo
durante el embarazo y desaparece despus del parto (diabetes gestacional);
rara vez persiste.Hay pruebas de que el factor hormonal, como el lactgeno
placentario y la destruccin acentuada de la insulina endgena por la placenta,
ayuda a precipitar la diabetes. Por eso conviene cuantificar glucosa durante el
embarazo.
Respecto a la bioqumica sangunea es frecuente la hipercolesterolemia
con niveles mximos a la trigsima semana, normalizndose a los 2 meses
despus del parto. En cambio urea y Nitrgeno ureico bajan
considerablemente. As mismo se ha observado tendencia a la
hipoproteinemia, hipoglicemia e hipocalcemia.
Respecto a algunas patologas, el trmino toxemia del embarazo incluye
las alteraciones encontradas durante la gestacin o poco despus del parto, y
que se caracterizan por la aparicin de hipertensin, edema y proteinuria
(preeclampsia) y en casos graves, convulsiones y coma (eclampsia). Tal
clasificacin usualmente incluye un buen nmero de padecimientos diversos de
los riones y de los vasos sanguneos que pueden comenzar o exacerbarse
durante el embarazo.

La toxemia aparece ms a menudo en mujeres primigrvidas y en las de
ms de 35 aos de edad. La aparicin puede ser insidiosa o brusca y
comnmente despus de la 24 semana de gestacin. La hipertensin es un
signo temprano acompaado por lo general de proteinuria, el Nitrgeno de
Urea muchas veces no se eleva a ms de 20 mg/dl y el cido rico
habitualmente elevado, refleja una disminucin en la depuracin renal de los
uratos. Se presenta hipoalbuminemia que generalmente contribuye a la
formacin del edema.
Q.F.B
32
En esta prctica se realizarn las siguientes pruebas: EGO, Qumica
Sangunea Completa, Protenas Totales y Albmina, Calcio y Fosfatasa
Alcalina.

Material y Mtodos.-
Sesin No.16
Se efectuar la QSC

Reactivos: Equipo:
Equipo para Glucosa Sera-Pak Espectrofotmetros c/celdas
Equipo para Urea Sera-Pak, Baos Maras a 37 C
Equipo para Creatinina Sera-Pak Termmetros
Equipo para cido rico Spinreat Centrfuga
Equipo para Colesterol Sera-Pak
Material por Equipo:
1 tubo Vacutainer rojo
Material por Seccin: torniquete, aguja y soporte
4 pip. 10 ml 1 pip. Pasteur c/chuzo
4 pip. 5 ml 10 tubos 13x100
6 pip. 1 ml 1/100 6 tubos pyrex 16x150
5 pip. 0.1 ml 1/100 1 pip. 0.1 ml 1/100
1 pip. 5 ml
1 gradilla

Tcnicas de la Sesin No.16.-
Se anexan los insertos de la Qumica Sangunea Completa

Material y Mtodos.-

Sesin No.17
Se realizarn las cuantificaciones de Protenas Totales y Albmina, Fosfatasa
alcalina total y placentaria y EGO

Reactivos: Equipo:
Equipo para Protenas Totales y Alb. Centrfuga
Equipo para Fosfatasa Alcalina Espectrofotmetros c/celdas
Tiras reativas para EGO Combur 10 Bao Mara a 37 C
Termmetro
Lector de Tiras reactivas
Material por Seccin:
4 pip. 10 ml Material por Equipo:
1 pip. 1 ml 1 tubo Vacutainer rojo
1 pip. 0.1 ml 1/100 torniquete, aguja y soporte
1 pip. 5 ml 1 pip. Pasteur corta c/chuzo
1 porta y 1 cubreobjetos
Q.F.B
33
2 tubos 13x100
8 tubos 16x150
1 pip.5 ml
1 pip. 1 ml 1/100
1 pip. 0.1 ml 1/100
1 gradilla

Tcnicas para Sesin No. 17.-

Se anexa el inserto de las Tiras Reactivas(EGO), protenas totales y albmina,
as como para fosfatasa alcalina total y placentaria.

Bibliografa:
Griffin, J.E.: Manual Clnico de Endocrinologa y Metbolismo, Ed.Mc Graw Hill,
Mxico
Henry, J.H.: Tood-Sanford-Davidsohn Diagnstico y tratamiento clnico por el
laboratorio, Ed. Salvat, Barcelona Espaa

Lab Quimica Clinica III

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