OBJETIVO: El estudiante deber determinar y hacer un anlisis detallado de una muestra de leche fresca de vaca, para determinar su calidad. (Caracteres organolpticos, Anlisis Higinico Sanitario y Anlisis fisicoqumico).
FUNDAMENTO: La leche es un lquido blanquecino y opaco producido por la secrecin de las glndulas mamarias de las hembras de los mamferos. Esta capacidad secretora es una de las caractersticas que definen a los mamferos. La leche es la materia prima con la que se elaboran numerosos productos lcteos, como la mantequilla, el queso, el yogur, entre otros. Es muy frecuente el empleo de los derivados de la leche en las industrias agroalimentarias, qumicas y farmacuticas en productos como la leche condensada, leche en polvo, casena o lactosa. La leche de vaca se utiliza tambin en la alimentacin animal. Est compuesta principalmente por agua, iones (sal, minerales y calcio), carbohidratos (lactosa), materia grasa y protenas. De acuerdo a los estndares de de identidad, la leche de vaca se define como la secrecin lctea, entera, no adulterada y no ajustada obtenida por ordeo complejo de animales bovinos sanos y que no contienen cantidades apreciables de calostro. El trmino leche no calificado, significa leche de vaca. La leche fresca de vaca es un alimento de composicin compleja; ya que contiene la lactosa en solucin acuosa, las protenas en estado coloidal, la grasa en estado de emulsin y los minerales formando complejos con la casena o bien en forma de sales en solucin acuosa. El equilibrio fisicoqumico de la leche es solo temporal y puede modificarse rpidamente por factores fsicos o bien por factores qumicos siendo los ms importantes, la separacin parcial de los glbulos de la grasa y la coagulacin de la casena promovida por el pH del medio acuoso (debido a la produccin de acido lctico por las bacterias lcticas) la minimizacin de los cambios de la leche fresca de la vaca antes de ser sometida a cualquier proceso de conservacin o transformacin, es determinante para su aceptacin y es a travs de los anlisis que podemos evaluar su nivel de calidad. La leche de vaca fresca puede ser utilizada para cualquier producto lcteo; desde leches pasteurizadas hasta el producto que menos se parece al original como es un caseinato o bien un derivado como el lcteo de amonio; pero evidentemente la leche de mejor calidad tanto fisicoqumica como sanitariamente, va a ser seleccionada para elaborar aquellos productos que requieran tales caractersticas (yogurt y leches ultrapasteurizadas). Las operaciones comunes a las que deben ser sometida la leche una vez recolectada son las siguientes: I.-FILTRACION: su objetivo es eliminar las impurezas visibles como pelos, partculas de excremento, partculas vegetales y polvo. II.-CLARIFICACION: su objetivo es darle una limpieza ms profunda, eliminado partculas extraas que no fueron removidas durante la filtracin y que en la centrifugacin son eliminadas. III.-ALMACENAMIENTO REFRIGERADO: el objetivo es reducir la actividad tanto reproductiva de los microorganismos que contaminan la leche como la actividad metablica que pudieran modificar el estado fisicoqumico de la misma.
Pruebas a realizar en el laboratorio para determinar la calidad de la leche fresca de vaca: 1.- CARACTERISTICAS ORGANOLEPTICAS. a)Color b)Olor c)Sabor
2.-ANALISIS HIGIENICO-SANITARIO. Filtracin de la leche a travs de un algodn y comparar el residuo, observar con lupa microscopio. 3.- ANALISIS FISICOQUIMICO a) Densidad.- No es un valor constante, depende de la concentracin de los elementos disueltos y en suspensin (Slidos No Grasos); la densidad vara proporcionalmente a esta concentracin. Proporcin de materia grasa; teniendo esta una densidad inferior a 1, la densidad vara de manera inversa al contenido graso. b) Acidez.- La valoracin acidimetra de la leche fresca es una medida indirecta de su riqueza en casena y fosfatos. Leche fresca contiene un promedio 0.12 a 0.18% cido lctico. MEDICION: Determinacin volumtrica. Con NaOH 0.1N y como indicador solucin fenlica de Fenoftalena al 1%. La cantidad de acidez se expresa en % de ACIDO LACTICO. c) pH.- La leche tiene una reaccin inica cercana a la neutralidad. Entre 6.6 y 6.8. Por debajo de 6.5 o superiores a 6.9 se considera ANORMAL.MEDICION: Se usa el potencimetro.
d) Slidos Totales.- % SLIDOS TOTALES = (B-A)/P x 100 Donde: B= Peso Cpsula con arena y muestra seca. A=peso de la capsula con arena. P = PESO DE LA LECHE
e) Slidos grasos.- Mtodo volumtrico de gerber. Se aade la leche a cido sulfrico (90%, densidad 1.82-1.83) en un tubo graduado especial, (butirometro). Precipita y disuelve protenas adems de que digiere la membrana del glbulo de grasa y eleva la temperatura de la muestra. La viscosidad disminuye, la grasa funde, se aglomera y separa por diferencia de densidades. El alcohol isoamilico (densidad 0.810 a 0.812). Favorece la ruptura de la emulsin, promueve la separacin de la grasa, previene la sulfonacin y carbonizacin de la grasa.
f) Slidos no grasos.- Se determinan usando la siguiente frmula: SLIDOS NO GRASOS = SLIDOS TOTALES SOLIDOS GRASOS
g) Prueba de Alcohol.- Consiste en observar las modificaciones cuando se mezclan leche con alcohol etlico al 68% en peso m/m, los resultados: Coagulacin positiva negativa. Leches Frescas anormales que presentaran poca estabilidad al calor, por lo tanto no podran ser utilizadas para procesos de pasteurizacin.
h) Neutralizantes. i) ndice de refraccin.
MTODOS
Caracteres Organolpticos Reportar Color Olor Consistencia Sabor Anlisis Higinico Sanitario Medir 30cm de algodn Filtrar medio litro de leche Observar los residuos Reportar Anlisis fisicoqumicos Acidez Pesar 9.0 gr de leche en un vaso de precipitados Diluir con 10ml de agua destilar Adicionar 5 gotas de solucin alcohlica de fenolftalena Agitar Adicionar gota a gota solucin de NaOH al 0.1N Observar hasta obtener coloracin rosa plido persistente durante 30 seg. Hacer clculos y reportar %Acidz= V(N)(0.90)/M (100) V: Volumen gasto en titulacin N: Normalidad del reactivo empleando en la titulacin M: Volumen de la leche empleada Ph Pesar 100gr de leche en un matrz Erlen Meyer de 250ml Calibrar el potencimetro con solucin buffer pH=7 Introducir el electrodo en la leche y reportar Slidos totales Pesar cpsula a peso constante Agregar 10gr de leche Mezclar con agitador Calentar a BM 20min colocando la cpsula en un tringulo refractario Secar en estufa 4hr/99C Slidos Grasos (Mtodo Gerber) Colocar el butirmetro 10ml de cido Sulfrico, 11ml de leche y 1ml de cido amlico Cerrar el butirmetro con el tapn de caucho Mezclar con precaucin hasta disolver los grumos Colocar el butirmetro con el tapn de caucho hacia abajo 15min/60C Realizar la lectura en la escala y reportar en % Slidos no grasos Determinarlos por diferencia S. no grasos = S. tolales- S. Grasos Reportar Prueba del alcohol Tomar 2ml de la muestra en un tubo de ensaye Adicionar 2ml de alcohol Mezclar sin agitacin Observar y Reportar Neutralizantes (Deteccin de Cal y hidrxido de Calcio) Tomar 50ml de leche y dejarla reposar Filtrar con papel filtro Al filtro con sedimento agregar 2ml de solucin de Oxalato de Potasio y 6 gotas de fenolftalena Observar y reportar Antispticos y conservadores (Deteccin de formaldehido) A un tubo de ensaye adicionar 5ml de leche Agregar por las paredes 5ml de Ac. Sulfrico concentrado con trazas de Tricloruro Frrico No mezcle Observe la formacin de dos capas Reportar Positivo si se encuentra coloracin violeta Deteccin de cido Brico Agregar 5ml de leche a tubo de ensaye Agregue 4 gotas de fenolftalena Titule con NaOH hasta coloracin rosa Divida la muestra en dos tubos de ensaye Tubo 1: Agregue agua destilada Tubo 2: Agregue solucin de glicerina Reportar positivo si el tubo con glicerol tiene una coloracin blanca brillante Adulterantes: (Almidn) Tomar 10ml de leche en tubo de ensaye Calentar a ebullicin Enfriar con bao de hielo Aadir 2gt de solucin con yodo Reportar Positiva una coloracin Azul- Rojiza (Sacarosa) Medir 15ml de leche en tubo de ensaye Aadir 1ml de HCl y 0.1 de resorcina Agitar y calentar a BM 45C/5min Reportar positivo si encuentra coloracin rojiza ndice de Refraccin Colocar 20ml de leche Aadir 5ml de solucin de sulfato de cobre Agitar y filtrar Calibrar el refractmetro Colocar 1-2 gts del filtrado en el prisma del refractmetro Determinar el ndice de refraccin y convertirlos a grados refractomtrico. Use el cuadro de su manual pag.37 Reportar OBSERVACIONES: Anlisis Higinico Sanitario.................Determinacin de acidz.
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Determinacin de pH (Potencimetro)...............Slidos Grasos (Gerber)
Prueba del alcohol..............................Deteccin de almidn
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Antispticos y conservadores...................... ndice de Refraccin ----------------
En el anlisis higinico sanitario no se utilizaron los estndares para comparar el residuo hallado en el filtro de algodn y por lo tanto se clasifico la leche de acuerdo a los trminos descritos en el manual de prcticas, clasificada en:
C. leche sucia: Aquella que deja un residuo evidente en el filtro.
Cuando se realizo la determinacin de slidos totales y se peso la capsula hasta peso constante no se pesaron los 25 gramos de arena debido a que no se tenia disponible en el momento y en su defecto se utilizo una varilla de vidrio para agitar constantemente y as evitar la formacin de nata. En la realizacin de la prueba de alcohol dio positiva observndose la formacin de grumos indicando la presencia de bacterias en la leche El ndice de refraccin de la leche fue de 1.345 lo cual equivale en el refractmetro a 38.0 lo cual nos indica que no ha tenido un proceso de adulteracin ya que grados menores a 37.0 nos indican signos de aguado o agregado de agua y lecturas por arriba de 39.0 indican adicin de solutos o adulterantes. . . RESULTADOS:
Anlisis fisicoqumico pH: 6.67 Acidez: VR. 0.12 o 0.18 Slidos totales: 9.615% Slidos grasos: 2.4% Slidos no grasos: 7.215% Prueba del alcohol: Presencia de cogulos (+) Neutralizantes: Prueba negativa, no hay presencia de leche de cal. Por lo tanto no hay cambio a rosa. Adulterantes: Almidon: (-) no hubo cambio de color Sacarosa: (-) no hubo cambio de color Acido brico: Prueba negativa Formaldehido: Negativo ndice de refraccin: 1.345 . . CONCLUSIONES
El anlisis de leche de acuerdo a las pruebas realizadas nos dio como resultado que la leche solo se puede utilizar para la elaboracin de queso y algn otro tipo de productos lcteos ya que la prueba del alcohol dio positiva indicando la presencia de bacterias, tambin podemos concluir que los mtodos de higiene utilizados desde la ordea de la vaca no son los ms adecuados ya se observo presencia de basura y pelos del animal.
Por lo tanto se puede establecer que la leche no tiene buena calidad para el consumo humano. . . BIBLIOGRAFA ANALISIS DE LECHE EN EL LABORATORIO. Control de calidad de leche cruda.Presentacin en ppt. Q.F.B. Rocio Lara Madrigal. Anlisis de leche. Tcnicas analticas. Calidad. Legislacin. Consumo. Acidez. Lactosa. Protenas. Casena. Disponible en internet en: