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ASOCIACIN

UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA


FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
I CICLO
GUIA DE PRCTICA DE BIOLOGIA CELULAR Y
MOLECULAR
PROFESOR RESPONSABLE:
DRA. EDITH RODRGUEZ QUISPE
1
ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
PRACTICA N 1
LABORATORIO: INSTRUMENTAL Y SEGURIDAD

I. OBJETIVOS:
Dar a conocer los lineamientos bsicos de organizacin, instrumental y seguridad en el laboratorio sea de
anlisis clnico o de investigacin.
II. MATERIALES Y EQUIPOS DE LABORATORIO:
Tubos de ensayo
Placas de Petri
Pipetas
Bagetas
Matraces(rlenmeyer, !iolas"
Probetas
Bea#er (vasos de precipitacin"
Pipetas (graduadas y volum$tricas
Mec%eros de Bunsen y de alco%ol
&sas de 'olle
Balanza analtica
stu(a o incubadora
)ornos
&utoclave
spectro(otmetros o colormetros
P) metros
2
3
III. PROCEDIMIENTO:
1. ORGANIZACIN:
*eneralmente los laboratorios (uncionan de acuerdo a las actividades +ue %a de
realizar se debe considerar reas, estructura y dise,o interior, considerando lo
siguiente-
Mesas de traba.o y repisa sobre la mesa
Mesa para instrumentales (balanza, microscopio, p) metro, etc."
&rmarios para reactivos y material de vidrio
/tractor de gases.
2. SECCIONES:
0ada laboratorio puede presentar una o varias secciones dependiendo de la
naturaleza de la actividad. n (orma general el laboratorio debe contar reas (sicas
o secciones-
Toma de muestra
1eparacin y clasi(icacin de muestras
2avado y esterilizacin
&lmac$n
1ala de traba.o
3. CUIDADO DE LOS MATERIALES Y EQUIPOS:
3.1. C!"#"$ "%& '#(%)!#& "% *!")!$:
Todo material de vidrio debe estar ubicado en una zona espec(ica y codi(icados. l
material a guardar debe estar completamente limpio, para lo cual debe ser sometido a
un riguroso lavado, dependiendo del caso se usar mezcla sul(ocrmica o agua regia
debiendo ser sometidos posteriormente a numerosos en.uagues con agua corriente y
(inalmente con agua destilada o bidestilada, y otros podrn ser autoclavados. 2os
materiales sern sometidos a temperaturas de 345 678 0 para el secado respectivo.
3.2. C!"#"$ "% %+!,$-:
Todo e+uipo o instrumental debe estar ubicado en una zona de poco transito, alta
iluminacin y en una mesa slida. Para el mane.o de los mismos se debe tener
conocimiento de la manipulacin debi$ndose contar con el manual respectivo. &ntes
de comenzar a operar un e+uipo veri(icar el volta.e, resistencia y ampera.e del e+uipo.
Terminado el traba.o el instrumental debe +uedar limpio y apagado. &notar en el
cuaderno de control la (ec%a, %ora de inicio y t$rmino de uso del e+uipo.
.. SEGURIDAD:
2a seguridad en el laboratorio es de alta responsabilidad. 0ual+uier actividad en un
laboratorio tiene riesgos potenciales. 2as reglas generales son-
9. l laboratorio :; es un lugar para correr, empu.ar y bromear.
<. &prende donde esta y como se usa el e+uipo de seguridad.
3. 2ee todas las instrucciones para la actividad &:T1 de empezar a traba.ar.
Pon atencin a las notas +ue indican P=0&>0?;:.
6. 0ual+uier accidente, in(ormar inmediatamente al responsable del laboratorio.
7. :o comer ni beber en el laboratorio. :o probar ninguna sustancia +ue se use en
el laboratorio. 2avarse las manos antes y despu$s de cual+uier actividad.
@. 2levar a cabo solamente a+uellas actividades +ue se nos asigna. :unca traba.es
4
solo en el laboratorio
4. Mantener el rea de traba.o limpia- sin libros, ni papeles, ni e+uipo alguno
innecesario.
A. &segurarse de apagar las salida de gas, mec%eros, %ornillas y de cerrar todas
las llaves de agua al terminar la clase.
B. 1igue las instrucciones del pro(esor acerca de la (orma adecuada de limpiar y
recoger los materiales.
9C. >sar M&:D?2 para cubrir la ropa cuando se esta traba.ando en el laboratorio.
99. &l calentar materiales, inclinar el tubo de ensayo en direccin (uera de uno y de
los dems.
/. S0MBOLOS DE SEGURIDAD:

IV. CUESTIONARIO:
Describe 2 protocolo para preparar agua regia y mezcla sul(ocrmica.
Dibu.e cuatro smbolos de seguridad
Due usos tiene la centr(uga y el p) metro en un laboratorioE

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CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
PRACTICA N1 2
MICROSCOPIA: ESTUDIO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO
I. OBJETIVO
9. 0onocer e identi(icar correctamente las partes pticas y mecnicas del microscopio compuesto.
<. !amiliarizar al alumno con el uso correcto, cuidado y conservacin del microscopio.
II. MATERIALES
6 Microscopios
6 2minas portaob.etos
6 2aminillas cubreob.etos
2minas coloreadas
1uero (isiolgico
Pipeta Pasteur
9 Plumn indeleble
Papel lente
Tela de (elpa(<7 cms"
!ibra de pelo y lana
???. PARTES DEL MICROSCOPIO
=econocer cada una de las siguientes partes del microscopio-
PARTE MECANICA
Tubo portalentes y cremallera
Tornillos macro y microm$trico
=evolver
Platina
0ondensador
Brazo y Pie
0%arnela
PARTE OPTICA
;cular
;b.etivos
spe.o
2entes de condensador
Dia(ragma
?F. SISTEMAS QUE COMPRENDE EL MICROSCOPIO
9. 1istema de soporte- comprende el brazo, el pie, el tubo ocular, el revolver y la
platina.
<. 1istema de ?luminacin- comprende el (oco, condensador y dia(ragma.
3. 1istema de &.uste- comprende el macrom$trico, microm$trico y cremallera
6. 1istema de &umento- comprende el ocular generalmente de 9C / , 97 / y los
ob.etivos de 7/, 9C, 6C, y 9CC/.
F. PROTOCOLO DE LAS OBSERVACIONES REALIZADAS
;BGT?F; &>M:T; M>1T=& :8 9 M>1T=& :8 < M>1T=& :8 3 M>1T=& :8 6



F?. 0>1T?;:&=?;
9. De(inir +ue es una imagen real y +ue una imagen virtual
<. Due es el poder de resolucin y a +u$ se denomina Hndice de =e(raccin
3. Due clase de microscopios se conocen actualmente.
6. Due importancia tienen las imgenes obtenidas a trav$s del microscopio
electrnicoE
7. =ealice un es+uema del microscopio compuesto y se,ale sus partes.
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PRACTICA N 3

RECONOCIMIENTO EN MATERIAL BIOLGICO DE LOS CARBOHIDRATOS
I. OBJETIVO
=econocer las unidades monom$ricas y macromoleculares como componentes
(undamentales de todos los seres vivos.
II. MATERIALES POR MESA
1olucin de *lucosa al 9I (Monosacrido"
1olucin de (ructuosa al 9I(Monosacrido"
1olucin de 1acarosa al 9I (Disacrido"
1olucin de Maltosa al 9I (Disacrido"
1olucin de &lmidn al 9I (Polisacrido"
1olucin de 2ugol
Jcido sul(Krico concentrado
=eactivo de Molis%
=eactivo de Benedict
Tubos de 93/9CC
Tubos de 9@/97C
Pipeta de vidrio de 7 ml. graduada
Bombilla de .ebe para pipeta
Pinzas de madera
Mec%eros, trpode, re.illa de asbesto
III. PROCEDIMIENTO
3.1. D%(%)'!2#3!42 G%2%)#& "% G&53!"$-:
2os *lKcidos o )idratos de carbono por accin des%idratante del cido sul(Krico
originan compuestos derivados del (ur(ural, los +ue en presencia del al(a5na(tol
presente en el R%#3(!*$ "% M$&!-6, (ormarn un compuesto coloreado.
P)%,#)#3!42:
9. 0olocar 9 ml. De cada solucin del glKcido al 9I (*lucosa, !ructuosa, 1acarosa
y &lmidn" en un tubo de 93/9CC y roturarlo.
<. &dicionar a cada tubo con glKcido una (9" gota del =eactivo de Molis%.
3. &gregar lentamente por la pared del tubo sin agitar 9 ml. de cido sul(Krico
concentrado.
6. ;bservar si %ay cambio de color.

3.2. D%(%)'!2#3!42 "% A753#)%- R%"3($)%-:
>n &zKcar reductor al ser sometido a la accin del calor en el medio alcalino del
R%#3(!*$ "% B%2%"!3(, su(re (enmenos de enolizacin y se (ragmenta (ormando
cuerpo (uertemente reductores para el cobre del =eactivo de Benedict +ue se
trans(orma en ?on cuproso (0u
L
" el +ue reaccionar con los iones ;)
5
del medio para
(ormar ;/ido cuproso (0u<;" +ue es de color ro.o ladrillo.
P)%,#)#3!42:
9. 0olocar < ml. de cada solucin de glKcido al 9I (*lucosa, !ructuosa,
1acarosa, Maltosa y &lmidn" en un tubo de 9@/97C mm y roturarlo.
<. &dicionar 9 ml. de =eactivo de Benedict a cada tubo.
3. 1ometer los tubos a ebullicin en agua %irviendo con ayuda de una pinza por
cinco (7" minutos.
6. ;bservar la (ormacin de color (ro.o ladrillo si es positivo"
3.3. D%(%)'!2#3!42 "% A&'!"42:
l yodo del 2ugol es absorbido por el almidn y (orma con $l compuestos comple.os de
color azul negruzco (yoduro de almidn".
P)%,#)#3!42:
9. 0olocar < ml. de solucin de &lmidn al 9I en un tubo de 9@/97C mm.
<. &dicionar 3 gotas de 2ugol y agitar.
3. ;bservar la (ormacin de color (azul negro si es positivo"
IV. PROTOCOLO
&. Determinacin de *lKcidos.
B. Determinacin de azKcares reductores.
0. Determinacin de &lmidn.
V. CUESTIONARIO
9. De(ina-
Monosacrido
Disacridos
Polisacrido
<. /pli+ue el (undamento de las reacciones realizadas.
3. stablezca di(erencias biolgicas y +umicas entre la glucosa, maltosa y
glucgeno
6. Dibu.e la estructura de la sacarosa y maltosa e indi+ue el motivo por el +ue una
de ellas :; es reductora.
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PRACTICA N .

RECONOCIMIENTO EN MATERIAL BIOLOGICO DE LIPIDOS Y PROTEINAS
I. OBJETIVO
=econocer +ue compuestos orgnicos como los lpidos y protenas son constituyentes
importantes en todos los seres vivos.
II. MATERIALES POR MESA
&ceite comestible
&lbKmina al 9I
0lara de %uevo
&lco%ol
0loro(ormo
Mter etlico
1udam ???
)idr/ido de sodio al 6CI
1ul(ato de cobre al 9I
Jcido ntrico concentrado
Tubos de 9@ / 97C mm.
Pipetas graduadas de 7 ml.
III. PROCEDIMIENTO
DETERMINACION DE LIPIDOS
A. S$&8!&!"#" "% &$- L9,!"$-
2os lpidos son insolubles en agua y solubles en solventes orgnicos como el
$ter y cloro(ormo.
P)%,#)#3!42:
9. 0olocar < ml. de &ceite en cada tubo y agitar
<. &gregar-
n el tubo :8 9- < ml de agua destilada
n el tubo :8 <- < ml. de &lco%ol
n el tubo :8 3- < ml. de cloro(ormo
n el tubo :8 6- < ml. de $ter etlico
3. ;bservar, en cada tubo si %ay solubilidad o no.
6. 2a solubilidad del aceite es positiva en el alco%ol, cloro(ormo y $ter etlico.
B. S$&8!&!"#" "%& S"#' III
l 1udam ??? es un compuesto coloreado +ue es mas soluble en los lpidos +ue
en el alco%ol, al solubilizarse en los lpidos produce una coloracin rosada.
P)%,#)#3!42:
9. 0olocar 9 ml. de aceite comestible en un tubo de 9@/97C mm.
<. &dicionar 9 ml. de 1udam ???
3. ;bservar la coloracin producida.
6. 2a (ormacin de una coloracin rosada indica +ue la prueba es positiva.
DETERMINACION DE PROTEINAS
A. REACCION DE BIURET
2os compuestos +ue contienen dos o ms enlaces peptdicos (orman un
comple.o con las sales de cobre en un medio (uertemente alcalino, dando un
color pKrpura o violeta.
P)%,#)#3!42:

9. 0olocar < ml. de la solucin de &lbKmina al 9I o solucin 0lara de
%uevo al 9CI en un tubo de 9@/97C mm.
<. &gregar < ml. de la solucin de H!")4:!"$ "% -$"!$ #& .;< y mezclar.
3. &,adir < gotas de S&=#($ "% 3$8)% #& 1<.
6. ?ncubar a <7N 0 por 3C minutos.
7. ;bservar la coloracin producida.
R%-&(#"$
2a (ormacin de una coloracin violeta o pKrpura indica +ue la prueba es
positiva.
B. REACCIN >ANTOPROTE0CA
2as protenas +ue presentan aminocidos con anillos benc$nicos, cuando se
someten a la accin del ?3!"$ 29()!3$, dan derivados nitrogenados +ue se
colorean de amarillo.
P)%,#)#3!42:

9. 0olocar < ml. de la solucin de &lbKmina al 9I o 0lara de %uevo al
9CI en un tubo de 9@/97C
<. &dicionar < ml. de cido ntrico concentrado.
3. ;bservar la (ormacin de un precipitado blanco y %ervir por 3 minutos.
6. ;bservar la coloracin producida.
R%-&(#"$
2a (ormacin de una coloracin amarillo 5 claro evidencia la presencia de
protenas.
IV. CUESTIONARIO:
9. Por +u$ los lpidos no se disuelven en el agua.
<. De +ue manera participan los lpidos en la estructura celular.
3. Due entiende por desnaturalizacin de las protenas.
6. !orme una protena constituida por @ aminocidos.
7. &minocidos aromticos- estructura y (uncin.
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PRACTICA N 5
OBSERVACIONES CELULARES: PROCARIOTES BACTERIAS! Y
EUCARIOTES HONGOS Y PARASITOS!.
I. OBJETIVO
C"#"$%& '()%&*"* "&+,#(*-"* -($&".(,#"* '%#"-(#,'"*
B,$/%&(,*0 P&"/"1",&("*0 2"#+"* 3 4,&5*(/"* 67%
%*/5# 8"&-,'"* 4"& 7#, *"9, " ),&(,* $:979,* 3 67%
2,.(/,# '()%&*"* -%'("* #,/7&,9%*.
V(*7,9(1,& $(%&/,* $,&,$/%&;*/($,* %*/&7$/7&,9%* %#
%99,*.
MATERIALES POR MESA
L,-(#,* $"# -7%*/&,* 4&%4,&,',* '% .,$/%&(,*0
2"#+"* 3 4,&5*(/"*
P,9(/"* -"#','(%#/%*
S"97$(<# 8(*("9<+($, ,9 =.>5?
S"97$(<# M%&$7&" $&"-"
S"97$(<# '% V("9%/, '% +%#$(,#,
A9$"2"9 3"','"
L,-(#, 4"&/,".@%/"*
L,-(#, $7.&%".@%/"
A$%(/% '% (#-%&*(<#
D%4<*(/" 4,&, %9(-(#,& 95-(#,* 3 9,-(#(99,*.
PROCEDIMIENTO
C"9"$,& 7#, +"/, '% *"97$(<# 8(*("9<+($, *".&% 7#,
95-(#,. C"# %9 -"#','(%#/%* "./%#%& 7#, -7%*/&, '%
*,&&" '%#/,9 3 %*4,&$(& %# %*4(&,9 %# 9, +"/, '%
*"97$(<# 8(*("9<+($,.
S%$,& , /%-4%&,/7&, ,-.(%#/% 3 7#, )%1 *%$" $7.&(&
$"# $"9"&,#/% M%&$7&" '% $&"-" 4"& 5 -(#7/"*.
E#@7,+,& 3 ,49($,& (#-%'(,/,-%#/% %9 $"9"&,#/%
V("9%/, '% +%#$(,#,.
D%@,& 4"& 3 -(#7/"*0 9,),& $"# ,+7, '% $,A". S%$,&
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,-.(%#/%.
L,* 95-(#,* $"# -7%*/&,* 4&%4,&,',* '% .,$/%&(,* 3
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L,* 95-(#,* '% 2"#+"* 3 4,&5*(/"* ".*%&),& $"#
".@%/()"* *%$"* '% 2= 3 4= ,7-%#/"*.
PROTOCOLO

A7-%#/"
M7%*/&, $"# S,&&" '%#/,9 $"9"&%,',!
L,-(#, $"# -7%*/&, .,$/%&(,#,
L,-(#, $"# -7%*/&, F7#+,9 H"#+"!
L,-(#, $"# -7%*/&, '% 4,&5*(/"*
4 B
1= B
4= B
1== B
ASPERGILLUS HONGO!
PENICILLUM HONGO !
CUESTIONARIO
9. Due son organismos Procariotes y ucariotes.
<. Due (ormas microbianas observ.
3. Due tipo de coloraciones se utilizaron en las preparaciones realizadas en la prctica.
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PRACTICA N @

OBSERVACION DE MEMBRANA Y PARED CELULAR: CELULA ANIMAL Y
VEGETAL
I. OBJETIVO
Poder di(erenciar al microscopio las caractersticas +ue presentan la membrana
celular de la c$lula animal y la pared celular de la c$lula vegetal.
??. MATERIALES POR MESA
Muestra de c$lula epitelial de la mucosa bucal
Muestra de cat(ila de cebolla (&llium cepa"
Microscopios
2minas portaob.etos
2aminillas cubreob.etos
Bistur
Pinza de punta recta
Mec%ero de alco%ol
0olorante &zul de metileno
0olorante 2ugol
&lco%ol yodado
1olucin (isiolgica
Papel secante
Papel lente
???. PROCEDIMIENTO
AA OBSERVACION DE CELULA ANIMAL BRASPADO DE MUCOSA BUCALA
9. 0olocar una gota de solucin (isiolgica sobre la lmina portaob.etos.
<. 0on una lmina limpia %acer un raspado de la mucosa bucal.
3. 0olocar la muestra obtenida sobre la gota de solucin (isiolgica.
6. &plicar una gota del colorante azul de metileno sobre la muestra.
7. 0ubrir la preparacin con una laminilla cubreob.eto.
@. ;bservar con ob.etivo de 9CO y 6CO aumentos.
1C M%'8)#2# ,&#-'?(!3#D 2C M!($3$2")!#D
3C R%(93&$ %2"$,&?-'!3$ )E$-$D .C R!8$-$'#-D
/C N3&%$&$D @C C)$'#(!2#D
FC C!($-$& BG6!#&$,&#-'#AD HC D!,&$-$'# BG3%2()!$&$-AD
IC R%(93&$ %2"$,&?-'!3$ &!-$D 1;C A,#)#($ "% G$&E!
BA OBSERVACION DE CELULA VEGETAL BCATAFILA DE CEBOLLAA
9. 0on ayuda de la pinza separe una de las cat(ila de la cebolla y e/ti$ndalo
sobre la lmina portaob.eto.
<. 0on el bistur corte cuadritos de medio centmetro de cat(ila.
3. 0olo+ue un cuadrito de la cat(ila sobre una lmina portaob.eto y agregar
una gota de 2ugol.
6. 0ubrir la preparacin con una laminilla cubreob.eto.
7. ;bservar con ob.etivos de 9C/ y 6C/
CA OBSERVACION DE UNA CELULA FUNGICA
9. n una lmina preparada observar un cultivo de %ongo coloreada con
&zul de 2acto(enol.
<. ;bservar con ob.etivos de menor y mayor aumento.
?F. PROTOCOLO JAJ - ;bservacin de c$lula animal

&>M:T;
RASPADO DE LA MUCOSA BUCAL
0on 1uero !isiolgico
con &zul de Metileno



PROTOCOLO JB P- ;bservacin de c$lula vegetal.
&>M:T;
CATAFILA DE CEBOLLA
con 1uero (isiolgico con 2ugol
PROTOCOLO KCL: ;bservacin de una c$lula (Kngica.
&>M:T;
CELULA FUNGICA BHONGO"
0;2;=&0?Q: &R>2 D 2&0T;!:;2
9C O
6C O
F. CUESTIONARIO
Du$ caractersticas presenta la membrana celular de la mucosa epitelial y la pared celular de
la c$lulas vegetales.
0ual es la importancia de los colorantes en las pruebas biolgicas
Due tipo decolorante es el azul de metileno y cual es su estructura.
0on +ue (inalidad se uso el 2ugol en la preparacin de laminas.
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PRACTICA N C

FENOMENOS FISICOS DE LA CELULA: DIFUSION0
OSMOSIS
OBJETIVO
O.*%&),& 9"* 8%#<-%#"* '% '(87*(<# 3 <*-"*(* 3 *7
(-4"&/,#$(, 4,&, 9, $:979,.
II. MATERIALES

L5-(#,* 4"&/,".@%/"
L,-(#(99,* $7.&%".@%/"*
T7."* '% 4&7%.,
L,#$%/,* 2%-,/"9<+($,*
S"97$(<# '% N,C9 ,9 =.4?
S"97$(<# '% N,C9 ,9 =.D?
S"97$(<# '% N,C9 ,9 2.=?
A+7, '%*/(9,',
A9$"2"9 $"&&(%#/%
A9+"'<# %*/:&(9
P(4%/,* '% 1 -9.
V,&(99,* '% )('&(" -,$(1"
G&,'(99,*
M($&"*$"4("*
III. PROCEDIMIENTO
A! EE4%&(-%#/" $"# %&(/&"$(/"*:
1. E# 9"* /7."* '% 4&7%., 4%&8%$/,-%#/% #7-%&,'"*0
$"9"$,&:
E# %9 1%&. /7.": 2 -9. '% S"9. N,C9 ,9 =.4
?
E# %9 2'". /7.": 2 -9. '% S"9. N,C9 ,9 =.D
?
E# %9 3%&. /7.": 2 -9. '% S"9. N,C9 ,9 2.=
?
2. D%*(#8%$/,& %9 '%'" $"&'(,9 /%&$%&"! $"#
,9+"'<# 27-%'%$('" %# ,9$"2"9
3. R%,9(1,& 7#, 47#$(<# $"# ,37', '% 9, 9,#$%/,
'%*$,&/,.9%0 %# %9 '%'"
4. D%@,& $,%& 3 +"/,* '% *,#+&% %# $,', 7#" '% 9"*
/7."*
5. A+(/,& 9"* /7."* 3 '%@,& %# &%4"*" '7&,#/% 2
-(#7/"*
F. C"# 9, ),&(99, '% )('&(" $"9"$,& *".&% %9
4"&/,".@%/" 7#, +"/, '% 9, -7%*/&, '% 9"* /7."*
C. C"9"$,& %9 $7.&%".@%/" 3 ".*%&),&:
L,* 95-(#,* 4&%4,&,',* ,9 -($&"*$"4("0 3
E9 ,*4%$/" '% 9"* /7."* 2,*/, 9"* 15 -(#7/"*.
B! EE4%&(-%#/" $"# )%+%/,9%*:
1. E# /7."* '% 4&7%., 4%&8%$/,-%#/% #7-%&,'"*0
&%4%/(& %9 47#/" #G-%&" 1
2. A+&%+,& , $,', /7." /&"$(/"* '% )%+%/,9
3. D%@,& %# &%4"*" '"* -(#7/"*0 97%+" 99%),& %9
)%+%/,9 %#/&% 95-(#, 3 9,-(#(99,.
4. O.*%&),& ,9 -($&"*$"4("
IV. RESULTADO:
O.*%&),& %9 %&(/&"$(/" %# *"97$(<# 2(4"/<#($, 67% *%
2(#$2, 3 %*/,99, H%-<9(*(*!.
O.*%&),& %9 %&(/&"$(/" %# *"97$(<# 2(4%&/<#($, 67%
4(%&'% ,+7, 3 *% $"#/&,% C&%#,$(<#!.
O.*%&),& %9 )%+%/,9 %# *"97$(<# 2(4"/<#($, $"-" 9,
),$7"9, *% 2(#$2, T7&+%#$(,!.
O.*%&),& $"-" %9 )%+%/,9 %# *"97$(<# 2(4%&/<#($,
*,9% ,+7, 3 %9 $(/"49,*-, *% $"#/&,% P9,*-<9(*(*!.
PROTOCOLO
C%979, ,#(-,9 %&(/&"$(/"*!
INCLUDEPICTURE
H2//4:IIJJJ.%8#.7#$"&.%'7I'%4I.("9"+(,I(#/&.("9IFK>.
@4+H LM MERGEFORMATINET
C%979, )%+%/,9 $,/58(9, '% $%."99,!
INCLUDEPICTURE
H2//4:IIJJJ.%9%&+"#"-(*/,.$"-I.("9"+(,I==4.GIFH LM
MERGEFORMATINET
INCLUDEPICTURE
H2//4:IIJJJ.#,/7&,9%1,'%,&,+"#.$"-I2(*/"&(,#,/7&,9I$
%979,C.@4+H LM MERGEFORMATINET
E*67%-, '% 9, 49,*-"9(*(* %# $:979,* )%+%/,9%*
C%42,9,&(, 9%7$,#/2,!. P90 4&"/"49,*-,. )0 ),$7"9,.
10 %# ,+7,. 2 %# *"97$(<# #(/&" ,9 4?. 3. %# ('%-.
,9 F?. 4. %# ('%- ,9 1=?.
TUBOS
MUESTRA
REACCION
OBSERVACION
1
S"9.N,C9 =.4 ? N *,#+&%
)ipotnica
< 1ol.:a0l C.B I L sangre ?sotnica
3
1ol. :a0l < I L sangre

)ipertnica
6
1ol,:a0l C.6 L *%E%(#& )ipotnica
7 1ol.:a0l C.B L vegetal ?sotnica
@ 1ol.:a0l < L vegetal

)ipertnica
VI. CUESTIONARIO
9. Du$ es di(usin y cuantas clases e/isten
<. De(ina +ue es- ;smosis, Dilisis, Turgencia y Plasmlisis.
3. Di(erencia entre %emlisis y plasmolisis
6. !undamente lo +ue sucede en las tres reacciones realizadas.
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CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
PRACTICA N H


ORGANISMOS MOVILES: PSEUDOPODOSD CILIOS Y FLAGELOS.
?. OBJETIVOS
9. Feri(icar y comprender el movimiento de la c$lula de vida libre.
<. ;bservar y comprobar la e/istencia de estructuras para el movimiento celular.
3. 2legar a di(erenciar las di(erentes estructuras +ue intervienen en el movimiento
celular, %acer una comparacin entre ellas.
??. MATERIALES
A. MATERIAL DE LABORATORIO
Microscopios
Placas Petri
2minas portaob.etos
2aminillas cubreob.etos
*otero o Pipeta de 9 ml.
0olorantes- 52ugol al 6I
5Ferde de metilo
B. MATERIAL BIOLOGICO
0ultivo de Protozoarios.
???. PROCEDIMIENTO
0ultivo de Protozoarios-
n un (rasco mediano de boca anc%a, con agua estancada, preparar-
arroz, zana%oria, lec%uga picada y levadura
Mantener abierto al aire libre durante @ das, en un lugar donde no
%aya luz directa.
IV. OBSERVACION
&" M$*!'!%2($ #'%8$!"%$ ,$) -%"4,$"$-- A'$%8# ,)$(%- (0lase 1arcodina"
9. 1obre una lmina portaob.etos, con un gotero colo+ue una gota del cultivo de
protozoarios +ue contenga &moeba, cubrirlo luego con una laminilla
cubreob.etos.
<. &,adir despu$s de %aber observado una gota de V%)"% "% '%(!&$ o LE$&.
3. Dibu.ar las observaciones realizadas a 9C/, <C/ y 6C/.
B" M$*!'!%2($ =&#E%&#) ,$) =&#E%&$-- EE&%2# *!)!"!- (0lase Mastigop%ora"
9. 1obre una lmina portaob.etos, colocar una gota de cultivo +ue contenga
uglena y cubrir con una laminilla cubreob.etos.
<. &,adir despu$s de %aber observado una gota de verde de metilo o 2ugol.
3. Dibu.ar las observaciones realizadas.
0". M$*!'!%2($ 3!&!#) ,$) 3!&!$-- P#)#'%3!' 3#"#(' (0lase 0iliop%ora"
9. 1obre una lmina portaob.etos, colocar una gota de cultivo +ue contenga
Paramecium, y cubrirlo con una laminilla cubreob.eto.
<. &,adir despu$s de %aber observado la muestra anterior, una gota de verde de
metilo o 2ugol.
3. Dibu.ar las observaciones realizadas.
V. PROTOCOLO: REALIZAR ESQUEMAS DE LO OBSERVADO
&>M:T;
A'$%8# ,)$(%-
(1arcodina"
EE&%2# *!)!"!-
(Mastigop%ora"
P#)#'%3!' 3#"#('
(0iliop%ora"
9C O
<C O
6C O
VI. CUESTIONARIO
9. & +ue atribuye la gran movilidad de los Protozoarios.
<. /pli+ue las di(erencias entre los di(erentes tipos de movimientos- por
seudpodos, (lagelos, cilios.
3. Due es el 1ndrome de 'artagener y su importancia m$dica.
6. /pli+ue tres en(ermedades producidos por protozoarios, (lagelados y no
(lagelados.
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CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
PRACTICA N 1 I

ESTUDIO DE ORGANELOS CELULARES: MITOCONDRIASD CLOROPLASTOS Y
PLASTIDOS.
I. OBJETIVO:
Mediante el empleo de la t$cnica de coloracin vital se observarn las
mitocondrias presentes slo en el citoplasma de las c$lulas ucariotas, +ue
vienen a constituir las Scentrales de energaT por+ue producen y almacenan
energa ba.o la (orma de &TP.
0on el uso de suero (isiolgico observar ,&#-(!"$- en las c$lulas vegetales
eucariticas, los +ue contienen pigmentos y pueden sintetizar y acumular
diversas sustancias, como los L%3$,&#-($- +ue son plastidos incoloros, los
A'!&$,&#-($- +ue acumulan almidn, los P)$(%!2$,&#-($- +ue acumulan
protenas, los E&#!$,&#-($- +ue acumulan grasas y aceites esenciales. 2os
C)$'$,&#-($- son plastidos coloreados como el C#)$(%2$ +ue presenta un
pigmento de color naran.a, el L!3$,%2$ de color ro.o, la >#2($=!&# de color
amarillo y los C&$)$,&#-($- +ue presentan un pigmento de color verde y cuya
(uncin principal es realizar la (otosntesis.
II. MATERIALES POR MESA-
Muestra de-
0$lulas de epitelio bucal
)o.a de lodea (0loroplastos"
&. amarillo (Oanto(ila"
Rana%oria (caroteno"
Papa (&miloplastos"
Betarraga (2icopeno"
)arina de arroz (2eucoplastos o &miloplastos"
Microscopios
)o.a de a(eitar
Pinzas en punta
2aminas portaob.eto
2aminillas cubreob.eto
1olucin Ferde Ganus 9U9C,CCC
!rascos con 2ugol
!rasco con 1uero !isiolgico
*oteros con c%upn de .ebe
III. PROCEDIMIENTO:
AA OBSERVACION DE MITOCONDRIA EN EPITELIO BUCAL-
9. 0on una lmina limpia y mediante un raspado suave obtener una muestra de
la mucosa bucal,
<. =ealizar un (rotis e/tendiendo la muestra sobre otra lmina,
3. De.ar secar la lmina con la muestra al medio ambiente,
6. 0ubrir la muestra con Ferde Ganus durante 7 minutos,
7. liminar el e/ceso de colorante y de.ar secar al medio ambiente,
@. ;bservar al microscopio con ob.etivos de 9C/ y 6C/.
B" OBSERVACION DE PLASTIDOS EN VEGETALES-
CLOROPLASTOS- 1e localizan en las %o.as deba.o de la epidermis superior.
9. 1eleccionar una %o.a .oven de lodea, colocarla sobre una gota de agua en una
lamina portaob.eto.
<. 0ubrir la muestra con una laminilla.
3. ;bservar al microscopio con ob.etivo de menor y mayor aumento.
CROMOPLASTOS- 1on organelas coloreados y presentan (ormas variadas
(redondas, elpticas, o aciculares".
9. =ealizar cortes (inos de zana%oria, a. amarillo, betarraga sobre una lmina
portaob.etos
<. 0olocar una gota de agua sobre el corte.
3. 0ubrir con una laminilla.
6. ;bservar al microscopio con ob.etivos de menor y mayor aumento.
AMILOPLASTO- 1on organelas +ue contienen almidn como sustancia de
reserva.
9. 1obre una lmina portaob.etos colocar una gota de 2ugol.
<. &gregar una pe+ue,a porcin de %arina de maz yUo trozo delgado de papa .
3. 0ubrir con una laminilla.
6. ;bservar al microscopio con ob.etivo de menor y mayor aumento.
IV. PROTOCOLO-

M>1T=&1
OBSERVACIN DE MITOCONDRIA0 CLOROPLASTOS Y
PLASTIDIOS
2= B 4= B TIPO DE
PLASTIDIO
EPITELIO BUCAL
HOJA DE ELODEA
AJI AMARILLO
OANAHORIA
BETARRAGA
PAPA
HARINA DE ARROO
V. CUESTIONARIO
1. C759 %* 9, (-4"&/,#$(, '% 9,* -(/"$"#'&(,*.
2. P7% /&,#*8"&-,$("#%* *% 99%),# , $,." %# 9,*
-(/"$"#'&(,*.
3. P"&67% 9,* -(/"$"#'&(,* 8(@,# %9 )%&'% '%
J,#7*.
4. P7% 87#$(<# $7-49%# 9"* 49,*/('("* %# 9,*
$:979,*.
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CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
PRACTICA N 1 1;
ACCION ENZIMATICA
I. OBJETIVO:
0onocer el mecanismo de accin de las enzimas durante una reaccin +umica
0onocer como actKa un catalizador
II. MATERIALES-
*radilla Papa rayada
Mortero con piln )gado de pollo
Tubos de prueba de 9@ /97C Palito de ?gnicin
&gua o/igenada !s(oros
Di/ido de Manganeso Placas Petri
III. FUNDAMENTACION-
2as nzimas tienen como (uncin acelerar la velocidad de una reaccin +umica. l
mecanismo de accin se realiza de la siguiente manera-
>nin de un 1ustrato a la nzima para (ormar un 0omple.o nzima5 1ustrato y
desdoblamiento del comple.o (ormado para liberar los Productos.
E M S N E C S O E M P
IV. PROCEDIMIENTO-
9" :umerar los tubos del 9 al 3
<" 0olocar en cada tubo < ml. de Per/ido de %idrgeno (&gua o/igenada"
3" &gregar al-
Tubo 9- V cuc%arita de Papa
Tubo <- V cuc%arita de )gado de pollo
Tubo 3- < g. Di/ido de Manganeso
6" 0olocar a cada tubo el palito de ?gnicin encendido en la boca del tubo
7" 1i el palito de ?gnicin aumenta la intensidad del (uego, la reaccin es
positiva.
V. RESULTADOS-
Mn;< L < )<;< 555555 < )<; L ;< L Mn;<
0atalasa L < )<;< 555555 < )<; L ;< L 0atalasa
VI. PROTOCOLO
&notar los resultados observados
VII. CUESTIONARIO:
9" De(ina +ue es un catalizador
<" 0ual es la (uncin +ue cumple el Di/ido de Manganeso, pero/ido de
%idrgeno y el %gado de pollo.
3" De +ue manera se clasi(ican las enzimas
6" Due se entiende por sitio activo.
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PRACTICA N 11

OBSERVACION DE ELEMENTOS FORMES DE LA SANGRE
I. OBJETIVOS
Determinar la presencia de elementos (igurados presentes en una muestra de
sangre peri($rica %umana, mediante el uso de una coloracin di(erencial.
;bservar la presencia de nKcleos en su interior.
II. MATERIALES
Microscopios
0olorante Wrig%t o *iemsa
&lco%ol yodado
&gua destilada
2minas portaob.etos limpias y desengrasadas
2ancetas %ematolgicas
&lgodn est$ril
Farillas de coloracin
III. PROCEDIMIENTO
A. O8(%23!42 "% -#2E)% 3#,!&#)
9. Desin(ectar el dedo anular con alco%ol yodado y algodn y con una lanceta
est$ril punzar el dedo y de.ar caer una gota de sangre sobre un e/tremo de
la lmina portaob.etos.
<. 0on ayuda de otra lmina portaob.eto (ormar un ngulo de 678 y realizar
un (rotis, tratando de esparcir %omog$neamente la gota de sangre sobre la
super(icie de la lmina.
3. De.ar secar la preparacin y proceder luego a la coloracin con Wrig%t o
*iemsa.
B. 0oloracin
9. 0ubrir el (rotis con colorante Wrig%t o 2eis%man por 9 minuto.
<. 1in eliminar el colorante agregar agua destilada y de.ar actuar por 9C
minutos.
3. liminar luego el colorante y lavar suavemente con agua de ca,o.
6. De.ar secar la lmina coloreada.
7. >na vez +ue la lmina coloreada a secado, observar al microscopio con
el ob.etivo de 9CC O y aceite de inmersin.
IV. PROTOCOLO
(s+uematice los siguientes elementos +ue aba.o se indican y +ue sern observados
con ayuda del microscopio".
9. LEUCOCITOS GRANULARES-
#A :eutr(ilos segmentados- presenta un nKcleo con varios lbulos (<57"
unidas por bandas de cromatinas.
8A :eutr(ilos en banda o abastonado- presenta un nKcleo no dividido en
(orma de 1 o en cayado ;.
3A osin(ilos- redondos, voluminosos, con granulaciones acid(ilas de
color anaran.ado, nKcleo con dos lbulos.
"A Bas(ilos- son escasos de C59, presenta un nKcleo di(cil de observar,
pues se %alla cubierto por una granulacin de color violeta o morado
oscuro .
<. LEUCOCITOS AGRANULARES-
#A 2in(ocitos- De (orma redonda o irregular, su nKcleo es morado,
voluminoso y ocupa la mayor parte de la c$lula, el citoplasma es azul y
sin granulaciones. 1u nKmero aumenta con las in(ecciones.
8A Monocitos- De (orma redonda u ovalada, nKcleo variable generalmente
en (orma de ri,n, citoplasma sin grnulos. Presenta una gran actividad
(agocitaria.
3. PLAQUETAS-
2as ms pe+ue,as de las c$lulas de la sangre, de (orma redonda y no contienen
%emoglobina. 1on esenciales en la coagulacin de la sangre.
6. HEMATIES O ERITROCITOS-
De (orma generalmente redonda, sin nKcleo, de color rosa intenso, contiene
%emoglobina. 2a protena +ue se encarga del transporte de o/geno y an%drido
carbnico.
N%()$=!&$-
E$-!24=!&$-
B#-4=!&$
M"#"$(/"*
L!2=$3!($-
IV.1.1.1.1.1.1.1. CUESTIONARIO
9. 0ul es la di(erencia entre plasma y suero.
<. scriba cules son los valores leucocitarios en el adulto sano.
3. Diga cul son las (unciones de los di(erentes leucocitos.
6. Describa en (orma breve el proceso de coagulacin sangunea.
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PRACTICA N 1 12

GRUPO SANGUINEO Y FACTOR R6
I. OBJETIVO:
&l (inalizar la prctica el alumno debe saber +u$ es el grupo sanguneo, sus
aplicaciones en el campo de la medicina y el grupo sanguneo al +ue pertenece.
II. GENERALIDADES:
l serlogo 'arl 2andsteiner, en 9BCC59BC9 (ue el primero en demostrar la e/istencia
de grupos sanguneos y en 9B3A el 0omit$ de )igiene de la 2iga de la ;:>, el
0ongreso de Microbiologa de 9B3C en 2ondres y la ?nternacional de Trans(usin
1angunea de Pars, se adopt de(initivamente la clasi(icacin de los grupos
sanguneos %umanos %eredables, designados como &, B, &B, ;.
GRUPOS SANGUINEOS RESULTANTES
*=>P; 1&:*>?:; &:T?*:; : *2;B>2;1
=;G;1
(AGLUTINOGENOS"
&:T?0>=P;1 : P2&1M& ;
1>=; 1&:*>?:;
(AGLUTININAS"
& & &nti5B
B B &nti5&
&B &B :inguno
(=eceptor universal"
; :inguno &nti5& L &nti5B
(Dador universal"
III. MATERIAL Y METODOS-
2minas portaob.etos
2ancetas %ematolgicas
1ueros &nti5&, &nti5B, &nti5D o =%.
&lgodn
&lco%ol yodado
RECONOCIMIENTO DE GRUPOS SANGUINEOS-
2a t$cnica de reconocimiento de grupos sanguneos se basa en la aglutinacin o no de
los %emates cuando se mezclan con la aglutinina &nti5& o &nti5B.
PROCEDIMIENTO :
9. 2impie con algodn embebido en alco%ol la yema del dedo anular.
<. =ealizar la puncin utilizando una lanceta %ematologa est$ril.
3. 0olo+ue dos gotas de sangre por separado sobre la lmina portaob.etos, de la
persona a la cual se va a realizar la prueba y en otra lmina otra gota de sangre.
6. &gregar a cada gota de sangre una gota de suero &nti5& y &nti5B y &nti5D o
&nti5=% por separado.
7. ;bservar la reaccin e identi(icar a +ue grupo pertenece y +ue (actor %, si es
positivo o negativo
METODO DE RECONOCIMIENTO PRACTICO -
*=>P; &
*=>P; B

&nti5& &nti5B &nti5&
&nti5B

*=>P; &B
*=>P; ;
=%- &nti XD o =% (L"
&nti5 D o =% (5"
?F- CUESTIONARIO :
9. & +uienes se les llama receptores y donadores universales, por +u$E
<. /pli+ue la ritroblastosis (etal.
3. n +ue se basa el reconocimiento de los grupos sanguneosE
6. /pli+ue como se puede %acer el descarte de paternidad
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PRACTICA N 1 13

CICLO CELULAR: MITOSIS
I. OBJETIVO:
1e estudiar la mitosis y el ciclo de divisin celular en las c$lulas meristemticas de la
raz de A&&!' 3%,# (cebolla".
n este sistema la poblacin celular esta en e+uilibrio dinmico y los cromosomas son
relativamente grandes, con un nKmero diploide ( <n Y9@ ".
II. MATERIALES-
Bulbos de cebolla
Placas Petri
stiletes y pinzas
Papel de !iltro
Portaob.etos
0ubreob.etos
&ceite de inmersin
Mec%ero de &lco%ol
;rcena ac$tica5 clor%drica
&ceite de inmersin
Papel lente
Microscopios
III. PROCEDIMIENTO:
9. 0ultivar los bulbos de cebolla en vasos pe+ue,os conteniendo agua corriente, la +ue
deber cambiarse cada <6 %oras, mantener los bulbos en oscuridad a <780 y
sometidos a aireacin constante.
<. Despu$s de 6A a 4< %oras, arrancar con ayuda de una pinza < a 3 races del bulbo,
cortar < cm. de la parte apical y colocarla sobre una placa Petri +ue contenga
;rcena.
3. 0alentar la placa en la llama de un mec%ero de alco%ol %asta apro/imadamente
@C80 y se observe la emisin de vapores blancos, evitar la ebullicin del colorante.
6. De.ar en(riar y repetir esta operacin cuatro veces.
7. n(riar y de.ar reposar durante 97 minutos.
@. 0olocar la raicilla en la lmina portaob.eto, cortar < mm de la punta, a,adir una
agota de ;rcena (ra, cubrir la preparacin con laminilla.
4. 0on la punta de un lpiz golpear suavemente la preparacin describiendo crculos
conc$ntricos para permitir la e/tensin del te.ido meristemtico.
A. liminar el e/ceso de colorante usando una tira de papel (iltro.
B. ;bservar la preparacin a mayor aumento y lente de inmersin.
IV. PROTOCOLO:
s+uematizar las di(erentes (ases +ue se observan-
?nter(ase- 2os cromosomas no se observan al microscopio debido a +ue son
demasiados delgados y no puede absorber su(iciente colorante para ser
visible.
Pro(ase- !ase en la cual los cromosomas se observan con sus dos cromtidas.
Meta(ase- 1e observa el %uso acromtico, los cromosomas estn mas condensados y
cortos.
&na(ase- 2os cromosomas se dirigen a los polos
Telo(ase- 2os cromosomas estn en los polos, empieza la (ormacin de la membrana
nuclear
V. CUESTIONARIO-
9. Due es mitosis.
<. Due %ay de comKn entre mitosis y meiosis.
3. Due es ?ndice mittico
6. Due es ?ndice inter(sico
7. Due es cariocinesis y citocinesis
REALIZAR ESQUEMAS-
!&1 D 2& M?T;1?1 1D>M&1