CORPORACIN UNIVERSITARIA ADVENTISTA

PROGRAMA DE ENFERMERA
Biologa y laboratorio
Prctica 2. Microscopa (segunda parte)

OBJETIVOS
Al finalizar este laboratorio, el estudiante podr:

1. Entender algunos conceptos bsicos de microscopa tales como poder de resolucin, poder de aumento
y campo visual.
2. Aprender a utilizar el objetivo de inmersin.

CARACTERSTICAS DE LA VISIN CON EL MICROSCOPIO

Poder de aumento. Es la capacidad que posee un instrumento ptico para producir una imagen aumentada de
un objeto debido al efecto de los lentes oculares y objetivos. Se obtiene multiplicando el nmero de veces que
aumenta el lente ocular por el nmero de veces que aumenta el lente objetivo. Si el objetivo aumenta la imagen
40 veces (40x), esta al pasar por el lente ocular ser nuevamente aumentada (10x) para un aumento total de
400 veces.
40x * 10x = 400x
Este resultado permite saber cuntas veces ms grande estamos viendo la imagen de un objeto.

Poder de resolucin. Es la posibilidad de distinguir separados dos puntos muy cercanos entre s. Cuanto mayor
sea el poder de resolucin, menor ser la distancia entre dos puntos a la cual pueden distinguirse como tales. La
distancia lmite en la cual dos puntos pueden ser todava distinguibles se denomina Lmite de Resolucin. El
poder de resolucin de un microscopio compuesto depende de la longitud de onda de la fuente luminosa y de la
apertura numrica (propiedad ptica de la lente). Puede ser calculado mediante la siguiente frmula:

En la que es la longitud de onda de la fuente luminosa con la cual se observa (que va de 400 a 700 nm). En
los microscopios usados en este laboratorio la longitud de onda corresponde a 640 nm y AN es la apertura
numrica de la lente y es especfica para cada lente objetivo. Existe una correspondencia entre el aumento de
un objeto y su apertura numrica, de tal modo que las lentes con mayores aumentos generalmente tendrn
mayores aperturas numricas. El poder de resolucin es quiz la caracterstica ms importante de un buen
microscopio ya que de nada sirve una imagen muy grande del objeto, si sta se ve borrosa y no puede
distinguirse en sus detalles.

Campo visual. Es el rea circular que se observa al mirar por los oculares. Est rea vara segn las lentes
utilizadas. Los dimetros de los campos visuales de un microscopio se calculan dividiendo el valor del nmero
de campo por el aumento del objetivo que se est utilizando, es decir.

Esta relacin viene dada en milmetros.

Unidades utilizadas en microscopa. La mayora de los organismos y las estructuras que se estudian en el
microscopio tienen tamaos muy pequeos. Por tanto, para medirlos es necesario utilizar unidades como el
angstrom (A), el nanmetro (nm), el micrmetro (m) y en algunos casos el milmetro (mm). Las equivalencias
de estas unidades son las siguientes:
1 mm = 1000 m
1 m = 1000 nm
1nm = 10 A

MATERIALES

Papel delgado con letras impresas
Cubreobjetos
Gotero con agua
Aceite de inmersin
Placas permanentes (sangre, de
microorganismos, etc)
Portaobjetos
Un microscopio compuesto por estudiante.
Toalla klinex muy suave.

PROCEDIMIENTO

1. Poder de resolucin
Para entender en forma prctica el poder de resolucin, tome un papel delgado con letras impresas, haga un
montaje en fresco y enfoque la letra en 4x, 10x y 40x.

Cmo puede relacionar los valores numricos de los poderes de resolucin obtenidos para cada objetivo y
las observaciones que acabas de hacer en los objetivos 4, 10 y 40x.





Complete el siguiente cuadro.

Objetivos Poder de resolucin
4x
10x
40x
100x












Observacin de una letra de papel transparente en el microscopio


2. Poder de aumento. Complete el siguiente cuadro con los aumentos del microscopio ptico compuesto
utilizado en esta prctica

Poder de aumento del
objetivo
Poder de aumento del
ocular
Aumento total
4x
10x
40x
100x


3. Campo visual. Vuelva a enfocar de nuevo la placa de las letras impresas. Con cul de los tres
objetivos ve un rea ms grande en la letra? Con cul objetivo hay mayor poder de resolucin?
4 X 10 X 40 X
4. Dimetro (d) del campo visual. Con la informacin dada en el fundamento terico calcule los
dimetros de los campos visuales para los diferentes objetivos de su microscopio.

Objetivos Dimetro (en mm)
4x
10x
40x
100x


5. Observacin con el objetivo de inmersin. Para esta observacin emplee las placas permanentes
que le entregue su profesor y proceda de la siguiente manera:
Enfoque en 4, 10 y 40 x.
Despus de obtener la imagen en 40x, gire el revlver hacia la izquierda, ponga una gota de aceite de
inmersin encima de la muestra que va a observar.
Complete el giro del revlver hasta que el objetivo de 100x (objetivo de inmersin) este en posicin
correcta.
Mire por los oculares y dele nitidez a la imagen por medio de la perilla micromtrica.
Esquematice lo observado.
Finalmente retire la placa y limpie el residuo del aceite del lente con un papel kleenex suave, sin frotarlo,
y squelo con otro papel kleenex.











Observacin de micro-preparados en aceite de inmersin



Clulas sanguneas
Micro-preparado de:

Micro-preparado de:


CUSTIONARIO
1. Realice las siguientes conversiones:

a) 0.025 mm en micrmetros y en A
b) 5 x10
-3
nm en mm y A
c) 1300 A en nm, micrmetro y en mm

2. Determine segn los poderes de resolucin mximos aproximados del ojo humano, del microscopio
compuesto y del microscopio electrnico, con cul o con cuales de estos se pueden ver las siguientes
estructuras.
Estructura Promedios de medidas
Virus del polio 300 A de dimetro
Virus de la viruela 2500 A de dimetro
Ribosomas de las eucariotas 140 a 180 A de dimetro
Escherichia coli 200000 A de largo
Mitocondrias 0.2 a 0.5 m de largo
Cloroplastos 5.8 m de dimetro
Glbulos rojos de mamferos 7.5 m de dimetro
Paramecium 0.1 a 0.3 mm de largo
vulo humano 0.15 mm de dimetro


BIBLIOGRAFA

Solomon, Berg & Martin (2004). Biology, 7th Ed. Brooks Cole Publ.

Uribe; Frank., Moreno, Jaime., Aldana, Daniel., y Pineda Nubiola, Manual de laboratorio de Biologa general.
Universidad de Antioqua. 1998