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ESTERILIZAO

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E
Diversidade nas tcnicas
de esterilizao
Mtodos fsicos, fsico-qumicos e qumicos
compem os mecanismos utilizados para a
esterilizao, que visa eliminar micro-organismos
capazes de levar contaminao e deteriorao
de produtos ou provocar infeces em seres vivos.
Dada a variedade de tcnicas disponveis, deve-se
buscar a mais apropriada a cada tipo de aplicao
e material
Marcelo Couto
mbora o uso do calor seja a forma
mais difundida de esterilizao,
h atualmente uma diversidade
de tcnicas ecazes para promover
a eliminao de micro-organismos
(fungos, bactrias e seus esporos) e
at vrus, que, caso no sejam destru-
dos, podem se desenvolver de forma
indesejada e provocar problemas como
deteriorao, falhas nas etapas de con-
servao, comprometimento na utiliza-
o de certos produtos ou utenslios e
ainda causar graves contaminaes e
infecces.
As tcnicas de esterilizao so co-
mumente utilizadas com o objetivo de
garantir nveis adequados de segurana
em alimentos e medicamentos, alm de
instrumentos e dispositivos utilizados
no ambiente mdico-hospitalar, mas a
sua aplicao tambm se estende a di-
versas outras reas. Gradativamente,
algumas das tcnicas passaram a ser
empregadas em diversos segmentos
industriais, cujos produtos so suscet-
veis biodeteriorao, como o caso
de cosmticos, resinas, embalagens,
tintas e matrias-primas variadas,
comenta Silvia Eguchi, coordenadora
do Grupo de Trabalho de Microbiologia
(GT2) da SBCC.
A escolha da tcnica de esteriliza-
o mais adequada para cada caso
depende do tipo de material que dever
passar pelo processo, da carga micro-
biana envolvida e de outras condies
para o emprego do mtodo, pois cada
alternativa apresenta um conjunto de
vantagens e desvantagens a serem
consideradas nos critrios de avaliao
de custos, ecincia, agilidade, dispo-
nibilidade de espao e segurana.
Evoluo
Desde longa data, o homem busca
formas de realizar o que hoje conhe-
cemos como esterilizao. Achados
de 1450 a.C registram o que seria a
esterilizao pelo fogo. Mas foi a
partir do sculo XIX, com os avanos
da microbiologia, que se estabelece-
ram princpios e foram obtidos os mais
signicativos avanos que levaram ao
desenvolvimento dos mtodos moder-
nos, incluindo a tcnica de esterilizao
por calor, a descoberta do perxido
de hidrognio e do xido de etileno, o
estabelecimento de processos de alta
presso e temperatura, a construo
do primeiro autoclave e a realizao de
experincias com vrios agentes este-
rilizantes.
A rea de alimentos foi a pioneira
na busca de mtodos de esterilizao,
lembra Silvia Eguchi. De fato, no scu-
lo XVIII, o cozinheiro francs Nicolas
Appert (1749-1841), considerado o Pai
das Conservas, criou uma tcnica
inovadora que consistia em cozinhar
por um certo tempo alimentos acondi-
cionados em recipientes hermticos
de vidro, selados com rolhas, em gua
fervente, de forma a preserv-los para
o consumo por muito mais tempo, o que
representou um importante avano na
rea e ajudou a combater doenas de
ESTERILIZAO
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origem alimentar.
A esterilizao de alimentos enlata-
dos formou inclusive a base da cincia
da autoclavao, que uma das formas
mais utilizadas ainda hoje de esteriliza-
o por calor mido e que se estendeu
para vrias outras aplicaes, notada-
mente nos segmentos mdico-cirrgico
e na indstria farmacutica. Deve-se ao
qumico francs Charles Chamberland
(1851-1908), um dos colaboradores do
cientista Louis Pasteur, a concepo e
construo do primeiro equipamento de
autoclave.
A evoluo do conhecimento tcni-
co-cientco levou ao desenvolvimento
de diversas tcnicas de esterilizao
baseadas em meios fsicos, fsico-qu-
micos e qumicos. Os fsicos incluem o
prprio calor (seco ou mido), a ltrao
e a radiao; enquanto os fsico-qumi-
cos dizem respeito aos processos que
utilizam principalmente xido de etileno
(EtO) e perxido de hidrognio. Essas
so as tcnicas mais empregadas em
larga escala. Alm delas, h as que
usam agentes qumicos como formal-
dedo, glutaraldedo e cido peractico,
entre outras substncias.
Existem diversas normas interna-
cionais que tratam das tcnicas de es-
terilizao e suas aplicaes. Algumas
serviram de base tambm para a nor-
malizao do tema no Brasil. Somente
a ABNT Associao Brasileira de
Normas Tcnicas registra atualmente
41 documentos relacionados esterili-
zao, sendo 25 no mbito do CB-26,
dedicado ao segmento odonto-m-
dico-hospitalar. H ainda portarias e
regulamentaes especcas do Minis-
trio da Sade e da Anvisa Agncia
Nacional de Vigilncia Sanitria, o que
mostra o grau de preocupao com o
tema.
Calor Seco
O calor considerado o agente
fsico mais prtico e eciente para es-
terilizao. Pode ser utilizado seco ou
Irradiador multipropsito do IPEN (acima). Na pgina ao lado, as fontes de
cobalto, emissoras de radiao
A ABNT registra
atualmente 41
documentos
relacionados
esterilizao, sendo
25 no mbito
do CB-26
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o. Para instrumentos cirrgicos, por
exemplo, o tempo de exposio de
120 minutos temperatura de 170C,
mas se a temperatura for reduzida a
140C necessrio dobrar o tempo.
Calor mido
Assim como no caso do calor seco,
o calor mido (vapor saturado sob pres-
so) atua desnaturando e coagulando
as protenas das clulas microbianas,
mas com a vantagem de que a gua
presente neste caso contribui para a
destruio das membranas e enzimas
e induz eliminao das ligaes de
hidrognio, tornando assim o mtodo
mais ecaz e reduzindo o tempo de
exposio dos materiais.
Por ser um processo eciente,
de fcil utilizao, custo acessvel e
bem conhecido, o vapor saturado sob
presso tornou-se o mtodo mais uti-
lizado de esterilizao para a maioria
dos casos, destaca Maria Silva de
Oliveira, supervisora de Controle da
Qualidade da Fresenius Kabi, empre-
sa que oferece solues para terapia
de infuso e nutricional com produtos
farmacuticos, dispositivos mdicos e
descartveis. Ela enfatiza, no entanto,
que apesar das suas muitas vantagens,
a utilizao de calor mido apresenta
como principal limitao o fato de no
servir para esterilizar ps, lquidos e
produtos que no resistem a tempera-
turas elevadas.
A forma mais usual de realizar a es-
terilizao pelo calor mido com au-
toclaves. Nesse tipo de equipamento,
o material ca exposto ao vapor dgua
sob presso a 121C durante 15 minu-
tos. Os itens devem ser embalados de
forma a permitir o contato com o vapor
e o processo deve se dar no vcuo,
para que a temperatura desejada seja
alcanada com mais ecincia, alm
de permitir a penetrao do vapor nos
poros do material e tambm evitar a
formao de bolses de ar frio.
A elevada temperatura e a presso
que formam as bases da tcnica de
autoclavao so sucientes para obter
a esterilizao, levando os micro-or-
ganismos morte. Uma vez nalizado
mido e sua eccia depende basica-
mente de dois fatores: o tempo e a tem-
peratura a que o produto ca exposto
durante o processo.
Para o processo envolvendo calor
seco podem ser utilizadas estufas
(tambm conhecidas como forno de
Pasteur) ou tneis de esterilizao.
A morte dos micro-organismos neste
caso decorre da oxidao e desidrata-
o das clulas. As estufas, em parti-
cular, so frequentemente empregadas
em consultrios mdicos e odontolgi-
cos em virtude tanto da facilidade de
operao quanto do seu baixo custo.
Como regra geral, recomenda-se
o calor seco para esterilizar vidros,
metais, leos e substncias em p, ou
seja, produtos resistentes variao de
temperatura ou que podem se oxidar
com o vapor. Um exemplo desta alter-
nativa para o caso de instrumentos
de corte, pois no danica a funo
cortante e no provoca ferrugem. Em
contrapartida, no uma soluo
para esterilizar lquidos nem materiais
termossensveis, como os que contm
componentes txteis, plsticos ou de
borracha.
Pelo fato de no ser to penetrante
quanto o calor mido, o processo en-
volvendo calor seco requer o uso de
temperaturas mais elevadas, por isso,
no indicado para produtos termos-
sensveis, embora devamos lembrar
que alguns produtos no suportam
nem mesmo a temperatura do calor
mido, considera Yves Lon Marie
Gayard, analista de Validao da ABL
Antibiticos do Brasil.
Alm das restries quanto ao tipo
de material, outra desvantagem do
processo envolvendo calor seco que
ele atua mais lentamente que o calor
mido, o que exige temperaturas mais
elevadas ou maior tempo de exposi-

Alguns alimentos que podem ser tratados pela irradiao
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o processo, os materiais so natural-
mente resfriados e no necessitam de
quarentena para eliminar resduos, di-
ferentemente da esterilizao por xido
de etileno, o que representa uma impor-
tante vantagem da tcnica baseada no
calor mido, considera a especialista
da Fresenius.
Apesar de eliminar os tipos mais
comuns de vrus, fungos e bactrias, a
tcnica de esterilizao por calor mido
pode no destruir completamente os
prons.
Existem no mercado autoclaves
de parede simples e de parede dupla,
estes mais sosticados e que permitem
melhores extrao do ar e secagem. O
monitoramento do processo impor-
tante para garantir que a esterilizao
tenha sido bem-sucedida. A maioria
das autoclaves possui sistemas que
registram a temperatura e presso em
funo do tempo, permitindo acompa-
nhar o desempenho do equipamento.
Uma ta indicadora tambm pode
ser colocada em embalagens de pro-
dutos antes de iniciar o processo, para
identicar que o material (ou o lote) foi
submetido ao calor. A ta no garante
que a esterilizao tenha sido ecaz,
apenas que o material passou pelo
processo. Para demonstrar que a este-
rilizao foi ecaz, costuma-se utilizar
um indicador biolgico, porm o seu
uso um pouco complicado e encarece
a operao. O bioindicador, no entan-
to, costuma ser um grande aliado para
monitorar ocasionalmente o processo e
avaliar a sua eccia.
Fora a autoclavao h ainda outro
mtodo comum de esterilizao por ca-
lor mido, chamado tindalizao. Neste
caso, o material submetido a trs
sesses de exposio a vapor dgua a
100C, durante um intervalo de 20 a 45
minutos, 45 minutos e, por m, por mais
um perodo de 20 a 45 minutos, com um
repouso de 24h entre cada uma dessas
sesses. Mesmo havendo germinao
dos esporos entre duas sesses a
esterilizao ca garantida com a sua
O calor
considerado o agente
fsico mais prtico
e eciente para
esterilizao. Ele pode
ser utilizado seco ou
mido
ESTERILIZAO
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posterior destruio ao m de todas
as etapas. normalmente usada para
solues aucaradas ou com gelatina.
Filtrao estril
No caso de lquidos e gases sens-
veis a temperatura ou que tenham res-
trio ao uso de processos qumicos,
pode ser necessrio lanar mo da
ltrao estril, que consiste na remo-
o mecnica de micro-organismos.
Neste processo, a soluo ou o gs
atravessam um ltro com membranas
de dimetros bastante diminutos. Um
exemplo da utilizao dessa tcnica
na produo de vitaminas e antibiti-
cos.
A ltrao pode ser considerada um
processo relativamente rpido e econ-
mico de se obter a esterilizao, mas
somente possvel utiliz-la em uidos.
Alm disso, obviamente, esse mtodo
tambm no pode ser empregado nos
casos em que os slidos em suspenso
nos uidos so o prprio princpio ativo.
Os meios ltrantes (velas porosas,
discos de amianto e ltros de vidro
poroso, por exemplo) podem ser feitos
de diversos materiais, como acetato de
celulose, policarbonato e outros sint-

ticos e devem, eles prprios, tambm
ser esterilizados, geralmente em auto-
claves, a uma temperatura que no da-
nique suas frgeis membranas. Para
garantir a esterilidade, as membranas
ltrantes necessitam ser vericadas
quanto a perfuraes durante ou antes
do uso. Mesmo com esses cuidados,
recomendvel que a ltrao seja reali-
zada em ambiente controlado.
Irradiao
A radiao ionizante uma das
alternativas para casos que reque-
rem esterilizao a frio, podendo ser
empregada em slidos e uidos. A
radioesterilizao consiste na reduo
dos micro-organismos, impedindo que
se reproduzam, pela quebra de suas
cadeias moleculares (DNA) e induzindo
reaes dos fragmentos com o oxig-
nio atmosfrico ou compostos oxigena-
dos. Tecnicamente, duas fontes podem
ser utilizadas no processo de radiao
ionizante: raios gama de fontes seladas
de Cobalto-60 ou feixe de eltrons de
aceleradores industriais de mdia e alta
energias.
As vantagens incluem o fato de
que os produtos so esterilizados na
embalagem nal e a penetrao da ra-
diao assegura esterilizao de todo
o volume. Alm disso, o processo
contnuo, seu nico controle o tempo
de exposio dos produtos radiao,
e no requer tratamento posterior,
destaca Wilson Calvo, gerente do
Centro de Tecnologia das Radiaes
do Instituto de Pesquisas Energticas
e Nucleares (IPEN), autarquia gerida
pela CNEN Comisso Nacional de
Energia Nuclear, ligada ao Ministrio de
Cincia e Tecnologia. Segundo ele, ou-
tro aspecto a destacar que o emprego
de embalagem impermevel a gases
assegura esterilizao por tempo ilimi-
tado. A probabilidade de encontrarmos
um nico micro-organismo no produto
radioesterilizado de 1 em 1.000.000,
enfatiza.
A lista de materiais compatveis com
a radiao inclui termoplsticos, borra-
chas, txteis, metais, pigmentos, vidros,
pedras preciosas, papis, adesivos e
tintas, entre outros. Na rea mdica,
pode ser utilizada em seringas descar-
tveis, agulhas, catteres, luvas, kits ci-
rrgicos, suturas, implantes, protenas,
unidades para hemodilise, pinas e
reagentes. A lista inclui ainda prteses,
cosmticos, aditivos e componentes
farmacuticos, meios de cultura, solu-
Autoclaves instaladas em unidades de produo em indstria de
medicamentos veterinrios e em farmacutica: uso do vapor sob presso
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es e ingredientes para laboratrios.
Mais recentemente, vem sendo utiliza-
da tambm na esterilizao de tecidos
humanos (ossos e peles) para enxerto
e pacientes com graves queimaduras.
Alm dessas e outras aplicaes,
um dos segmentos na mira da irradia-
o o de processamento de alimen-
tos e produtos agrcolas. A tcnica
utilizada em especiarias (pimenta
do reino), plantas medicinais, frutas
(mangas), carne moda (hambrguer)
em pases industrializados, como os
Estados Unidos, mas ainda busca se
expandir no Brasil e em outros pases
em desenvolvimento, constata Calvo.
A propsito, autoridades de vigilncia
sanitria de 37 pases, incluindo o
Brasil, aprovaram a irradiao em 40
tipos de alimentos. As decises foram
inuenciadas pela publicao de nor-
mas nacionais e internacionais sobre
o tema.
Como em outras aplicaes rela-
cionadas radiao, a tcnica enfrenta
resistncias, mas, segundo Calvo, a
informao e o esclarecimento so os
melhores meios para ampliar a utili-
zao dessa alternativa. A irradiao
de alimentos vem sendo pesquisada
h mais de 50 anos e, do ponto de
vista tcnico, mostra-se bastante e-
ciente para eliminar ou reduzir micro-
organismos, parasitas e pragas, sem
prejuzo ao alimento e ainda garantindo
a segurana alimentar ao consumidor,
defende.
Nas diversas aplicaes h tam-
bm outra questo prtica e econmi-
ca a ser superada para maior dissemi-
nao dessa tcnica, que a oferta
de irradiadores comerciais com fontes
seladas de Cobalto-60 e aceleradores
industriais de eltrons licenciados pela
CNEN para operar. O nmero de em-
presas no Brasil que prestam o servio
reduzido, pondera o analista de Vali-
dao da ABL, Yves Gayard. As insta-
laes devem seguir rgidas normas de
segurana e ter pessoal especializado.
Alm da radiao ionizante (raios
gama e feixe de eltrons), h a no-io-
nizante (raios ultravioleta), que menos
usual para esterilizao, porque tem
baixo poder de penetrao, no atra-
vessando vidros, lmes sujos e outros
materiais espessos.
xido de Etileno
O xido de etileno (EtO) um gs
utilizado desde a Segunda Guerra
como alternativa de esterilizao a bai-
xa temperatura, notadamente no caso
de produtos e artigos mdico-hospita-
lares com componentes plsticos ou
termossensveis que no resistem a
temperaturas superiores a 60C ou a
processos de radiao. Ele apresenta
grande eccia na destruio de micro-
organismos formadores de esporos.
Ganhou espao na aplicao em ins-
trumentos de uso intravenoso e cardio-
pulmonar, aparelhos de monitorizao
invasiva, instrumentos telescpios,
materiais eltricos (eletrodos, os el-
tricos) e marcapassos, entre diversos
outros.
O processo de esterilizao com o
Autoridades de
vigilncia sanitria de
37 pases, inclusive o
Brasil, j aprovaram o
uso de irradiao em
mais de 40 tipos de
alimentos
FILTRAGEM,
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ESTERILIZAO
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xido de etileno normalmente execu-
tado com temperatura na faixa de 40C
a 60C, umidade relativa com ponto
timo entre 40% e 80% e uma con-
centrao de gs normalmente acima
de 400mg/l (ponto timo de ecincia)
com durao mdia de ciclo de trs a
at mais de 10 horas.
O EtO penetra em papel, tecido e
em alguns lmes plsticos, mas pesa
contra ele o fato de ser altamente in-
amvel, txico e cancergeno, o que
exige cuidados. No Brasil, a Portaria
Interministerial MS/MET n 482, em
vigor desde abril de 1999, estabelece
procedimentos para as instalaes de
unidades de esterilizao com esse
tipo de gs e disciplina ainda as suas
misturas e seu uso. Nos Estados Uni-
dos, a OSHA Occupational Safety
and Health Administration tambm
estabelece limites para a exposio
dos operadores ao gs neste tipo de
operao.
O processo de esterilizao com
EtO normalmente inclui uma fase de
pr-condicionamento ou condicina-
mento, seguida de vcuo para a retira-
da do ar do interior da cmara, entrada
de gs inerte e agente esterilizante
(EtO), exposio (fase de esterilizao
propriamente dita), lavagens com gs
inerte e ar para remover resduos de
EtO e, por m, uma aerao completa
para eliminar o gs da carga.
A esterilizao com EtO continua
sendo o mtodo mais utilizado para dis-
positivos mdico-hospitalares descart-
veis no mercado brasileiro e mundial,
com os processos por irradiao apre-
sentando grande potencial neste seg-
mento, considera Fabiano Andreazza,
supervisor de Esterilidade Assegurada
da BD Medical, empresa que atua no
fornecimento de dispositivos mdico-
hospitalares.
A esterilizao feita em cmara
de gs prpria para essa nalidade,
preenchida com EtO e gases diluentes,
como dixido de carbono ou nitrog-
nio (antes usava-se tambm CFC). A
vantagem desse processo o ganho
de escala, dada a quantidade de itens
processados de uma vez em um pallet,
por exemplo. Mas o ganho de escala
obtido implica na utilizao de grandes
quantidades de agente esterilizante,
que gera um elevado volume de res-
duos de EtO, com alta inamabilidade
e os problemas de armazenamento da
decorrentes, o que requer cuidados
especiais de manuseio e treinamento
adequado. Em funo de custos e do
banimento mundial do CFC, por causa
dos impactos na camada de oznio, os
processos tendem a utilizar 100% de
xido de etileno ou misturas de EtO e
dixido de carbono.
Plasma de Perxido de
Hidrognio
A utilizao de plasma de perxido
de hidrognio (H
2
O
2
) outra tecnologia
de esterilizao de baixa temperatura
(ciclo entre 45C a 55C) disponvel.
Assim como o xido de etileno, esse
mtodo encontra grande aplicao em
instrumentos e dispositivos mdico-
hospitalares. As suas propriedades
oxidantes so capazes de destruir uma
ampla gama de patgenos e apresenta
como vantagem a rapidez no processo,
j que a liberao do produto ocorre
num intervalo de 30 minutos a 1 hora.
Conforme descrito em artigo da
odontloga e enfermeira Denise De-
marzo, publicado na edio 23 da
Revista SBCC (A evoluo dos esteri-
lizadores a baixa temperatura: plasma
de perxido de hidrognio, veja artigo
completo acessando o site www.sbcc.
com.br), dentro da cmara de esterili-
zao se desenvolvem reaes a partir
do H
2
O
2
que interagem com molculas
essenciais ao metabolismo e reprodu-
o dos micro-organismos, realizando
ligaes qumicas inespeccas com
membranas citoplasmticas, enzimas,
cido desoxirribonucleico (DNA) e
cido ribonucleico (RNA), entre outros,
Preparo de bolsas para envio a autoclave
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que resulta em ao esporicida, fungi-
cida, bactericida e virucida. Ao m da
esterilizao e uma vez terminada a
ao das ondas eletromagnticas, as
espcies qumicas tendem a se recom-
binar formando H
2
O e O
2
em pequenas
concentraes, dispensando a aerao
dos artigos.
Os equipamentos tambm no re-
querem reas com rede de vapor ou
tubulaes e o cassete que carrega
o perxido de hidrognio no requer
condies controladas de temperatura
no transporte e armazenamento. Os
modernos equipamentos tambm tm
ciclo automatizado e computadoriza-
do, alm de permitir o cancelamento
do ciclo, caso as condies mnimas
para a sua reprodutibilidade no sejam
alcanadas. Para o registro desses
equipamentos no Brasil so exigidos
o atendimento aos requisitos de ec-
cia e segurana das regulamentaes
RDC n 185/01 e n 56/01.
Existem, por outro lado, restries
inerentes tecnologia. O sistema
incompatvel com lquidos. Por ser um
forte oxidante, o perxido de hidrognio
tambm pode ser incompatvel com
certos materiais, o que exige do usurio
consulta ao fabricante do artigo a ser
esterilizado para garantir que pode ser
submetido a esse mtodo. Dispositivos
que contenham celulose, por exemplo,
podem absorver em excesso o precur-
sor qumico. Por isso, as embalagens
devem ser diferenciadas.
A capacidade de penetrao de
perxido de hidrognio tambm impe
limitaes no comprimento e dimetro
dos lumens (quantidade de luz visvel
que um sistema emite) que podem ser
efetivamente esterilizados.
Em relao aos aspectos de segu-
rana para o usurio, mesmo consi-
derando que o perxido de hidrognio
no seja txico na mesma medida que
o xido de etileno, a OSHA tambm es-
tabelece limites de exposio a deter-
minadas concentraes da substncia
ao longo do dia.
As tcnicas
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asseguram nveis
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em alimentos,
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