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TOMA DE MUESTRA Y DIFERENCIACIN DE CLULAS SANGUINEAS

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I. INTRODUCCIN:
El hemograma es un examen sencillo y econmico que aporta informacin muy valiosa,
que unida a un examen fsico y una buena anamnesis, puede ser suficiente para llegar a un
diagnstico preciso e iniciar el tratamiento para recobrar la salud (Iglesias, 2006).
El anlisis de sangre es una herramienta valiosa para la medicina preventiva, sobre todo
en animales de edad avanzada, pues se pueden detectar problemas en su fase temprana e
iniciar un tratamiento (Iglesias, 2006).
Del 100% del contenido de sangre, el 78% es plasma o parte lquida, compuesta
bsicamente por agua, protenas y sales minerales; el resto est formado por los
corpsculos celulares - glbulos rojos, glbulos blancos y plaquetas, gases, productos
orgnicos, y otros elementos como hormonas, vitaminas, minerales, protenas, enzimas,
lpidos, glucosa, etc. (Palafoz, 2004).
Para hacernos una idea de la importancia de la sangre basta un slo dato: todos los
rganos de nuestro cuerpo funcionan gracias a ella. Sus cometidos principales son, por un
lado, llevar oxgeno y alimento a todas las clulas del cuerpo y, por otro, retirar el
anhdrido de carbono y dems sustancias de desecho producidas por el cuerpo (Palafoz,
2004).
Pero otra clave de su importancia nos la da el hecho de que su anlisis permite obtener
informacin muy til para conocer las causas de muchas dolencias. De hecho es posible
medir cientos de sustancias distintas que circulan por la sangre y que, dependiendo de
que presenten valores elevados o reducidos, pueden detectar dolencias como la diabetes,
la anemia, la hepatitis, las enfermedades infecciosas, el cncer, etc. (Palafoz, 2004).
II. OBJETIVOS:

Conocer y realizar la toma de muestra de sangre de la especie animal indicada
(bovino).
Realizar correctamente el frotis de sangre.
Identificar en microscopio la cantidad (conteo) de clulas sanguneas.
Diferenciar las clulas sanguneas y reconocer los diferentes tipos de leucocitos.

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III. MARCO TERICO:
La sangre est compuesta por millones de clulas que navegan por los vasos sanguneos
flotando en un medio lquido llamado plasma. Los componentes slidos son los glbulos
rojos, glbulos blancos y las plaquetas, mientras que en el plasma se encuentran infinidad
de electrolitos, minerales, factores de la coagulacin, protenas, nutrientes, etc. Veremos
a continuacin una breve descripcin de los elementos slidos de la sangre para
comprender los resultados de un hemograma (Iglesias, 2006).
A) Glbulos rojos: Son los encargados de llevar oxgeno a todas las clulas del cuerpo,
usando para ello la hemoglobina. Cada uno tiene una vida media de 120 das, de
modo que la mdula sea est encargada de fabricarlos y reponerlos
constantemente. La cantidad de glbulos rojos se mide rpidamente mediante el
hematocrito y con ms exactitud, con el recuento de glbulos. Tambin se mide la
hemoglobina para conocer su concentracin (Iglesias, 2006).

Si hay menos de lo normal, significa que el animal est anmico. Los signos clnicos
en casos severos son palidez de las mucosas, falta de apetito y cansancio, ya que
los tejidos no tienen suficiente oxgeno para funcionar. Una anemia puede ser
regenerativa, en la cual la mdula sea libera gran cantidad de glbulos rojos
inmaduros (reticulocitos) a la circulacin para intentar suplir la falta de oxgeno, o
arregenerativa, en la que la mdula sea no tiene capacidad para reestablecer el
nmero normal de glbulos rojos. La primera se produce por prdida de glbulos
rojos, como en una hemorragia o algunas enfermedades infecciosas de la sangre.
La segunda se da por falta de produccin, como en la insuficiencia renal y otras
enfermedades carenciales (Iglesias y Lilidio, 2006).

En algunos casos el nmero de glbulos rojos es mayor a lo normal. Esto suele
darse por deshidratacin (en realidad no hay ms clulas, sino menos plasma),
pero tambin se ve en algunas enfermedades pulmonares, en tumores de la
mdula sea o en zonas de gran altitud donde hay poco oxgeno en el aire. Ante
cualquier falta de oxgeno en los tejidos, el cuerpo responde produciendo ms
glbulos rojos (Lilidio, 2006).

B) Glbulos blancos: tambin se los llama leucocitos y son las clulas encargadas de
la defensa del organismo. Hay distintos tipos y cada uno tiene funciones diferentes
en la lucha contra los microorganismos. El recuento de glbulos blancos se hace en
grupo y luego cada tipo por separado. Casi todos ellos se forman en la mdula sea
(Iglesias, 2006).
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Cuando el recuento total aumenta, casi siempre se debe a una infeccin, pero
tambin se elevan en casos de mucho estrs o en algunas leucemias. Si el recuento
est por debajo de lo normal, eso indica que el animal est muy debilitado o que
padece alguna enfermedad inmunosupresora, generalmente virales (Iglesias,
2006).

Los distintos glbulos blancos son:

Neutrfilos: son los que se encuentran en mayor nmero y los encargados
de destruir a las bacterias. Son la primera lnea de defensa del organismo.
Cuando hay infecciones bacterianas su nmero aumenta rpidamente
(neutrofilia), tanto en sus formas maduras (segmentados) como inmaduras
(en banda). Por el contrario, muchos virus hacen disminuir la cantidad de
neutrfilos circulantes (neutropenia) (Palafoz, 2004).

Eosinfilos: se encuentran normalmente en un nmero mucho menor.
Tienen la funcin de engullir partculas extraas, y su nmero aumenta
(eosinofilia) en caso de infecciones parasitarias o en las alergias. Ellos son
los culpables de reconocer como extraas y atacar a partculas
inofensivas y provocar reacciones alrgicas de distintos tipos. Su nmero
puede disminuir (eosinopenia) en casos de estrs prolongado (Palafoz,
2004).

Basfilos: su funcin no es bien conocida, y es raro encontrarlos en los
recuentos, por lo cual su nmero suele ser 0 (Palafoz, 2004).

Linfocitos: estas son clulas muy importantes en la defensa contra
enfermedades infecciosas. Los linfocitos B son los encargados de formar y
liberar anticuerpos especficos contra diversos microorganismos, incluso los
virus. Los linfocitos T pueden dirigir el combate activando y ayudando a
otras clulas a luchar contra enfermedades. Se fabrican en los ganglios
linfticos, el bazo y otros tejidos linfoides. El nmero de linfocitos no suele
estar aumentado, pero se puede dar en caso de enfermedades muy
prolongadas o en la leucemia. S pueden estar disminuidos (linfopenia) al
principio de enfermedades virales o como resultado del uso excesivo de
corticoides (Palafoz, 2004).

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Monocitos: su recuento es bastante bajo y estable. Tienen la funcin de
engullir microorganismos y tambin liberan diversas protenas que
participan en la inflamacin. Su nmero prcticamente no vara, salvo en
casos de leucemias que involucren este tipo celular (Palafoz, 2004).

C) Plaquetas: son los ladrillos necesarios para coagular la sangre, junto con otros
factores fundamentales en este proceso. Su nmero da una idea de la capacidad
del organismo para formar cogulos; si est demasiado bajo hay riesgo de
sangrado, y si es demasiado alto, pueden formarse trombos (Iglesias, 2006).

En todos los tipos de clulas es importante evaluar tambin la forma y el tamao,
pues estos se modifican en algunos tipos de leucemia o de anemias infecciosas
(Iglesias, 2006).

TABLA 1. FORMULA LEUCOCITARIAA EN MAMIFEROS (Porcentaje, %)

FUENTE: LILIDIO, 2006.





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TABLA 2. FORMULA LEUCOCITARIA RELATIVA Y CONTEO TOTAL DE LEUCOCITOS EN
DIFERENTES ESPECIES

FUENTE: U.N.C.P.B.A.; 2005
IV. MATERIALES Y MTODOS:
MATERIALES

Toma de muestra:
Aguja hipodrmica N18
Tubo con anticoagulante (EDTA)
Algodn
Alcohol
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Frotis sanguneo:
Muestra sangunea
Laminas portaobjetos
Gotero o pipeta Pasteur
Guantes

MTODOS
Toma de la muestra
1) Primero sujetamos al animal correctamente, tratando de que se mueva lo menos
posible



2) Ubicamos la vena yugular y limpiamos la zona con un algodn con alcohol



3) Insertamos la aguja en un ngulo de 45 en la vena y rpidamente colocamos el
tubo con anticoagulante para la coleccin de la sangre

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4) Luego de extrada la muestra retiramos la aguja y aplicamos presin unos 30
segundos manualmente para parar el sangrado

Realizacin del frotis sanguneo:
1) Verificamos que las lminas estn completamente limpias (libre de pelusas y
grasas) de lo contrario, las lavamos con jabn desengrasante y secamos (preferible
con una tela)


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2) Colocamos una gota pequea de la muestra en un extremo de la lmina con la
ayuda de la pipeta o del gotero



3) Colocamos el portaobjetos extensor sobre la gota de sangre en un ngulo de 45
esperamos que esta se extienda un poco y luego deslizamos el portaobjetos
extensor hacia adelante



4) Debe de quedar una fina pelcula de sangre sobre el portaobjetos en la que se
deben diferenciar 3 parte: cabeza (parte ms gruesa), cuerpo (parte intermedia), y
cola (la parte ms fina)

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5) Luego se dejamos secar la lmina con la parte de la muestra hacia arriba,
realizamos este proceso varias veces para obtener varios frotis



V. RESULTADOS:
VI. DISCUSIN:
VII. CONCLUSIONES:













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REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
IGLESIAS, ISABEL. 2006. ANALISIS DE SANGRE: HEMOGRAMA. (ONLINE). DISPONIBLE EN:
http://www.amordemascota.com/article203.html. 03 DE SEPTIEMBRE DEL 2013. 09:54.
LILIDIO RAMREZ, 2006. REVISTA MUNDO PECUARIO. LOS LEUCOCITOS EN MAMIFEROS
DOMESTICOS. Vol. II, N 2, 37-39, 2006.
PALAFOZ, JORGE. 2004. REFLEJAN NUESTRA SALUD LOS ANALISIS DE SANGRE? (ONLINE).
DISPONIBLE EN: http://www.dsalud.com/index.php?pagina=articulo&c=578. 03 DE
SEPTIEMBRE DEL 2013. 08:33.
U.N.C.P.B.A.; 2005. GUA DE TRABAJOS PRCTICOS. CURSO DE INMUNOLOGA BSICA.
FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS.

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