Competencia: Identificar y caracterizar los componentes del sistema inmunitario

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PRCTICA 1.

RGANOS LINFOIDES Y CLULAS
DEL
SISTEMA INMUNITARIO


I. INTRODUCCIN

El sistema inmunitario para su estudio se puede clasificar en: rganos linfoides primarios
(centrales) y secundarios (perifricos), los cuales se describen brevemente a continuacin:

rganos linfoides primarios: Son rganos donde se generan y maduran las clulas del
sistema inmunitario. Antes del nacimiento son el saco vitelino y el hgado fetal, mientras
que en el adulto son la mdula sea y el timo.

a) Mdula sea: Formada por islotes de clulas hematopoyticas y tejido adiposo, los
cuales se encuentran en huesos largos, cuerpos vertebrales, costillas, esternn, huesos
planos de crneo y pelvis. En estos sitios, los progenitores hematopoyticos se desarrollan
a partir de clulas troncales, mediante la interaccin con: el estroma y citocinas
(Interleucinas (IL), quimiocinas y factores estimulantes de colonias (CSF)). Generando el
linaje mieloide y el linfoide. El linaje mieloide da origen a clulas dendrticas, monocitos,
macrfagos, neutrfilos, eosinfilos, basfilos, mastocitos, plaquetas y eritrocitos. El linaje
linfoide da origen a linfocitos T, B y clulas NK. En este rgano maduran los linfocitos B y
clulas NK.

b) Timo: Es un rgano bilobulado, capsulado y trabeculado, cada lbulo se divide en
corteza y mdula. El progenitor linfoide comn migra de la mdula sea al timo, donde
recibe el nombre de timocito y completa su proceso de maduracin a linfocitos T
cooperadores (Th) o citotxicos (Tc) o reguladores (Treg).

rganos linfoides secundarios: Son rganos donde se inicia la respuesta inmunitaria
adaptativa, incluye al bazo, ganglios linfticos y tejido linfoide asociado a mucosas
(MALT).

a) Bazo: rgano capsulado donde se realiza la hemocatresis (pulpa roja) y depuracin
de antgenos sistmicos (pulpa blanca). La pulpa blanca contiene principalmente linfocitos
T y B, mientras que la pulpa roja es rica en fagocitos mononucleares, eritrocitos y restos
de clulas sanguneas.

b) Ganglios linfticos: Son rganos capsulados distribuidos a travs de todo el sistema
linftico. A los ganglios llega la linfa procedente de los tejidos y estn organizados en tres
zonas:

1. Corteza: Constituida principalmente por linfocitos B organizados en folculos
primarios y secundarios (centros germinales).
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2. Paracorteza: Formada esencialmente por linfocitos T y clulas presentadoras de
antgeno (APC).

3. Mdula: Este sitio est conformado bsicamente por macrfagos, linfocitos T,
linfocitos B y clulas plasmticas.

c) Tejido linfoide asociado a mucosas (MALT): Tejido linfoide no encapsulado, situado
en la lmina propia del tracto gastrointestinal, (GALT), nasofarngeo (NALT), bronquial
(BALT) y genito-urinario (GULT). Se conforma por tejido organizado difuso.


Clulas del Sistema Inmunitario
Las clulas del sistema inmunitario se originan a partir de las clulas troncales
hematopoyticas de la mdula sea. Por efecto de la interleucina tres (IL-3) se originan
clulas de estirpe mieloide y a su vez la IL-7 da origen a la estirpe linfoide.

Clulas de la inmunidad innata

Monocitos/Macrfagos: Los monocitos (circulacin) son los precursores de los
macrfagos (tejidos), poseen actividad fagoctica y son APC. Algunos marcadores de
membrana que los identifican son CD14 y CD64 (CD: marcador de diferenciacin).

Clulas dendrticas (DC): Son APC y sus marcadores de superficie son CD11c y HLA-
DR. Tienen la capacidad de regular la respuesta inmunolgica.

Neutrfilos: Clulas con actividad fagoctica, se encuentran en circulacin sangunea, su
tiempo de vida media es de aproximadamente seis horas. Expresan CD16 y CD33.

Basfilos: Contienen en sus grnulos aminas vasoactivas y mediadores de la inflamacin.
Se encuentran en circulacin sangunea. Expresan constitutivamente en la membrana el
receptor FcRI.

Eosinfilos: Abundan en los infiltrados inflamatorios de la fase tarda de las reacciones de
hipersensibilidad inmediata, y participan en la defensa contra los helmintos. Contienen
protena bsica mayor (MBP), eotaxina, y protena catinica del eosinfilo (ECP) entre
otras.

Mastocitos: Contienen en sus grnulos aminas vasoactivas y mediadores de la
inflamacin, son una estirpe celular diferente de los basfilos, tambin expresan
constitutivamente en la membrana el receptor FcRI, pero los mastocitos residen en los
tejidos.

Clulas NK: Expresan en membrana las protenas CD16 y CD56. Ejercen citotoxicidad
sobre clulas propias modificadas (tumorales) e infectadas.


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Clulas de la inmunidad adaptativa

Linfocitos B: Clulas de la respuesta inmunitaria adaptativa humoral, sus marcadores de
superficie son CD19 y CD20, entre otros. Su vida media si no ocurre encuentro antignico
es aproximadamente de 30 das y una vez que este ocurre se diferencian a clulas
plasmticas productoras de anticuerpos (Ab).

Linfocitos T: Participan en la respuesta inmunitaria adaptativa celular, sus marcadores de
membrana son entre otros: CD3, CD4 (Th), CD3, CD4, CD25 (Treg) y CD3, CD8 (Tc). Su
funcin es modular la respuesta inmunolgica a travs de la produccin de citocinas (Th y
Treg) y la induccin de apoptosis en clulas infectadas y tumorales (Tc). Su vida media es
aproximadamente de 30 das si no ocurre encuentro antignico.

Estudio de laboratorio
Citometra hemtica (Biometra hemtica): Es un estudio que informa sobre el nmero y
caractersticas de las clulas de la sangre, se divide en el estudio de la serie roja, serie
blanca y serie tromboctica. La serie roja incluye la determinacin de hemoglobina (Hb),
hematocrito (Hto.), nmero de glbulos rojos, volumen corpuscular medio (VCM), Hb
corpuscular media (HCM), concentracin media de Hb globular (CmHb). La serie blanca
incluye la cuenta total y diferencial de leucocitos. La serie tromboctica determina la cuenta
de plaquetas. Los valores de referencia de la biometra hemtica para la poblacin
mexicana se presentan en el anexo correspondiente.


II OBJETIVOS

1. Correlacionar la localizacin y funcin de las clulas con la estructura de los rganos
linfoides en la respuesta inmunolgica.
2. Identificar los leucocitos en un frotis de sangre perifrica.
3. Conocer los parmetros de referencia de una cuenta leucocitaria.



III. MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS

Material Reactivos Equipo
- Preparaciones finas de mdula sea
- Cortes histolgicos de rganos linfoides
secundarios
- Inmunohistoqumica de ganglio linftico
- Laminillas
- Hoja de papel seda
- Aceite de inmersin - Microscopio ptico




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IV. PROCEDIMIENTO

a) Observacin de preparaciones de un frotis sanguneo

1. Enfocar la preparacin con los objetivos 10x, 40x y finalmente observar a 100x
agregando 1 gota de aceite de inmersin.
2. Identificar las diferentes estirpes celulares como: Granulocitos (neutrfilos, basfilos
y eosinfilo), Linfocitos y Monocitos.


b) Observacin de preparaciones histolgicas de rganos linfoides

Aspirado de mdula sea teida con hematoxilina y eosina (H&E)

1. Observar la preparacin con el objetivo 10x.
2. Identificar magacariocitos y distribucin de mdula roja y amarilla.

rgano linfoide secundario teido con H&E

1. Observar la preparacin con el objetivo 10x.
2. Identificar las zonas de la corteza, folculo primario y centros germinales.

Inmunohistoqumica de ganglio linftico marcada con anti-CD3 o anti-CD20

1. Observar la preparacin con el objetivo 10x.
2. Identificar las zonas de la corteza, folculo primario y centros germinales.

NOTA: Las zonas positivas para CD3 o CD20 se observarn en color caf.


V. RESULTADOS

Reportar lo que observ en las diferentes preparaciones.

- Frotis sanguneo: Describir la morfologa de los leucocitos observados.

- Aspirado de mdula sea: Describir la morfologa del megacariocito, heterogeneidad
celular y distribucin de mdula roja y amarilla.

- rgano linfoide secundario: Identificacin de centros germinales.

- Inmunohistoqumicas de ganglio: Identificacin de la regin de la corteza, folculos
primarios y paracorteza.




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VI. CUESTIONARIO ADICIONAL

1. Qu es un marcador de membrana (CD)?
2. Qu aplicacin tiene en la prctica mdica la identificacin de los CD?
3. Mencione dos citocinas hematopoyticas con actividad teraputica y su aplicacin.
4. Cul es el origen hematopoytico de la DC plasmacitoide?
5. Qu poblaciones leucocitarias se ven alteradas en una infeccin bacteriana, viral,
parasitaria y mictica?



VII. BIBLIOGRAFA

1. Owen J, Punt J, Stranford S.. Kuby. Inmunologa. 7 ed. Mxico: McGraw-Hill-
Interamericana., 2014. 692 p. ISBN: 978-1492-1919-8.
2. Doan T, Melvold R, Viselli S, Waltenbaugh C. Inmunologa. 2 ed. USA: Lippincott
Williams & Wilkins., 2013. 376 p. ISBN-13: 978-84-15840-63-3.
3. Abbas A, Lichtman A, Pillai S. Inmunologa Celular y Molecular. 7 ed. Espaa:
Elsevier., 2012. 560 p. ISBN: 9788480869164.
4. RuizArgelles GJ. Fundamentos de Hematologa. 4
a
edicin. ed. Mxico:
Panamericana., 2009. 334p. ISBN: 978-607-7743-04-0.