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LA CLULA. NIVELES DE ORGANIZACIN CELULAR.

MTODOS DE ESTUDIO.



NIVELES DE ORGANIZACIN

Al estudiar la materia viva podemos diferenciar varios niveles de complejidad
estructural que son los llamados niveles de organizacin. Actualmente se distinguen
siete y se agrupan en tres bloques:

I. Niveles abiticos: nivel subatmico y nivel atmico.
II. Nivel intermedio: nivel molecular.
III. Niveles biticos: nivel celular, pluricelular, poblacin y ecosistema.


Caractersticas de los diferentes niveles.

(a) Nivel subatmico: integrado por las partculas ms pequeas de la materia:
protones, neutrones...
(b) Nivel atmico: constituido por tomos. Un tomo se define como la parte ms
pequea de un elemento qumico que puede intervenir en una reaccin qumica
(Fe
2+
, O
-2
, Cl
-1
...).
(c) Nivel molecular: constituido por molculas o unidades materiales unidas por
enlaces qumicos y que poseen todas las propiedades de la sustancia que se
trate: O
2
, CO
2
... A las molculas que constituyen la materia viva se les llama
biomolculas o principios inmediatos (protenas, lpidos y glcidos, entre
otros). Las molculas orgnicas son aquellas molculas carbonadas que slo
producen los seres vivos. Actualmente, con la sntesis de plsticos es mejor
hablar de biomolculas y no biomolculas. Las macromolculas son el resultado
de la unin de monmeros sencillos para dar un polmero: almidn formado por
glucosa, protenas formadas por aminocidos... Los virus se incluyen entro de
esta categora, estando en el lmite entre lo vivo y lo inerte. Podemos decir que
son entidades biolgicas acelulares que no pueden considerarse ni como
animales ni vegetales. Desde el punto de vista reproductivo pueden
considerarse organismos vivos ya que pueden hacerlo, pero metablicamente no
se consideran organismos vivos pues carecen de metabolismo propio, por lo que
necesitan parasitar otra clula para utilizar el suyo. Por otro lado, pueden
adoptar una estructura cristalina y permanecer as indefinidamente. Se
consideran, pues, complejos supramoleculares constituidos por dos tipos de
molculas: protenas y cidos nucleicos. Un complejo supramolecular es la unin
de varias macromolculas, como glucoprotenas. A veces estos complejos
pueden asociarse para formar orgnulos celulares: lisosomas, cloroplastos... que
no poseen autonoma per se.
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(d) Nivel celular: las clulas son unidades de materia viva. Ya las hemos visto al
hablar de la teora celular. Definida como unidad vital, morfolgica, fisiolgica y
gentica del ser vivo. Segn su grado de complejidad diferenciamos entre
clulas procariotas y eucariotas. Las colonias que forman los organismos
unicelulares al asociarse no se consideran dentro del nivel pluricelular pues
cada clula realiza todas las funciones a pesar de que pueden o no existir cierto
grado de especializacin.
(e) Nivel pluricelular: abarca aquellos seres vivos constituidos por ms de una
clula. Encontramos varios subniveles:
TEJIDOS: conjunto de clulas similares que realizan la misma funcin y
tienen el mismo origen. Cuando un organismo pluricelular slo posee clulas
de un tipo se dice que tiene estructura de talo (hongos y algas pluricelulares
o talofitos).
RGANOS: unidad estructural y funcional de seres vivos superiores.
Constituidos por tejidos diferentes para realizar un acto concreto (corazn,
bceps, flor...).
SISTEMAS: conjunto de rganos parecidos ya que estn constituidos por
los mismos tejidos, pero realizan funciones diferentes (nervioso, muscular,
seo, endocrino...).
APARATOS: conjunto de rganos que pueden ser muy diferentes entre s
pero que estn coordinados para realizar una misma funcin (respiratorio,
circulatorio, digestivo, locomotor...).
(f) Nivel de poblacin: se consideran los organismos de una misma especie que
habitan un mismo espacio en un mismo momento temporal y que establecen
entre s unas relaciones.
(g) Nivel de ecosistema: biocenosis (comunidad de seres vivos) y biotopo (medio
fsico y sus condicionantes).




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LA TEORA CELULAR.

Hooke (1665) estudia las celdillas de tejido suberificado y otros tejidos
vegetales e introduce el trmino clula.
Corti (1774) descubre la existencia de un medio interno celular.
Schleiden y Schwann (1839) iniciaron el desarrollo de la Teora Celular y
anunciaron que todos los organismos vivos estn constituidos por clulas.
Virchow (1858) reformula la Teora Celular y postula que toda clula procede
de otra ya existente (omnis cellula e cellula).

La TEORA CELULAR anuncia que la clula es la unidad:

Vital: una clula es el ser vivo ms pequeo y sencillo.
Morfolgica: todos los seres vivos estn formados por clulas, ya sean
stos uni o pluricelulares.
Fisiolgica: la clula posee todos los mecanismos bioqumicos para
permanecer con vida.
Gentica: toda clula proviene de otra preexistente.

Las clulas pueden, por tanto, realizar las tres funciones vitales (nutricin,
relacin y reproduccin) y son las formas ms elementales de vida. Toda unidad de
nivel inferior carece del atributo vital. Poseen una individualidad propia que las
caracteriza como unidades vitales. La defensa de la INDIVIDUALIDAD de la
clula se argumenta principalmente en el hecho de que sta es el resultado de una
ORGANIZACIN que obedece a la DIFERENCIACIN de sus estructuras en el
seno del citoplasma y no a una simple reunin de unidades menores.


Morfologa de las clulas

De forma y tamao variable en funcin de su grado de especializacin (alargadas,
prismticas, redondeadas, estrelladas, los
micoplasmas miden 0,1 micras, las bacterias
entre 5-10 micras, las algas unicelulares de
10 cm, huevos de avestruz...), la clula no es
una simple masa de materia viviente sino el
resultado de un proceso de diferenciacin
que a travs de la evolucin ha conducido a
una organizacin que ha ido adquiriendo
complejidad. En consecuencia, segn el
grado de complejidad estructural alcanzado
se han establecido diferentes niveles de
organizacin celular, siendo bsicamente
dos: PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS.

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Los virus junto con otras formas acelulares, como los priones o los plsmidos,
quedan fuera de esta clasificacin.


CLULAS PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS.

Todos los tipos celulares que conocemos se encuadran dentro de uno de estos dos
grupos de clulas, diferentes en funcin de su grado de complejidad y organizacin,
aunque poseen en comn una membrana que las asla del medio externo, un sistema
gentico director del funcionamiento celular y un sistema metablico encargado
del funcionamiento.

La clula PROCARIOTA se caracteriza en general por ser ms pequea (1-10
micras) y tener menor complejidad organizativa. No existen grados de
complejidad y son relativamente simples desde el punto de vista citolgico.
Poseen una simple membrana
plasmtica de naturaleza
lipoproteica semejante a la de
eucariotas y una pared celular
constituida por pptidoglucanos
(polmeros de N-acetilglucosamina
y cido N-acetilmurmico) que
tambin se denomina capa de
murena. Las bacterias Gram (+) se
asocian, adems, a lpidos,
protenas y cidos teicoicos, y las
Gram () a lpidos y glucolpidos,
formando la membrana externa (no
confundir con la membrana
plasmtica). En casi todos los
patgenos existe la llamada cpsula bacteriana, con un papel regulador del
intercambio de sustancias y de defensa ante anticuerpos y fagocitosis.
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Las clulas procariotas carecen de orgnulos celulares, excepto ribosomas 70 S,
que a veces forman polirribosomas. La membrana celular puede invaginarse para
formar mesosomas que contienen, entre otros, enzimas respiratorios. El ADN es
doble hlice, circular o enrollado, bicatenario, asociado a protenas similares a
histonas y organizado en una regin llamada nucleoide, sin membrana nuclear.
Presenta inclusiones de reserva y de residuos
metablicos, tambin vesculas gaseosas. Los
flagelos, cuando se presentan, son
estructuralmente ms sencillos que los
eucariotas. Las Gram () poseen pili o
fimbrias para conjugacin. En bacterias
fotosintticas se localizan cromatforos con
pigmentos.

Son procariotas las bacterias, las
cianobacterias o algas verdeazuladas,
micoplasmas, ricketsias y clamidias.
Morfolgicamente las bacterias pueden ser
redondeadas (cocos), alargadas (bacilos) y
onduladas (espirilos). Agruparse en cadenas
(estrepto...), racimos (estafilo...) y sarcinas.
Las cianobacterias tienen forma globosa, los
micoplasmas de pera y las clamidias de huevo
frito.

Bioqumicamente encontramos clulas procariotas tanto auttrofas como
heterotrofas; tanto quimitrofas como fottrofas.


Las clulas EUCARIOTAS son generalmente de mayor tamao y ms complejas
en su estructura y funcionamiento. Posee estructuras subcelulares organizadas,
limitadas por membranas y con funciones especficas: orgnulos.

Poseen ms de un cromosoma formado por ADN y protenas histnicas y no
histnicas; membrana plasmtica y las vegetales adems una pared celular;
mitocondrias; ribosomas 80 S; retculo endoplasmtico y orgnulos celulares
caractersticos (mitocondrias, lisosomas, etc.); plastos, en vegetales; flagelos y
cilios, diferentes a procariotas. En definitiva, su estructura, forma y tamao
vara dependiendo de que sean unicelulares o pluricelulares, con tejidos
diferenciados, y dentro de stas segn su funcin.

La clula eucariota posee tres componentes principales:

NCLEO, vara segn est en interfase o divisin, y es el centro director
del metabolismo celular y en l se encuentran los cromosomas. En interfase
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posee membrana nuclear doble que lo separa y en su interior se localiza el
ADN en forma de cromatina. Entre ella est el nucleolo y el carioplasma o
jugo nuclear. Cuando est en divisin, la membrana desaparece y el ADN se
encuentra organizado en cromosomas. Existen dos tipos fundamentales de
divisin celular: mitosis y meiosis segn su dotacin cromosmica se
mantenga igual o se reduzca a la mitad.

CITOPLASMA, formado por hialoplasma, morfoplasma y citoesqueleto. El
hialoplasma es el citoplasma fundamental y el morfoplasma los elementos
formes (mitocondrias, ribosomas...). En las clulas vegetales el citoplasma
establece una relacin de continuidad entre clulas vecinas a travs de los
plasmodesmos o punteaduras. El
citoesqueleto est formado por
microfilamentos de actina y miosina,
microtbulos de tubulina y filamentos
intermedios de diferente composicin
qumica (vimentina...).

MEMBRANA PLASMTICA, y
sistemas de membrana. Separan el
citoplasma del medio externo. Posee
invaginaciones que forman el retculo
endoplasmtico el cual llega a
comunicarse con la membrana nuclear. Su naturaleza es lipoproteica. Los
lpidos permiten que la membrana se comporte como una barrera aislante
entre el medio externo e interno, mientras que las protenas se encargan de
la entrada y salida de sustancias mediante diferentes mecanismos. Posee
membranas de secrecin como el glucoclix, (formado por oligosacridos
unidos a protenas y lpidos de membrana, es imprescindible para su buen
funcionamiento y est implicado, entre otras cosas, en el reconocimiento
celular).


La clula animal y vegetal.

Dentro de las clulas eucariotas podemos diferenciar entre la clula animal y la
vegetal. Aunque su morfologa y tamao puede variar en funcin de que se trate de
organismos unicelulares o pluricelulares con tejidos especializados, su estructura
es prcticamente idntica, encontrndose en ambas los mismos orgnulos
caractersticos de todas las clulas eucariticas aunque con ciertas diferencias
entre las que cabe sealar que la clula vegetal suele tener forma prismtica o
poligonal, est adaptada a la nutricin auttrofa fotosinttica, posee plastos,
pared celulsica, plasmodesmos y carecen de centrosoma, de cilios y de
flagelos; mientras que la animal presenta formas ms variadas, est adaptada
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a la nutricin hetertrofa, posee centrosoma pero carece de plastos y pared
celulsica, pudiendo presentar cilios y flagelos.
























Otras caractersticas son la presencia de vacuolas en la clula vegetal, espacios
destinados a almacenar sustancias de reserva o desecho, aunque las animales
poseen vesculas que realizan funciones similares. Adems, el polisacrido de
reserva en la clula animal es el glucgeno y en la vegetal es el almidn.

Actualmente se piensa que la clula eucaritica proviene de la procaritica. Hay
dos teoras a este respecto:

Hiptesis autgena (Taylor y Dobson). La clula eucaritica se ha originado
debido al desarrollo de la membrana plasmtica en procariotas primitivos lo
cual dio lugar a la formacin de diferentes orgnulos.

Hiptesis endosimbionte (Margulis y Sagan). Procede de la asociacin
simbitica de diferentes tipos de procariotas. El precursor procariota
anaerobio, al asociarse a bacterias aerobias originara mitocondrias, al
hacerlo a espiroquetas dara lugar a cilios y flagelos, mientras que su
asociacin con cianofceas pudo originar los cloroplastos. Se fundamenta en
la autonoma de cloroplastos y mitocondrias, en su tamao, su contenido en
ADN, la presencia en ellos de ribosomas, etc.
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MTODOS DE ESTUDIO DE LA CLULA.

Instrumentos especiales.

Para el estudio de la clula y tejidos se utilizan instrumentos especiales, puesto
que las clulas son de pequeo tamao y transparentes a la luz visible. Dichos
aparatos proporcionan una mayor definicin de la estructura celular, aumentando el
PODER DE RESOLUCIN es decir, la capacidad de ver separados dos puntos muy
prximos. Esto, unido al aumento del CONTRASTE conseguido mediante tinciones
facilita el estudio de clulas y tejidos.

El microscopio ptico simple o lupa binocular (estereomicroscopio). Se
utiliza para la diseccin de animales u observacin de piezas histolgicas.
Posee un poder de resolucin de 0,35 micras.


El microscopio compuesto ptico. Normalmente alcanza 1000 aumentos y
excepcionalmente 2000. El lmite se debe al poder de resolucin que vara
en funcin de la longitud de onda de la luz utilizada y de la apertura
numrica que posea el sistema de lentes empleado. Con objetivos de
inmersin en aceite de cedro el poder de resolucin alcanza las 0,24
micras. Los microscopios pticos ponen de manifiesto aspectos muy
parciales de la estructura. A este nivel son muy importantes las tinciones.


Microscopio de luz ultravioleta. Su poder de resolucin es de 0,06
micras, con una longitud de onda de 2000-3000 amstrongs. Utiliza lmparas de
vapor de mercurio, lentes de cuarzo y lleva incorporada una cmara fotogrfica.


Microscopio de fluorescencia. Utiliza lmparas de vapor de mercurio. Se basa en
que unas sustancias absorben radiaciones de una longitud de onda determinada y
emiten otra radiacin diferente de mayor longitud de onda: fluorescencia. No
interesa el poder de resolucin sino la observacin de la fluorescencia de ciertas
sustancias.

Microscopio electrnico de transmisin. El microscopio electrnico de transmisin
(MET) tiene mayor poder de resolucin que el microscopio ptico, porque utiliza un
chorro de electrones en lugar de luz visible. El MET aprovecha el hecho de que el
haz de electrones se comporta como una radiacin electromagntica con una
longitud de onda extraordinariamente corta. Este tipo de microscopia produce una
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imagen detallada y ntida a aumentos de hasta 200000x, en comparacion con los
l000x del microscopio ptico.
En muchos aspectos el MET funciona como un
microscopio ptico. En lugar de un haz de luz,
se transmite un haz de electrones a travs
del espcimen. En vez de lentes de cristal, se
utilizan lentes electromagnticas para
enfocar la imagen. En lugar de producir la
imagen directamente, sta se registra en una
pantalla fluorescente o en una placa
fotogrfica (a la imagen se le denomina
microfotografia electrnica de
transmisin). En vez de montar el espcimen
en un portaobjetos, se prepara en una rejilla
de cobre que permite el paso de los
electrones. En lugar de usar colorantes para
aumentar el contraste, se utilizan metales pesados, como el plomo, tungsteno y
uranio, que hacen que el espcimen absorba diferentes cantidades de electrones.
En otros aspectos, el MET presenta problemas tcnicos especiales. La principal
dificultad es que los electrones tienen un poder de penetracin muy pequeo. Como
resultado, si se desea ver un detalle intracelular es preciso realizar secciones
finas del microorganismo. Mediante un instrumento denominado microtomo, el
espcimen se corta en delgadas secciones con un grosor no superior a 0,1 m.


Microscopio electrnico de barrido. Los
electrones no atraviesan el material sino
chocan y se recogen en una pantalla de TV.
Permite ver superficies en relieve. Los
electrones se acompaan de otros procedentes
de la muestra (emisin secundaria) lo que
permite estudiar la composicin qumica de
algunas partes. Su poder de resolucin es
menor que el del microscopio electrnico de
transmisin.

En resumen, en microscopa electrnica se ha
pretendido aumentar el poder de resolucin
disminuyendo la longitud de onda.

Para el estudio de clulas vivas se utilizan otros microscopios que no poseen un gran poder de
resolucin pero mejoran el contraste:

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Microscopio de fondo oscuro: El microscopio de campo oscuro tambin permite visualizar clulas
vivas sin teir. Este microscopio se basa en el principio de dispersin (esparcimiento), lo que significa
que un rayo de luz cambiar de direccin, se dispersar, cuando choque contra un objeto pequeo. El
microscopio de campo oscuro posee un condensador especial con un disco que desva los rayos de luz
para que no penetren en el objetivo: los nicos rayos que llegarn al objetivo son aquellos que hayan
sido dispersados al incidir en el espcimen. El resultado es una imagen brillante contra un fondo
oscuro. La microscopa de campo oscuro es la mejor para la observacin de estructuras externas,
especialmente los flagelos, pero deja ver menos detalles internos que la microscopia de contraste de
fases. La tcnica de campo oscuro se utiliza para Treponema palladium, una bacteria muy mvil,
agente causante de la sfilis.

Microscopio de contraste de fases. El microscopio de contraste de fases se fundamenta en el hecho
conocido de que las ondas de luz viajan a distintas velocidades en los materiales que poseen ndices de
refraccin diferentes. Por tanto, los rayos de luz que pasan a travs del espcimen no se encuentran
en la misma fase que los que pasan a su alrededor. Imaginemos las olas del ocano viniendo haca la
playa desde diferentes direcciones. Las olas se suman o anulan unas a otras, dependiendo de que sus
crestas lleguen al mismo tiempo o no. De forma similar, el microscopio de contraste de fases combina
los rayos de luz procedentes del espcimen y los que llegan de sus alrededores. Los rayos se suman o
se anulan unos a otros produciendo diferentes intensidades de luz y aumentando, en consecuencia, el
contraste. Se denomina interferencia al resultado de la combinacin de rayos de luz de distinta fase.


Microscopio de luz polarizada. Utilizado en mineraloga y petrologa. Cuerpos istropos o
monorrefringentes slo poseen un ndice de refraccin y anistropos o birrefringentes poseen dos.
Un prisma de Nicol o polarizador de calcita hace que la luz que lo atraviesa vibre en un solo plano (luz
polarizada). Otro prisma similar, el analizador, puede mantener el plano de vibracin o variarlo. Si
ambos estn paralelos la transmisin es mxima y si estn perpendiculares es nula. Al colocar ahora
un espcimen birrefringente, el plano de polarizacin ser desviado de acuerdo con el retardo
producido por el objeto. El material biolgico es birrefringente y suele verse brillante sobre un fondo
oscuro.

Preparaciones.

En el estudio de clulas vivas (in vivo), a veces no es posible observar a simple
vista toda las capas o los orgnulos celulares, por lo que se recurre a instrumentos
especiales, ya vistos. Pero las clulas vivas pueden solamente estudiarse cuando
estn aisladas o forman delgadas capas. Una dificultad aadida es que en ocasiones
aparecen transparentes y no se aprecian los orgnulos, por lo que se recurre a la
TINCIN con colorantes vitales que no matan la clula: rojo neutro,
rodamina, verde jano...

Algunas tcnicas especiales para estudiar clulas vivas son la de montaje
hmedo y gota pendiente.

En ocasiones el estudio vital se efecta mediante CULTIVOS
CELULARES en medios nutritivos. Para ello se separan enzimticamente
las clulas de los tejidos mediante enzimas (EDTA, Tripsina) lo que
permite el estudio de clones celulares originados al multiplicarse una
clula.
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En bacteriologa existen diferentes tipos de medios de cultivo sintticos o
qumicamente definidos, en funcin del grupo bacteriano que deseemos cultivar y
aislar, con una composicin concreta en cuanto a nutrientes. En cuanto a la
clasificacin de los medios nutritivos, podemos distinguir:

a) Medios enriquecidos, para microorganismos exigentes (sangre, suero...).
b) Medios selectivos, inhiben el crecimiento de ciertos tipos (en funcin de la
fuente de C).
c) Medios diferenciales, permiten diferenciar grupos bacterianos (agar-
sangre).
d) Medios de mantenimiento.


Cuando se trata de clulas muertas (in vitro), lo primero es evitar la autolisis y la
putrefaccin. Para ello se provoca la muerte rpida y se fija.

La FIJACIN mata a la clula lo ms rpidamente para que se mantengan las
propiedades fisiolgicas y morfolgicas del organismo vivo, facilitando la
coloracin. Dos maneras de hacerlo son:

Por extensin en portaobjetos (frotis) y fijacin con metanol o a la llama.
Por perfusin o inmersin del corte biolgico en un fijador (formol,
glutaraldehido...). A veces se fijan mediante congelacin en N
2
o He.

La INCLUSIN se realiza para formar una masa compacta que permite cortar en
lminas: en parafina, en resinas plsticas tipo EPON...

El CORTE se efecta con micrtomos de mano (M.O.) o ultramicrotomos (M.E.).

La TINCIN se utiliza para dar contraste. En M.O. se utilizan colorantes
orgnicos que poseen un grupo cromforo (produce color) y otro auxocromforo (se
fija). Los colorantes pueden ser cidos (eosina) que se fijan a bases y bsicos
(hematoxilina) que se fijan a cidos, aunque depende del pH. En M.E. se utilizan
colorantes pesados como el cido smico, acetato de uranilo o citrato de plomo.

Las tinciones pueden ser:

Tinciones simples: se utiliza un nico colorante para dar contraste (azul de
metileno, cristal violeta).
Tincines diferenciales: se utilizan dos colorantes. Una tcnica muy
utilizada en M.O. es la de la Hematoxilina-Eosina, que tie el ncleo celular
de azul y el citoplasma de rojo. En microbiologa se utiliza la tincin de
Gram, tcnica diferencial consistente en teir con cristal violeta y solucin
de yodo, decolorar con alcohol y aplicar un colorante de contraste como
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safranina. El complejo formado entre el cristal violeta y el yodo es retenido
por los microorganismos gram (+), no as por los gram (-). Parece ser que el
responsable es el peptidoglucano de la pared bacteriana.









Despus de teir y antes de observar se procede al MONTAJE de la preparacin,
existiendo como hemos dicho antes distintas tcnicas: gota pendiente, montaje
hmedo, frotis, aplastamiento...

Otras tinciones especiales son:

Tincin negativa, que utiliza tinta china o nigrosina, de apariencia similar a una
preparacin de fondo oscuro. Permite observar cpsulas bacterianas.
Tincin cido-alcohol resistencia, permite distinguir las mycobacterias del
resto de bacterias. Se trata de una coloracin diferencial.
Tincin Giemsa, para ricketsias, protozoos. Coloracin diferencial.


Tcnicas especiales.

Inmunocitoqumica o inmunofluorescencia, basadas en la reaccin antgeno-
anticuerpo a nivel de membrana. El anticuerpo (protena producida por los
linfocitos B del sistema inmune) llevara asociada una molcula fluorescente
llamada fluorocromo, o de alta densidad (ferritina) para su visualizacin. El
anticuerpo se unir al antgeno (microorganismo) que queremos localizar, lo que
nos permitir identificarlo. Puede ser directa e indirecta.


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Ultracentrifugacin diferencial,
triturando tejidos y obteniendo
una masa de orgnulos que se
centrifugan o diferente velocidad
para separar distintos orgnulos en
funcin de su peso o densidad
(coeficiente de sedimentacin).
Una vez separadas las fracciones
celulares, los componentes
qumicos deben separarse para su
estudio y anlisis.


Autorradiografa, se marcan molculas con istopos radiactivos.


Otras tcnicas asociadas son:

Cromatografa en papel, donde un
disolvente arrastra las molculas
solubles, y cromatografa en columnas
de cambio inico que permite separar
molculas segn su carga elctrica. La
columna posee bolitas de determinada
carga que atraen a las de signo
contrario, desplazando las del mismo
signo.


Electroforesis, permite la separacin
de molculas en funcin de su carga
neta mediante un campo elctrico,
sobre un gel de poliacrilamida.









Espectrofotometra, basada en la absorcin de luz de determinada longitud de
onda segn el compuesto de que se trate.
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Difraccin de Rayos X. Nos da idea de la
estructura y disposicin de los tomos en las
macromolculas. Utilizada para conocer la
estructura del ADN.





- Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).Una tcnica utilizada en Ingeniera
Gentica es la denominada reaccin en cadena de la polimerasa o PCR, proceso
rpido y sencillo que permite obtener un gran nmero de copias de un gen (10
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copias). Esta tcnica permite disponer de grandes cantidades de ADN por
ejemplo para estudios de paternidad, esclarecimiento de delitos, etc. pues la
cantidad de ADN de la clula es del orden de picogramos.