PRACTICA N 01 CARBOHIDRATOS

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I.- Introduccin:

Los hidratos de carbonos tambin conocidos como azucares, sacridos y glcidos son las
biomolculas que existen en mayor cantidad en el mundo vivo. Cada ao se transforman
100.000 M de toneladas de dixido de carbono y agua durante el proceso fotosinttico en HC.
Estos formar polmeros que actan como elementos estructrales (celulosa, hemicelulosa y
pectina) y de defensa en las paredes celulares de vegetales y bacterias, como tambin en la
formacin de tejido conjuntivo en los animales. Sin mencionar que son la principal fuente de
energa metabolizable (glucosa, sacarosa, glucgeno, almidn) de los organismos no
fotosintticos. Los hidratos de carbono pueden estar presente como unidades simples que son
las preferidas para metabolizar o formando conjugados con lpidos y protenas y actuando
como lubricante de las articulaciones, como marcadores celulares o participando en la
traduccin de seales intracelulares.


II.- Objetivos:
Llevar a cabo el reconocimiento experimental de hidratos de carbono, determinando
su existencia en muestras a analizar.
Saber por qu reacciones fundamentalmente se reconocen las propiedades oxidantes y
reductoras de los carbohidratos sacridos.
Diferenciar aldosas de cetosas, y clasificar sacridos como mono, oligo o poli
sacridos segn las reacciones llevadas a cabo.









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III.- Marco Terico:
CARBOHIDRATOS



Los glcidos, azcares o carbohidratos, son qumicamente hablando, aldehdos o cetonas
polihidroxlicos, o productos derivados de ellos por oxidacin, reduccin, sustitucin o
polimerizacin. Los glcidos desempean una gran variedad de funciones en los organismos,
cmo una fuente energtica o formando material estructural de las membranas, esto entre
otras muchas funciones, por lo que se consideran molculas extremadamente verstiles.

Atendiendo a su estructura, los glcidos se pueden clasificar en:

1. Monosacridos simples y compuestos.
2. Oligosacridos.
3. Polisacridos simples y compuestos.


MONOSACRIDOS

Los monosacridos simples se pueden representar con la frmula estequiomtrica (CH
2
O) y pueden
tener funcin aldehdo: cuando el grupo funcional carbonilo se encuentra en el carbn primario de la
molcula, o funcin cetona: cuando el grupo funcional se encuentra en un carbn secundario.Segn la
longitud de la cadena carbonada se distinguen entre aldo o cetotriosas, tetrosas, pentosas ,etc. La
molcula ms pequea que generalmente se considera un monosacrido son las triosas (con n =3).

Configuracin
Los monosacridos por sus estructuras pueden presentar diferentes tipos de isomera.
La existencia de uno o varios carbonos asimtricos en todos los monosacridos simples,
excepto en la cetotriosa: dihidroxiacetona, implica numerosas posibilidades de
configuracin espacial de la cadena carbonada.




D-Gliceraldehdo D-Dihidroxiacetona
(Aldosa) (Cetosa)
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ENANTIMEROS

Este tipo de isomerismo se observa en la frmula del Gliceraldehdo, el segundo tomo de
carbono tiene cuatro sustituyentes diferentes, por lo que es un carbono quiral.
Por lo tanto el Gliceraldehdo tiene dos estereoismeros de tipo enantimeros, que son
imgenes especulares, no superponibles, uno del otro. La forma ms compacta de
representar los Enantimeros es utilizando una proyeccin de Fischer.

Otro tipo de isomerismo es el que se da debido a la capacidad de desviar el plano de la luz
polariza da, los que desvan la luz hacia la derecha se conocen como D (dextrgiros)y los que
la desvan hacia la izquierda L(levgiros). El carbono asimtrico, el ms alejado
delaldehdodeterminaladesignacin D/L segnlaposicindelgrupofuncionalOH.
Enlosorganismosdominaunaforma enantiomrica de losmonosacridos, la forma D, No
obstante, tambin hay monosacridos L, aunque en menor proporcin, desempeando
funciones bastante especializadas.


DIASTMEROS

Cuandoseconsideranlosmonosacridosconmsdetres carbonos,se
apreciaqueelmonosacridopuedetenermsdeuncarbonoquiral,porloque hay dos tipos de
estereoismeros: los enantimeros y los diastmeros una nueva forma de estereoismeros
que se distinguen de losprimeros por que no son imgenesespecularesunodelotro.
Sonismerosquedifierenensuorientacin alrededor de otros carbonos, con la misma formula
estructural, pero con una disposicin diferente en sus grupos, recibiendo nombres diferentes,
Ejemplo de estosonlatreosaylaeritrosa sondosaldotreosasconorientacionescontrarias
alrededor del carbono 2,teniendo cada uno dos enantimeros (D YL).



ANMEROS

Los monosacridos de 5 y6 carbonos presentan la caracterstica de poder formar estructuras
de anillo muy estables mediante la formacin de un hemiacetal
interno.Cuandoelenlacesedaentreeloxgeno delcarbonounoconelhidroxilo del carbono cuatro
produce una estructura cclica llamada furano. Si el enlace se da entre el uno y el cinco el
anillo se denomina pirano.
En condiciones fisiolgicas en disolucin, los monosacridosde 5 y 6 carbonos se encuentran
en un99%en forma de anillo. Estanuevaestructuraa formadounnuevo
centroasimtricobasadoenelcarbono1, dandolugaralos estereoismeros
ydebidoalarotacindelaluzpolarizada,estosismeros quedifieren enla configuracin
tanslodelcarbono1(tomodelcarbono anomrico)sedenominananmeros.
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ConlaproyeccindeHaworthpodemos ejemplificaresteisomerismodelaglucosa.
Existendosclasesdeconformaciones de piranosa para los azucaresde 6 carbonos: la forma de
silla ms estable y la de
bote,menosfavorecida.Sibienexistenenlanaturalezaconmsde6carbonos, la mayora son de
escasa importancia.A excepcin de la sedoheptulosa.

DERIVADOS DE LOS MONOSACRIDOS

A los grupos hidroxilos de los monosacridos se le pueden unir a otros grupos funcionales,
los ms importantes y que desempean una funcin biolgica son:

a) Esteres de fosfato.

Un grupo fosfrico se une a un grupo hidroxilo formando un ster fosfato,
ejemplodeestoeselD-Gliceraldehdo-3-fosfatoolaa-D-glucosa-6-fosfato.Los azcares
fosfato son intermediarios importantes del metabolismo y actan como compuestos
activados en el anabolismo.


b) cidos y lactonas.

Estos se producen en presencia de un agente oxidante, formando cidos aldnicos.
Algunos de ellos son el cido D-glucnico, la d-gluconolactona.

c) Alditoles.

Estos seproducenalreducirseelgrupocarbonilodelazcar,enla naturaleza se
encuentran el eritrol, el D-manitol y el D-glucitol, tambin conocido como sorbitol.

d) Aminoazcares.

En estos un grupo amino se une alazcar, la glucosamina y la galactosamina son
losms frecuentes. De la glucosamina proceden otros como el cido murmico y el cido
N-acetilmurmico.















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PRINCIPALES MONOSACRIDOS

Nombre aldosas cetosas
Triosas(3carbonos) Gliceraldehido Dihidroxiacetona
Tetrosas(4carbonos) Eritrosa Eritrulosa
Pentosas(5carbonos) Lixosa
Xilosa
Arabinosa
Ribosa
Ribulosa
Xilulosa
Hexosas(6carbonos) Galactosa
Manosa
Glucosa
Fructosa
Heptosas(7carbonos) Sedoheptulosa


ENLACE
GLUCOSDICO

Se da entre el grupo hidroxilo del carbn anomrico deun monosacridocclico y
elgrupohidroxilodeotrocompuesto,enlacequeseconocetambincomo ter. La unin entre
dos monosacridos forman los disacridos.










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OLIGOSACRIDOS

Son polmeros de monosacridos, que no rebasan el nmero de diez los ms
abundantes son los disacridos. Los oligosacridos tienen propiedades reductorascuando
unodeloshidroxilos anomricos noestacomprometido conel enlaceglucosdico.Es
elcasoentreotros, delamaltosa,isomaltosa,celobiosay lactosa.
Paradescribirlasestructurasdeestosoligosacridos secomienzaporel
extremonoreductor enellado izquierdo,sesealalaformaanomricay enantiomrica.
Lostomosentreloscualesseformanlosenlacesglucosdicosse indican mediante nmeros
entre parntesis,escribiendo primero el carbono de la izquierda ydespusel carbono del
residuode la derecha.
Existen otros en los cualesestncomprometidos los carbonos anomricos por lo
que carecen de poder reductor y de mutarrotacin entre estos se encuentran la sacarosa, la
trehalosa y la rafinosa. La sacarosa es D glucopiranosil-D-fructofuransido.

PrincipalesOligosacridos
Nombre Formadospor Enlace
Lactosa Glucosa+galactosa 1-4
Sacarosa Glucosa+fructosa 1-2
Maltosa Glucosa+ glucosa 14
Celobiosa Glucosa+Glucosa 1-4
Isomaltosa Glucosa+Glucosa 16


POLISACRIDOS

Como sus nombres lo indican estos compuestos son polmeros de elevada masa molecular,
formados por condensacin de monosacridos simples, que a veces presentan estructuras
complejas. Los polisacridos pueden ser de reserva o estructurales.
Los de reserva ms importantes son: el almidn, la amilopectina y el glucgeno. Los dos
primeros son reserva de las plantas y el ltimo de los animales.
Laamilasa es un polmetro lineal formadoporunas250300unidadesde
D-glucopiranosa unidad es por enlaces glucosdicos(14).La amilopectina
esunpolmeroramificado,compuestoporunas1000unidadesde glucosa,con
enlaces(14)queserepitenhastacompletarde25a30unidades,delacual parte una nueva rama con
enlaces(1 6 )para seguir con unidades de glucosa(1 4). As por hidrlisis de la
amilopectina se pueden obtener maltosa e isomaltosa.
El glucgeno tiene una estructura similar a la amilopectina, pero con
ramificacionesmsfrecuentes,cada8a12monmerosymasamolecularms elevada, de hasta
varios millones. Elglucgenotieneespecialimportanciaenel reino animal porque garantiza un
aporteendgeno instantneo yconsiderable de glucosa.
Delospolisacridosestructuraleselmsimportanteeslacelulosa, que
puedencontenervariosmilesderesiduosdeglucosaensecuencialinealunidos por enlaces (1
4)este tipo de enlace le da una configuracin retorcida


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POLISACRIDOS
COMPLEJOS


Estos polisacridos adems de contener unidades de glucosa tambin pueden contener
lpidos, protenas o secuencias peptdicas, esta complejidad estructural es producto de
unaamplia variedad funcional. La pectina se halla en las paredes celulares de los vegetales
aunque en menor proporcin que la celulosa, y son polmeros lineales del cido D-
galacturnico, parcialmente esterificados congrupos metilo,ligados a galactosa,
arabinosayxilosa. La quitina es el material bsico delexoesqueleto de los artrpodos y forma
paredescelularesenhongos,Tieneunaestructura bsicamentesimilaraladela celulosa, en donde
el hidroxilo del carbono 2 de cada residuo se ha reemplazado por un grupo aminoacetilado,
formando unidades repetitivas de N- acetilglucosamina en enlaces(14). La quitina se
encuentra en el tabique que se forma entre las clulas que se estn separando. Tambin
tenemos a los glucosaminoglucanos anteriormente denominados mucopolisacridos, los ms
importantes son: el condroitn sulfato y el queratn sulfato del tejido conjuntivo, el
dermatnsulfato de la piel y el cidohialurnico. Todos ellos son polmeros de unidades
repetidas de disacridos, en donde uno de los azcares es la N-acetilgalactosamina o la a N-
acetilglucosamina o uno de sus derivados.




Estructura del
glucgeno
(polisacrido)
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IV.- Procedimiento Experimental:


1. MATERIALES Y EQUIPOS

8 tubos de ensayo.
Una pipeta graduada de 5 ml.
Un vaso de precipitado de 250 ml.
Una bagueta de vidrio.
Una pinza metlica.
Una gradilla para tubos de ensayo.


2. REACTIVOS
Muestra Problema
Reactivo de Molish( naftol en alcohol )
Acido Sulfrico (H
2
SO
4
)
Reactivo de Selliwanoff (resorcinolen Ac.Clorhdricodiluido)
Reactivo de Tollens (NH
4
OH + AgNO
3
+NaOH)
Reactivo de Barfoed(solucin de acetato de cobre en medio actico)
Reactivo de Lugol(solucin de KI y I
2
en agua destilada)
Reactivo de Fehling














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3. PROCEDIMIENTO

1. Diferenciacin entre aldosa y cetosa.

A. PRUEBA DE TOLLENS
Tomar 1ml de muestra problema y aadir 3ml de reactivo de Tollens. Cliente en bao Mara a
60 C sin agitar por 5 minutos. Observe y anote los resultados. Este experimento es positivo
para aldosas, o sea que la muestra dada es una aldosa.
La reaccin que ocurre:



En la primera imagen se produce el color negro brillante caracterstico del reactivo
Tollens frente a la D-glucosa. Em el lado derecho se aprecia la formacin del espejo
de plata.





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B. PRUEBA DE FEHLING
Fundamento de la reaccin: En medio alcalino, el cobre procedente del CuSO
4
se encuentra en
forma de hidrxido cprico, y se forma la correspondiente sal Na
2
SO
4
. Cuando el Cu(OH)
2
(de
color azul) se calienta en presencia de un compuesto reductor se forma xido cuproso (de color rojo
ladrillo).

Procedimiento: Tomar 3ml de la muestra problema, aadir 2ml de Fehling A y Fehling B. El
lquido del tubo de ensayo y caliente hasta ebullicin (5-10 minutos). La reaccin ser negativa si
la muestra queda azul y ser positivo cuando se cambia a color ladrillo.
Se observa un precipitado rojizo (CuO), Esto demuestra que nuestra muestra problema es una
aldosa.

La reaccin que ocurre:


















En la imagen se aprecia la
coloracin ladrillo, caracterstica de
las aldosas frente al reactivo de
Fehling.
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2. Reconocimiento de Carbohidratos
a) PRUEBA DE MOLI SH:
En un tubo de ensayo, colocar 2ml de la muestra problema y se le agrega 2 gotas del
reactivo de Mollish (-naftol en alcohol) y sobre las paredes del tubo se aade H
2
SO
4(cc)
.
De tal modo que se deposite en el fondo del recipiente, en la interfase se va a producir la
formacin de un anillo color prpura-violceo. Este resultado indicar que la reaccin es
positiva.

La reaccin es la siguiente:
OH
+
O H
2
3
OH
OH
O
SO
3
H
SO
3
H
O
OHC CH
2
OH
-H
2
O
H
2
SO
4
H
O
H
H
H
O H
OH
OH
OH




En la imagen se aprecia la formacin de la interfase de un anillo color purpura-violceo
que indica la presencia de un carbohidrato.



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3. Reaccin Diferencial de Aldosa-Cetosa
a) PRUEBA DE SELI WANOFF
En un tubo de ensayo, colocar 2 ml de la muestra problema y se le agrega 2 ml del reactivo se
Seliwanoff, caliente en bao maria a ebullicion por 2 minutos. La formacion de una coloracion roja es
positivo para las cetosas.


Las cetosas por accin del HCl forman la hidroximetil furfural y con la resorcina
forman productor coloreados rojos.










En la imagen se aprecia que la
muestra problema (D-glucosa) no
reacciona con el reactivo de
Seliwanoff por su carcter
aldehdico
+ 2H
2
O
Cetosa Resorcinol
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4. Prueba de diferenciacin entre monosacridos y disacridos)
a) PRUEBA DE BARFOED
Esta prueba permite diferenciar entre monosacridos y disacridos reductores, tambin
contiene ion cprico que se reduce hasta oxido cuproso ms rpidamente con los
monosacridos que con los disacridos.
Soluciones muestras de carbohidratos: GLUCOSA Y SACAROSA.
Coloque en un tubo de ensayo 2ml de la solucin del carbohidrato y agregue 2ml del reactivo
de Barfoed (Acetato cprico en Agua), calentar los tubos de ensayo en bao mara por unos
minutos, la formacin de un precipitado rojo entre 5-7 minutos. Indica la presencia de xido
cuproso y es prueba positiva para monosacridos.


En la primera imagen se produce la formacin de un precipitado rojo debido a que
trabajamos con glucosa (monosacrido) a diferencia de la segunda imagen que se
trabajo con sacarosa (disacrido) que result negativa.



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b) PRUEBA DE LUGOL
Los polisacridos se diferencian entre si por su comportamiento ante el reactivo de Lugol. Los
monosacridos y disacridos en solucin acuosa tratados con gotas de Lugol no dan
coloracin.
1. En dos tubos de ensayo colocamos 2ml de almidn y D-glucosa
2. Le agregamos gotas de Lugol a cada uno y mezclamos
3. Observamos en el primer caso con almidn que se torna color azul esto se debe a la
formacin del Ioduro de almidn; en el segundo caso no hay cambio de coloracin.














La D-glucosa a la izquierda del grfico
(monosacrido) no reacciona con el lugol.
El almidn a la derecha del grfico
(polisacrido) reacciona con el lugol
tornando una coloracin azul liliaceo.
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PRUEBA INVERSION DE LA SACAROSA
En un tubo de ensayo se aade 8ml de una solucin sacarosa al 1% y 1 ml de HCl
concentrado, luego lo llevamos a bao mara por 15 minutos, luego se saca 2 ml de la
solucin y se determina la prueba de Seliwanoff.
Para el caso de la sacarosa, debido al carcter acido del agua, la hidrlisis de la sacarosa
es lenta, formndose as las formas cclicas de la glucosa y fructosa, no obstante pasan a
su forma lineal, y la reaccin continuara tal cual como la forma lineal de la glucosa.
Esto es uno de los por qu demora en dar presencia de la coloracin rojiza.

Conclusiones: A los 5 minutos de estar en bao mara la sacarosa da una coloracin
rojiza, dando como resultado que la GLUCOSA es un Monosacrido y la SACAROSA
es un disacrido.



En la imagen se aprecia que la
muestra de la solucin de
sacarosa fue positiva para la
prueba de Seliwanoff. Esto
debido a la fructofuranosa
(Cetosa en su composicin)
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CUESTIONARIO
1. Indique una prueba de identificacin de la galactosa
REACCION DEL CIDO MCICO
Este ensayo permite la identificacin de la galactosa o de los azucares que lo contienen. El acido
ntrico oxida tanto al grupo aldehdo como al alcohlico primario de cualquier azcar para
originar cidos dicarboxlicos que han recibido el nombre general de cidos sacricos. El acido
mcico o galactrico es el menos soluble en agua acidificada de todos los cidos sacricos
Colocar 700mg de galactosa, glucosa y de la sustancia problema en distintos tubos de ensayo a
continuacin aadir 1 ml de agua y 1 ml de HNO3 a cada tubo. Calentar los tubos en un bao de
agua hirviendo durante una hora y luego se dejan enfriar lentamente. La reaccin debe
considerarse positiva si aparece un precipitado blanco de cristales de cido mcico.


2. Indique una prueba de reconocimiento de la fructosa
PRUEBA DE SELIWANOFF
Esta prueba se realiza para la identificacin de cetosas (fructosa) y aldosas. Se agregan 0,5 ml
de la solucin problema y 2 ml del reactivo, el cual, esta constituido por el compuesto fenlico
Resorcinol (m-dihidroxibenceno) disuelto en acido clorhdrico concentrado. Una tonalidad rojo
cereza indica la presencia de cetosas.
El cido clorhdrico deshidrata ms rpidamente las cetohexosas que las aldohexosas, ya que
stas deben isomerizarse a aquellas, para formar el Hidroximetilfurfural por deshidratacin


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3. Presente la inversin de la sacarosa. Utilice formulas de Haworth





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4. Presente la reaccion que indique que la hidroilsis de la sacarosa
tuvo lugar. Explique

La sacarosa es un disacrido. El HCl hidroliza el enlace glucosdico entre los dos
monmeros (glucosa y fructosa) que forman la sacarosa. Resultando una mezcla
equimolecular de estos dos monmeros. Los cuales luego pueden ser evaluados a travs
de la Prueba de Seliwanoff.

















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V. Conclusiones
A. Prueba de Mollish.
Al realizar esta prueba concluimos como es evidente que nuestra muestra se trata de un
carbohidrato, ya que se observo un anillo violeta en la interface de la solucin (incolora-
rojiza).
B. Diferenciacin de aldosa y cetosa.
Se tienen varias pruebas de las cuales se tiene los siguientes datos:
PRUEBA OBSERVACION CONCLUSION

Selliwanoff
Luego del bao Mara
la solucin no ha
cambiado (solucin
amarilla).

Es negativa para
cetosa.

Tollens
Luego de algn
tiempo en bao Mara
se observa un espejo
de plata

Es positiva para
aldosa.

Fehlling
Se forma un
precipitado rojizo.
Es positiva para
aldosa.

Schiff
En medio acido la
solucin se torna
violeta oscuro.
Es positiva para
aldosa.

Como conclusin de estas pruebas se tiene que nuestra muestra se trata de una aldosa.






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C. Diferenciacin entre monosacridos y polisacrido.
Se realizan dos pruebas, de las cuales tenemos:
PRUEBA OBSERVACION CONCLUSION

Barfoed

Se observa
precipitado rojiza

Es positivo para
monosacridos.

Con Lugol

La solucin no de
color.

Es positivo para
monosacridos.

De estas pruebas se concluye que nuestra muestra se trata de un monosacrido.
D. Conclusin general.
Nuestra muestra se trata de un carbohidrato que es monosacrido y a su vez es derivado
de un aldehdo (aldosa).
VI.- Recomendaciones:
Tener cuidado en la manipulacin del material, en la colocacin de los reactivos
y en las distintas operaciones del anlisis.

Se debe limpiar bien los materias de vidrio con los cuales se van a trabajar para
que no haya problemas al momento de realizar las pruebas.

La falta de orden conduce con frecuencia a confusiones que implica la prdida
lamentable de horas de trabajo y peor aun obteniendo resultados errneos.

El mtodo es indispensable en un problema tan complejo como es el anlisis
qumico, no se debe suprimir separaciones u operaciones (para ganar tiempo).
Tngase en cuenta que los procesos recomendados son frutos de aos de
investigacin. No debe iniciarse un proceso sin haber comprendido antes la
finalidad de todas las operaciones.

Todas las operaciones del anlisis con sus correspondientes observaciones deben
ser en un cuaderno apropiado, sin fiar nada a la memoria. Cuanto mayor nmero
de observaciones se anoten, mayor seguridad se tendr a la hora de comparar los
datos para resumir el anlisis

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VII.- Bibliografa:
Carrasco Venegas, Luis Edit. Arcngel Qumica Experimental
Qumica Orgnica; Wade, L.G. editorial: Pearson educacin, segunda
edicin, ao 2002, Pg. 1312
Rakoff, H; Rose N, C. Qumica Orgnica fundamental. Mxico 1980.
Wingrove A.S.; R.E. Caret. Qumica Orgnica Mxico 1984


















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VIII.- Anexos:


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