DATOS INFORMATIVOS ASIGNATURA: BIOQUMICA NIVEL: 6 NOMBRES: DANIEL BOLAOS JUAN FRANCISCO RODAS
TITULO DE LA PRCTICA: PRUEBAS DE IDENTIFICACIN Y PROPIEDADES DE LOS LPIDOS
FECHA DE REALIZACION DE LA PRCTICA: 18 DE FEBRERO DE 2014
1. Objetivos
Realizar pruebas de identificacin para lpidos utilizando aceite de oliva como muestra. Calcular el ndice de saponificacin del aceite de oliva mediante hidrlisis bsica.
2. Resumen
3. Introduccin
Los lpidos son un conjunto de molculas orgnicas (la mayora biomolculas) compuestas principalmente por carbono e hidrgeno y en menor medida oxgeno, aunque tambin pueden contener fsforo, azufre y nitrgeno. Tienen como caracterstica principal el ser hidrfobas (insolubles enagua) y solubles en disolventes orgnicos como la bencina, el benceno y el cloroformo. En el uso coloquial, a los lpidos se les llama incorrectamente grasas, ya que las grasas son slo un tipo de lpidos procedentes de animales. Los lpidos cumplen funciones diversas en los organismos vivientes, entre ellas la de reserva energtica (como los triglicridos), la estructural (como los fosfolpidos de las bicapas) y la reguladora (como las hormonas esteroides). El nmero de saponificacin o ndice de saponificacin es el nmero de miligramos de hidrxido de potasio requeridos para saponificar 1g de grasa bajo condiciones especficas. Es una medida para calcular el peso molecular promedio de todos los cidos grasos presentes. ndice de saponificacin: se define como los miligramos de KOH necesarios para saponificar un gramo de lpido. La palabra saponificar significa producir jabn, la hidrlisis alcalina de un triglicrido produce glicerol y las correspondientes sales de cidos grasos que forman el triglicrido. Por ejemplo: TRIPALMITINA + 3 KOH glicerol + 3 C15H31COOK Jabn Peso molecular de la tripalmitina: 860 g/mol Peso molecular del KOH: 56 g/mol Por cada 860 g de tripalmitina se necesitan 168.000 mg de KOH Osea 168.000 mg de KOH / 860 g de tripalmitina = I.S.
Como siempre se requieren 3 moles de KOH para la hidrlisis alcalina, podemos decir que I.S.=168.000/peso molecular del triglicrido. Se puede observar que el ndice de saponificacin es inversamente proporcional al peso molecular del trigicerido.
Parte experimental Materiales: Tubo de ensayo Mechero Centrifuga Varilla de vidrio Pipeta Baln de destilacin Refrigerante Vasos de precipitacin.
Reactivos: Solucin de Sudn III KOH alcohlico 0.5 N ter de petrleo Acetona Cloroformo N-Hexano Aceite de oliva
Procedimiento Solubilidad Ponga en 5 tubos de ensayo 2ml de un aceite cualquiera Aadir a primer tubo 2ml de agua, al segundo 2 mL de ter de petrleo, al tercero 2 mL de cloroformo, al cuarto 2 mL de acetona y al quinto 2ml de n -hexano Agitar fuertemente los tubos y dejar reposar Tincin Colocar 2ml de la muestra en 2 tubos de ensayo. Aadir a uno de los tubos 5 mL de solucin alcohlica de Sudn III y al otro tubo aadir 5mL de solucin acuosa de rojo 40 Agitar ambos tubos y dejar reposar 10 minutos Registrar los resultados
Indice de saponificacin Pesar un baln esmerilado de 250 mL vaco y seco y Colocar dentro del baln aproximadamente 2 g. de manteca de cerdo Aadir 40 mL de KOH 0.5 N alcohlico, conectar el refrigerante, calentar a bao mara por 30 minutos, enfriar y desmontar el equipo En el baln poner unas 8 a 10 gotas de fenolftalena y neutralizar el exceso de KOH con HCl 0.5 N desde una bureta, hasta desaparicin del color rosa. Anotar el volumen de HCl utilizado En un Erlenmeyer colocar 40 mL de KOH 0.5 N y unas 8 a 10 gotas de fenolftalena. Neutralizar con HCl 0.5N hasta desaparicin del color rosa. Anotar el volumen consumido de HCl (blanco)
Resultados
Resultados
Muestra: Aceite de Oliva
Tabla 1: Prueba de tincin Solucin Observacin Sudn III La muestra aceite se tintura al mezclar con esta solucin. Rojo 40 0,5% Se forma una emulsin, se mezcla muy uniformemente con el aceite
Tabla 2: Prueba de solubilidad Solvente soluble Insoluble Agua X ter de petrleo X N-hexano X Cloroformo X Acetona X
INDICE DE SAPONIFICACIN
Cuestionario
Indique como se realiza el metabolismo de los lpidos en el ser humano
Las clulas obtienen energa a partir de los cidos grasos. El ser humano obtiene grasas de la dieta, movilizan grasas almacenadas en tejidos especializados (tejido adiposo), y en el hgado convierten en grasas los glcidos que se encuentran en exceso en la dieta para exportarlos a otros tejidos. En promedio, los triacilgliceroles de la dieta suministran el 40% o ms del total de energa requerido diariamente por los seres humanos. Los triacilgliceroles cubren ms de la mitad de las necesidades energticas de algunos rganos, en particular del hgado, corazn y msculo esqueltico en reposo.
Qu enzima logra en el aparato digestivo la hidrlisis de las grasas?
Boca: lipasa bucal Estmago: lipasa gstrica Intestino delgado: lipasa pancretica- colipasa, esterasa del colesterol, lipasa pancretica dependiente de sales biliares.
Indique lo que ocurre con la mezcla aceite-Sudn III y aceite-tinta y explique a qu se debe la diferencia entre ambos resultados.
En la mezcla de aceite y sudan III: se forman micelas.
Aceite y tinta: la tinta queda pegada en el tubo, ya que esta contiene agua, por lo tanto no hay miscibilidad, no es miscible con el lpido.
Qu ocurre con la emulsin de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo? Y con la de benceno y aceite? A qu se deben las diferencias observadas entre ambas emulsiones?
Al pasar unos minutos de reposo, la emulsin con agua desaparece por la reagrupacin de las gotitas de grasa en una capa, que por ser menos densa, se sita sobre el agua, de mayor densidad.
En el caso de la emulsin con benceno aparece una disolucin homognea por ser afn con este solvente
Las diferencias se basan simplemente en la solubilidad de las grasas ya que son insolubles en agua pero son solubles en disolventes apolares como el benceno.
Conclusiones
Bibliografa Antonio Pea. Bioqumica. 2da Edicin. Pg. 109 Metabolismo de lpidos, lpidos de importancia fisiolgica, tomado de: http://acemucsc.galeon.com/articulos/Bioquimica/metabolismo_de_lipidos.htm; 08-marzo del 2014