INFORME DE ANALISIS DE COLIFORMES (RECUENTO POR PLACA)

PRESENTADO POR: CATTERINE CUIVA REINA

FICHA: 583801





















SENA
CENTRO DE HOTELERIA Y TURISMO TECNOLOGO EN CONTROL DE
CALIDAD DE ALIMENTOS
BOGOTA
MARCO TEORICO
Los coliformes habitan generalmente en el intestino del hombre y animales de
sangre caliente y pertenecen al grupo de las enteras bacterias.
Este grupo coliformes incluye bacilos Gram negativos, aerobios y anaerobios
facultativos, no esporulados. Tradicionalmente se consideraba que los coliformes
pertenecan a los gneros escherichia, citrobacter, enterobacter, y klebsiella, pero
de acuerdo con los mtodos taxonmicos modernos, el grupo es ms
heterogneo. Las bacterias del grupo coliformes estn asociadas con los
organismos patognicos y son un buen ndice del grado de seguridad
bacteriolgico del agua.
Cuando aparecen bacterias coliformes en el agua u/o otro alimento se asume que
otra clase de microorganismo capaces de causar enfermedades pueden estn
presentes.

OBJETIVOS
Comprender y realizar adecuadamente la determinacin de coliformes en
un alimento, mediante la cuenta en placas vertidas.
Interpretar los resultados obtenidos, de acuerdo con las normas aplicables.
Realizar recuento de bacterias del grupo coliformes, como indicador
sanitario.
Realizar recuento de bacterias del grupo coliformes como indicador
sanitario.
Establecer un procedimiento para el recuento de Coliformes segn la
Norma Tcnica 4458.

MATERIALES.

Medio de cultivo EMB (eosina azul de metileno).
Agua peptonada al 0.1%
Homogenizador
Balanza
Incubadora
Contador de colonias
Cuchillo, cucharas
Asas bacteriolgicas
Cajas Petri esterilizadas

METODO RECUENTO EN PLACA

Se basa en la cuantificacin de la poblacin microbiana presente en los alimentos
slidos o lquidos, sembrando en profundidad o en superficie. La mayora de los
alimentos no son estriles, sino que contienen una poblacin microbiana, que
vara ampliamente en nmero, que vara del alimento. Es por eso que al alimento
se le realizan diluciones para su cuantificacin. Ya que si se sembraran los
alimentos sin diluir, presentaran un recuento tan alto que sera imposible realizar
su conteo. Para eso se realizan las diluciones logartmicas en base 10 (10, 10,
10), las cuales se pueden relacionar con el recuento de microorganismos
multiplicando por el factor de dilucin que es el inverso de la dilucin.

PROCEDIMIENTO

PROCEDIMIENTO DE LAS DILUCIONES

1. En un frasco adicionar 90ml de agua peptonada al 0.1% y marcarla como
dilucin 10.
2. Marcar 2 tubos de vidrio como dilucin 10 y dilucin 10, adicionar a cada
uno de ellos 9ml de agua peptonada al 0.1%.
3. Para muestras solidas pesar 10g de la muestra, tratando de tomar porciones
de diferentes partes.
4. Tomar los 10g de la muestra mezclada y agregarlos al frasco que contiene
los 90ml, mezclar suspendindolo con la pipeta ms de 10 veces, hasta
homogenizar la mezcla; as se obtiene la dilucin 10.
5. Tomar 1ml de la dilucin 10
1
y adicionarlos al tubo que contiene 9ml de
agua peptonada al 0.1% marcado con la dilucin 10. Mezclar unas 10 veces
aspirando con la pipeta.
6. Tomar 1ml de la dilucin 10 y adicionarlos al tubo marcado con la dilucin
10. Mezclar unas 10 veces aspirando con la pipeta.
Nota: deben sembrarse por lo menos 3 diluciones.





PROCEDIMIENTO DE LA SIEMBRA EN PROFUNDIDAD

1. Preparar la muestra y realizar las diferentes diluciones.
2. Marcar tres cajas de Petri que contienen agar con el nombre del alimento,
fecha, dilucin y # del grupo.
3. Marcar dos cajas de Petri del mismo medio, una como control del diluyente y
otra como control del medio.
4. Adicionar 0.1ml de cada una de las diluciones y del control del diluyente en
las cajas marcadas que contienen el medio de cultivo.
5. Extender con una varilla de vidrio la muestra sobre toda la superficie del
medio, hasta que la superficie quede seca.
6. Incubar por 24- 48 horas a 35- 37 C.
7. Seleccionar las cajas que tengan entre 20 a 200 colonias.
8. Realizar el conteo final multiplicando por la dilucin y por 10

CONCLUSIONES
Muchos alimentos requieren un paso de dilucin antes de sembrarse, con el fin de
obtener una Distribucin lo ms homognea posible de los microorganismos
contenidos en la muestra reducir el nmero de microorganismos por unidad de
volumen, para que se encuentren en Cantidad adecuada despus de la incubacin
y se puedan observar las colonias en las placas .Encontramos un solo morfo tipo,
con 65 colonias.

Medio de Caractersticas Caractersticas dilucin # colonias Imagen
cultivo microscpicas macroscpicas
EMB Bacterias de
forma bacilar,
no esporuladas,
inmviles, pero
animados de
movimiento
pendular.
Color mbar,
con borde
irregular,
caractersticas
similares a
salmonella
shingella.
10 Crecimiento
masivo(65)

EMB Bacterias de
forma bacilar,
no esporuladas,
inmviles, pero
animados de
movimiento
pendular.
Color mbar,
con borde
irregular,
caractersticas
similares a
salmonella
shingella.
10 5
EMB Bacterias de
forma bacilar,
no esporuladas,
inmviles, pero
animados de
movimiento
pendular.
Color mbar,
con borde
irregular,
caractersticas
similares a
salmonella
shingella.
10 0 para
coliformes



BIBLIOGRAFIA:

http://es.slideshare.net/nataliavelasquez01/ntc4458-rto-coliformes-y-e-coli
WWW.GOOGLE.COM
Http: //es.slideshare.net/vado/guas-microbiologa-de-alimentos