QUMICA, HEMATOLOGA Y TOXICOLOGA II pg.

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1. HEMATOLOGA FORENSE
1.1 DEFINICIN
La Hematologa forense es la aplicacin criminalstica de la Morfologa,
Serologa y Bioqumica de la sangre. La Hematologa Forense abarca todos los
aspectos, tanto reconstructor, como identificador, en el terreno no solo policial,
penal, sino que, adems, el civil, por los problemas relacionados con la
filiacin.

1.2 RELACIN CON LA CRIMINALSTICA
La Hematologa (hema=sangre, logo=estudio), es el estudio de la sangre.
La hematologa forense comprende dos ramas:
Hematologa Reconstructora.
Hematologa Identificadora.

Hematologa Reconstructora

A travs del estudio meticuloso de las imgenes sanguneas se podr obtener
una informacin precisa de la forma en que se han producido los hechos. Se
podr determinar posicin de la vctima y del agresor, los movimientos
realizados en el sitio de suceso, caractersticas del traumatismo y violencia
empleada, intensidad del traumatismo, arma empleada, movimientos
ejecutados con ella.
En recintos cerrados se inspeccionar cuidadosamente las entradas,
salidas, techos, muebles, sospechosos, cadveres.
En recintos abiertos se puede encontrar manchas de sangre en
arbustos, piedras, pastos, hojas, en la tierra, etc.

- Clasificacin de Manchas Sanguneas.-

La clasificacin de manchas sanguneas se basa en su mecanismo de
produccin.
1. Manchas de sangre por contacto:
El contacto puede ser simple, por ej.: las manchas de sangre de las ropas que
estn en contacto directo con la herida. El contacto puede ser por limpiamiento,
ej.: al proceder a la limpieza de manos, armas, etc., las manchas aparecen en
los objetos utilizados para ello (papeles, paos, gneros, etc.)
2. Las manchas de sangre por arrastre:
Se producen cuando la vctima se arrastra o es arrastrada.


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3. Manchas de sangre por escurrimiento:
Cuando el desplazamiento se hace sobre un soporte inclinado se forma el
escurrimiento; cuando el soporte es horizontal o presenta depresiones la
sangre forma charcos. El soporte puede estar constituido por el cuerpo, suelo o
piso, murallas, ropas, etc.
4. Manchas de sangre por proyeccin:
Se producen cuando la sangre es proyectada en forma violenta sobre el
soporte. Si la mancha de sangre proyectada al soporte se presenta en forma de
imgenes aisladas y de disposicin irregular, constituyen las salpicaduras,
distinguindose en ellas salpicaduras gruesas y finas. En general, las
salpicaduras gruesas corresponden a la contusin repetida sobre una
superficie sangrante. Las salpicaduras finas se observan generalmente en la
mano del suicida que se dispara sobre la sien. La rociadura se produce cuando
la fuente productora se desplaza linealmente frente al soporte, ej.: herida
arterial y movilizacin de segmentos corporales o armas ensangrentadas.
5. Manchas de sangre por goteo de altura:
Se produce al caer la gota sangunea desde la fuente productora hasta el
soporte, impulsada por la fuerza de gravedad. La imagen producida tomar
caracteres especiales de acuerdo a la altura, al desplazamiento y detenciones
del herido y a la inclinacin del soporte. A medida que la fuente productora se
va alejando del soporte, la forma de la gota sufre variaciones progresivas en su
contorno; de muy poca altura el contorno es regular; a medida que se aleja, el
contorno se va haciendo irregular, luego presenta salientes en forma de rayos
y, posteriormente, se aprecia rodeada de gotas secundarias. El desplazamiento
del herido produce un contorno especial que se acenta con la velocidad: la
gota aparece de forma ovalada y con digitaciones (pata de oso) que se
acentan transformndose en proyeccin.
Estas digitaciones o proyecciones indican la direccin del desplazamiento (la
punta ms fina y alargada de la gota muestra el lugar hacia donde se dirige el
herido).
En el caso de soporte vertical, por lo general la gota ser de contorno con
radiaciones regulares, pudindose observar un escurrimiento vertical desde la
gota.
6. Manchas de sangre por Impregnacin:
Se produce cuando la mancha de sangre traspasa la textura del soporte. Por
ejemplo, En casos de violacin.
7. Manchas de sangre por Limpiamiento:
Se produce cuando hay tentativa de limpiado o se observa el enjuagado de un
soporte.



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- Forma y Posicin de las Manchas.-

El dimetro de una mancha de sangre slo tiene valor en la estimacin de la
distancia de cada cuando ste es inferior a 1,5 metros. Ms all de este valor,
la variacin en el dimetro es demasiado reducida como para ser confiable.
El aspecto de los bordes de la macha slo es verdadero cuando se tienen en
cuenta las caractersticas de la superficie sobre la que ha cado la sangre. Son
vlidas las correlaciones entre manchas desconocidas y patrones, slo si se
usan idnticas superficies de impacto. Cuando ms burda y spera es la
superficie, mayor es la posibilidad de que la gota se rompa.
Cuando las gotas caen perpendicularmente sobre una superficie lisa y
horizontal a una distancia menor de 50 cm. su forma es circular con los bordes
lisos. Cuando la altura est comprendida entre los 50 y 100 cm. los bordes ya
se presentan en forma festoneada; a una altura entre 100 y 150 cm. los
mismos son ms aguzados, producindose proyecciones radiales (o gotas
satlites) a una mayor altura.
Cuando las gotas caen verticalmente sobre un plano liso y oblicuo, las
manchas se alargan, tanto ms cuanto ms agudo sea el ngulo de cada. Su
forma, en cambio, no depende de la altura ni del volumen de la gota. La
relacin longitud/anchura de la gota permite calcular con aproximacin
suficiente cual ha sido el ngulo de cada.
8. Color de las Manchas de Sangre.-
Una mancha seca, pero relativamente fresca, es de un color rojo intenso y de
aspecto brillante.
El brillo desaparece bajo la accin de la luz solar, calor y diferentes
condiciones atmosfricas hacindolas de aspecto polvoriento, deslustradas,
resquebrajadas y ms plidas. Sobre tejidos, el brillo es a menudo menos
visible.
Estudio del Soporte.-
Soporte: Es toda superficie donde se encuentran las manchas de sangre
(cuerpo, ropas, suelo, murallas, vidrios, etc.).
Las manchas de sangre por contacto tendrn particularidades especiales
atendiendo a la permeabilidad e impermeabilidad del soporte.







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Hematologa Identificadora.-

Es la rama de la hematologa forense que se ocupa de identificar sangre.
Los procedimientos empleados estn destinados a investigar si es sangre, a
qu especie pertenece y en lo posible su individualidad.
a) Pruebas de Orientacin.-
Tienen valor como ensayos de orientacin, pero no aseguran la presencia de
sangre. Se realizan no solamente cuando hay suficiente cantidad de muestra,
para no dificultar la realizacin de las pruebas de certeza, especificidad y
tipificacin de grupo.
Los ensayos preliminares son pruebas rpidas y basadas en la actividad de la
peroxidasa que posee el grupo hemo de la hemoglobina de la sangre y que, en
presencia de agua oxigenada y de ciertos reactivos orgnicos dan lugar a la
aparicin de coloraciones o luminiscencia que orientan sobre la posible
existencia de sangre en las muestras analizadas.
Si el resultado de los ensayos preliminares es negativo, la mancha no contiene
sangre en cantidades detectables como para permitir su posterior anlisis. Si el
resultado es positivo, se requiere continuar con los ensayos para confirmar su
presencia.
Dentro de los ensayos preliminares, los ms conocidos son:
Investigacin de la catalasa de Vandervelde o hemasa de Senter.- Conocida
tambin con el nombre de reaccin de Schoenbein, se basa en el principio en
que el agua oxigenada es descompuesta fcilmente por un fermento que se
encuentra en la materia colorante de la sangre. El oxgeno puesto en libertad
remonta a la superficie en forma de pequeas burbujas formando una espuma
blanquecina. Este fermento se llama catalasa o hemasa.
Reaccin de Thevenon-Roland.- Color violeta, da esta reaccin si es
positiva. Su reactivo se compone de una solucin alcohlica acuosa de
piramidn a las que se agregan unas gotas de cido actico, lo que facilita la
reaccin (alcohol .50 gramos; piramidn 2.50 gramos)
Reaccin de Adler.- Reactivo: Solucin saturada de bencidina en alcohol de
96 o en cido actico. Se utiliza agua destilada y unas gotas de agua
oxigenada. Se altera pronto, siendo preferible prepararla en el momento de su
uso. La coloracin violeta es al instante, puesta en contacto con la sangre.
Las reacciones preliminares pueden dar falsos positivos; es decir, resultados
positivos producidos por sustancias diferentes de la sangre, como por ejemplo:
Sales de cobre y nquel Interfieren slo en soluciones concentradas. Una
coloracin dbil aparece antes del agregado de agua oxigenada y se intensifica


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lentamente despus del mismo. La reaccin es todava incompleta a los 15-20
minutos.
-Pruebas de la Certeza
Son ensayos especficos que certifican la existencia de sangre en la mancha
investigada.

Mtodos Cristalogrficos.-
Consisten en la preparacin y observacin microscpica de cristales obtenidos
por accin de ciertos reactivos sobre la hemoglobina de la sangre.
Entre los ms conocidos tenemos:
1. La prueba de Teichmann.- Consiste en la cristalizacin caracterstica del
Clorhidrato de hematina (hemina), bajo la forma de cristales rombodricos de
color caf, utilizando cido actico glacial con vestigio de cloruro de sodio. Esta
prueba da buenos resultados an con manchas antiguas y con muy pequea
cantidad de sangre.
2. La prueba de Takayama.- Es especfica y esta basada en la obtencin de los
cristales de piridina-hemocromgeno como consecuencia de la accin del
reactivo sobre la hemoglobina de la sangre, presente en la muestra.
El reactivo consiste en una mezcla de piridina, solucin saturada de glucosa y
solucin de hidrxido de sodio. Los cristales obtenidos son de color rosado
Mtodos Microespectroscpicos.-
Consiste en observar el espectro de absorcin de la oxihemoglobina, con un
microscopio provisto de un ocular microespectroscpico, en lugar del ocular
corriente.
Cuando la muestra de sangre es fresca, el mtodo no ofrece problemas
siempre que se disponga de la cantidad suficiente; pero si la mancha es
antigua, la hemoglobina se habr transformado parcialmente en
metahemoglobina, hematina y hemocromgeno. Cada una de estas sustancias
da un espectro de absorcin caracterstico, dificultando la observacin.
Actualmente este mtodo ha sido desplazado por los mtodos cristalogrficos.
c) Pruebas de Especificidad.-
Una vez realizadas las pruebas confirmatorias de sangre, debe efectuarse la
investigacin del origen humano o de otra especie al cual pertenece la muestra.
Hay factores que pueden afectar la posibilidad de asegurar el origen de la
sangre. Entre los ms importantes son: antigedad de la mancha, accin del
sol, humedad, putrefaccin desarrollo de hongos, altas temperaturas, lavado y
la naturaleza de la superficie en la que se encuentra la sangre.
Existen dos formas de realizarlas:


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1. Fsicas o microscpicas.- La presencia de glbulos rojos en una muestra ha
sido de valor ya que el tamao y la morfologa de los mismos difieren entre
ciertas especies.
Los glbulos rojos del hombre, como los de caso todos los mamferos, son
circulares y sin ncleo, a excepcin de los del camello y otros relacionados,
como los de la llama, que son ovales, pero tambin sin ncleo.
Las aves, reptiles y peces, poseen glbulos rojos nucleados y de mayor
tamao que el de los humanos.
Mediante estos datos es posible constatar que la sangre en cuestin no puede
pertenecer a determinadas especies, quedando las mismas excluidas.
2. Biolgicas o Inmunolgicas.- Consiste en una reaccin antgeno-anticuerpo,
y como la misma se visualiza con la obtencin de un precipitado, se conoce
con el nombre de ensayo de las precipitinas. Desde el principio de esta
centuria, se sabe que es posible distinguir la sangre de diferentes animales por
medio de sueros precipitantes.
Tipificacin de Manchas de Sangre.-
Tipificar una mancha de sangre, es encontrar su tipo o grupo dentro de la
mayor cantidad posible de sistemas y es fundamental para llegar a la
individualizacin.
En sangre fresca, la presencia o ausencia de un antgeno, se determina por la
aglutinacin o no de los glbulos rojos puestos en contacto con un antisuero
especfico.
En manchas de sangre seca los glbulos rojos estn generalmente destruidos
y, por lo tanto, las tcnicas de aplicacin directa no son aplicables; sin embargo
los antgenos no se desnaturalizan inmediatamente y retienen la capacidad de
combinarse con anticuerpos especficos (mtodos indirectos).
Es muy probable que queden en la escena del delito manchas de sangre; si se
comprueban que las mismas no pertenecen a la vctima, su estudio es muy
importante para localizar al criminal. Por otra parte, si en ropas u objetos
pertenecientes a un sospechoso, se encuentran manchas de sangre diferente a
la suya y coincidente con la de la vctima, sera una prueba ms de
culpabilidad. No podrn sacarse conclusiones valederas si hay semejanza
entre los grupos sanguneos de sospechoso y vctima, ya que alegar el primero
que la sangre es suya.
Los sistemas o grupos sanguneos ms aprovechables son los siguientes:
Sistema ABO: En el cual se manifiestan cuatro grupos sanguneos: "A", "B",
"AB", y "O".
Sistema MN: En este grupo se consideran tres combinaciones posibles:
"MN", "M" y "N".


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Sistema Rh: Los antgenos presentes en este sistema son: D, C, E, c, e, que
constituyen el factor Rh (que segn la combinacin de sus tres alelos, ser
positivo o negativo).
1. Factores que Pueden Afectar los Resultados
Entre los factores que pueden influir en obtener un resultado incorrecto,
tenemos: la antigedad de la mancha, la naturaleza del sustrato sobre el cual
se encuentra, las condiciones a la que estuvo expuesta, cantidad de muestra,
etc.
La antigedad de la mancha es de fundamental importancia en lo que
respecta a la investigacin de anticuerpos. Estos son muy poco estables, por lo
que su estudio en el laboratorio debe ser lo ms rpido posible.
No se deben manipular las muestras con las manos sin guantes, ya que los
antgenos del Sistema ABO se encuentra, adems, en las secreciones: sudor,
semen, saliva, lgrimas, etc. en la mayora de los individuos. Estos son los
llamados "secretores". Solo un 20% aproximadamente no manifiestan esta
propiedad, que son los individuos "no secretores".
Otro factor importante es la contaminacin bacteriana de la muestra.
Desafortunadamente no todos los sistemas conocidos de agrupamiento de
sangre son tiles en su aplicacin forense. Algunos son inestables o se
deterioran luego de varios das o semanas. Adems, factores tales como el
calor, luz solar directa, humedad y embalado inadecuado de la evidencia,
disminuyen de una u otra forma la posibilidad de llegar a un resultado efectivo.
2. Parte o Regin de donde Procede La Sangre.-
Se trata de estudiar los caracteres regionales de la sangre humana. En primer
lugar se estudiar si la forma y la posicin de las manchas estn o no en
contraposicin con la explosin dada. El examen microscpico suministra a
veces los escasos datos que se posee para establecer el diagnstico regional
de la sangre.
As por ejemplo, la mancha sangunea sea menstrual si se encuentra clulas
epiteliales uterinas o de la mucosa vaginal. Ser "epistaxis" si va acompaada
de clulas epiteliales de pestaas vibrtiles (fosas nasales). Ser "melena"
cuando la sangre va acompaada de materia fecal. En la "hemoptisis" la
sangre va en forma de salpicaduras muy finas, producidas por la tos. Y es
"hematemesis" cuando la sangre es de origen gstrico (en ocasiones
acompaadas de alimentos).
Determinar si las manchas que se encontraron son de sangre.
La apariencia de la sangre puede variar segn:
.
Tempertur.


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Luz.
Hume.

Los anlisis qumicos y microscpicos son necesarios para identificar la sangre
positivamente.
Forma de los Rastros Sanguneos.-
1. Sangre en herida por arma blanca
Caractersticas Especficas:
rt e Terer .
t r-te-pumet .
Empapada en Ropas.
Empapada en cabello.
Seca.
Hmeda.
e u .
2. Sangre en herida por arma de fuego
Caractersticas:
Seca-Hmeda-Gel.
Contaminada.
Restos metlicos.
Presencia plvora.
Otros restos orgnicos.
Existencia fibras
3. Sangre como Evidencia
Presente en el Sitio del Suceso, vctima o victimario puede presentarse en
distintas formas siendo las ms usuales:
Charco.
Salpicadura.
Chorro.
Huellas por escurrimientos.
Huellas por deslizamiento.
Huellas ensangrentada.
Manchas por absorcin.
Manchas referidas a maniobras de limpieza.
Proyeccin y apualamiento






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1.3 Antecedentes Histricos

En 1853, surgen los primeros estudios para la identificacin de sangre cuando
el anatomista Ludwig Teichmann Stawlarsgy, observa que la sangre tratada
con cido actico formaba cristales caractersticos a las que daba el nombre de
cristales hemticos.

En el ao de 1904 Adler reporta su estudio sobre el empleo de la prueba de la
bencidina para identificacin de sangre, mtodo que actualmente an es
utilizado por muchos investigadores forenses como prueba de orientacin.
Los estudios para la individualizacin de la sangre desde el punto de vista
gentico, aplicado a fines forenses por medio de tcnicas electroforticas,
fueron hechos por B. J. culliford de 1963 a 1967 y benjamn w. grunbaum de la
universidad de C alifornia, desde 1964 contina con esos estudios en la
asociacin californiana de criminalstica.





















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2. MUESTRAS DE SANGRE EN CRIMINALSTICA

2.1 Recoleccin y Embalaje de las muestras de Sangre
1) En caso de encontrar sangre liquida en el lugar de los hechos, se deber de
tomar con ayuda de una pipeta Pasteur o de un gotero y depositar en un tubo
de ensayo limpio y seco, al que se le deber de aadir 1ml de solucin salina
estril por cada 5 ml. De sangre.
2) Si se encuentran cogulos, se tomara con el extremo de un aplicador de
madera y se colocara en el interior de un tubo de ensayo, precediendo despus
como en el caso anterior.
3) Si se localiza sangre seca en objetos slidos, se levantara con pequeos
fragmentos de 2 x 2 cm. De tela blanca y limpia sin apresto, humedecidos con
solucin salina (.85%). Tela que se colocara en un tubo de ensayo, para l
enva a laboratorio. Con otro fragmento de tela, preparado de la misma forma,
se tomara una muestra control de una zona del soporte no manchada con
sangre.
4) Cuando las manchas se encuentran sobre cualquier tipo de tela, se
recortaran porciones representativas de la muestra, as como un trozo de la
misma tela que no se encuentre maculado con sangre.
5) Si se trata de manchas sobre vegetales, estos se recortaran y se pondrn en
el interior de un sobre. Una porcin no manchada del vegetal ser tambin
recogida en otro sobre.
6) La sangre que se llegue a encontrar sobre tierra o arena, se deber de
recolectar tomando un trozo completo del soporte, el cual se depositara en una
bolsa de plstico que ser colocada en una caja de cartn. Tambin se tomara
una muestra de tierra sin sangre y se empacara por separado.
7) Si la muestra problema se encontrara impregnada en cabellos, estos se
tomaran con pinzas y se trasladaran al laboratorio dentro de pequeas bolsas
de plstico.
8) Las manchas que se encuentran en el cuerpo de la vctima, y de las que se
sospecha no pudieran ser originadas por su propia sangre, sern tomadas
como se describen en el punto 3. Adems se tomara sangre del cadver, con el
fin de compararla con la de las manchas.


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Todas muestras tomadas llevaran etiquetas firmemente adheridas, las cueles
tendrn anotaciones como:
a) Numero de averiguacin o expediente.
b) Fecha y hora en que se levant la evidencia.
c) Sitio de donde se recolecto.
d) Naturaleza presunta del indicio.
e) Nombre del investigador que realizo el levantamiento y embalaje.


* DETERMINACION DEL GRUPO SANGUINEO EN MANCHAS DE SANGRE SECA
El propsito de este captulo es el de orientar al experto en hematologa forense sobre
la problemtica especial que reviste este captulo de la criminalstica.
En manchas de sangre seca, las clulas se han roto y por lo tanto las pruebas de
aglutinacin directa no son factibles; sin embargo los antgenos del sistema ABO no se
desnaturalizan tan rpidamente por la sequedad y en este sistema sobreviven durante
algn tiempo y conservan la capacidad de combinarse con anti cuerpos especficos.

Manchas de sangre
En cuanto a su recoleccin, levantamiento, embalaje y envo al Laboratorio,
Gaspar (1993:85) sostiene lo siguiente:

Como primera medida es necesario volver a recalcar que cuando las manchas
de sangre se encuentren depositadas en soportes transportables, es
conveniente no tocarlas, y por lo tanto se deben secuestrar y remitir al
laboratorio para su estudio.

Los mtodos de levantamiento de rastros de sangre cuando el soporte no
pueda ser enviado al laboratorio son variados, segn las condiciones del
mismo.

En general, cuando el soporte lo permite, se procede al raspado con un cuchillo
filoso o elemento similar.

Sobre una madera muy dura se efectuar el mismo procedimiento, pero si sta
fuere blanda es preferible efectuar un corte en ella por la parte inferior,
retirando la porcin que se encontrare maculada.

Si estuvieran sobre tierra o elemento similar se levantar una porcin de ese
material maculado, tratando de que sea lo suficientemente amplio (ms no
excesivo) como para mantener la mancha.



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Sobre tejidos tales como alfombras, tapices, etc. se har el corte del lugar
correspondiente y cuando ello no fuere posible se colocar debajo del mismo
un papel secante blanco qumico puro o papel filtro; luego por medio de una
cuenta gotas se deja caer solucin salina fisiolgica (factible de obtener en
cualquier farmacia), hasta que traspase al elemento cuestionado y el secante o
papel colocado en su parte inferior absorba buena cantidad del material a
analizar. Despus se dejar secar, previo a su embalaje y remisin.

Cuando la sangre sea abundante y an lquida, se proceder a su
levantamiento con una cuchara, pipeta o elemento similar y sin ningn
agregado se colocar en un envase de vidrio, hermticamente cerrado; si
hubiera demora para su remisin al laboratorio, se conservar en una heladera.

Las ropas ensangrentadas deben ser secadas al aire, en lugar cubierto y donde
no haya corriente, a los fines de evitar que se contamine con polvo existente.
Para este trabajo nunca debe emplearse ventiladores artificiales o calor
artificial. El primero puede hace desaparecer rastros existentes como pelos,
fibras, deflagracin de plvora, etc., y el segundo tiende a fijar la sangre en los
gneros, y si la temperatura es muy elevada perjudicar su consistencia y por
ende, el posterior anlisis en el laboratorio.

Luego de estos sern envueltas en papel madera limpia o dispuestas en cajas
de cartn, cuidando de no mezclar las ropas de la vctima con las del imputado,
y de ser posible embalarlas todas separadamente. Nunca se emplear papel
de poca consistencia que pueda romperse y permitir que se pierdan partculas
desprendidas de las manchas.

Se tratar de evitar los plegados excesivos en dichas ropas con el objeto de no
provocar el resquebrajamiento de las zonas maculadas y as producir la
prdida de partculas de sangre seca.

Los dems elementos como hachas, cuchillos, armas de fuego, machetes,
barretas, etc, debern ser puestos en cajones de madera o de cartn duro y
fuerte, procurando atarlos en su interior para no producir su desplazamiento en
el transporte y los consiguientes desprendimientos de manchas como se
mencion precedentemente.

La sangre recogida an lquida, como se ha dicho, deber ser colocada en
tubos de ensayo o frascos de vidrio hermticamente cerrados, sin adosrseles


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ninguna sustancia. Cuando la remisin al laboratorio no sea inminente, sern
conservados en una heladera.

Las raspaduras o residuos de sangre seca tambin sern envasados en tubos
de ensayo o frascos de vidrio. Nunca sern ensobrados o envueltos en papel,
ya que puede originarse la prdida de partculas, sea por las esquinas del
sobre o bien por los pliegues del papel.

Es de hacer constar que todos estos elementos deben estar rotulados con
indicacin de la causa (cartula), del magistrado de intervencin, de quin
segn el caso, es la vctima y el imputado, la fecha de su secuestro, y sern
firmadas por la instruccin y testigos del caso.

Cuando el secuestro de la sangre se hubiera hecho por el mtodo del papel
secante o papel filtro, en su envo al laboratorio, que ahora si puede efectuarse
en un sobre, se especificar claramente el mtodo que se emple para el
levantamiento de la mancha.