Resonancia Magntica Nuclear

4.3 Espectrmetros de Resonancia Magntica Nuclear.

4.3.1 Equipo de RMN a onda continua: RMN-OC.
Los primeros equipos de RMN trabajaban de forma anloga a los equipos dispersivos de
UV e IR, alcanzando la condicin de resonancia de los diferentes n!cleos de una muestra
por un variacin contin!a de la frecuencia de "
#
o de la intensidad del campo magn$tico
esttico "
%
& 'stos equipos son conocidos como RMN a onda continua (RMN)*+,&
-escribiremos en forma sint$tica los componentes principales de dic.os equipos, que por
otra parte muestran analog/a con los de los equipos ms modernos de pulsos)
transformada de 0ourier (RMN)10,2
#&) Magneto o imn , generador del campo magn$tico esttico "
%
que debe ser intenso,
.omog$neo 3 estable (estas propiedades se discuten ms adelante,&
4&)Emisor de radiofrecuencias, para crear el campo oscilante "
#
a las frecuencias de
resonancia (decenas a cientos de M5z, con intensidad moderada ("
#
#%
)6
1, para evitar
saturacin de las se7ales& 8eneralmente se logra la e9citacin de la muestra
constru3endo un peque7o solenoide con eje coa9ial al tubo que la contiene&
:&) Detector de radiofrecuencias, para medir la absorcin de radiacin por parte de la
muestra al alcanzarse la condicin de resonancia& 'n los equipos de RMN)*+ se .an
utilizado dos tipos de detectores& 'l primer tipo, que utiliza slo una bobina, fue
desarrollado por ;urcell (#<=>, 3 mejorado posteriormente por "loemberger (#<=?,2 se
detecta la resonancia por desbalance de un puente de radiofrecuencias conectado a la
bobina !nica emisora)detectora& 'l segundo m$todo utiliza 4 bobinas 3 es llamado
m$todo de induccin& 'n $l se .ace uso de la induccin magn$tica producida en un eje
perpendicular a "
%
cuando el sistema entra en resonancia& +on este fin se sit!an en el
entre.ierro del imn dos bobinas (transmisora 3 receptora, con ejes en ngulo recto en el
plano perpendicular a "
%
& La se7al detectada en el receptor corresponde a la absorcin de
energ/a por los n!cleos en resonancia 3 debe ser bien separada de la se7al proveniente del
transmisor, minimizando todo acoplamiento entre ambas bobinas& 'ste m$todo fue
desarrollado inicialmente por "loc. (#<=>, 3 se aplica, con modificaciones, en los
nuevos espectrmetros RMN)10&
=&) Sistema de barrido para detectar sucesivamente todos los n!cleos de inter$s en la
muestra modificando las relaciones frecuencia@campo en un rango que corresponda al de
desplazamientos qu/micos presentes 'sto puede lograrse por variacin de la frecuencia de
"
#
(barrido de frecuencias, o de la intensidad de "
%
(barrido de campo,& La velocidad de
barrido generalmente es del orden de # 5z@s& Velocidades menores tienden a producir
saturacin con deformacin 3 ensanc.amiento de las se7ales& "arridos ms rpidos
pueden deformar las se7ales 3 .acer aparecer fenmenos transientes indeseables como el
denominado ringing& ;ara el registro de un espectro con un equipo RMN)*+ se requieren
al menos varios minutos&
A&) Sistema portador de la muestra, la que se sit!a en un tubo de vidrio de paredes finas,
generalmente de Amm de dimetro interior, con el material de inter$s disuelto en un
disolvente apropiado, preferentemente aprtico o deuterado& 'n RMN)*+, t$cnica poco
sensible, las cantidades de sustancia requeridas para obtener un espectro de resonancia
Resonancia Magntica Nuclear
protnica son del orden de unos pocos miligramos 's frecuente someter la muestra a
rotacin (velocidades t/picas de rotacin 4A5z, para minimizar la posible
in.omogeneidad del campo "
%
en el plano perpendicular al eje de rotacin&

'n la 0igura =&## se muestra el esquema de un equipo de RMN)*+&
0igura =&## 'quipo de RMN a onda continua&
4.3. !cnica de pulsos-!rans"ormada de #ourier.
La RMN es una t$cnica de baja sensibilidad debido a la peque7a diferencia de
poblaciones entre el estado base 3 el e9citado& La relacin se7al)ruido B@R, que en un
espectro es el cociente entre la altura de la se7al B 3 el nivel medio del ruido R, toma
valores mu3 bajos si el n!clido tiene baja abundancia natural 3@o una relacin
magnetog/rica desfavorable& +uando la relacin se7al)ruido se acerca a la unidad la
posibilidad de discernir entre una se7al verdadera 3 una fluctuacin del ruido electrnico
del sistema de amplificacin del equipo se .ace cada vez mas dificil& Una alternativa es la
acumulacin co.erente de espectros& Cl sumar espectros la se7al aumenta linealmente con
el n!mero de acumulaciones n mientras que el carcter aleatorio del ruido .ace que este
crezca slo con n& Cs/ la relacin se7al ruido crece con el n!mero de acumulaciones
seg!n2 B@R D n@n D n& ;ara que sea efectivo este incremento la acumulacin debe ser
co.erente lo que implica una gran estabilidad en la frecuencia de trabajo del
espectrmetro& 'n la t$cnica tradicional de RMN)*+ la acumulacin de espectros no
resulta mu3 provec.osa pues la adquisicin de un espectro individual es tarea de varios
minutos 3 la acumulacin de unos pocos cientos de espectros demora varias .oras& La
limitacin fundamental radica en que en RMN)*+ la ma3or parte del tiempo de registro
(barrido, se emplea en medir la l/nea base del espectro que no contiene informacin !til&
'ste tipo de espectroscop/a donde sensamos la respuesta a una frecuencia 3 obtenemos el
Resonancia Magntica Nuclear
espectro secuencialmente se denomina monocanal& Veremos a continuacin la t$cnica de
pulsos, que con sus numerosas ventajas se .a impuesto en el campo de la RMN desde su
introduccin a fines de los a7os >%& La descripcin fenomenolgica del funcionamiento de
un equipo de este tipo mediante el denominado modelo vectorial clsico requiere la
introduccin de una serie de conceptos que trataremos a continuacin&
Magneti$acin Macroscpica.
La magnetizacin macroscpica M se define como la suma vectorial de todos los
momentos magn$ticos nucleares 2

=
i
i
M
E=&4AF
'n condiciones de equilibrio t$rmico, dado el ligero e9ceso de poblacin en el estado G
(semi)cono superior en la 0igura =&#4, 3 ausencia de co.erencia en los movimientos de
los vectores individuales H, el vector M
%
es colineal con "
o
&
0igura =&#4 Vector de Magnetizacin Macroscpico
La ecuacin de movimiento de la magnetizacin macroscpica es semejante a la
correspondiente a un momento magn$tico individual2
B x M
dt
M d
= E=&4>F
B x
dt
d

=
E=&46F
'l vector M permite una descripcin macroscpica del fenmeno de resonancia& "loc.
desarroll las ecuaciones que permiten evaluar la evolucin del vector de magnetizacin
en el tiempo bajo diferentes condiciones& 'stas ecuaciones permiten comprender el
fenmeno de la resonancia 3 la evolucin macroscpica del sistema bajo la accin de
campos magn$ticos, pulsos de radiofrecuencias 3 relajacin&
Ecuaciones de %loc&.
"loc. desarroll las ecuaciones que describen la evolucin de la magnetizacin
macroscpica en un sistema sometido a la accin de diferentes campos magn$ticos 3 la
relajacin&
)Vector de magnetizacin macroscpica2

k M j M i M M
z y x
+ + =
E=&4?F
Resonancia Magntica Nuclear
(
k j i , ,
)vectores unitarios en las direcciones 9, 3, z respectivamente,
)'volucin del vector M en el tiempo2
B x M
dt
M d
= I relajacin E=&4<F
lajacin
B B B
M M M
k j i
dt
M d
z y x
z y x
Re + =
1eniendo en cuenta2
)el campo magn$tico e9terno "
o
( convenio2 direccin z, 3 el campo magn$tico de la
radiofrecuencia "
#
(oscilante en plano perpendicular a "
o
, a velocidad angular
#
2
"
z
D "
o
"
9
D "
#
cos
#
t "
3
D )"
#
sen
#
t E=&:%F
)los procesos de relajacin que tienden a la situacin de equilibrio con cin$ticas de primer
orden caracterizadas por tiempos 1
#
3 1
4
2
M
z
M
o
(1
#
, M
9,3
% (1
4
,
;odemos llegar al conjunto de ecuaciones de "loc. en el llamado sistema de coordenadas
de laboratorio (inercial,2
dM
9
@dt D EM
3
"
o
I M
z
"
#
sen
#
t F ) M
9
@1
4
'cuaciones de "loc.
Bistema de coord&laboratorio
dM
3
@dt D ) EM
9
"
o
I M
z
"
#
cos
#
t F ) M
3
@1
4
E=&:#F
dM
z
@dt D EM
9
"
#
sen
#
t I M
3
"
#
cos
#
t F ) EM
z
) M
o
F@1
#
'stas ecuaciones constitu3en un sistema de ecuaciones diferenciales acopladas cu3as
soluciones nos darn la evolucin de los diferentes componentes del vector de
magnetizacin M en el tiempo para situaciones e9perimentales concretas& Resulta
conveniente utilizar un sistema de coordenadas donde estas ecuaciones resulten de mas
simple resolucin 3 visualizacin de las soluciones& C tal efecto se introduce el
denominado sistema de coordenadas rotatorio (no inercial,&
'istema de coordenadas rotatorio.
La idea central es la eliminacin del caracter oscilatorio de "
#
& Bi escogemos un sistema
de coordenadas que rote alrededor de "
o
(eje z, a una velocidad angular igual a la de
"
#
( es decir
#
,, en el nuevo sistema encontraremos a "
#
fijo a uno de los ejes
coordenados perpendiculares a z (utilizaremos al eje 9J,&
1enemos a.ora un sistema no inercial por lo que la ecuacin de movimiento debe
modificarse& La nueva ecuacin adopta la forma2
EdM@dtF
rot
D M 9 "
ef
E=&:4F
Resonancia Magntica Nuclear
donde2 "
ef
es el campo magn$tico efectivo que resulta de corregir el campo real "
inclu3endo el efecto de la rotacin (que compensa la rotacin efectiva en el nuevo
sistema,2
"
ef
D " I
#
@ E=&::F
1eniendo en cuenta la ecuacin de Larmor E "
o
D @F las ecuaciones de "loc. en el
sistema de coordenadas rotatorio quedan2
dM
9J
@dt D ( )
#
,M
3J
) M
9J
@1
4
dM
3J
@dt D ) ( )
#
,M
9J
I "
#
M
z
) M
3J
@1
4
'cuaciones de "loc.@Bist&coord&rotatorio
dM
z
@dt D ) "
#
M
3J
) (M
z
) M
o
,@1
#
E=&:=F
E(olucin durante el pulso de radio"recuencias
'n la t$cnica RMN)1ransformada de 0ourier se aplica un pulso de R0 de corta duracin
para e9citar simultneamente todos los n!cleos de inter$s& 'stos pulsos tienen usualmente
una duracin de unos pocos microsegundos& Los pulsos deben ser cortos para que e9citen
de forma semejante a todos los n!cleos de interes, independientemente de su
desplazamiento qu/mico& Beg!n el principio de incertidumbre de 5eisenberg, un pulso de
duracion t
p
de frecuencia nominal
o
tiene un rango de frecuencias efectivo dado por D

o
#@=t
p
& ;ulsos de microsegundos de duracin tienen rangos de frecuencias efectivos
del orden de las decenas de miles de 5z, lo que es en general suficiente para e9citar
efectivamente a todos los n!cleos de un istopo dado (
#
,& La corta duracin de los
pulsos no permite que act!en los procesos de relajacin&
dM
9K
@dt D %
dM
3K
@dt D I "
#
M
z


'cuaciones de "loc.@ Bist& coord& rotatorio
dM
z
@dt D ) "
#
M
3J
'volucin durante el pulso de R0 E=&:AF
Los resultados anteriores muestran que en estas condiciones la magnetizacin precesa
alrededor de 9J (en el plano z3J, sin relajacin, pues el campo efectivo en estas
condiciones es "
#
(ver 0igura =&#:,& La velocidad angular de esta precesin viene dada
igualmente por la ecuacin de Larmor2
z3J
D "
#
3 el angulo de rotacin al final del
pulso es2 D "
#
t
p
E=&:>F
La duracin del pulso determina el valor del angulo que forman el vector M 3 "
o
&;uede
.ablarse entonces de pulsos de <%
o
, #?%
o
, =A
o
, etc& ;ara producir un componente de
magnetizacin en 3J (al cual es proporcional la intensidad de la se7al pues esta se sensa
como induccin magn$tica en bobinas situadas en el plano 9J3J, es necesario que el
ngulo sea apreciable& ;ara pulsos necesariamente cortos, esto implica que sean de
Resonancia Magntica Nuclear
intensidad apreciable (*+ "
#
#%
)>
1 , 10 "
#
#%
)4
1, con velocidades angulares
z3J
de
#%
>
rad@s&
B
1
x'
y'
z
M
o

0igura =&#: 'volucin del vector de
magnetizacin durante un pulso de R0&
E(olucin de la magneti$acin despus de un pulso de )*
o
en resonancia
-espu$s del pulso de R02 "
#
D % 'n resonancia2 D
#
&
'l campo magn$tico efectivo es nulo& Blo ocurrirn los procesos de relajacin&
dM
9J
@dt D ) M
9J
@1
4
D % dM
3J
@dt D ) M
3J
@1
4
D % dM
z
@dt D ) EM
z
) M
o
F@1
#
E=&:6F
M
3J
D M
o
e
)t@14
M
z
D M
o
(# ) e
)t@1#
, E=&:?F
La evolucin de los componentes del vector de magnetizacin se muestra en la 0igura
=&#=&
Resonancia Magntica Nuclear
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
1
Relajacin
t/s
My
,
Mz
My
Mz
0igura =&#= 'volucin de las magnetizaciones longitudinal 3
transversal despu$s del pulso en resonancia&
La curva M
3J
versus tiempo se denomina ca/da de induccin libre (0I-,& Bi tengo situada
una bobina con eje en 3J se inducir en la misma una corriente el$ctrica debida a la
magnetizacin variable en esa direccin& -e esta forma se detectan las se7ales en RMN)
10& La bobina detectora est normalmente alimentada 3 referida a la radiofrecuencia de
e9citacin por lo que efectivamente sensa la variacin de magnetizacin equivalente al
sistema de coordenadas rotatorio&
La aplicacin del pulso de <%
o
lleva la magnetizacin macroscpica al eje 3J por lo tanto
crea cierto ordenamiento en la precesin de los n!cleos (memoria de fase,, este fenmeno
se conoce como co.erencia& Cl desaparece "
#
, los procesos naturales tienden a anular
este orden 3 la magnetizacin transversal se amortigua& 'ste proceso , que generalmente
tiene un comportamiento cin$tico de primer orden caracterizado por un tiempo de vida
medio 1
4
, corresponde a un incremento de la entrop/a del sistema&
;or otra parte el pulso altera la poblacin de los estados 3 & -espu$s de cesar su
accin el sistema tiende a la restauracin del equilibrio t$rmico, mediante la relajacin
longitudinal (esp/n)red,& 'ste proceso tiene carcter energ$tico, recibiendo energ/a el
ret/culo del sistema de espines, mediante una cin$tica de primer orden asociada al tiempo
de vida medio 1
#&
E(olucin de la magneti$acin despus de un pulso de )*
o
"uera de resonancia
-espues del pulso de R02 "
#
D% 0uera de resonancia2 )
#
%
Resonancia Magntica Nuclear
dM
9J
@dt D ( )
#
,M
3J
) M
9J
@1
4
E=&:<F Be mezclan las componentes M
9J
3 M
3J
dM
3J
@dt D ) ( )
#
,M
9J
) M
3J
@1
4
E=&=%F La magn&transversal precesa alrededor de z
dM
z
@dt D ) (M
z
) M
o
,@1
#
E=&=#F Relajacin longitudinal
'n este caso la evolucin de la magnetizacin longitudinal tiene las mismas
caracter/sticas del caso anterior& La magnetizacin transversal precesa alrededor de z con
una frecuencia igual a la diferencia de frecuencias entre la propia de la radiacin
#
3 la
de precesin del n!cleo & Bimultaneamente ocurre relajacin& 'l vector de
magnetizacin transversal traza una espiral que termina en el origen de coordenadas, lo
que se ilustra en la 0igura =&#A&
0igura =&#A +a/da de induccin libre (0I-, despu$s de un pulso, fuera de resonancia&
La ca/da de induccin libre contiene informacin sobre la posicin relativa de la se7al ()

#
, 3 sobre su anc.ura (anc.ura a altura media de una se7al
#@4
D #@1
4
,& 's decir un
0I- contiene la misma informacin que un espectro& 'n el caso de varias se7ales el 0I-
tiene una apariencia compleja de la cual es imposible e9traer directamente la informacin
espectral (interferograma,& Bin embargo mediante la transformacin matemtica de
0ourier es posible convertir el interferograma en un espectro semejante al obtenido en
RMN)*+&
'n la t$cnica RMN)10 la informacin se adquiere en mu3 corto tiempo2
-uracin del pulso e9citador s
-uracin de la deteccin (0I-, #s (del orden de 1
4
, o, si .a3 in.omogeneidad
apreciable del campo magn$tico "
o
, aun menor (del orden de 1
4
L,
Resonancia Magntica Nuclear
!rans"ormada de #ourier.
5emos visto que la informacin contenida en un 0I- (M
3
J(t,, equivale a la de un
espectro& 'l 0I- usualmente se detecta midiendo la fuerza electromotriz generada en una
bobina situada con eje en el plano perpendicular a "
o
3 alimentada con la frecuencia 3 la
fase del emisor de R0& 'sto .ace que podamos sensar efectivamente M
3J
o M
9J
modificando solo la fase respecto al emisor& 'l 0I- se adquiere durante un tiempo del
orden de 1
4
L ( # segundo, 3 puede transformarse en informacin espectral&
M
y'
(t) I()
T. Fourier
FID Espectro
Dominio tiempo Dominio Frecuencia
La transformacin de 0ourier est relacionada con las series de 0ourier que permiten
desarrollar cualquier funcin del tiempo como una combinacin lineal de funciones
peridicas de frecuencia definida& 's decir podemos encontrar las frecuencias
componentes de un proceso de evolucin compleja en el tiempo&
Berie de 0ourier2
f(t, D
nD%
C
n
cos(nt, I
nD%
"
n
sen(nt, E=&=4F
donde C
n
3 "
n
son coeficientes 3 n n!meros enteros positivos&
1ransformada directa de 0ourier2
+ompleja2
0(, D f(t,&e
Iit
dt E=&=:F
Real2
+(, D 4 f(t,cost dt
B(, D 4 f(t, sent dt E=&==F
1ransformada inversa de 0ourier (permite reconstruir el proceso temporal,2
f(t, D #@4 0(,e
Iit
dt E=&=AF
La transformada de 0ourier de una funcin e9ponencial es una lorenciana, tal como se
muestra en la 0igura =&#>&
Resonancia Magntica Nuclear
M
y'
= M
o
e
t
M
y'
-t/T
2
TF
0igura =&#> 1ransformada de 0ourier de una funcin e9ponencial&
'n general al realizar la transformacin obtenemos 4 componentes2 el real 3 el imaginario2
, ( , ( , ( , (

iD A dt e t f F
t i
+ = =

E=&=>F
A()2 ;arte real &+omponente absortivo (<%
o
fuera de fase con "
#
,
A() D M
o
"
#
1
4
@E# I =
4
1
4
4
()
#
,
4
F
D()2 ;arte imaginaria& +omponente dispersivo (en fase a "
#
,
D() D M
o
"
#
1
4
4
()
#
,@E# I =
4
1
4
4
()
#
,
4
F
Cmbos t$rminos se pueden interconvertir mediante una transformada de 5ilbert& Las
componentes real e imaginaria pueden sensarse con 4 bobinas en el plano 9J3J o con una
bobina alimentada alternativamente con una R0 en fase 3 <%
o
fuera de fase con la
frecuencia de "
#
& Bi el detector no est bien ajustado las se7ales aparecen como mezclas
de absorcin 3 dispersin& 'l error en las fases puede eliminarse mediante la llamada
correccin de fase, mezclando las componentes real e imaginarias, 3 se realiza
inmediatamente despues de la transformacin de 0ourier& +uando por la naturaleza del
e9perimento no es posible un ajuste adecuado de la fase puede recurrirse a las
representaciones del espectro en modo magnitud
4
#
4 4
, ( , ( D A M + = o en modo
potencia
4 4
, ( , ( D A + =
& Los diferentes modos de representacin se muestran en la
0igura =&#6& Las representaciones en modo magnitud 3 potencia presentan anc.uras de
l/neas mu3 desfavorables por participacin del componente dispersivo&
-ebe destacarse que el espectro obtenido por transformacin de 0ourier contiene slo la
mitad de la informacin del 0I- original&
Resonancia Magntica Nuclear
0igura =&#6 Representacin de una se7al en modos absorcin, dispersin,
magnitud 3 potencia& La representacin usual es en modo absorcin&
+uando no puede lograrse la eliminacin de la componente dispersiva se
utilizan los modos magnitud 3 potencia& *bs$rvese el ensanc.amiento de
la se7al en estos modos comparados con el de absorcin&
+enta,as de la tcnica de pulsos-!# respecto a OC
#&)La e9citacin de todos los n!cleos de inter$s es simultanea (espectroscop/a multicanal,
3 ocurre en un intervalo de tiempo mu3 corto (s,&
4&)La informacin se adquiere como un 0I- durante un tiempo del orden de 1
4
L& 'sta
deteccin equivale a un espectro en *+ pero se obtiene en un tiempo considerablemente
menor2
RMN)*+ velocidad de barrido #5z@s
#
5 #%%M5z
#%ppm #%%%5z
t D #%%%s
#:
+ 4AM5z
4%%ppm A%%%5z
t D A%%%s
RMN)10 pulso (s, I 0I- (1
4
L, s, t D #s
La mejor/a de la relacin se7al@ruido B@R en 10 respecto a *+, a iguales tiempos de
medicin, viene dada por la relacin de 'rnst2
B@RD (@
#@4
,
#@4
E=&=6F
donde2 )rango espectral
#@4
) anc.ura de l/nea 5z
:&)+omo la e9citacin 3 la deteccin son secuenciales(estn separadas en el tiempo,
e9iste un gran potencial para manipular los sistemas de spines lo que .a conducido al
desarrollo de las t$cnicas multipulsos 3 multidimensionales(ingenier/a de spines,&
4.3.3 Equipo de RMN-!#.
Los componentes principales de un equipo de RMN)10 (0igura =&#?, son2
#&)Magneto ("
o
,
Resonancia Magntica Nuclear
4&)'misor R0 ("
#
,
:&)-etector R0
=&)Bistema portador de= la muestra
A&)-esacoplador ("
4
,
>&)Monitor de deuterio ("
:
,
6&)+onvertidor Cnalgico)-igital (C-+,
?&)+omputadora
0igura =&#? -iagrama de bloques de un equipo de RMN)10&
1.-Magneto.
+omo fuente de campo magn$tico puede utilizarse un imn permanente, un electroimn
(.asta 4&:A1, correspondiente a una frecuancia de #%% M5z para
#
5, o un criomagneto&
'n el criomagneto se .ace uso de la propiedad de algunas aleaciones (Nb1i, Nb
:
Bn, de
ser superconductoras a mu3 bajas temperaturas& 'n estas condiciones se pueden .acer
pasar corrientes de decenas de Cmperes sin calentamiento al no e9istir resistencia
electrica& Un solenoide de un material superconductor se sumerge en .elio l/quido (=&4M,
3 se le impone una corriente& Mientras el sistema permanezca a la temperatura del .elio
l/quido se mantendr una corriente estable 3 se generar un campo magn$tico, que puede
alcanzar .asta #=&#1 (>%%M5z, o subenfriando el .elio l/quido .asta 4#&#1 (<%% M5z,&
'l l/quido refrigerante 3 el solenoide estn contenidos en un frasco -eNar aislado que a
su vez est rodeado de otro frasco -eNar aislado del e9terior en condiciones de alto
vac/o 3 que contiene nitrgeno l/quido& 'stos sistemas tienen una velocidad de
evaporacin de .elio que permiten una autonom/a de varios meses antes de recargarlos&
Las caracteristicas ms importantes que debe poseer el campo magn$tico "
o
son2
Resonancia Magntica Nuclear
)Homogeneidad2 el campo debe ser .omogeneo en toda la zona activa de la muestra& La
in.omogeneidad O"
%
produce ensanc.amiento instrumental de las se7ales 3 baja
resolucin2
in.om
D "
o
@4& La .omogeneidad puede aumentarse utilizando bobinas
au9iliares para generar peque7as corrientes que compensen las irregularidades del campo
en la zona activa& 'l proceso de ajuste, automatizado en lo fundamental en los equipos
ms modernos, se denomina s.iming 3 resulta la etapa mas tediosa del registro de un
espectro de RMN& 'l nivel de .omogeneidad necesario es alto, la relacin "
o
@"
o
debe
ser menor de #%
)<
para obtener un espectro de calidad&
-Intensidad2 La utilizacin de campos magn$ticos mas intensos tiene considerables
ventajas prcticas2
)ma3or sensibilidad (' ma3or, ma3or diferencia de poblacin entre los niveles,
)ma3or capacidad de separacin de las se7ales (la diferencia de desplazamientos
qu/micos e9presada en 5z crece linealmente con "
%
,
)espectros mas sencillos de interpretar (la posibilidad de encontrar espectros de primer
orden crece con "
%
,&
1odo esto e9plica la tendencia ininterrumpida .acia equipos con campos "
o
cada vez mas
fuertes& 'l estudio de biomol$culas slo es posible con equipos de elevado valor de "
o
&
)Estabilidad2 La necesidad frecuente de obtener espectros por acumulacin de 0I- que
implican tiempos de adquisicin de .oras o d/as impone la rigurosa estabilidad de la
relacin frecuencia@campo "
o
en el espectrmetro& Los criomagnetos son mu3 estables
pero generalmente se requiere una estabilizacin adicional que se logra con el monitor de
deuterio& Bi el sistema no es estable, la acumulacin de 0I- deja de ser co.erente 3 la
relacin se7al@ruido no crece con n&
.-Emisor de R#
'l emisor de radiofrecuencias debe ser capaz de enviar a la muestra pulsos cortos e
intensos para producir e9citacin no selectiva 3 componente transversal de magnetizacin
apreciable& La selectividad de la e9citacin es funcin de la duracin del pulso como se
muestra en la 0igura =&#<& 'l programa de pulsos es controlado por la computadora a
trav$s de su reloj interno& La .omogeneidad 3 la forma de ascenso 3 caida del pulso son
caracteristicas importantes al evaluar la calidad de un instrumento& La sonda emisora
cu3o componente principal es la bobina debe ser capaz de emitir pulsos de R0 de alta
frecuencia 3 gran potencia (.asta los PQ para e9citacin no selectiva en rangos
espectrales grandes,& 'stas potencias de irradiacin son elevadas comparadas con *+&
;ara
#
5 tipicamente se requiren A%Q 3 para
#:
+, con un rango espectral ma3or, de unos
#A%Q (dependen del valor de "
o
del equipo, &
Resonancia Magntica Nuclear
0igura =&#< 'l perfil de e9citacin de
un pulso depende de su duracin t
p
&
-ebe escogerse adecuadamente la
frecuencia nominal del pulso R en el
centro del rango espectral de forma
tal que toda la zona de inter$s en
e9citar reciba esencialmente la
misma energ/a& La transformada de
0ourier del pulso nos da el perfil de
e9citacin&
3.-Receptor -.etector de R#/.
+omo la e9citacin 3 la deteccin estn separadas en el tiempo puede usarse la misma
bobina con eje en el plano 93 para ambos fines& ;or supuesto la d$bil se7al de induccin
0I- a detectar (HQ, debe estar libre de cualquier componente de la fuerte se7al de
e9citacin por lo que se aplica un corto intervalo de tiempo entre el final del pulso de R0
3 el inicio de la medicin de la induccin (dela3,& 'l detector est referido a la frecuencia
del emisor para que funcione sensando la variacin de magnetizacin en el sistema de
coordenadas rotatorio& La deteccin referida al pulso de e9citacin transforma la se7al
del rango de radiofrecuencias al de las audiofrecuencias que corresponde al rango de
desplazamientos qu/micos ( cientos de M5z a miles de 5z, & La sonda debe poseer tres
canales correspondientes al n!cleo a observar, al n!cleo a desacoplar 3 al deuterio que se
utiliza para la estabilizacin 3 .omogeneizacin del campo magn$tico "
%
& Una sonda
t/pica se muestra en la 0igura =&4%&
0igura =&4% "obinas de 5elm.oltz
conc$ntricas utilizadas en las sonda de
los equipos de RMN de alta
resolucin& La bobina interior
corresponde normalmente al canal de
observacin (ms sensible,,
e9teriormente se sit!a la bobina del
desacoplador 3 del locP&
Resonancia Magntica Nuclear
'l pulso de e9citacin como .emos visto se sit!a en el centro del rango espectral& 'sto
trae dificultades, pues la deteccin de la magnetizacin transversal M
3S
no permite
discernir entre se7ales situadas sim$tricamente a ma3or 3 menor frecuencia que la del
pulso& La llamada deteccin por cuadratura resuelve este problema, como se muestra en
la 0igura =&4#& 'n esta t$cnica se sensa la magnetizacin con dos referencias desfasadas
en <%
%
(en fase 3 <%
o
fuera de fase respecto a "
#
, lo que permite detectar las
componentes en M
9J
3 M
3J
& 's entonces posible la diferenciacin de se7ales igualmente
distanciadas de la frecuencia nominal del pulso& Las ventajas de poder situar el pulso de
e9citacin en el centro del rango espectral, posibles en la deteccin por cuadratura,
radican en la reduccin considerable del nivel de ruido 3 un perfil de e9citacin mas
adecuado&
0igura =&4# -eteccin por cuadratura& 'l pulso de e9citacin aplicado en 9S crea
magnetizacin trasversal inicialmente en 3S& Bi tenemos dos se7ales (R 3 L,
Resonancia Magntica Nuclear
sim$tricamente situadas respecto a la frecuencia nominal del pulso, el monitoreo de la
magnetizacin en 3S (sensor fase ;5 D %, no permite su diferenciacin& Bi se monitorea
simultneamente la magnetizacin en 9S (sensor fase ;5 D <%, las se7ales son
diferenciables&
'n a7os recientes se .an introducido las criosondas, en ellas el circuito el$ctrico se
encuentra enfriado a 4%M lo que .ace descender el ruido electrnico en el sistema,
alcanzndose relaciones se7al@ruido mu3 altas, tal como se ilustra en la 0igura =&44&
0igura&=&44
'fecto de la
utilizacin de
criosonda sobre la
relacin B@R& La
relacin B@R es
ms del doble en
el espectro de
A%% M5z con
criosonda que en
el de ?%% M5z
sin ella
4.-'istema portador de la muestra
Cl igual que en los equipos de RMN)*+ se utilizan tubos de vidrio de paredes finas 3
diametros de Amm que requieren %&AmL de solucin en un solvente deuterado (necesario
para obtener la se7al del locP,& ;ara n!cleos poco sensibles pueden utilizarse tubos con
diametros ma3ores&, 'n las condiciones actuales obtener espectros protnicos de rutina
requiere disponer de cantidades de muestra del orden del mg (mMol@L,& +on frecuencia
la muestra se .acer rotar para elevar la .omogeneidad de "
o
en el plano perpendicular al
eje de rotacin, mediante la utilizTacin de rotores 3 aire comprimido (0igura =&4:,&
0igura =&4: 1ubo portador de
muestra de RMN con rotor&
Resonancia Magntica Nuclear
0.-.esacoplador.
Muc.os e9perimentos en RMN se realizan aplicando 4 radiofrecuencias2 una para la
e9citacin de los n!cleos a observar ("
#
, 3 un segundo canal de irradiacin ("
4
, para
afectar a otros n!cleos con el objetivo de desacoplarlos o modular sus interacciones con
los primeros& ;or ejemplo, los espectros de rutina de
#:
+ se obtienen por irradiacin no)
selectiva de todos los protones para destruir sus acoplamientos con los n!cleos de
#:
+&
;or esta razn los equipos de RMN estn dotados de al menos un canal adicional al de
observacin que tradicionalmente recibe el nombre de desacoplador&
1.-Monitor de deuterio -2oc3/.
;ara lograr una estabilidad a largo plazo de la relacin frecuencia@campo en el
espectrmetro (la suma de 0I-s debe ser co.erente, se monitorea la se7al de resonancia
del deuterio del solvente (tercer canal a la frecuencia de resonancia del deuterio, "
:
, Bi se
estabiliza el equipo 3 se controla sistemticamente la se7al en fase dispersiva del
deuterio (0igura =&4=, cualquier desplazamiento del campo magn$tico es sensado como
una se7al positiva o negativa que puede ser compensado por la computadora&
0igura =&4= Bistema de monitoreo de la
relacin frecuencia)campo con la se7al
dispersiva de la resonancia del deuterio&
4.-Con(ertidor 5nalgico-.igital -5.C/.
'l 0I- es una se7al continua (analgica, que debe ser almacenado como informacin
digital en la memoria de la computadora& -ebe pues convertirse a la forma digital& 'sta
funcin es realizada por el C-+& Recordemos que la d$bil se7al el$ctrica (0'M,
producida en la bobina detectora por la induccin magn$tica(M
3J
, M
9J
, es convertida por
el detector sensible a la fase en una se7al analgica de audiofrecuencias(rango de
desplazamientos qu/micos,, preamplificada electronicamente cerca de la sonda de
deteccin 3 amplificada posteriormente& 'sta es la se7al que debe ser convertida en
informacin digital& 'n el C-+ son importantes los siguientes parmetros2
- dwell time t
dw
2 es el tiempo entre 4 puntos de adquisicin del C-+& La se7al analgica
es sensada periodicamente por el C-+ 3 la informacin almacenada en una localizacin
de la memoria de la computadora& 'l intervalo de tiempo entre 4 puntos, t
dN
, determina el
rango efectivo de frecuencias que el equipo es capaz de sensar adecuadamente& Beg!n la
Resonancia Magntica Nuclear
teor/a de la informacin (teorema del muestreo, para reproducir adecuadamente una se7al
analgica de frecuencia f, la frecuencia de muestreo debe ser al menos de 4f (la llamada
frecuencia de N3quist,& 'l no cumplimiento de este principio conduce a artefactos en el
espectro, denominados de folding o doblaje (0iguras =&4A 3 =&4>,& Una frecuencia
superior a la l/mite en un valor b es sensada errneamente por el equipo como de
frecuencia ()b,, lo que debe evitarse& 'l rango espectral esperado nos define el dNell
time2 t
dN
D #@4f D #@4 adecuado para evitar el folding (ver 0igura %&?,& 'n la 0igura %&<
se muestra una t/pica se7al con folding&
- nmero de puntos de adquisicin N2 La transformada de 0ourier que realiza la
computadora es una transformacin digital mediante un algoritmo mu3 eficiente, el de
+oole3 3 1uPe3 (#<>A, 0ast 0ourier 1ransform 001,& 'ste algoritmo requiere que el
n!mero de puntos sea e9presable como 4
n
& 's com!n referirse al n!mero de puntos como
un m!ltiplo de 4
#%
D #M& Cs/ un 0I- con ?M puntos de adquisicin tiene ?&4
#%
puntosD?#<4 puntos& La resolucin digital , o sea la separacin entre 4 puntos en el
espectro ,depende del rango espectral 3 del n!mero de puntos de adquisicin N2 D
4@N 5z D #@N t
dN
5z& 'l factor 4 aparece debido a que el espectro slo contiene la
mitad de los puntos del 0I- (componente real o absortiva,&
La digitalizacin de las se7ales de
#4%% 5z 3 :%% 5z es id$ntica si el
dNell time escogido tiene la
frecuencia de N3quist a 6A% 5z&
Las dos se7ales son detectadas a :%%
5z pero la correspondiente al folding
tiene errores de fase&
0igura =&4A 0olding& C una frecuencia de muestreo de #A%% 5z (t
dN
D %&>6ms,, la
frecuencia mas alta detectable correctamente es de 6A% 5z& Una frecuencia de #4%% 5z es
detectada errneamente como de :%% 5z (v$ase que la informacin digitalizada de ambas
frecuencias es id$ntica, parte superior,& Be dice que la se7al se dobla sobre la frecuencia
l/mite de N3quist (6A% 5z, 3 aparece al otro lado de la misma pero con errores de fase
(parte inferior,&
Resonancia Magntica Nuclear
0igura =&4> 'spectro correctamente adquirido (izquierda, 3 espectro con folding de la
primera se7al (derec.a,& La se7al con folding muestra un error de fase&
- rango dinmico2 's la capacidad de digitalizar se7ales debiles frente a otras mas
intensas en forma no distorsionada& 'ste parmetro se relaciona con la digitalizacin
UverticalV tal como el dNell time lo es para la digitalizacin U.orizontalV& 'l rango
dinmico depende del n!mero de bit del C-+ (com!nmente de #4 a #> bit,& Un C-+ de
#> bit tiene una resolucin de #24
#A
3 no es capaz de detectar se7ales con intensidades
menores que #@:46>? veces que la de amplitud m9ima& ;ara la deteccin de
biomol$culas en agua donde las relaciones molares son e9tremadamente desfavorables
(protones del 5
4
*2 ##%M, biomol$cula2 W #mM, se requiere de un rango dinmico
elevado& 'l rango dinmico est ligado a la resolucin temporal (dNell time,& 'l valor
m/nimo del dNell time es el imprescindible para digitalizar un punto en el 0I- (cargando
el voltaje observado en un capacitor 3 compararlo con los voltajes dentro del rango
dinmico escogido,& 'l dNell time m/nimo crece con el rango dinmico limitando el
intervalo de frecuencias detectable&
Resonancia Magntica Nuclear
0igura =&46 Rango dinmico& Un C-+ con 4 bits no puede detectar se7ales
relativamente intensas debido a las dificultades de codificacin& 1oda se7al con relacin
inferior a #24
4
no ser detectada&
6.-Computadora.
La computadora juega un papel central en un equipo de RMN)10&Bus funciones
principales son2
)controlar el funcionamiento del espectrmetro, programando los pulsos (abriendo las
compuertas que dan acceso a la R0 a la sonda,, programa el r$gimen de
desacoplamientos, programa 3 controla la adquisicin del 0I- por el C-+, mantiene la
estabilidad del espectrmetro a trav$s del sistema de locP 3 monitoreo de la se7al del
deuterio&
)procesa la informacin2 .ace la transformacin de 0ourier, corrige los errores de fase,
ajusta la l/nea base del espectro, permite la manipulacin matemtica del 0I- (uso de
ventanas para incrementar la relacin B@R o la resolucin,, eval!a parmetros, realiza la
integracin automtica de las se7ales&