Yarrowia Lipolytica

Es una de las ms estudiadas no convencional levaduras, siendo estrictamente un

microorganismo aerbico capaz de producir metabolitos importantes y que tiene una intensa
actividad secretora, lo que justifica esfuerzos para utilizarlo en la industria, en biologa molecular y
en los estudios de la gentica.
Uno de los productos ms importantes secretados por este microorganismo es la lipasa, que es
una enzima muy importante, ya que puede ser utilizada en aplicaciones en el detergente, comida,
industria farmacutica, y las industrias ambientales. Al ser un microorganismo estrictamente
aerbico, su crecimiento y la secrecin de metabolitos son afectados por la cantidad de oxigeno
disponible en el medio de cultivo.
Introduccin
Con una produccin anual mundial de ms de 1.7 millones de toneladas, el cido ctrico ocupa el
primer lugar entre los cidos orgnicos sintetizados por microorganismos. El cido ctrico es
producido predominantemente por el hongo micelio aspergillus niger, pero en los ltimos aos se
ha considerado mucho el uso de la levadura yarrowia lipolytica. La levadura es capaz de utilizar
una amplia variedad de sustratos no convencionales como fuentes de carbono, y el rpido
desarrollo de industrias de biocombustibles proporciona un fcil acceso a grandes cantidades de
glicerol, que es el subproducto principal de la produccin de biodiesel y, al mismo tiempo, una
materia prima industrial de bajo costo. En la ltima dcada el glicerol ha sido exitosamente utilizado
como una fuente de carbono para la produccin de cido ctrico por Y. lipolytica.
Una desventaja del uso de Y. lipolytica especialmente cepas que no son modificadas
genticamente es la secrecin simultanea de cido isocitrico (ICA), que tiene una capacidad de
amortiguacin inferior en comparacin con el cido ctrico. Adems, la cristalizacin del cido
ctrico durante el proceso de purificacin se ve perturbado por contaminaciones ICA>5%. Adems
de ICA tambin se produce polioles, tales como eritritol y manitol; estos tienen un papel como
reservas de carbohidratos. En la etapa posterior de la fermentacin, todos los polioles se
consumen tan pronto como la fuente principal de carbono se agota y al levadura es capaz de
convertir los polioles en cido ctrico. Esto a su vez, prolonga la fase efectiva de la produccin de
cido ctrico.
Materiales Y Mtodos
Medios
El medio para la preparacin del inoculo contena (g L
-1
): glicerol, 50; extracto de levadura, 3;
extracto de malta, 3; bactopeptona, 5. Los cultivos se desarrollaron en matraces de 0.3 L, del cual
0.1 L correspondan al inoculo que se mantuvo a 30
0
C durante 3 das.
El efecto de la tasa de dilucin (0.009, 0.015, 0.021, 0.024, 0.031 h-1) en el crecimiento de Y.
lipolytica y la produccin de cido ctrico en el quimiostato se realiz en el medio PM1 el cual
contena (g L-1): glicerol, 150 (Poch, Polonia); NH
4
Cl, 3; KH
2
PO
4
, 0,2; MgSO
4
7H
2
O, 1. La
produccin de cido ctrico por la levadura en un quimiostato se llev a cabo en un cultivo PM2 el
cual contena (g L
-1
): glicerol, 200 (Poch, Polonia); NH4Cl, 4; KH2PO4, 0,25; MgSO4 7H2O, 1; El
grado de dilucin fue de 0,01 h-1.
Los cultivos crecieron en un reactor de tanque agitado de 5 litros (BIOSTAT B-PLUS, Sartorius,
Alemania) con un volumen de trabajo de 2.0 L a 30
0
C. La tasa de aireacin y la agitacin se
establecieron a 0.36 v/v/min y 600 rev min-1, respectivamente. El pH se mantuvo a 5.5 mediante la
adicin de 40% (w/v) de solucin de NaOH.
Resultados Y Discusin
Efecto De La Tasa De Dilucin En La Produccin De cido Ctrico
Cuando la tasa de dilucin aumentaba, las concentraciones de cido ctrico y de biomasa
disminuyeron, mientras que la concentracin residual de glicerol en el medio aumento. Las
concentraciones de subproductos no deseados se redujeron solo ligeramente.
A la tasa de dilucin, en el que la Y. lipolytica alcanza la mxima productividad especifica en el
quimiostato, es imposible obtener altas concentraciones de cido ctrico.
En este trabajo, el aumento de la tasa de dilucin fue acompaado por el aumento de la tasa
especfica y la tasa volumtrica de produccin de cido ctrico. A pesar de ello, el rendimiento del
proceso fue de entre 0.59 y 0.67 gg-1. En anteriores estudios, en cultivos discontinuos, el
rendimiento de cido ctrico fue de 0.46 gg-1, alimentado con las mismas condiciones.
Biosntesis De cido Ctrico En Un Quimiostato Con Una Tasa De Dilucin De 0.01 h
-1

Se llevaron a cabo ms estudios sobre la produccin de cido ctrico en el medio PM2 (con ms
nutrientes), a una tasa de dilucin de 0.01 h-1. En comparacin con el cultivo en el medio PM1 a la
tasa de dilucin de 0.009 h-1, el cambio en la composicin del medio y el ligero aumento de la tasa
de dilucin aumento las concentraciones de cido ctrico (97.8 g L-1) y la biomasa (22.2 g L-1),
aumenta la productividad especifica de cido ctrico (0.98 g L-1 h-1) y reduce el rendimiento del
proceso (0.49 gg-1). Esto se puede atribuir al aumento de las concentraciones de biomasa y
subproductos no deseados. La tasa especfica de produccin de cido ctrico (0.044 gg-1 h-1) fue
similar a la obtenida en el medio PM1.
Resumen
El objetivo del estudio era examinar como la tasa de dilucin y la composicin qumica impacta
sobre la sntesis de cido ctrico por la cepa de yarrowia lipolytica utilizando glicerol como medio de
cultivo en un quimiostato. La levadura Y. lipolytica se cultiv en un medio de nitrgeno y fosforo
limitado a una tasa de dilucin de 0.009 a 0.031 h
-1
en un quimiostato. En condiciones de estado
estable, el aumento de la tasa de dilucin fue acompaado por la disminucin en la concentracin
de cido ctrico, as como por el aumento de la tasa volumtrica y la tasa especifica de la
produccin de cido ctrico. El rendimiento del proceso de produccin vari 0.59-0.67 gg
-1
. En
comparacin con un proceso discontinuo el cual presenta un rendimiento de 0.46 gg-1.