BIOQUMICA FORENSE Y ANALTICA TOXICOLOGICA

1. Anamnesis en Toxicologa Clnica

2. Recoleccin de datos en Bioqumica Forense

3. Integracin de los conocimientos adquiridos en otras materias, para proceder eficazmente en la
marcha analtica y en la confeccin del informe qumico-toxicolgico/legal. La materia ms
destacada es la Farmacologa y Fisiologa, puesto que algo inseparable de la Toxicologa es la
Farmacocintica (especficamente toxicocintica) y la Farmacodinamia (toxicodinamia). Ellas como
es evidente, nos indican por donde ingresan los txicos al organismo, como se absorben, se
distribuyen, se metabolizan, se depositan y se excretan. Cuanto tiempo permanecen en el
organismo, que cambios o transformaciones sufren durante el tiempo que permanecen en el
organismo, etc.

4. Normas de bioseguridad a cumplir
- Seguridad personal
- Usar los medios de proteccin que establece la ley segn la funcin que se desempee
- Uso de desinfectantes adecuados previo y post-examen mdico/toma de muestra.
- Uso de descartadores de material quirrgico, residuos patgenos, etc.
- No comer ni ingerir bebidas en los mbitos que no estn habilitados para tales fines.
- Usar delantal o chaqueta limpia solo dentro del mbito Institucional que le corresponda.
- Utilizar los biomonitores de radioactividad en aquellas profesiones que lo demanden
- Usar mscaras con filtros adecuados de acuerdo a la situacin

5. Eleccin del/los material/es biolgico/s para anlisis clnicos-toxicolgicos: las matrices
biolgicas ms adecuadas de acuerdo al caso son:
- Orina
- Sangre
- Lavado gstrico
- Lquidos de puncin
- Pelos
- Uas
- Hisopados
- Saliva
- Tejidos (biopsias o necropsias)
- Leche
- Meconio
- Bilis
- Hueso
- Humor vtreo/acuoso

6. Tipos de txicos que se pueden investigar en medios biolgicos:
Venenos animales o Txicos ponzoosos:
a- Mordedura de vboras
b- Picadura de escorpiones (alacranes)
c- Picadura de araas
d- Otros: anfibios (batracios), insectos (abejas, avispas, etc.), animales marinos.
Custicos y corrosivos (hipoclorito, soda custica, cido muritico, etc.)
Txicos voltiles (monxido de carbono, Cianuro, Arsina, Fosfina, Alcoholes, Glicoles, xido
nitroso, Nitrito de Amilo, Solventes y Naftas)
Drogas de Abuso:
o Ilegales: Estimulantes, Depresores, Alucingenos (Cocana, Marihuana, Anfetaminas;
Heroina, Nitrito de Amilo, LSD, Psilosibina, gamahidroxibutirato, etc.)
o Legales: opiceos, morfina, xantinas, barbitricos, benzodiacepinas, etanol, antidepresivos,
broncodilatadores, xantinas, anablicos etc.
o Drogas teraputicas: litio, benzodiacepinas, digitlicos, fenitona, carbamazepina,
oxcarbazepina, antidepresivos, topiramato, gabapentn
Plaguicidas y Herbicidas (Organoclorados, Organofosforados, Carbamatos, Warfarinas, Fosfina,
Piretroides, Talio)
Nitratos y Nitritos
Metales Pesados (plomo, arsnico, mercurio, cadmio, cromo, cobalto, talio, nquel)
COPs: compuestos orgnicos persistentes. Dioxinas, organoclorados, PCBs.
Intoxicaciones alimentarias (micotoxinas aflatoxinas-, metilmercurio, nitritos, bromatos,
hongos venenosos)
Intoxicaciones por Hongos: venenosos hepatotxicos o alucingenos

7. Envases o recipientes adecuados para los tipos de anlisis solicitados al laboratorio
Lo primero que se tiene que pensar es que si la muestra est mal recolectada (ya sea porque es
escasa, porque se volc o contamin, etc.) se pierde o altera la evidencia y todo lo que se haga
despus carecer de valor real. El recipiente puede ser jeringa (no debe llevar aguja) o frasco con
tapa a rosca, color mbar, libre de contaminantes, no es necesario que sea estril a menos que se
requiera un anlisis bacteriolgico, virolgico.
Todo material remitido al laboratorio debe ir doblemente envuelto en bolsa de papel primero y
luego bolsa de plstico a los efectos de evitar riesgos de contagio de enfermedades infecciosas.
Si se desea analizar un compuesto voltil, en el recipiente no debe haber cmara de aire
(burbujas), por ello el mejor recipiente es una jeringa.

8. Desinfectantes que pueden ser utilizados de acuerdo al tipo de muestra a extraer
Normalmente puede usarse cualquier desinfectante siempre y cuando este no interfiera con el
analito que se quiera investigar en la muestra. Ejemplo: para determinacin de alcoholemia
(etanol en sangre) no se puede limpiar el lugar de puncin con alcohol medicinal, ni con espadol.
Se usa yodopovidona.

9. Anticoagulantes que se pueden utilizar en las muestras a procesar por el laboratorio
Se pueden usar heparina, fluoruro de sodio, EDTA, citrato. El ideal en el mbito forense es el
fluoruro de sodio pues tiene doble funcin: anticoagulante y conservante, pero no pueden
realizarse anlisis de actividad enzimtica, pues el fluoruro es un inhibidor de enzimas.

10. Conservacin de las muestras hasta que se remitan al laboratorio
Los conservantes son necesarios segn el tipo de anlisis solicitado (fluoruro de sodio para
muestras de sangre y otros humores, azida sdica para orina). Siempre mantener cadena de fro.

11. Rotulado e identificacin de las muestras a remitir al laboratorio
El rotulado de las muestras debe claro, legible, con rtulos resistentes a la humedad, con tintas
indelebles, y con la mayor cantidad posible de informacin til a los efectos de evitar confusin de
muestras.
En el caso de muestras del mbito legal, forense o deportivo los datos debern coincidir con los
volcados en la planilla de cadena de custodia, informando adems el nmero de recipientes
utilizados a los efectos de guardar uno como contraprueba. En todos los casos debern ser
lacrados (hoy en da ya vienen recipientes con precintos inviolables).

12. Metodologas vigentes que se utilizan en el procesamiento de las muestras a investigar
Inmuno-ensayos (para drogas y hormonas)
Cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC) (para drogas)
Cromatografa gaseosa con espectrometra de masas (GC-MS) (para drogas y compuestos
voltiles)
Espectrofotometra (enzimas y biomarcadores)
Absorcin Atmica (AA) e ICP-MS (para metales)
Electroforesis capilar (CE)

13. Valores de referencia de las sustancias a investigar en los distintos especmenes remitidos al
laboratorio: los valores de referencia los aportar el laboratorio que analice las muestras. Estos
debern ir acompaados de la metodologa utilizada en el anlisis y del tipo de muestra al que
esta remitido. En el caso de cualquier anlisis de laboratorio en que el mdico tenga dudas,
repetir el anlisis con una nueva muestra para confirmar que est fuera de rango.

14. Requisitos que debe cumplir un laboratorio clnico/toxicolgico/forense para ser considerado
apto para el tipo de anlisis solicitado
- Que est a cargo de un especialista en la materia con reconocida formacin terica y
prctica
- Que cuente con la metodologa analtica de ltima generacin en el mercado
- Que sea reconocido en el mbito acadmico en lo posible, a travs de formacin de
recursos humanos y actividades cientficas
- Que cuente con la infraestructura necesaria no solo para el anlisis de las muestras sino
para el soporte bibliogrfico, soporte administrativo de datos y conservacin de muestras
- Que este suscripto a programas de control de calidad
- Que est habilitado por el cuerpo colegiado correspondiente a su circunscripcin

15. Cadena de custodia del material (mbito forense, mbito deportivo)

16. Consideraciones legales: importancia de los resultados de los anlisis clnico-toxicolgicos /
pericias qumicas en la labor diaria del perito como pruebas diagnsticas, evidencias cientficas,
pruebas legales, datos epidemiolgicos.

17. Manchas biolgicas de inters mdico-legal: manchas de sangre, manchas de semen y saliva
En el caso de solicitar investigacin de manchas de sangre, tenemos aqu ensayos orientativos
(ej. Reaccin de Adler, reaccin de Luminol) y a estos le siguen en el caso de dar positivos, los
ensayos confirmatorios a travs de mtodos cromatogrficos y tcnicas de Biologa Molecular.
En el caso de solicitar investigacin de manchas de esperma, tenemos aqu tres anlisis
confirmatorios:
- Observacin de espermatozoides por microscopa ptica
- Reaccin de la fosfatasa cida prosttica
- Determinacin de antgeno prosttico especfico (Ag P30)
En el caso de investigacin de manchas de saliva, se solicita determinacin de amilasa en la
mancha sospechosa.

Cualquiera de las manchas biolgicas descriptas, son pasibles de realizarle anlisis gnicos en el
caso de que resulten positivas y a travs de tcnicas de Biologa Molecular (PCR, Western Blott,
ADN mitocondrial, etc.).

18. Actualizacin bibliogrfica permanente



BIOQUMICA LEGAL Y CRIMINALSTICA

La bioqumica legal y criminalstica es una rama de la bioqumica dentro del mbito forense o policial
a la cual servir como auxiliar de otras ciencias dentro del proceso de investigacin criminal (en mayor
medida) y como auxiliar de la Justicia en otros casos, como por ejemplo investigaciones de
paternidad, medicina laboral y/o casos de investigacin en hechos de contaminacin ambiental.

El rol ms protagnico de esta rama es indudablemente dentro del mbito de la Criminalstica, que es
la ciencia que estudia los indicios dejados en el lugar del delito, gracias a los cuales puede
establecerse, en los casos ms favorables, la identidad del criminal y las circunstancias que
concurrieron en el hecho delictivo. La hiptesis base de la criminalstica es que el criminal, por
inteligente que sea, siempre deja en el lugar del delito algo que, de algn modo, revela su presencia
all.

En la investigacin pericial de un indicio se recorren tres grandes etapas:
1. La bsqueda de la escena del crimen
2. Toma de muestra y envo al laboratorio respetando la cadena de custodia
3. Los exmenes analticos y su interpretacin

La primera cuestin que el bioqumico debe saber es que el hecho que se va a investigar no es
actual, sino que ha transcurrido un tiempo antes de su descubrimiento. Cuando l llega al lugar de
los hechos, otros muchos le han precedido y, a menudo deber reconstruirlos con datos que ni
observ, ni recogi por s. Una observacin atenta demostrar muchas veces que una parte de los
indicios han sido sobreaadidos por personas que contaminaron el lugar. Por ello, es una regla de
oro de la investigacin criminal que el esquema y la fotografa deben preceder a cualquier
actuacin.
En segundo lugar debemos asimismo saber que el indicio es frgil. La traza, la huella y el vestigio
pueden pasar inadvertidos, olvidados sobre el lugar, perdidos o alterados. Mal recogido, el indicio
se vuelve inutilizable.
Finalmente debe conocerse que el valor de la prueba indiciaria es relativo, pues los indicios
estudiados pueden ser falsos, bien por intencin de criminal o bien por adicin o alteracin
inducidas por los que manipularon previamente o realizaron las primeras diligencias en el lugar de
los hechos. Incluso en el envo y transporte al laboratorio pueden alterarse las pruebas.

Los indicios en el lugar del hecho
El problema central de la investigacin criminal es establecer identidad, lo que generalmente se hace
por medios indirectos. Un criminal puede identificarse por el pelo, la sangre que derram, el semen
que deposit en la vctima, el instrumento que manej en la agresin, trozos de vestimenta que
quedaron en el lugar, la pintura del vehculo y los vidrios adheridos a sus ropas; si fue un robo con
destruccin, puede ser identificado por el cigarrillo que fum y dej luego abandonado.

Examen de ropas
Con frecuencia, registrando los bolsillos, el revs de los pantalones o los forros, podemos encontrar
vestigios microscpicos que nos facilitarn informacin sobre hbitos, profesin, naturaleza del
medio en que vive, etc., puede tratarse de restos de vidrios, aceites, polvos, residuos de metales, etc.
En las ropas pueden encontrarse igualmente manchas biolgicas de sangre, semen u orina.
Para el estudio debemos emplear tres tipos de iluminacin: la de incandescencia u ordinaria, que da
una buena iluminacin general; la luz de tungsteno, rica en radiaciones rojas, que da muy buenos
resultados en el examen de las manchas de sangre y, la luz ultravioleta, que pone de manifiesto las
sustancias con propiedades fluorescentes y es muy til para manchas de orina, semen, pinturas y
aceites.

Manchas biolgicas
La mancha es pues como la huella, un indicador de mucha trascendencia, pero mientras en la huella
se analiza la forma y sus integrantes, en la mancha interesa su naturaleza, su constitucin.
Dentro de la amplia variedad de manchas que pueden requerir su estudio analtico pericial debe
consignarse que, en la prctica mdico legal su nmero se reduce a: sangre, esperma, orina, materia
fecal, meconio, leche, calostro, saliva.
Las manchas pueden asentarse sobre soportes de variable naturaleza, ya sean fijos (muebles, pisos,
paredes, etc.) o susceptibles de traslado (sbanas, ropas en general, etc.).

1) Recoleccin de las muestras:
-levantamiento de la muestra,
-toma de fotografas,
-soporte para el levantamiento
-envo al laboratorio
En casos de prendas de vestir: descripcin de la ropa, observacin minuciosa, descripcin de
orificios, etc.

2) Estudio de las manchas:
-Determinar la naturaleza de la mancha
-Ver si corresponde a especie humana o animal (en casos particulares)
-Establecer grupo sanguneo y/o marcadores genticos
-Determinar la forma:
-manchas por proyeccin (gotas-salpicaduras)
-manchas por escurrimiento (charcos- regueros)
-manchas por contacto o impresin
-manchas por impregnacin
-manchas por limpiamiento

3) Investigacin Analtica:
Reacciones catalticas u oxidsicas: la hemoglobina y otros derivados (metahemoglobina, hemina,
hematina, oxihemoglobina) poseen, en grado variable, propiedades peroxidsicas. Cualquier
sustrato oxidable, que por oxidacin, origina un derivado coloreado, puede usarse como ensayo
cromtico en le diagnstico presuntivo de las manchas de sangre.
En la prctica se emplean, como sustratos oxidables, los siguientes compuestos:
- bencidina en medio cido (ensayo de Adler)
- fenolftalena en medio alcalino (ensayo de Kastle-Scheede-Meyer)
- guayaco
- leucobase del verde de malaquita (ensayo de Pierre-Medinger)
- ortotoluidina
- Luminol
Los ensayos catalticos consumen muy escaso material y son muy sensibles aunque inespecficos.
Adquieren valor absoluto cuando resultan negativos. Si los ensayos catalticos o peroxidsicos
resultan positivos, deben convalidarse con los ensayos de certeza

4) Diagnstico de certeza: todos los ensayos genricos de certeza identifican al grupo prosttico de
la hemoglobina, es decir el hemo.
a) Transformacin en porfirina
b) Ensayos microcristalogrficos
c) Identificacin espectroscpica
d) Identificacin espectrofotomtrica
e) Identificacin cromatogrfica: es la ms especfica, prctica y sensible.
f) Otros mtodos (anlisis de los elementos figurados)

5) Diagnstico especfico: comprobada la naturaleza sangunea del material sometido a estudio
pericial, corresponde establecer si el origen es humano o animal.
Didcticamente hay dos mtodos:
Mtodos fsicos: estudio morfolgicos de los hemates
Mtodos biolgicos:
o Mtodos de los sueros precipitantes
o Mtodo de la desviacin del complemento
o Mtodo anafilctico de Pfeifer
o Mtodo de inhibicin de la anti globulina humana
o Mtodos de la hemoaglutinacin pasiva: jams produce falsos (+)
o Mtodos por tcnicas de Biologa Molecular: permiten establecer especie -
humana o no humana-, grupo sanguneo, antgenos de histocompatibilidad,
sexo, etc.

Manchas de esperma
En todos los peritajes motivados por violacin o atentados al pudor, esta investigacin tiene
fundamental importancia, porque su presencia en indumentaria, rganos genitales o lugares
prximos, constituye la nica prueba, a veces decisiva, de la realidad del acto cometido.
La naturaleza de las manchas queda determinada por la identificacin de sus componentes
especficos: los espermatozoides y accesoriamente, otras pruebas la confirman. Debido a la fragilidad
de sus compuestos figurados, y a los ignorados pero no poco comunes casos de azoospermia,
actualmente se aceptan otros anlisis como recursos vlidos para afirmar.
El lquido espermtico, o semen eyaculado, es espeso, filamentoso, blanco, ms denso que el agua, de
reaccin alcalina, sabor salado y olor sui gneris (olor espermtico), coagula rpidamente y luego se
licua. El volumen vara entre 1 y 8 ml, y est constituido por dos partes fundamentales sobre las que
se asienta su investigacin bioqumico legal:
Material proveniente de testculos: formado en un 90% por los espermatozoides, adems de
protenas, lecitina, fructuosa, fosfatos y otras sales.
Material proveniente de las vas espermticas: como ser los productos del epiddimo, del canal
deferente, del vaso aberrante, de las vesculas seminales y de la prstata.

Ante la sospecha de violacin o de otros atentados al pudor, seguidos o no de asesinato, debe
examinarse la piel ventral, el perin y los muslos, los pelos de los rganos genitales, la vagina y el
recto. Sobre la piel, el esperma forma una pelcula barnizada si no ha sufrido roces. De lo contrario se
notan pequeas costras escamosas blanquecinas y brillantes.
En la vagina o en el recto, puede encontrarse semen fresco hasta 24-48 hs despus de consumado el
acto. Se extrae por jeringas con solucin fisiolgica. El semen fresco se observa entre porta y cubre.

1. Observacin: mancha acartonada
2. Observacin a la luz ultravioleta de 366 nm para delimitarla
3. Bsqueda de presencia de espermatozoides al MO con tincin de Florence
4. Estudio de componentes del plasma seminal
5. Fosfatasa cida prosttica (tartrato resistente): vida media aprox. 14 hs.
6. Antgeno prosttico especfico (P30): por ELISA
a. Individuos: sensible hasta 27 hs post-coito aproximadamente.
b. Cadveres: entre 1-4 das post-mortem puede ser detectado.
2. Espermatozoides (intactos)
a. En hisopados de individuos: se pueden hallar espermatozoides intactos hasta 16-26 hs
post-coito. En raras excepciones hasta 72 hs.
b. En hisopados de cadveres: se pueden detectar hasta 16 das (en vagina o cavidad oral)

MODELO DE ACTA DE EXTRACCION DE MATERIAL
En el da de la fecha..................................................., siendo las......................horas, se hace presente
en este lugar, sito en.....................................el Bioqumico/Mdico Matrcula
profesional N:.......................................................... por pedido de la autoridad judicial
actuante:............................................. (nombre, apellido y cargo del funcionario judicial quien deber
presentar credencial) quien solicita a este profesional se extraiga material biolgico (sangre, orina,
pelos, hisopado vaginal, hisopado anal, otro.) a:.............................................. (nombre, apellido y DNI
del detenido - imputado - vctima) quien brinda su consentimiento para la realizacin del acto
bioqumico, en presencia de los testigos hbiles.................................................... (por lo menos dos
indicando nombre, apellido y DNI).
Dando fe de lo actuado se avala el presente acto con la firma y/o impronta del dgito pulgar derecho
de los involucrados en este acto y los testigos presenciales del mismo, entregando la muestra y/o
material extrado a.......................................................... (nombre, apellido y DNI de la autoridad
policial o judicial que remitir la muestra a quien corresponda).
Queda en guarda de este profesional una segunda muestra por el perodo que transcurriese desde la
remisin del material hasta la confirmacin por escrito de su recepcin por parte de la autoridad del
laboratorio oficial donde se realice la pericia.

Lugar y fecha.
Firma, sello y DNI del Bioqumico
Firma y DNI de las otras personas

Nota: hacer una descripcin de las condiciones en que se recolect la muestra indicando:
a) tipo de espcimen biolgico,
b) tipo de anticoagulante/conservante si fuese el caso,
c) volumen/cantidad aproximada de material,
d) tipo de recipiente (jeringa, frasco, catter, etc.),
e) tipo de conservacin para el envo (refrigerado, congelado, etc.),
f) que se enva el material aislado primero en bolsa de plstico (para evitar derramamientos) y
despus en bolsa/sobre de papel (para evitar exposicin a la luz), el cual deber estar cerrado,
firmado y si es posible lacrado.

PRESERVACION DE LA EVIDENCIA MEDICO-LEGAL
La evidencia es aceptable legalmente solo si cumple con los siguientes requisitos:
a. Debe ser obtenida en forma legal
b. Debe ser relevante para el caso en cuestin
c. La cadena de custodia (Garanta de Ley) debe estar intacta y ser conocidos todos los pasos por lo
que paso la evidencia
d. Debe ser evaluada por personal idneo cuya opinin pueda ser volcada a la causa
e. No debe estar contaminada (por ejemplo: mezclada con otra evidencia).

TOXICOLOGA ANALTICA / TOXICOLOGA FORENSE
La toxicologa analtica es la aplicacin de cualquiera de las herramientas del qumico analtico o el
bioqumico a la identificacin cualitativa y/o cuantificacin estimativa de sustancias qumicas que
pudieran ejercer efectos adversos sobre organismos vivientes. Generalmente la sustancia a ser
medida (analito) es un xenobitico que puede haber sido alterado o transformado por acciones
metablicas del organismo. Frecuentemente el espcimen a ser analizado presenta una matriz
compuesta de fluidos biolgicos o tejidos slidos que provienen del organismo.

La toxicologa forense es la toxicologa a los propsitos de la ley. Aunque esta amplia definicin
incluye un amplio rango de aplicaciones tales como la toxicologa regulatoria o pruebas de screening
de drogas, por lejos lo ms frecuente es para identificar cualquier sustancia qumica que pudiera ser
el agente causal de muerte o injuria a humanos o daos a la propiedad.

La toxicologa ocupacional y la toxicologa regulatoria requieren de procedimientos analticos para su
implementacin o monitoreo. En la primera, los mtodos analticos utilizados para monitorear los
valores umbrales lmites (TLV) y otras maneras de estimar la exposicin de trabajadores a riesgos
txicos pueden utilizar mtodos de screening para determinar la exposicin actual de un trabajador
analizando sangre, orina o aliento u otros especmenes por mtodos similares a aquellos utilizados en
toxicologa clnica o forense. Para los propsitos regulatorios, una variedad de matrices (alimentos,
agua, aire, etc.) deben ser examinadas para cantidades de analitos extremadamente pequeos.

A la luz de la afirmacin enunciada por Paracelsus hace cinco siglos, todas las sustancias son
venenos: no hay ninguna que no lo sea- solo depende de la dosis -, la toxicologa analtica incluye
todas las sustancias qumicas. Una clasificacin que est basada en sobre el origen o naturaleza del
agente txico se podra ordenar de la siguiente forma:
a- Gases
b- Sustancias voltiles
c- Agentes corrosivos
d- Metales
e- Aniones y no metales
f- Sustancias orgnicas no voltiles
g- Miscelneas

La matriz es generalmente un espcimen biolgico tal como un fluido corporal o un tejido slido. El
agente de inters podra existir en la matriz en solucin simple o unida a protenas y otros
constituyentes celulares. El desafo es separar el agente txico con suficiente pureza y cantidad para
permitir que este pueda ser caracterizado y cuantificado. A veces el compuesto original ya no est
presente en cantidad suficiente para ser separado. En este caso metabolitos conocidos podran
indirectamente proveer una medida de la sustancia original. Para otras sustancias, la interaccin del
txico con componentes tisulares podra requerir la aislacin de un aducto (protena).

Los gases son medidos por gas cromatografa. Algunos gases son tremendamente lbiles y el
espcimen debe ser colectado y preservado a temperaturas tan bajas que debe usarse nitrgeno
lquido. Generalmente el gas es liberado cuidadosamente incubando el espcimen a una temperatura
determinada en un container sellado. El gas, ya liberado de la matriz se acumula sobre el espcimen
head space o espacio de cabeza donde este puede ser muestreado e inyectado dentro del gas
cromatgrafo. Otros gases tales como monxido de carbono, interactan con protenas. Estos pueden
ser cuidadosamente liberados de la protena, o el aducto ser medido independientemente como
puede ser el ejemplo de la carboxihemoglobina.

Las sustancias voltiles son generalmente de una variedad de tipos qumicos. La cromatografa de
gases (gas-lquido) es la aproximacin ms simple para la separacin simultnea y cuantificacin en
casos que esta se pueda realizar. Los alcoholes simples pueden ser medidos inyectando el fluido
corporal diluido directamente en la columna del instrumento. La aproximacin ms comn es usar la
tcnica de headspace como la utilizada con los gases despus de incubar el espcimen a
temperatura elevada.

Los corrosivos incluyen cidos minerales y bases. Muchos de estos consisten en iones que son
constituyentes normales del tejido. Las tcnicas qumico-clnicas pueden ser aplicadas para detectar
estos iones en exceso sobre las concentraciones normales.

Los metales son encontrados frecuentemente como contaminantes de riesgo en industrias y el medio
ambiente. Los procedimientos clsicos de separacin involucran destruccin de la matriz orgnica por
oxidacin trmica o qumica. Esto deja libre al metal para ser identificado y cuantificado en el residuo
inorgnico. Desafortunadamente, esto permite una determinacin del metal en un estado de
oxidacin, o en combinacin con otros elementos que no puede ser el mismo que cuando fue
absorbido. Por ejemplo, los efectos txicos del mercurio metlico, in mercurioso, in mercrico o
dimetilmercurio, son todos diferentes. Mtodos analticos deben ser seleccionados para determinar la
cantidad relativa de cada forma presente para producir resultados analticos ptimos. La dificultad
analtica de hacer esto ha hecho que se discuta la toxicidad de metales como si cada uno existiera
como una nica entidad con un solo estado de oxidacin.

Los aniones txicos y los no metales son un grupo de difcil anlisis. Algunos aniones pueden ser
atrapados en combinacin con un catin estable, despus de lo cual la matriz orgnica puede ser
destruida como en los procedimientos usados para metales. Otros pueden ser separados a partir de
una cantidad de matriz por dilisis despus de la cual ellos son detectados por colorimetra o
procedimientos cromatogrficos. Otros son medidos por electrodos in selectivos.

Las sustancias orgnicas no voltiles comprenden el grupo ms grande de sustancias que debemos
considerar. Este grupo incluye drogas, legales e ilcitas, pesticidas, productos naturales, polutantes y
compuestos industriales. Ellos son slidos o lquidos con altos puntos de ebullicin. Por lo tanto los
procedimientos de separacin generalmente se basan en extracciones diferenciales, ya sea liquido-
lquido o slido-lquido utilizando primero cidos o bases para acidificar o alcalinizar la fase acuosa y
posterior agregado de un solvente orgnico inmiscible en agua. Frecuentemente estas extracciones
no son eficientes y la recuperacin del analito puede ser baja. Cuando la naturaleza del txico es
conocida, los procedimientos por inmunoensayo son tiles porque los procedimientos de separacin
pueden ser evitados.

Finalmente las miscelneas es una categora que debe ser incluida por el gran nmero de agentes
txicos que no pueden ser detectados por los procedimientos de rutina hasta aqu descriptos.
Venenos y otras mezclas de protenas txicas o constituyentes no caracterizados, caen dentro de esta
categora. Si los anticuerpos pueden ser generados contra el constituyente activo, el inmunoensayo
puede ser el medio ms prctico para la deteccin y medicin de estos potentes txicos. Pero a
menos que Ac monoclonales altamente especficos sean usados, los procedimientos analticos pueden
no ser aceptados con propsitos forenses.

ANLISIS TOXICOLGICO
Antes de comenzar un anlisis, varios factores deben ser considerados: la cantidad de espcimen
disponible, la naturaleza sospechada del txico y la posible va de biotransformacin del txico.
En casos involucrando administracin oral del txico, lo que se analiza primero es el contenido
gstrico, ya que gran concentracin del txico no absorbido puede estar presente. Luego puede
seguirse con el anlisis de orina ya que el rin es el mayor rgano de excrecin para la mayora de
los txicos y grandes concentraciones del txico y/o metabolitos se suelen encontrar en este
espcimen. Siguiendo la absorcin a partir del tracto GI, drogas o venenos son transportados primero
al hgado antes de pasar a la circulacin sistmica general; por lo tanto el primer anlisis sobre un
rgano interno es realizado sobre el hgado.

El conocimiento de la biotransformacin de drogas es esencial antes de realizar un anlisis. El
compuesto original y cualquiera de los metabolitos fisiolgicamente activos deben ser aislados e
identificados.

El anlisis puede ser complicado a causa de cambios qumicos normales que ocurren durante la
descomposicin de un cadver. La naturaleza enzimtica y no enzimtica de los procesos de
descomposicin y metabolismo microbiano pueden destruir un txico que est inicialmente presente
en el momento de la muerte o pueden producir sustancias o compuestos con propiedades fsicas o
qumicas similares a aquellas de los ms comnmente encontrados.

Previo al anlisis, la pureza de todos los reactivos debe ser chequeada. Los testigos de referencia
usados para preparar calibradores y controles deben ser chequeados para pureza, y la forma de la sal
y su grado de hidratacin determinados. Los reactivos y solventes deben ser de gran pureza y libre de
contaminantes que pudiesen interferir o distorsionar los hallazgos analticos. Los recipientes, las tapas
de estos, los tubos, tapones, etc. deben estar libres de contaminantes, tales como ciertos selladores o
plsticos los cuales a menudo interfieren con los mtodos cromatogrficos.
Los laboratorios forenses utilizan diversas metodologas analticas. Inicialmente, test no especficos
diseados para determinar la presencia o ausencia de una clase o grupo de analitos puede ser usada
directamente sobre los especmenes. Los resultados positivos obtenidos por estos test deben ser
confirmados por un segundo procedimiento analtico que identifique a ese txico. El segundo test
debe estar basado sobre un principio fsico o qumico distinto al primero y debe ser ms sensible y
especfico.