UNIVERSIDAD TCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERA EN ALIMENTOS

LABORATORIO DE MICROBIOLOGA DE LOS ALIMENTOS
Profesor: Ing. M. Sc. Maro Paredes Prctic ! "
A#$%&te: Egda. Gabrea Vnueza
Se'estre: Cuarto
TEMA: (SIEMBRA EN PLACA SOBRE MEDIOS DIFERENCIALES)
"* INTRODUCCI+N
En esta prctca se aprovechan as caracterstcas sogcas de as
bacteras, de ta modo que as coonas pueden ser reconocdas drectamente
en as pacas. En a prmera parte de esta prctca se descrbe e asamento
de as bacteras de a eche, capaces de fermentar a actosa. Medante a
adcn de un ndcador de pH, a agar actosa se puede detectar vsuamente
aqueas coonas que producen cdo a partr de a actosa.
En a segunda parte se ndca e asamento de as bacteras de sueo
capaces de hdrozar a casena, empeando e msmo prncpo que se ha
utzado para medr a hdrss de a casena.
,* OB-ETIVOS
,*"* Conocer e prncpo de os medos dferencaes.
,*,* Observar bacteras ctcas y bacteras que hdrozan a casena a
partr de muestras de eche y sueo.
.* MATERIALES
1 Termmetro 2 Erenmeyer (500 m)
2 Erenmeyer (125 m) 6 Ppetas (1 m)
1 Ppeta 10 m Incubadora a 37 y 30 C
1 Vaso de precptacn Agar actosa extracto de
evadura 60 m
6 Ca|as Petr estres Agar eche descremada
3 Porta y cubre ob|etos Soucones de: Acoho,
Crsta voeta,
1 Pceta con agua destada Lugo, Safranna.
1 Mcroscopo por cada subgrupo Leche descremada en povo
1 Ftro de tea Leche sn pasteurzar.
/* PROCEDIMIENTO
/*"* BACTERIAS FERMENTADORAS DE LACTOSA
/*"*"* Esterzar agar actosa-extracto de evadura que contenga e
ndcador PBC (prpura bromo creso) para 2 ca|as y enfreos a
45C.
Agar lactosa extracto de levadura
Extracto de evadura
Trptona
Lactosa
K
2
HPO
4
Agar
Agua
10.0 g
10.0 g
5.0 g
5.0 g
15.0 g
1000 m
/*"*,* C$&%o $se i&%ic%or:
/*"*,*"* Prpura de bromo creso (1.6% soucn acohca de
80%) 2m por tro.
/*"*,*,* Sembre por e mtodo de ducn utzando a muestra de
eche.
/*"*,*.* Incube as pacas a 37C hasta e sguente perodo de
aboratoro.
/*"*,*/* Examne en a paca a presenca de coonas rodeada de
zonas amaras. E ndcador PBC es amaro a vaores de
pH nferores a 5.2; por o tanto una zona amara es
ndcatvo de a formacn de cdo.
/*,* BACTERIAS 0IDROLI1ANTES DE LA CASENA
/*,*"* Preparar agar eche descremada (a agar para recuento en paca,
aadr eche descremada, esterzada a 2%) para 2 ca|as petr.
Esterzar en autocave durante 20 mn. A 121C y enfreos a
45C.
Agar leche descremada
Trptona
Extracto de evadura
Gucosa
Leche descremada en povo
Agar
Agua
5.0 g
2.5 g
1.0 g
20.0 g
15.0 g
1000 m
/*,*,* Sembre por e mtodo de ducn, una muestra de a suspensn
de terra sumnstrada.
/*,*.* Incube as pacas a 30C hasta e prxmo perodo de aboratoro.
/*,*/* Examne en as pacas a aparcn de coonas rodeadas de zonas
caras, a casena es opaca en a paca antes de a ncubacn, por
hdrss se converte en productos soubes. Por o tanto, una
zona cara arededor de una coona es ndcatva de a dgestn
de a casena.
/*,*2* Reace tncones de Gram en tres coonas de bacteras
fermentadoras de actosa y en otras tres que hdrocen a casena.
2* RESULTADOS
- De acuerdo a o observado se dra que os organsmos de cada
hbtat presentan caracterstcas sogcas y morfogcas comunes,
fundamente bbogrcamente su respuesta.
- Expque cmo se observa que a casena se ha degradado, as como
ndque qu es a casena.
- Presentar grcos y dscusn de o observado en prctca.
3* CUESTIONARIO
3*"* Las bacteras que producen cdo actco se pueden dentcar
drectamente en un medo que contenga CaCO
3
en suspensn. Cu
es e fundamento de esta tcnca de asamento?.
3*,* Por qu se denomnan medos dferencaes y qu sustancas
qumcas se agregan a estos para dferencaros.
3*.* Cu es o son as enzmas responsabes de a hdrss de a casena?.
Expque su mecansmo de accn.
3*/* Cu es a funcn de ndcador en a formacn de cdo a partr de
a actosa?
4* BIBLIOGRAFA
SEELEY, H: 1973. "Mcrobos en Accn". 1era. Edcn. Barceona - Espaa.
Ed. Bume.
PELCZAR, M: 1995. "Mcrobooga". 2da. Edcn. Ed. Mc Graw H. New York.
BURDON, W: 1974. "Mcrobooga". Mxco. Ed. Cutura.