BIBLIOGRAFA

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CUESTIONARIO

1. Mencione 2 maneras de cmo se realiza la fijacin de la muestra.

i. Examen en fresco.- Este mtodo tiene la ventaja de una gran simplicidad y por
otra parte no produce alteracin alguna en las muestras; en histologa animal se
presentan grandes inconvenientes para su uso, puesto que slo pueden
utilizarse, bien para organismos vivos de pequeo tamao o bien para piezas
sumergidas durante un tiempo limitado en lquidos fisiolgicos. Los vegetales
presentan ventajas sobre los animales, ya que se pueden fcilmente cultivar en
el laboratorio o bien llevarlos desde el campo al mismo sin que los procesos de
lisis se presenten con la rapidez que ocurren en los tejidos animales.
An teniendo estas ventajas sobre los tejidos animales, con mucha frecuencia
debe recurrirse en histologa vegetal al uso de fijadores, bien porque las
muestras se recojan lejos del laboratorio durante campaas botnicas ms o
menos amplias o porque los trabajos se prolonguen excesivamente debido a
largos tratamientos, por lo que es necesario recurrir a la fijacin de las muestras
a estudiar.
i. Inmersin. En el mtodo de inmersin las piezas de tejido se sumergen en la
solucin fijadora. Hay que tener en cuenta algunas precauciones.
1) Las piezas de tejido no deberan superar los 0.5 cm de espesor para que el
fijador alcance el interior de la pieza antes de que sta comience a
deteriorarse. Esto depende de la velocidad de penetracin del fijador y de las
caractersticas del tejido. Por ejemplo, si tiene cavidades por donde penetre la
solucin fijadora el volumen podra ser mayor.

Fijacin por inmersin.
2) El volumen recomendado de fijador es 20 veces superior al volumen de la
pieza.
3) El tiempo de fijacin depende de cada tipo de fijador. Una agitacin suave
durante la fijacin ayuda a la penetracin del fijador y disminuye el tiempo.

2. Explique el fundamento de la coloracin de Gram.

La coloracin gram consiste en adicionar cierta cantidad de algn colorante ( en mi
caso azul de metilo) donde se puede observar que las bacterias que se tien de un
color azul son gram positivas y las de un tie rojo o de color rosa son positivas.

3. Explique la funcin del lugol y en que favorece a la coloracin.

El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de
potasio) y Sl (Siulterio), los cuales estn presente para solubilizar el yodo, y actan
de mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la
pared de la clula bacteriana. El I
2
entra en las clulas y forma un complejo
insoluble en solucin acuosa con el cristal violeta.

4. Si Ud., pudiera elegir entre alcohol y alcohol-acetona Cul elegira?

El alcohol acetona porque es mejor disolviendo el contenido lipdicode la pared
celular (lo que aumenta la permeabilidad celular)

5. Qu otros colorantes de contraste se podran utilizar.

Los colorantes que tambin se podran usar serian el azul de metileno,
cristal violeta, safranina, son catinicos y se combinan fuertemente con
componentes celulares cargados negativamente, como los cidos
nucleicos y los polisacaridos cidos (las envueltas externas de los
microorganismos estn por lo general cargadas negativamente).

6. Porque la necesidad de utilizar el objetivo de inmersin.

Porque la necesidad de utilizar el objetivo de inmersin. Los rayos que
desde la muestra se dirigen al objetivo atraviesas el vidrio del cubre objeto
y al pasar al aire se separa de la normal. Algunos rayos incluso sufren
reflexin total en la interface vidrio aire. Solo llega al microscopio una
pequea parte de la luz que parte de la muestra, con el problema que
conlleva para la visin.

7. Porque en algunos procedimientos varan los tiempos de exposicin a
los colorantes.

- Porque en algunos procedimientos varan los tiempos de exposicin a los
colorantes. Esto se debe a la concentracin del reactivo usado y por el
ambiente en la que se encuentren.