Universidad de Carabobo

Facultad experimental de ciencias y tecnologa

Departamento de fsica
Laboratorio de Ondas y ptica

Absorbancia
Br. Hernandez Katherine C.I : 20.445.895
Br. Lpez Vanessa C.I : 22.005.433
Br. Paredes Mileidy C.I : 20.402.192

Resumen.
Se estudio la absorcin de la luz por sustancias coloreadas mediante el anlisis de imgenes digitales,
comprobando la ley de Lambert-Beer al estudiar la absorcin de luz de la misma sustancia a distintas
concentraciones, tambin se encontr que la absorbancia est relacionada linealmente con la
concentracin, en una celda de ancho constante, la importancia de la ley de Lambert-Beer es que es la base
de uno de los anlisis en qumica analtica, la espectrofotometra, permitiendo conocer la solucin de una
sustancia desconocida mediante el uso de varios patrones y una curva de calibracin.
INTRODUCCION.
Todas las sustancias pueden absorber energa
radiante, aun el vidrio que parece ser
completamente transparente absorbe radiacin de
longitudes de ondas que no pertenecen al espectro
visible; el agua absorbe fuertemente en la regin
del infrarrojo.
La absorcin de las radiaciones ultravioletas,
visibles e infrarrojas depende de la estructura de
las molculas, y es caracterstica para cada
sustancia qumica. Cuando la luz atraviesa una
sustancia, parte de la energa es absorbida; la
energa radiante no puede producir ningn efecto
sin ser absorbida.
El color de las sustancias se debe a que stas
absorben ciertas longitudes de onda de la luz
blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a
nuestros ojos aquellas longitudes de onda no
absorbidas. Adems, no est de ms mencionar el
hecho de que la absorcin y trasmitancia de luz
depende tanto de la cantidad de la concentracin
como de la distancia recorrida.

Objetivos:

Estudiar la absorcin de la luz por
sustancias coloreadas mediante el
procesamiento de imgenes digitales

Comprobar la Ley de Lambert-Beer
FUNDAMENTOS TERICOS
Ley de Lambert-Beer:
La fotometra o medida de la luz e un mtodo
ptico de anlisis dentro del cual se encuentran la
colorimetra y la espectrofotometra, que miden la
cantidad de luz absorbida por sustancias
coloreadas o incoloras, respectivamente. Las
medidas de absorcin de luz se basan en dos leyes,
la ley de Lambert y la ley de beer.
La ley de Lambert se refiere al paso de un rayo de
luz a travs de un medio absorbente. Establece
que la intensidad disminuye exponencialmente a
medida que la longitud del medio absorbente
aumenta.

(1)
Donde I
1
es la intensidad de luz transmitida, I
0
la
intensidad de luz incidente, k el coeficiente de
absorcin y l corresponde al espesor de la capa
del medio absorbente.
Por otro lado, la ley de Beer se refiere a la
disminucin exponencial de la intensidad a
medida que aumenta la concentracin de la
sustancia absorbente en el medio.

Donde c es la concentracin de la sustancia
absorbente. La combinacin de ambas leyes es
conocida como ley de Lambert-Beer:

Donde

es el coeficiente de absorcin,
k

es el coeficiente de extincin y la longitud de

onda de la luz absorbida. El cociente de las
intensidades se conoce como trasmitancia (T) y se
suele expresar como un porcentaje.
A medida que un haz de luz atraviesa un medio
absorbente, la cantidad de luz absorbida en
cualquier volumen es proporcional a la intensidad
de luz incidente multiplicado por el coeficiente de
absorcin. Consecuentemente, la intensidad de un
haz incidente decae exponencialmente a medida
que pasa a travs del absorbente. Esta relacin
cuando se expresa como Ley de Lambert es:

La absorbancia A viene dada por la expresin:

Tambin llamada densidad ptica (DO).
La mayor parte de los trabajos analticos se
realizan con soluciones de manera que vamos a
desarrollar la relacin que existe entre la
concentracin de la solucin y su capacidad de
absorber radiacin.


Fig.1. Esquema para el estudio de la absorcin de la
luz

La figura muestra un haz de radiacin paralela
antes y despus de que ha pasado a travs de una
capa de solucin que tiene un espesor de b cm y
una concentracin c de una especie absorbente.
Como consecuencia de interacciones entre los
fotones y las partculas absorbentes, la potencia
del haz es atenuada. La transmitancia T de la
solucin es entonces la fraccin de la radiacin
incidente transmitida por la solucin.

Limitaciones de la Ley de Lambert-Beer:
Se encuentran pocas excepciones a la
generalizacin que la absorbancia est
relacionada linealmente a la longitud del camino
ptico. En cambio, las desviaciones de la
proporcionalidad directa entre la absorbancia
medida y la concentracin, para l constante son
ms frecuentes. Estas desviaciones son
fundamentales y representan limitaciones reales
de la ley. Algunas ocurren como una consecuencia
de la manera en la que las mediciones de
absorbancia se hacen, o como un resultado de
cambios qumicos asociados con cambios en la
concentracin. Otras ocurren a veces como
desviaciones instrumentales.
La ley de Beer describe muy bien el
comportamiento de absorcin de soluciones
diluidas; a concentraciones altas (generalmente
mayores que 0,01M). la distancia promedio entre
las especies responsables de la absorcin esta
disminuida hasta el punto que cada una afecta la
distribucin de cargas de sus vecinas. Esta
interaccin, a su vez, puede alterar la habilidad de
las otras especies para absorber en una longitud
(2)
(3)
(4)
(5)
de onda de radiacin. Debido a que la extensin
de la interaccin depende de la concentracin, la
ocurrencia de este fenmeno provoca desviaciones
de la relacin lineal entre absorbancia y
concentracin.
Desviaciones de la ley de Beer tambin surgen
debido a la dependencia de del ndice de
refraccin de la solucin. Al cambiar la
concentracin se altera el ndice de refraccin de
la solucin y se observan desviaciones de la ley.
Cromaticidad:
La colorimetra es el rea de la ptica que estudia
el color, el cual puede ser representado por dos
caminos bsicos, dependiendo del medio en que se
produce.
Sistemas aditivos:
Se logra aadiendo colores al negro para crear
nuevos colores. Cuantos mas colores sean
mezclados se obtendr un color mas parecido al
blanco. La presencia de todos los colores
primarios es suficiente para crear un blanco puro,
mientras que la ausencia de colores primarios
crea un negro puro. Los colores de luz o colores
primarios aditivos son el rojo, verde y azul. La
suma de los tres colores primarios da lugar al
blanco (la luz blanca esta compuesta por luz roja,
verde y azul en partes iguales). Los colores
secundarios de luz son cualquier combinacin de
dos colores primarios: rojo mas azul nos da el
magenta; verde mas azul nos da el cian; rojo mas
verde nos da el amarillo.
Sistemas sustractivos:
En stos, los colores primarios son sustrados del
banco para formar nuevos colores. Cuantos mas
colores se mezclen se obtendr algo mas parecido
al negro. Tericamente, la presencia de todos los
colores primarios sustractivos nos da negro y, su
total ausencia, blanco. Se define un color
primarios de pigmento a aquel que absorbe un
color primario de luz y refleja los otros dos. Por
tanto, son el cian, el magenta y el amarillo.
Cuando la luz incide sobre un color primario de
pigmento lo que vemos es la combinacin de dos
colores primarios de la luz. Colores secundarios
del pigmento: rojo, verde y azul.

Fig.2. Circulo Cromtico

Modelos del color:
La idea de la utilizacin de modelos del color
surge para facilitar la especificacin de objetos en
colores de forma estndar. Buscamos un sistema
de coordenadas tridimensionales (X Y Z) en el
cual se defina un sub espacio donde cada color
quede definido por un punto nico.
Modelo CIE X Y Z (1931):
La necesidad de que al especificar un color
pudiramos evaluar su luminosidad sin llevar a
cabo clculos extra y el hecho de que los valores
R, G y B (intensidad de rojo, verde y azul, por
negativos, llev a la CIE (Comisin Internacional
de Iluminacin) a realizar una nueva
recomendacin donde se usan colores primarios
genricos supe saturados (irreales), lo cual
evitara tener valores triestmulo negativos.
La combinacin de X, Y y Z permite representar
todos los colares de posibles. As C=X+Y+Z,
donde X, Y y Z son lumnicas de las nuevas fuentes
consideradas como primarias. Donde Y lleva toda
la informacin de la luminancia del color. Se
puede llevar a cabo la siguiente normalizacin:

x=X/(X+Y+Z)
y=Y(X+Y+Z)
z=Z/(X+Y+Z)
La expresin de la luminancia de un color ser
x+y+z=1. A x, y, z se le conoce como coordenadas
cromticas. Normalmente, para describir un color
nos darn (x,y) e Y, donde (x,y) es la
cromaticidad.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
MATERIALES Y EQUIPOS
Colorantes de cocina color amarillo y
color rojo.
Cubetas de plstico transparente.
Cabina de luz.
Cmara fotogrfica.
Para el estudio de la absorbancia mediante el
anlisis de imgenes digitales [4,5], se van a
preparar soluciones diluidas de colorante
comercial de cocina en agua desionizada.
Prepare la solucin patrn mezclando 2
gotas de colorante amarillo en 80 ml de
agua desionizada. A esta solucin se le
asigna una concentracin de 100% V/V.
Por diluciones sucesivas de la solucin
patrn prepare soluciones (en las cubetas)
con las siguientes concentraciones: 11,11
%V/V, 33,33 %V/V, 44,44 %V/V, 55,55
%V/V, 72,72 %V/V, 77,77 %V/V Y
88,88%V/V (3,2 ml de solucin patrn en
0,4 ml de agua).
Coloque las cubetas con las soluciones en
la cmara de luz, ilumnelas y tome las
fotografas. El montaje experimental se
muestra en la figura 3
ANALISIS DE LAS FOTOGRAFIAS:
De la fotografa original recorte las
imgenes de mapa de bit (bmp) para cada
valor de concentracin.
Ejecute el programa beer.m desarrollado
en MATLAB para obtener los datos de la
intensidad espectral (en enteros de 0-225,
8 bits) de los componentes rojo, verde y
azul para las diferentes concentraciones.
Observe cual de las componentes es
absorbida mas fuertemente. Grafquela
como funcin de la concentracin y
compruebe que se cumple la ley de
Lambert-Beer (ecuacin 3). Explique.
Por qu se absorbe dicho color?
Explique.
Calcule la Absorbancia y grafquela como
funcin de la concentracin. Se cumple la
ecuacin 5? Explique.
Desde el punto de vista fsico, Cul es la
diferencia fundamental entre la
metodologa experimental usada aqu y la
metodologa estndar (figura 1) para el
estudio de la absorcin de la luz?
Explique.

Fig. 3 Imagen de las soluciones preparadas
con el colorante amarillo.


Fig. 4. Imagen de las soluciones preparadas
con el colorante rojo.

Fig. 5 Imagen de las soluciones preparadas
con el colorante verde.
RESULTADOS
Tabla 1. Datos de las soluciones a preparar.





Tabla 2. Intensidad de colores a distintas
concentraciones (Absorbente de color Amarillo)

Tabla 3. Intensidad de colores a distintas
concentraciones (Absorbente de color Verde)




Color Amarillo
Concentr
acin
(%V/V)
Red Green Blue
Prom
edio
Desvia
cin
Prom
edio
Desvia
cin
Prom
edio
Desvia
cin
11.11 134.0
60
7.992 132.5
08
6.703 90.04
5
5.946
22.22 144.9
24
5.548 142.0
35
5.551 35.47
0
6.824
33.33 153.7
35
4.802 151.0
07
5.443 25.87
1
6.005
44.44 163.6
71
6.333 160.9
28
5.896 13.39
8
8.126
55.55 167.6
49
8.979 165.1
74
7.734 11.44
7
11.328
72.72 173.6
87
4.911 170.4
83
5.472 5.281 4.903
77.77 174.5
83
6.058 170.0
10
5.869 5.989 6.504
88.88 178.6
29
5.360 172.9
52
5.554 15.48
5
6.318
Concentracin
%V/V
Solucin patrn
(ml)
Agua (ml)
11,11 0,4 3,2
22,22 0,8 2,8
33,33 1,2 2,4
44,44 1,6 2
55,55 2 1,6
72,72 2,62 0,98
77,77 2,8 0,8
88,88 3,2 0,4
Color Verde
Concentr
acin
(%V/V)
Red Green Blue
Prom
edio
Desvia
cin
Prom
edio
Desvia
cin
Prom
edio
Desvia
cin
11.11 116.8
13 10.220
140.9
78 8.515
101.0
05 7.354
22.22 99.54
6 6.469
153.4
04 5.328
104.2
43 6.223
33.33 56.18
8 8.807
169.5
43 6.668
100.8
03 8.536
44.44 29.68
3 7.766
171.6
87 4.598
97.40
1 6.717
55.55 15.64
7 3.255
187.1
65 4.120
108.6
91 5.141
72.72
1.831 4.963
182.1
44 4.323
98.46
9 4.913
77.77
1.391 3.723
163.4
35 12.769
75.93
3 10.174
88.8
0 0
166.6
54 4.993
76.40
4 6.789
Tabla 4. Intensidad de colores a distintas
concentraciones (Color Rojo)

Tabla 5. Absorbancia del color azul a distintas
concentraciones














Grafica 1. Concentracin vs absorbancia Verde-red


Grafica 2. Concentracin vs absorbancia Verde-Green



Grafica 3. Concentracin vs absorbancia Verde-blue


0
50,000
100,000
150,000
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Concentracin (M)
Verde-Red
125
132
139
146
153
160
167
174
181
188
195
11.1122.2233.3344.4455.5572.7277.7788.88
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Concentracin (M)
Verde-Green
40
20,040
40,040
60,040
80,040
100,040
120,040
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Concentracin (M)
Verde-Blue
Color Rojo
Concentr
acin
(%V/V)
Red Green Blue
Prom
edio
Desvia
cin
Prom
edio
Desvia
cin
Prom
edio
Desvia
cin
11.11
156.7
76 8.955
136.8
11 6.346
98.30
8 6.144
22.22
178.1
59 4.822
126.3
07 6.477
94.41
0 6.803
33.33
193.2
23 6.725
124.0
80 9.774
93.56
3 9.773
44.44
200.0
57 4.502
115.9
99 6.516
88.73
2 6.720
55.55
203.2
38 3.621
89.88
8 4.772
58.73
5 5.882
72.72
213.1
22 6.140
95.25
1 9.018
63.76
7 9.459
77.77
210.9
21 6.193
80.79
0 8.620
48.92
8 8.899
88.88
213.4
71 7.324
79.54
5 11.213
48.69
5 10.363
Concentracin Absorbancia
11.11% 0,07514499
22.22% 0,13030026
33.33% 0,19875764
44.44% 0,3201798
55.55% 0,3491435
72.72% 0,44981366
77.77% 0,47910303
88.88% 0,58109257
0
20
40
60
80
11.1122.2233.3344.4455.5572.7277.7788.88
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Concentracin (M)
Amarillo-Blue
Grafica 4. Concentracin vs absorbancia Rojo-red


Grafica 5. Concentracin vs absorbancia Rojo-Green


Grafica 6. Concentracin vs absorbancia Rojo-blue




Grafica 7. Concentracin vs absorbancia Amarillo-red


Grafica 8. Concentracin vs absorbancia Amarillo-
Green

Grafica 9. Concentracin vs absorbancia Amarillo-
blue


140
147
154
161
168
175
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Concentracin (M)
Rojo-Red
30
60
90
120
150
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Concentracin (M)
Rojo- Green
50
70
90
110
130
150
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Concentracin (M)
Rojo-Blue
125
130
135
140
145
150
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Concentracin (M)
Amarillo- Red
130
137
144
151
158
165
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Concentracin (M)
Amarillo-Green
Grafica 10. : Grafico de intensidades de colores contra
concentraciones


Grafica 11. : Grafico de absorbancia del color azul
contra la concentracin

DISCUSIN DE RESULTADOS
Como se puede observar en las tabla 2,3,4 el
componente ms absorbido es el azul, esto se debe
que al ser las soluciones de color amarillo
anaranjado, verde y rojo se absorbe su color
complementario en el circulo cromtico, el cual
resulta ser el azul, rojo y verde
Con estos valores tabulados se pudieron calcular
los valores de absorbancia a las soluciones
preparadas a partir de la solucin patrn,
pudiendo tambin representar grficamente estos
valores en funcin de la concentracin de las
soluciones diluidas, y de la absorbancia
mostrndose en algunas un comportamiento lineal
entre la absorbancia y la concentracin, lo cual es
acorde con la ley de Lambert-Beer.
Al graficar la intensidad del color azul contra la
concentracin se obtiene una curva de forma
exponencial con la siguiente funcin:
y = 129,59 e
-0,015x

Que cumple con la ecuacin de Lambert-Beer (3),
debido a que tiene la forma esperada, y adems se
puede determinar que la intensidad de luz
incidente es 129,59, el coeficiente de extincin no
es posible determinarlo, debido a que no se tiene
el ancho de la celda.
En la tabla 5 y la grafica 11 se observa q al
graficar absorbancia contra concentracin se
tiene que ambas estn relacionadas de manera
lineal, lo cual satisface con la ecuacin (5),
teniendo esta recta la siguiente forma:
y = 0,0064x
Donde la pendiente es el coeficiente de extincin
caracterstico de la solucin por el ancho de la
celda, la importancia de esta ecuacin es que si se
tiene una solucin de la misma sustancia de
concentracin desconocida se puede calcular su
concentracin por medio de este mtodo, de hecho
la ley Lambert-Beer es la base de uno de los
mtodos ms importantes de qumica analtica, la
espectrofotometra.
Desde el punto de vista fsico le diferencia entre la
metodologa aplicada y la mostrada en la figura 1
es que en la metodologa una se mide la luz
reflejada, por medio de la cual se calcula la
absorbida, mientras que en la metodologa de la
figura 1 se mide directamente la luz que a traviesa
la celda, otra diferencia es la manera en que
incide la luz, en la metodologa de la figura 1 la
y = 129.59e
-0.015x

R = 0.9892
0
20
40
60
80
100
120
140
160
0 50 100
I
n
t
e
n
s
i
d
a
d

d
e

c
o
l
o
r

Concentracion
intensidad de
azul
intensidad de
rojo
intensidad de
verde
Expon.
(intensidad
de azul)
y = 0.0064x
R = 0.9892
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0 50 100
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Concentrcion
Absorbancia del color azul
Absorbancia
del color azul
Linear
(Absorbancia
del color
azul)
(6)
(7)
luz incide desde un lado de la celda, mientras en
la metodologa usada incide desde todos lados.
Conclusiones
La relacin entre la concentracin y la
absorbancia es lineal
Una sustancia de un color dado absorbe su
color complementario
La sustancia estudiada cumple con la ley
de Lambert-Beer
Le relacin de la intensidad de color azul
contra concentracin de la sustancia
estudiada es y = 129,59e
-0,015x
siendo el
eje de las x la concentracin y el de las y
la intensidad de azul
La relacin de absorbancia del color azul
contra concentracin es y = 0,0064x donde
el eje de las x es la concentracin y el de
las y la absorbancia
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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Espectroscopa, Pearson Pentice Hall,
Madrid.
Berns, R. S. (2000). Billmeyer and
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Intersciencie, New York.
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