Laboratorio de farmacognosia 2014-1

Prctica nmero 5. EXTRACCIN DE HESPERIDINA

Introduccin.
Entre los principales metabolitos con actividad biolgica en el gnero Citrus se
encuentran los flavonoides, que son compuestos de bajo peso molecular. Se
dividen de acuerdo con la presencia de un oxgeno en la posicin cuatro, un doble
enlace entre los carbonos dos y tres o un grupo hidroxilo en la posicin tres del
anillo central.
Los flavonoides estn presentes en casi todas las plantas, fundamentalmente en
las partes areas, pero varan cualitativamente de una planta a otra. Se han
descubierto ms de 4 000 y estn recibiendo gran atencin por parte de la
comunidad cientfica, debido a que se les atribuyen propiedades antiinflamatorias,
antioxidantes y protectores de vasos sanguneos. Estas propiedades biolgicas los
sealan como posibles opciones para el tratamiento de enfermedades vasculares.
La narangina es el flavonoide mayoritario en la toronja, mientras la hesperidina lo
es en la naranja. La rutina, hesperidina y diosmina son abundantes en el limn y
las dos ltimas lo son en la mandarina.
La hesperidina se encuentra principalmente en la cscara de los ctricos
(naranjas y limones). La glicona es el disacrido reductor rutinosa, formado por
una ramnosa (6-desoxi-L-manosa) unida a una glucosa mediante un enlace
glicosdico de tipo ( 1,6). La aglicona o genina es una flavonona denominada
hesperitina.











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Accin antiagregante plaquetaria
La mezcla de flavonoides micronizada que contiene 90 % de diosmina y 10 % de
hesperidina (forma comercial Dafln 500 mg) a dosis de 100 mg/da inhibi la
agregacin plaquetaria intravascular inducida por una dosis i.v. de colgeno e
increment la desagregacin plaquetaria.
Accin antiedemagnica y antinflamatoria
La fraccin de flavonoides micronizada y purificada que contiene 90 % de
diosmina y 10 % de hesperidina, que se comercializa como Dafln 500 mg, ha
sido efectiva para inhibir el incremento de la permeabilidad inducida por diferentes
estmulos. Esto ha sido corroborado por su eficacia como frmaco flebotnico para
el tratamiento de la insuficiencia venosa crnica.
Tiene efectos vasoprotectores ya que mejora el estado de los capilares
aumentando su resistencia y reduciendo su permeabilidad. Adems de reducir los
niveles de colesterol, se le atribuyen propiedades antioxidantes, antiinflamatorias y
anticancergenas.
Efectos secundarios
Los flavonoides de ctricos han demostrado ser poco txicos y por el contrario,
tienen efectos beneficiosos tales como la accin protectora de la rutina frente a las
lesiones nefrotxicas inducidas en ratones44 y la accin antiulcerognica de la
naringina y naringenina.

Tabla 1. Concentraciones de flavonoides (mg/100 mg de peso seco) en
diferentes partes de la naranja agria y el limn
Flavonoide
Naranja agria Limn
Hoja Fruto Jugo Hoja Fruto Jugo
Rutina < 10 < 10 < 10 591,3 22,7 < 10
Hesperidina < 10 19,6 < 10 < 10 358,0 384,0
Naringina < 10 377,0 < 10 < 10 < 10 < 10
Diosmina 38,8 < 10 < 10 204,0 73,2 < 10




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Tabla 2. Concentraciones de flavanoides (mg/100 mg de peso seco) en
diferentes partes de la naranja dulce (Cytrus sinensis) y la mandarina (Cytrus
nobilis)
Naranja dulce Mandarina
Flavonoide Hoja Fruto Jugo Hoja Fruto Jugo
Rutina 215,1 < 10 < 10 < 10 < 10 < 10
Hesperidina 498,6 698,0 < 10 1 543,0 1 199,0 612,0
Naringina < 10 < 10 < 10 < 10 < 10 < 10
Diosmina 163,2 < 10 < 10 131,0 < 10 < 10


Objetivos. Llevar a cabo una extraccin qumica del flavonoide hesperidina a
partir de la cascara seca de 3 ctricos, realizar una comparacin en el rendimiento
de extraccin para finalmente realizar una crema corporal ya que estas
formulaciones se recomiendan para proteger los pequeos vasos, propiedad til
para el tratamiento de la insuficiencia venosa crnica.






Materiales Reactivos
1 matraz bola de 250 ml 24/40
1 condensador 24/40
2 mangueras ltex
1 soporte universal
2 pinza de extensin
1 parrilla elctrica
1 embudo de tallo corto
2 papel filtro de cafetera (traer ustedes)
2 vasos de precipitado 100ml
1 agitador de vidrio
Hielo
Cascarillas del ctrico correspondiente

Hexano
Metanol
cido actico 10%
Mezcla eluyente



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Procedimiento Experimental.
A. Extraccin Qumica: En un matraz bola colocar cscara de mandarina o
naranja preferentemente seca y fragmentada hasta la mitad del matraz,
adicionar hexano hasta cubrir las cascaras y refluir por una hora. A
continuacin se filtra a gravedad el lquido, se saca el material vegetal y se
extiende sobre servilletas para deja secar a temperatura ambiente. Una vez
seco (lo ms posible) se vuelven a colocar las cascaras dentro del matraz
bola y se adiciona metanol hasta cubrirlas se refluye por 1.5 h. El extracto
orgnico se filtra y el material vegetal se desecha. Finalmente el extracto
metanolico se concentra en el rotaevaporador y el residuo obtenido se
cristaliza con HOAc al 10%.

B. Maceracin: En un frasco de boca ancha con tapa, se colocan 100 g de
cscara y se cubre con metanol, el material vegetal se deja macerar por
una semana. Al cabo de ese tiempo, se filtra y el material vegetal se deja
secar a temperatura ambiente y el extracto metanolico se concentra en el
rotaevaporador y se cristaliza con HOAc al 10%.