Titulo- Polmero natural Extraccin de ADN

Objetivos
1. Comprender la base de las tcnicas de extraccin de ADN
2. Extraer y manipular el ADN de clulas vegetales
Materiales
!resas
"abn de #regar
Agua destilada
$olsa %iploc
Embudo
#iltros de ca#
$ea&ers pe'ue(os
2 )ubos de ensayo y *radilla
$ea&er grande +,, m-
Etanol al .+/ $0EN !123 4ideal5 del congelador6
7alillos de pl8stico para revolver el ADN
Teora
-os pol9meros son molculas 'ue tienen la capacidad de unirse y #ormar cadenas. -a
molcula de ADN es un pol9mero de cadenas de nucletidos. Es decir es polinucletido.
Existen diversos procedimientos para extraer ADN de las clulas. Estos var9an en la
cantidad y pure:a del ADN 'ue se obtiene al #inali:ar el procedimiento; pero la base de
todos ellos es muy similar.
-a extraccin de ADN re'uiere una serie de etapas b8sicas. En primer lugar tienen 'ue
romperse la pared celular y la membrana plasm8tica para poder acceder al n<cleo de la
clula. A continuacin debe romperse tambin la membrana nuclear para de=ar libre el
ADN. 7or <ltimo >ay 'ue proteger el ADN de en:imas 'ue puedan degradarlo y para
aislarlo >ay 'ue >acer 'ue precipite en alco>ol.
-a solucin con detergente y sal es capa: de romper la pared celular y las membranas
plasm8tica y nuclear.
El alco>ol se utili:a para precipitar el ADN 'ue es soluble en agua pero; cuando se
encuentra en alco>ol se desenrolla y precipita en la inter#ase entre el alco>ol y el agua.
Cuando el ADN va a utili:arse en el laboratorio para otras aplicaciones; se toman estas
#ibras 'ue precipitan en la inter#ase y se disuelven en agua o en un amortiguador apropiado.
Esta solucin de ADN se puede mantener a ?@C 4en un re#rigerador6 por a(os; puesto 'ue
es una molcula muy estable.
Procedimiento
1. 0ntrodu:ca #resas en una bolsa %iploc; intente sacar el aire antes de cerrar.
2. Aplaste las #resas por unos dos minutos >asta #ormar un pur. )enga cuidado de no
romper la bolsa.
. Agregue una cuc>aradita de =abn de #regar a la bolsa y me:cle nuevamente por un
minuto.
?. !iltre el contenido de la bolsa a travs de gasa o un #iltro de ca# de manera 'ue caiga en
un bea&er pe'ue(o o cual'uier recipiente pe'ue(o.
+. Ana ve: terminada la #iltracin puede botar los restos de #resas y la gasa 4#iltro6.
B. )rans#iera el #iltrado a un tubo de ensayo de #orma 'ue 1CD del tubo est lleno.
E. Agregue lentamente etanol bien #r9o a la muestra >asta 'ue la mitad del tubo est lleno.
El etanol se agrega de manera 'ue se deslice por la pared del tubo; no directamente sobre el
#iltrado.
.. En la inter#ase podr8 ver el ADN precipitar.
1,. -as #ibras de ADN las puede extraer del tubo de ensayo usando un palillo pl8stico
Preguntas de discusin
1. FEs posible ver la doble >lice del ADN a simple vistaG F7or 'uG
HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH
HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH
HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH
2. FDe 'u est8 compuesto el material blanco 'ue precipit en la inter#aseG
HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH
HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH