Microscopio, Portaobjetos, Mechero de alcohol, Lancetas estriles, Cubetas de tincin,Soportes de
tincin, Frasco lavador. REACTIVOS QUMICOS: Alcohol absoluto (Metanol Etanol), Agua destilada, Tincin 2 (Giemsa) o bien Tincin 1 (Hematoxilina, Eosina). MATERIAL BIOLGICO: Sangre fresca (Humana o de cualquier mamfero u otro animal, pero teniendo en cuenta que las clulas sanguneas de aves, etc. presentan algunas diferencias). MODO DE HACERLO: Con una lanceta estril hacer, previa desinfeccin con alcohol, una puncin en el pulpejo de un dedo (se eligir el dedo meique de la mano izquierda en las personas diestras y viceversa en las zurdas). Colocar una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos. Con otro portaobjetos se procede de la manera siguiente: ponerlo delante de la gota de sangre hasta que su borde toque la gota; deslizarlo sobre toda la superficie del primer portaobjetos de manera que se pueda obtener una fina pelcula de sangre.(Esto se llama frotis).
Pasos para lo obtencin de un "Frotis" Colocar el frotis sobre el soporte de tincin y ste sobre la cubeta de tincin y aadir unas gotas de alcohol absoluto (Metanol o Etanol) y dejar que el alcohol se evapore para fijar la preparacin. Podemos elegir entre las dos siguientes tinciones: TINCIN 1.- Cubrir con unas gotas de Hematoxilina y dejar actuar durante 15 minutos. Evitar la desecacin del colorante agregando ms. Lavar la preparacin y aadir unas gotas de Eosina dejndola actuar 1 minuto. TINCIN 2.- Cubrir con unas gotas de Giemsa y dejar actuar durante 5 minutos evitando la desecacin del colorante agregando ms. Lavar la preparacin hasta que no queden restos de colorante. Dejar secar el porta al aire (aireando en forma de abanico) o bien al calor muy lento de la llama del mechero (no debe quemar en el dorso de la mano el portaobjetos).
Distintos tipos celulares de la sangre OBSERVACIN MICROSCPICA: Al microscopio se vern con un dominio predominante los glbulos rojos teidos de color rojo. No tienen ncleo y son ms delgados por el centro que por los bordes.Tamao: De 7 a 8 micras de dimetro y de 1 a 2 micras de grueso. Los glbulos blancos se identifican fcilmente por la presencia de ncleo, teido de morado. Hay varias clases de leucocitos: 1.-Linfocitos: De tamao aproximado al de los glbulos rojos (de 8 a 10 micras); tienen un ncleo redondeado que ocupa casi todo el glbulo. 2.-Monocitos: Son los leucocitos mayores (de 12 a 20 micras); poco frecuentes; ncleo grande y redondo; son los ms mviles y su funcin principal es la fagocitosis. 3.-Polimorfonucleares o granulocitos: De tamao entre 9 y 12 micras.Con el ncleo fragmentado o arrosariado; tienen abundantes granulaciones en su citoplasma; los Neutrfilos (los ms abundantes) tiene sus granulaciones pequeas y teidas de azul plido. Los Basfilos (los menos abundantes) tienen sus granulaciones ms grandes y teidas de color azul. Los Eosinfilos (poco abundantes) tienen sus granulaciones teidas de rojo. Las Plaquetas no son visibles ya que precisan una tcnica especial de tincin. Asmismo pueden aparecer formas juveniles de los distintos glbulos. La observacin microscpica de sangre es importante para saber la Frmula Leucocitaria