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Este documento describe un estudio sobre los efectos relajantes del útero de la combinación de agonistas b2 y inhibidores de fosfodiesterasa en ratas embarazadas in vivo y tejido uterino humano embarazado in vitro. Los resultados mostraron que el inhibidor selectivo de PDE4 rolipram fue más eficaz que el inhibidor no selectivo de PDE teofilina para inhibir las contracciones inducidas por oxitocina en el útero humano. Los efectos relajantes del útero de bajas dosis de terbutalina se potenci
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Útero efecto relajante de los agonistas b2 en combinación con.docx
Este documento describe un estudio sobre los efectos relajantes del útero de la combinación de agonistas b2 y inhibidores de fosfodiesterasa en ratas embarazadas in vivo y tejido uterino humano embarazado in vitro. Los resultados mostraron que el inhibidor selectivo de PDE4 rolipram fue más eficaz que el inhibidor no selectivo de PDE teofilina para inhibir las contracciones inducidas por oxitocina en el útero humano. Los efectos relajantes del útero de bajas dosis de terbutalina se potenci
Este documento describe un estudio sobre los efectos relajantes del útero de la combinación de agonistas b2 y inhibidores de fosfodiesterasa en ratas embarazadas in vivo y tejido uterino humano embarazado in vitro. Los resultados mostraron que el inhibidor selectivo de PDE4 rolipram fue más eficaz que el inhibidor no selectivo de PDE teofilina para inhibir las contracciones inducidas por oxitocina en el útero humano. Los efectos relajantes del útero de bajas dosis de terbutalina se potenci
tero efecto relajante de los agonistas b2 en combinacin con
inhibidores de la fosfodiesterasa : Estudios en ratas embarazadas
en vivo y en el miometrio humano embarazada en vitrojog_1929 31 .. 39 Judit Verli1 , Anna Klukovits1 , Zsolt Kormnyos2 , Judit Hajagos - Tth1 , Eszter Ducza1 , Adrienn B. Seres1 , George Falkay1 y Rbert Gspr1 1 Departamento de farmacodinmica y Biofarmacia de la Facultad de Farmacia y 2 Departamento de Obstetricia y Ginecologa, Centro Clnico de Albert Szent - Gyrgyi , Facultad de Medicina General, Universidad de Szeged, Szeged , Hungra abstracto Objetivos: Nuestro objetivo fue examinar los efectos de una estimulacin simultnea de los receptores b2- adrenrgicos y la inhibicin de las fosfodiesterasas (PDE) uterinas , en el tero de rata embarazada in vivo y en el tejido uterino humano in vitro . Tambin nos pusimos en marcha para medir los niveles de cAMP y detectar las expresiones de la PDE4B isoenzimas y PDE4D en muestras de tejidos uterinos humanos . Material y Mtodos : El parto prematuro se indujo en ratas Sprague -Dawley con lipopolisacrido bacteriano. Los efectos uterinos de terbutalina solos o en combinacin con el rolipram se ensayaron in vivo . miometrio humano tiras de cesreas en embarazos a trmino y en trabajo de parto prematuro fueron estimulados con oxitocina y Se estudiaron los efectos inhibitorios de la teofilina , rolipram y terbutalina . La acumulacin de miometrial AMPc en presencia de rolipram y la terbutalina se determin mediante inmunoensayo enzimtico . Las expresiones de protenas PDE4B y PDE4D se detectaron por transferencia de Western . Resultados : El selectivo inhibidor de PDE4 rolipram fue ms eficaz que el inhibidor de la PDE no selectivo teofilina en la inhibicin de las contracciones inducidas por la oxitocina en el tero humano . Los efectos tero - relajante de dosis bajas de terbutalina fueron notablemente potenciados por el rolipram , tanto en las ratas y en los tejidos humanos . la cambios en los niveles de AMPc uterinos correlacionados con estos resultados . Al trabajo de parto prematuro , PDE4B fue el predominante forma de PDE4 expresa ; a trmino , PDE4D se expres con ms fuerza. Conclusiones: Una combinacin de los inhibidores selectivos de PDE4 y los agonistas b2 deben ser considerados para la tratamiento de contracciones prematuras . Palabras clave : B2 -mimticos , la fosfodiesterasa , trabajo de parto prematuro , rolipram , terbutalina . introduccin El nacimiento prematuro , a menudo asociada con la inflamacin genital , es la causa principal de mortalidad perinatal y morbidity.1 Aunque la gestin de especies amenazadas trabajo de parto prematuro mediante tratamiento tocoltico puede prolongar gestacin , 2 pruebas con respecto a su eficacia es limitada. Una importante va de sealizacin implicada en el mantenimiento de la relajacin del miometrio es la cAMP / cAMPdependent la protena quinasa A ( PKA) Mientras pathway.3 los receptores b2- adrenrgicos ( b2- AR) agonistas estimulan la generacin de cAMP en el miometrio , 4 y por lo tanto son comnmente utilizados para tratar el trabajo de parto prematuro , fosfodiesterasas locales (PDE ) garantizar la terminacin de sealizacin por la degradacin de AMPc a la inactiva 5' - AMP 0,5 PDE4 (anteriormente conocido como cAMP -PDE ) es el predominante isoenzima en la mayora de inflamatoria clulas y en el myometrium.6 humano Los cuatro genticamente subtipos de PDE4 diferentes , denominadas PDE4A - D , 7 son codificada por los empalmes de ARNm alternativos que impliquen por lo menos 35 diferentes proteins.8 PDE4 A principios de 1970 , rolipram , un inhibidor de la PDE de AMPc , se desarroll como una antidepresivo , aunque sus efectos secundarios ( nuseas y alteraciones gastrointestinales) descartaron su clnica desarrollo.7 emesis se asocia con la inhibicin de PDE4D , mientras que 9 de PDE4B ha demostrado ser requerido para el lipopolisacrido ( LPS ) - evoc inflamatoria respuestas . LPS, una endotoxina de bacterias gramnegativas bacterias , las causas del parto prematuro en animales y ha sido implicado como un factor desencadenante en trabajo de parto prematuro humans.10 El inhibidor selectivo de PDE4 prototipo rolipram y tambin agonistas b - AR se han notificado a modular la produccin de mediators.11 inflamatoria En un estudio anterior , hemos demostrado que el rolipram potenci el efecto tero - relajante de la b2 -AR terbutalina agonista en intacto y en ratas tratadas con LPS en in vitro , la relajacin ms pronunciada se detect en Ratas tratadas con LPS . En el presente estudio, se investig los efectos tocolticos del rolipram y la terbutalina en intacta y LPS tratada con ratas finales embarazadas en vivo y en uterino humano especmenes in vitro. Niveles de AMP cclico y las expresiones de protenas PDE4B y PDE4D Tambin se determinaron en los tejidos uterinos humanos de plazo y trabajo de parto prematuro . Mtodos Animales Los animales fueron tratados de acuerdo con la Comisin Europea Directivas del Consejo de las Comunidades ( 86/609/ECC ) y la Ley Hngara para la Proteccin de los Animales en Investigacin ( XXVIII.tv.32 . ) . Los experimentos con sujetos animales se llevaron a cabo con la aprobacin de el Comit tico de Investigacin Animal de Hungra (nmero de registro : IV./01758-2/2008 ) . Sexualmente maduros ratas Sprague -Dawley hembras (cuerpo masa : 140-160 g, 50 a 60 das de edad) se aparearon en el horas de la madrugada . La copulacin fue confirmada por la presencia de un tapn de copulacin o espermatozoides en el la vagina . El da de la copulacin fue considerado como el primero das de embarazo . Los animales fueron alojados en temperatura ( 20-23 C ) , la humedad ( 40-60%) y de la luz - ( 12 h de luz y 12 h de oscuridad ) habitaciones regulados , con agua y la ingesta de alimentos disponibles ad libitum . En los tratamientos in vivo Los animales se dividieron en dos grupos ( n = 10 en cada uno) : ( i ) las ratas embarazadas intactos en el da 22 del embarazo ( trmino) , y ( ii ) las ratas tratadas con LPS ( IP 125 mg / da , Sigma -Aldrich , Budapest , Hungra ) para 3 consecutiva da fromday 18 de embarazo, en la madrugada horas , para evocar el nacimiento prematuro , que se produjo en el principio de la tarde del da 20.12 En los estudios in vivo miogrficas Los estudios miogrficas in vivo se realizaron en ratas intactas (en el da 22 del embarazo; a trmino ) y sobre LPStreated ratas ( en el da 20 de la gestacin , al parto prematuro ), en el horas de la maana entre las 08.00 y las 10.00 horas. ratas se anestesiaron con una mezcla de ketamina y xilazina ( 36 y 4 mg / kg, respectivamente ) IP , y la yugular Se canul la vena para la administracin i.v. la administracin del frmaco . despus laparotoma , el cuerno uterino izquierdo fue expuesto , y un transductor de fuerza implantable / desplazamiento ( SEN- 04 - FSG2 ; Experimetria , Budapest , Hungra ) se sutur sobre la superficie del miometrio , dejando la amnitico membranas intactas . No hubo fuga de amnitico fluido durante los experimentos . Los animales con la sensores se colocaron en una jaula de Faraday hecho de hierro para filtrar electromagntica ambiental ruido. Los desplazamientos mecnicos provocados por las contracciones de las tero se convirtieron a elctrica impulsos por el transductor , y amplificada por un amplificador de puente ( AMP- 01 -SG , Experimetria , Budapest, Hungra). Se detect la seal elctrica amplificada y analizada por el S.P.E.L. ISOSYS avanzadas Sistema de Adquisicin de Datos ( Experimetria , Budapest, Hungra). El tono basal se registr durante 4 min . la rea bajo la curva (AUC ) de este 4 min fue siempre utilizados como control , y los inhibitionwas calculan como el porcentaje de este perodo inicial . El AUC de 4 min Se evaluaron periodos ; los efectos de la terbutalina o la terbutalina + rolipram se expresaron como porcentajes de la actividad espontnea . Las dosis de terbutalina ( Sigma - Aldrich , Budapest , Hungra ) , y rolipram ( Sigma - Aldrich , Budapest , I.v. Hungra ) , se administraron y la contraccin se registraron seales . Dos dosis de 0,5 mg / kg de terbutalina fueron seguidos por 10 dosis de 1 mg / kg a 5 - min se administr 0,25 mg / kg de rolipram ; intervalos de manera similar a la terbutalina solo. En combinacin , rolipram fue dado en una sola dosis de 500 mg / kg. El aplicada dosis se ha elegido en la curva de dosis - respuesta de los rolipram , por lo tanto, la dosis de provocar 30 % de relajacin . este dosis ( 500 mg / kg ) es de acuerdo con algn anterior en estudios in vivo har sobre rats.13 , 14 En los estudios in vitro de la contractilidad Treinta muestras de biopsia de tejido del miometrio humano se obtuvieron en la cesrea en el tercer trimestre del embarazo en dos grupos: en el embarazo a trmino ( 37 a 41 semanas de gestacin , n = 19 ) y en el nacimiento prematuro (32-36 semanas , n = 11 ) . En cesrea embarazo a trmino la entrega se indica mediante un parto por cesrea anterior , presentacin de nalgas , sospechoso desproporcin cfalo-plvica o miopa . Paridad vari de 0 a 3 , y significa la edad materna fue de 30,8 aos ( 22-41 aos ) . Ninguno de los las mujeres recibieron un agente tocoltico , y no hubo signos de trabajo de parto. Parto pretrmino ocurri en madres con doble embarazos , o la mano de obra se sealan con un curso infeccin, leucocitosis, toxemia , sufrimiento fetal o la restriccin del crecimiento . En el grupo de prematuros , la paridad vari de 0 a 3 , la edad materna promedio fue de 32,7 aos ( 26 - 42 aos) . Tres de cada 11 pacientes recibieron tocolticos terapia (sulfato de magnesio) para detener uterina pretrmino contracciones , que han demostrado ser ineficaces . Todo el las operaciones se llevaron a cabo bajo anestesia espinal . El Comit tico de la Universidad de Szeged aprobado el protocolo clnico (nmero de registro : 114/2009 ) . Las muestras de tejido ( 10 10 20 mm) desde la parte superior borde de una incisin transversal inferior segmento se redujeron despus de entregar al nio , pero antes de que la oxitocina era dado a las madres. Los tejidos se almacenaron en solucin de Krebs- Henseleit (que contiene en mM : 118 NaCl , 5 KCl, 2 CaCl2 , 0,5 MgSO4 , 1 K2SO4 , 25 de NaHCO3 , 10 de glucosa ; pH 7,4) a 4 C , y se tuvieron en el experimento dentro de las 12 h de la coleccin. Cada tejido se cort en al menos cuatro tiras ( aprox. 3 5 10 mm ) , montados verticalmente en un bao de rganos ( solucin de Krebs - Henseleit a 37 C; perfundido con 95 % de O2 + 5 % de CO2 ) , y probado en paralelas. Despus del montaje, se equilibraron las tiras durante ~ 2 h antes de los experimentos se llevaron a cabo , con una solucin cambia cada 15 min . Los especmenes expuestos contracciones espontneas durante el perodo de incubacin . La tensin inicial se fij a 3,00 g, que se relaj a 1,5 g al final de la equilibracin . La tensin de la tiras del miometrio se midi con un isomtrica transductor de fuerza ( SG- 02; Experimetria , Budapest, Hungra) y grabado con un S.P.E.L. avanzado Sistema de Adquisicin de Datos ISOSYS . Contracciones rtmicas fueron provocados por 10-6 M oxitocina. Despus de la estimulacin , la teofilina , rolipram , o terbutalina se aadi en forma no acumulativa. Despus de cada concentracin de frmaco ensayado , las tiras se lavaron tres veces , se dejaron recuperar durante 5 min , y, a continuacin contrado de nuevo con oxitocina . tejido ligero fatiga slo se observ antes de la ltima dosis que no influy en nuestras mediciones de manera significativa. El efecto de la terbutalina tambin fue probado en el presencia de 10-6 M rolipram . AUC de perodos de 4 min se evaluaron ; los efectos del rolipram y terbutalina se expresaron como porcentajes de la oxitocina inducida por el contracciones . Medicin de la acumulacin de AMPc uterina Muestras de tejido uterino humano desde el embarazo a trmino y el parto prematuro se incubaron bajo la mismas condiciones en un bao de rganos como se describe anteriormente . Se detectaron acumulaciones basal de cAMP en presencia del rolipram slo ( 10-6 M ; 10 min ) . En la presencia del rolipram ( 10-6 M ; 10 min ) , la acumulacin de AMPc fue estimulada por la terbutalina (10-8 , 10-6; 10-4 M; 10 min ) y, finalmente, la forskolina se aadi al bao ( 10-5 M ; 10 min ) . Despus de la estimulacin , las muestras fueron se congelaron inmediatamente en nitrgeno lquido en el que se almacenaron hasta la extraccin de cAMP.15 uterino la acumulacin de AMPc se midi con un EIA de AMPc Kit ( Sigma- Aldrich , Budapest , Hungra ) y el tejido los niveles de cAMP se expresan en pmol / mg de tejido . Western Blot Las protenas se aislaron a partir de muestras uterinos humanos con la Nucleospin Kit de Macherey - Nagel ( Izinta , Budapest, Hungra ) de acuerdo con el fabricante de instrucciones . Se determinaron las concentraciones de protenas por BioSpec - nano ( Shimadzu , Budapest, Hungra). Sesenta microgramos de protena por pocillo fue sometido a electroforesis en 4-12 % NuPAGE Bis - Tris gel en XCell SureLock Unidades Mini -Cell (Invitrogen , Hungra) . Las protenas se transfirieron de los geles a nitrocelulosa membranas, utilizando el Sistema de Transferencia de iBlot gel ( Invitrogen , Hungra). Los blots se incubaron en un agitador con PDE4B , PDE4D y policlonales b -actina (Santa Cruz Biotechnology, CA, EE.UU. ; 1:200 ) en el tampn de bloqueo , la inmunorreactividad se detect con la mancha inmunodeteccin WesternBreeze Chromogenic Western kit ( Invitrogen, Hungra). La ptica Se determin la densidad ( DO) de cada banda inmunorreactiva con software de anlisis de Kodak 1D Imgenes . sobredosis Se calcularon los valores en unidades arbitrarias luego de rea local sustraccin de fondo . Los anlisis estadsticos En los estudios en animales y la contractilidad humana , AUC fueron evaluados estadsticamente y inhibitoria mxima efectos ( Emax ) se calcularon con el Prism 4.0 ( GraphPad Software Inc San Diego , CA, EE.UU. ) computadora programa . Para las evaluaciones estadsticas , los datos fueron analizada mediante el uso de la prueba t no apareado o de un solo sentido ANOVA comprueba con el post-test de Newman- Keuls .
Resultados En los estudios de contractilidad in vivo en ratas Los efectos de la terbutalina y el rolipram - B2 agonista fueron investigados in vivo. Las contracciones fueron inhibidas dependiente de la dosis por ambos compuestos . mximo efecto inhibidor del rolipram en ratas intactas fue 96.7 ? 3,1 error estndar de la media (SEM ) % ( CI50 = 0,8 0,1 mg / kg ; ? . Fig. 1a ) . Las inhibiciones mximas consigue con terbutalina + rolipram no fuera estadsticamente diferente en ratas intactas en el da 22 del embarazo ( ? 86,1 8,9 SEM % ; . Fig. 1b ) y en tratados con LPS ratas en el da 20 (89,0 % ; 9,5 SEM ? . Fig. 1c ) . En el caso de la combinacin , rolipram ( 500 mg / kg iv ) potenci el efecto de terbutalina , y este efecto prevaleci principalmente a las dosis bajas de terbutalina . En la presencia de rolipram y en la dosis ms baja de terbutalina ( 0,5 mg / kg ) , Sin embargo , la inhibicin de las contracciones fue significativamente mayor (P < 0,001 ) en las ratas tratadas con LPS ( 48,1 % 4,7 SEM ; ? . Fig. 1c ) que en las ratas intactas ( ? 33,3 1,4 SEM % ; . Fig. 1b ) . En ratas intactas a trmino , los valores de IC50 para la terbutalina ( IC50 = 2,94 ? 1,31 mg / kg ) no eran diferentes de la combinacin de terbutalina y rolipram ( CI50 = 3.53 ? 1,54 mg / kg ) . Del mismo modo , en las ratas tratadas con LPS en da 20 , los valores de IC50 para la terbutalina ( IC50 = 2.69? 0,98 mg / kg ) no eran diferentes de la combinacin de terbutalina y rolipram ( IC50 = 5,05 ? 2,71 mg / kg ) . En los estudios de contractilidad in vitro en humanos muestras uterinas La actividad uterina se caracteriz por las AUC de las curvas de concentracin-respuesta de uterino humano tiras . Tiempo de experimentos de control mostraron que el contracciones estimuladas oxitocina no disminuyeron significativamente a travs del experimento . La teofilina y rolipram reduce las contracciones inducidas por la oxitocina - un 24,9 ? 3.6 SEM % y 61,9 ? 4,5 SEM % , respectivamente . El efecto de contraccin de inhibicin del rolipram fue significativamente mayor que la de teofilina ( P < 0,001 ) (Fig. 2 ) . Los efectos de la combinacin de terbutalina y rolipram se ensayaron tambin . Mientras que la terbutalina solos inhibe las contracciones oxitocina estimulada por 71.6 ? 4.5 SEM % , en el embarazo a trmino , en el adicional presencia de rolipram M 10-6, las contracciones fueron inhibidas en un 78,3 ? 4,7 % de SEM (Fig. 3a ) . en parto prematuro , la mxima contraccin de inhibicin efecto de terbutalina solo era 39,7 ? 4,6 SEM % , pero este se increment a 63,5 ? 4,7 SEM % en presencia del rolipram . El efecto de 10-10 M terbutalina era ms que duplicado en presencia de 10-6 M rolipram ( P < 0,001 ) (Fig. 3b ) . niveles de cAMP en las muestras uterinas humanos Los niveles de cAMP en las muestras de tejido uterino humano de Se midieron el parto prematuro y de un embarazo a trmino en la presencia de 10-8 , 10-6 , 10-4 M terbutalina en combinacin con 10-6 M de rolipram . Niveles basales de AMPc (Slo 10-6 M de rolipram ) no fueron significativamente diferentes entre los grupos de natalidad embarazadas y prematuros plazo. Hubo un aumento dependiente de la concentracin de la terbutalina estimulado los niveles de cAMP en ambos grupos. en Concentracin de 10-6 M , terbutalina provoc significativa elevacin de los niveles de cAMP ( P < 0,01 ) en comparacin con los el nivel basal , en el grupo de parto prematuro. Adems , en 10-8 M concentracin terbutalina provoc significativa elevacin de los niveles de cAMP ( P < 0,01 ) en comparacin con los el nivel basal , tanto en el trmino y el parto prematuro grupos . En las muestras de nacimientos prematuros de los niveles de cAMP fueron significativamente mayores ( P < 0,05 ) en la presencia de M terbutalina 10-6, que en los que desde el embarazo a trmino. No hubo diferencias significativas entre los los grupos de 10-8 M o 10-4 M terbutalina ( fig. 4 ) . Estudios de Western blot Western blot revel la presencia de PDE4B y PDE4D en los tejidos uterinos de plazo y trabajo de parto prematuro . La expresin de PDE4B ( fig. 5a ) fue significativamente mayor en trabajo de parto prematuro que a trmino embarazo . La DO del PDE4D , sin embargo , fue significativamente mayor en los tejidos uterinos del trmino embarazos ( Fig. 5b ) que en trabajo de parto prematuro . discusin En vista de las relativamente altas tasas de mortalidad materna adversa y eventos fetales durante toclisis , y con la esperanza de mejorar el resultado perinatal, existe una creciente inters en los estudios experimentales en el uso de diferentes combinaciones de frmacos. Numerosos experimentos han sugerido las combinaciones de agentes tocolticos, tales como la PDE5 sildenafil inhibidor con el bloqueador de los canales de Ca2 + nifedipina, 16 el atosiban antagonista de la oxitocina con progesterona, agonistas b2-17 AR con nifedipina, 18 y agonistas b2-AR con gestagens.19 Ahora hemos probado los efectos tocolticos de combinaciones de la B2-AR terbutalina agonista y el inhibidor de PDE4 rolipram. Los agonistas b2 -AR ejercen una inmediata y profunda efecto sobre el muscle.20 liso uterino relajante Recientemente revisiones sistemticas publicadas (Lancet , Base de Datos Cochrane) estn de acuerdo en que los agonistas b2 -AR pueden retrasar la entrega por 48 h , pero la terapia de larga duracin con los agonistas b2 -AR a menudo falla. Las razones por las que la administracin a largo plazo con frecuencia conduce a un resultado teraputico ms pobres son una desensibilizacin inducida por medicamentos de la b2 -AR , y el cambios fisiolgicos en pregnancy.21 tarde, 22 A pesar de sus efectos secundarios ( taquicardia desfavorable y el riesgo de la hipertensin pulmonar) , los agonistas b2 -AR todava tienen un papel insustituible en therapy.23 tocoltico , 24 Por otro lado , el potencial efecto beneficioso de el inhibidor selectivo de PDE4 rolipram como tocoltico agente an no ha sido confirmada . Nos planteamos anteriormente evidencia de que el rolipram potencia el efecto tocoltico de terbutalina tanto en intacto y en mujeres embarazadas tratadas con LPS ratas , debido a la mayor levels.25 campamento en el presente estudio, nos propusimos investigar sus efectos en ratas embarazadas en vivo. La deteccin de la miometrial actividad in vivo se acompaa de la ventaja de permitir estudios de la eficacia de estos frmacos de acuerdo a los principios de pharmacology.26 integrador Los experimentos en ratas anestesiadas revelaron que la la co-administracin de rolipram potenci el uterusrelaxing efecto de la terbutalina . Este efecto fue ms pronunciado a dosis ms bajas de terbutalina . El grado de relajacin logrado con la primera dosis de terbutalina era de 2-2,5 veces mayor en el intacta y en el LPStreated ratas , respectivamente , cuando era coadministrar con rolipram . En cuanto a las tres primeras dosis de terbutalina , la combinacin fue ms eficaz en la tiempo de trabajo de parto prematuro inducida por LPS que en normales plazo , que est de acuerdo con nuestra anterior in vitro hallazgos . En experimentos humanos , teofilina ejerci una muy efecto limitado , de manera similar a los estudios anteriores sobre PDE4 transfectadas cells.27 El selectivo rolipram inhibidor de PDE4 , sin embargo , ha demostrado ser mucho ms eficaz en la inhibicin de las contracciones uterinas inducidas por la oxitocina . estos resultados se corresponden con hallazgos anteriores sobre el ser humano tero en embarazo.6 a trmino ,28 - 31 Bardou et al. reportado en el primero que los inhibidores de PDE potencian los efectos de agonistas b2 -AR en el miometrio humano a corto plazo en vitro.28 franova et al. investigado los efectos in vitro de la combinacin de rolipram y el agonista B2 - AR salbutamol , ambos administrados en una sola dosis de 10-4 M , en el miometrio humano en term.32 Se encontr que las contracciones inducidas por la oxitocina - fueron inhibidas por aproximadamente el 70 % por la combinacin de estos dos frmacos , aunque las dosis aplicadas fueron muy altas . Sin embargo , ningn estudio se ha realizado con rolipram y terbutalina en muestras humanas de parto prematuro. Rolipram tambin potenci el efecto tero - relajante de terbutalina en el corto plazo y el tero humano prematuro, siendo su efecto ms pronunciado en menor terbutalina concentraciones y en el nacimiento prematuro. Las conclusiones relativas los niveles de cAMP tejido estaban en armona con los resultados de los ensayos in vitro de la contractilidad en , lo que sugiere que la principal interaccin se produce en un intracelular nivel de cAMP. Estudios previos han demostrado que los cuatro Subtipos de PDE4 se expresan en la fraccin citoslica del trmino humano miometrio , 6 y PDE4 selectivos inhibidores han sido reportados para exhibir una mayor eficacia en la embarazada que en el miometrio no embarazada . 31 Las isoenzimas de PDE4 juegan un papel en procesos inflamatorios, 32 pero no se ha registrado ningn dato en cuanto a si estas protenas se expresan en la prematuro tero humano . Nuestro estudio de Western blot demostr la regulacin al alza de PDE4B en humanos muestras en el nacimiento prematuro. Esto bien podra ser una consecuencia de procesos inflamatorios que conducen en curso de trabajo de parto prematuro . La infeccin intrauterina ha sido reconocida como la causa primaria de delivery.33 prematuro En el parto prematuro , la expresin de PDE4D fue menos pronunciada que la de la PDE4B , que es similar a hallazgos anteriores en term.34 Por lo tanto , la inhibicin de la PDE4D probablemente no es necesaria para la toclisis efectiva , lo que permitira el desarrollo de PDE4Bselective inhibidores , con el beneficio de ningn efecto adverso efectos emticos . agonistas b2 - AR y los inhibidores de PDE4 pueden ser de gran valor para la toclisis , dado que tanto alivian la inflamacin y prolongar pregnancy.33 Aunque la expresin de PDE4 ha sido reportado en el cardiaco ventrculos , los inhibidores de PDE4 no produjeron ningn positivo efectos inotrpicos , que es una accin tpica de la PDE3 inhibitors.35 Adems del efecto favorable de la tocoltico por encima de combinacin , una menor incidencia de sideeffects cardacos Tambin se puede esperar . Dada la baja frecuencia de cesrea prematura secciones , creemos que todas las muestras prematura debe considerarse como una posibilidad casi nico para la investigacin. Reconocemos que nuestro tamao de la muestra es relativamente bajo , y las razones de dicha intervencin son diversas . Sin embargo , a pesar de la patologa diversa , las expresiones de PDE4B fueron siempre mayores en el tejidos prematuros , lo que sugiere que esta enzima puede ser considerado un objetivo fundamental para el desarrollo de frmacos . Llegamos a la conclusin de que las combinaciones teraputicas putativas de los agonistas b2 -AR y los inhibidores selectivos de PDE4 puede mejorar la eficacia de la terapia tocoltico humana. Rolipram solo muestra un fuerte efecto inhibidor in vivo, aunque, en la terapia humana una dosis tan altas pueden dar lugar a efectos secundarios graves. Por otro lado, la la co-administracin de rolipram en una dosis baja con terbutalina dado lugar a una relajacin tero equivalente a la que del rolipram solo. Tales combinaciones de frmacos tambin pueden tienen la ventaja de permitir la administracin de dosis ms bajas de agonistas B2-AR, retrasando de este modo la desensibilizacin de los receptores b2-AR. Partimos de que el desarrollo de nuevos inhibidores de PDE4B selectiva puede mejorar an ms la eficacia de la toclisis.