El producto final de la evolucin es la adaptacin: la adquisicin de nuevas caractersticas que permiten que el organismo afectado funcione mejor que sus antepasados en el ambiente en que en ese momento vive. Hay variaos tipos de adaptacin pero este captulo explica la adaptacin morfolgica. Un ejemplo de adaptacin morfolgica es el rabo prensil o agarrador que aparece en los monos, procinidos (kinkay), puercoespines, marsupiales, etc. -Todos los animales con rabo prensil son habitantes de las selvas, en donde un tercer brazo puede ser muy til para agarrarse de las ramas. Otro ejemplo es la convergencia en ser fusiforme (ms hidrodinmica) entre los peces, tiburones o mamferos (delfines, ballenas). Tambin la convergencia evolutiva entre las plantas Ocotilla y Audilla (parecidas morfolgicamente a pesar de ser de familias diferentes) y entre la alevilla y el colibr ( pico similar para alimentarse del mismo grupo de flores) Estos ejemplos son adaptaciones funcionales a las presiones selectivas comunes. A esta tendencia hacia la homogeneidad de caractersticas se le llama evolucin convergente si los animales envueltos no estn muy relacionados entre s. Evolucin paralela cuando la relacin entre los animales envueltos es ms estrecha -Ejemplo: larvas o renacuajos de sapos y ranas el renacuajo puede aparecer en diferentes familias de ranas con formas parecidas Concepto de Homologa: semejanzas que se mantienen, no importa el ambiente, y que tienen un origen y una embriologa en comn. -Aunque las homologas son ms o menos fijas y estables, tambin pueden ser, a la larga, afectadas por las presiones selectivas -La mejor manera para determinar si las estructuras son homologas: el origen y embriologa comn y una enervacin y vascularizacin paralela -Ejemplo: en las patas anteriores de los tetrpodos (aves, delfines, murcilago) Analoga (semejanzas funcionales, no tienen un origen comn) vs Homologa (estructuras heredadas) Tendencias Evolutivas Divergente Paralela Convergente A A A A A T
(formas diferentes) (evol al mismo tiempo) (misma morfologa)
S T S S S S Formas Intermedias: Therapsida ( reptiles del permiano y trisico) -Dieron origen a los mamferos y sus caractersticas son intermedios entre un grupo y el otro. Algunas caractersticas son: a. Presencia de ojo pineal b. Menos huesos craneales c. Hueso dentario (menor tamao) d. Dos cndilos occipitales e. Paladar secundario (ausente en reptiles, excepto cocodrilos) f. Posicin de las patas ( no eran laterales) -Hubo una evolucin de la articulacin mandibular y huesos del odo medio -Los terapsidos representan una transicin clara entre reptiles y mamferos. rganos Vestigiales- remanentes intiles de rganos o estructuras que en otros animales, tienen alguna utilidad funcional. - Tuvieron funcin en el pasado (nuestros antecesores los tenan) -Su presencia nos permite confirmar evolucin de tendencias en organismos de un mismo grupo -Ejemplos en humanos: apndice, las tetillas del varn, el pelo o lanugo en el embrin -Ejemplo: pelvis vestigial en culebra boa - las patas que tienen forma de espoln (extremidades posteriores en culebras ms primitivas) asumieron una nueva funcin, la de acomodar y estimular a la hembra en el acto de la cpula -Segn los bilogos: son estructuras homologas que no tienen funcin alguna (o tienen una funcin modificada) en los organismos que la poseen, pero que si han desempeado una funcin importante en sus antecesores
II. Morfologa del Embrin La yema es un material inerte y el desarrollo del embrin se efecta, exclusivamente, en la porcin protoplsmica y viva del huevo Luego de la fecundacin, el cigoto unicelular se divide, primero en dos clulas, estas dos en cuatro y as sucesivamente hasta que el cigoto se convierte en una bola hueca de clulas, la blstula. En huevos de poca yema (anfioxo), la segmentacin del cigoto es completa u holoblstica y las clulas resultantes son ms o menos del mismo tamao. En los huevos de mucha yema (pece telesteos, reptiles y aves) el citoplasma activo es un pequeo disco que descansa sobre la yema y la segmentacin es de tipo meroblstico (discoidal). Los anfibios y algunos peces son ms o menos intermedios entre estas dos condiciones y su segmentacin es holoblastica desigual en el sentido de que las clulas superiores son ms pequeas que las inferiores. Segmentacin holoblastica (Ej: Amia)- luego de formada la blstula ocurre invaginacin del blastocelo (cavidad interna de la blstula) y se forma la gstrula (estructura en forma de taza con dos estratos celulares, el ectodermo y el endodermo. Llamados epiblasto e hipoblasto durante las primeras etapas de desarrollo) y el arquentenio (estructura interna; tubo digestivo primitivo) que abre al exterior a travs del blastoporo (en el adulto la parte posterior del organismo) Luego de la gstrula se forma el mesodermo (aparece como pareja de bolsas en la parte dorsolateral del endodermo) Endodermo- da origen al revestimiento interno del tubo digestivo y a las glndulas asociadas con la digestin Ectodermo- da origen a la piel y sus derivados y al sistema nervioso En las aves y animales con abundante yema el proceso de segmentacin no puede cortar a travs del vitelo y se limita a un pequeo disco en el tope de la enorme yema. -En los mamferos la escasez de yema es resultado de un proceso de adaptacin. En los humanos el embrin se desarrolla en la masa celular interna. Eventualmente aparecen en ellas dos cavidades que quedan separadas por un doble estrato de clulas. La cavidad superior es el amnios, la inferior el saco vitelino y el doble estrato celular, el disco embrionario (donde se desarrollar el embrin). -Esta doble camada de clulas corresponde al ectodermo y endodermo y es comparable con el estado de gstrula de otros animales. Membranas Embrionarias (no son parte del embrin). Estas son las siguientes: 1. Amnios- rodea al embrin y lo mantiene sumergido en liquido protegindolo de danos mecnicos, a la vez que lo mantiene en un medio estable y de una concentracin qumica favorable 2. Corion- pegado al cascaron ( o a la membrana uterina) facilita el intercambio de gases adems de brindar cierto grado de proteccin 3. Saco vitelino- expansin sacciforme de la parte ventral del intestino, sirve para contener los productos alimenticios 4. Alantoide- sirve para contener los productos excrementicios En los mamferos, la nutricin del embrin es efectuada por la madre a travs de la placenta y tambin se encarga de eliminar las excreciones, por lo tanto, el saco vitelino y el alantoide son innecesarios. Estos son considerados los rganos vestigiales del embrin En los peces y tiburones las branquias estn vascularizadas por arcos articos. Mientras que en los reptiles, aves y mamferos no respiran por branquias (sino por pulmones). Sin embargo, los arcos articos aparecen en el embrin de todos estos vertebrados. Tambin el corazn de los mamferos pasa por etapas embrionarias durante las cuales se parece al de su antecesor. En los peces y tiburones el corazn est dividido en cuatro cmaras (tetracameral). En los vertebrados terrestres el corazn tambin es de cuatro cmaras, pero estas no corresponden a las 4 originales (de peces y tiburones). Durante las etapas ms tempranas del desarrollo embrionario, el embrin de estos vertebrados tiene un corazn tubular, con 4 cmaras consecutivas. Estas luego se doblan sobre si mismas formando una S que al continuar replegndose, asume finalmente la forma del corazn tetracameral. Faringula- etapa en la que el embrin posee un corazn tubular, bolsas farngeas, ranuras branquiales, arcos articos y somites. Esta etapa todos los vertebrados tienen ms o menos los mismos rganos y el mismo patrn anatmico bsico Estas similitudes pueden ser explicadas a base de que han heredado la condicin de sus antecesores Los principios generales de las homologas tambin le aplica a los invertebrados.
Otros puntos importantes: - Huevo amnitico o cleidoico- encerrados por una concha o cascarn - Genes Hox- determinan la polaridad del organismo. Su expansin ocurri luego de la evolucin de los nidarios alteres -El gen se expresa ntegramente, no importa dnde est localizado - Genes hometicos- Drosophila y Ratus
Captulo 12 Pruebas Paleontolgicas
La Fosilizacin El registro fsil es la prueba ms firme de la evolucin El registro geolgico est escrito en el lenguaje de los fsiles Su lectura y estudio es lo que permite al paleontlogo reconstruir la historia de la vida en la tierra Tipos de fosilizacin: 1. Permineralizacin- ocurre cuando las partes organicas del hueso van desapareciendo pero queda una matriz porosa que es penetrada por agua y ciertos minerales como calcio y slice. Se mantiene la forma exacta del organismo 2. Vaciado o cast- ocurre mayormente en zonas desrticas cuando el cuerpo del organismo desaparece y la roca solidificada a su alrededor queda como un molde fiel a sus contornos externos. El hueco es inundado por agua y minerales disueltos que adquieren la forma del organismo original, aunque nada revela de sus estructuras internas. 3. Carbonizacin- ocurre cuando los tejidos blandos son preservados como finas pelculas de carbn que se ven como siluetas ennegrecidas del animal preservado. Permite detectar fsiles como anemonas y medusas 4. Impresiones o moldes- ocurre cuando los restos han desaparecido, pero queda un trazo o contorno de su presencia anterior. Ej: huellas 5. Resina fsil- cuando quedan ejemplares perfectos de insectos, ranas y lagartijos conservados en mbar. Ej: mbar del Bltico con mamut y mosquitos preservados 6. Coprolitos- excrementos fosilizados 7. Gastrolitos- piedras del estmago fosilizadas La Secuencia Fsil ms conocido: Archaeopteryx La ordenacin de los fsiles es posible debido a que los sedimentos en los que aparecen los fsiles son depositados horizontalmente, los ms antiguos abajo y los ms recientes arriba Es decir, mientras ms profundo el sedimento donde se encuentras, ms antiguo es el fsil Un ciclo geolgico comprende el periodo durante el cual las masas continentales son elevadas, el tiempo durante el que la erosin acta sobre ellas y los sedimentos resultantes van siendo depositados en regiones ms bajas y finalmente el periodo de levantamiento. La presin ejercida sobre los sedimentos inferiores y el efecto aglutinante de las substancias qumicas disueltas consolidaran la roca (litificacin) y al cabo de los aos, aparecer como piedra caliza, con los fsiles ms antiguos en la camada ms profunda y los ms recientes en las ms superficiales. Dependiendo del origen de los sedimentos y los procesos envueltos en la sedimentacin y consolidacin de la roca, estas pueden clasificarse en roca sedimentaria qumica (piedra caliza, dolomita, evaporita, carbon) y roca sedimentaria detrital (conglomerado, arenisca, lutita y lodolita) Tambin podran acumularse estos depsitos en embalses de los propios ros llamados entonces fluviales Si la sedimentacin ocurre en un lago los depsitos son lacustres y si por efectos del viento, elicos Si la roca sedimentaria es sometida a grandes presiones (como en el movimiento orognico) o altas temperaturas que causen su ablandamiento y ulterior endurecimiento, su textura cambia y los fsiles pueden perderse parcial o totalmente. Esta es la roca metamrfica de los gelogos Otro tipo de roca es la gnea, es la que se derrite y luego se solidifica lentamente a bajas temperaturas, ya sea en la superficie (lava) o en las profundidades de la tierra (granito). Este tipo de roca casi nunca contiene fsiles. Los gusanos y celentreos (excepto los corales) no fosilizan. De entre los animales que fosilizan, los marinos y fluviales tienen la mayor oportunidad de aparecer como fsiles. Los terrestres cuyos restos no son cargados por los ros requieren condiciones ms especiales para su fosilizacin. Y de estos, solo los expuestos al efecto de la erosin y excavacin se descubren ocasionalmente por los gelogos. La Edad: Como Calcularla La edad de los fsiles se determina mediante el uso de isotopos radioactivos. Para determinar la edad de los fsiles los paleontlogos acuden a las regiones en donde los fsiles son ms abundantes La proporcin existente entre el elemento radioactivo presente y el producto de desintegracin da una edad aproximada del fsil Hay varios tipos de relojes radioactivos, estos son: 1. Carbono 14- nos permite contar de 100-100,000 aos. Este carbono emite rayos beta y se vuelvo no radioactivo a un ritmo constante (media vida 5,700). Estimas la edad del fsil a base del contenido de C14 que queda en l. Mientras menos tomos de C14 queden, menor ser la radioactividad y mayor ser la edad del fsil. En los fsiles que no quede C14 no pueden evaluarse por este mtodo, tienen que tener material orgnico. 2. Uso de espectrofotmetro de masas- permite contar directamente los tomos de carbono individuales provenientes de una muestras de solo miligramos. Permite determinar la edad de muestras de 70-100,000 aos. 3.Uranio 235 y 238- se desintegran a plomo (207 y 206). Se puede utilizar para determinar la edad de las rocas desde la formacin de la tierra hasta hace ms o menos 500 billones de aos, pero tiene la limitacin de que solo puede emplearse en rocas que contengan uranio (este solo se encuentra en depsito gneos). -La edad de la roca sedimentaria solo puede determinarse mediante el mtodo de uranio-plomo por estimados indirectos basado en la posicin de la roca sedimentaria con la gnea. gnea esta sobre la sedimentaria= gnea ms joven, gnea bajo sedimentaria= gnea ms vieja -Un mtodo ms novel consiste en la determinacin de la cantidad relativa de plomo y uranio encerrado en los cristales de circn incrustados en la roca lo que nos permite determinar la edad de la roca y el cristal. 4. Mtodo Potasio (K40)- Argn (Ar40) (ms preciso)- nos permite contar de 100,000- 4.6 billones de aos. Tcnica basada en que un isotopo radioactivo de potasio a travs del tiempo decae al gas argn, el cual queda atrapado en la estructura cristalina de la roca. La cantidad e argn se determina y se contrasta con la cantidad del isotopo de potasio que queda en la roca. Tcnica de mayor utilidad para los paleontlogos. Este mtodo es til cuando no hay material orgnico. 5. Mtodo argn- argn- modificacin precisa que solo requiere cantidades mnimas del material. Exige que los cristales volcnicos se bombardeen con neutrones en un reactor y cuando el ncleo de potasio en penetrado por stos, desplaza un protn, convirtiendo el potasio en un isotopo de argn que no existe en la naturaleza. El argn artificial y el que ocurre en la naturalmente en el cristal se miden y comparan lo que da una idea ms clara de la edad del fsil
Algunos de los mtodos usados para la determinacin de la edad no estn basados en tcnicas radioactivas. Uno de estos consiste en contar las lesiones causadas por la radioactividad de uranio 238 sobre los cristales o el vidrio. Pero la tcnica est limitada a rocas que contengan cristales Otro mide la velocidad a la que el fluoruro se incorpora al hueso durante el proceso de fosilizacin. Este mtodo fue el que sirvi para esclarecer el fraude del hombre Piltdown. El ms reciente es el del reloj de protenas o la racemizacion de aminocidos. Conociendo la tasa de racemizacion de los distintos aminocidos, se reduce el fsil a su contenido de amino cidos, se aade luego una substancia que cambie los aminocidos L (izquierda) y los aminocidos D (derecha) a substancias separables y medibles y a basa de esto se determina el tiempo desde que comenz la racemizacion (desde la muerte del animal) Con esta tcnica es mejor que la de C14 ya que se puede calcular la edad de fsiles mucho ms antiguos que lo que es posible medir con C14 Sin embargo, esta no es muy exacta debido a que el proceso de racemizacion es afectado por la temperatura. Su uso est limitado naturalmente a fsiles. Entre todas las tcnicas el error es de entre 3 al 10% (siguen siendo buenas) Inmensa mayora de los fsiles datan de los ltimos 600 millones de aos.
El Registro Geolgico En el en precambriano los depsitos sedimentarios son muy escasos. Sin embargo, se ha encontrado fsiles de lo que parecen ser bacterias, algas verdeazules y organismos plncticos unicelulares En el proterozoico abunda la roca sedimentaria y en el vendiano (periodo anterior al cambriano) se conocen algunos protozoarios, esponjas, anlidos, celentreos, etc. La Invasin y Conquista de la Tierra Durante el devoniano, uno de los grupos ms abundantes de peces eran los crosopterigios, de los cuales existan 2 subrdenes distintos: celencantinos, que todava tienen representantes vivos (Latimeria) y los ripidistios Los anfibios se derivan de crosopterigios ripidistios en el Devoniano. Durante la invasin de la tierra ocurren dos pre adaptaciones importantes: aletas lobuladas y pulmn primitivo derivado de la vejiga natatoria (modula la profundidad de los peces)
Entre los primeros anfibios y crosopterigios no hay diferencias apreciables. Se asemejaban en: o -Ichthiostegalia (crneo a techo del pez) o -dientes circunvolutos (labirintodontios) o -aleta caudal con radios o -escamas en superficie ventral y rabo (anfibios modernos carecen de esto) -algunos con huesos operculares Hay evidencia fsil que indica que las muecas (patas) se desarrollaron en adaptacin a la necesidad de los anfibios a levantarse y empujarse para capturar las presas (Ej: Ichtiostega- anfibio) Problemas de los primeros tetrpodos: desecacin del agua en los lugares donde vivan y la acumulacin de desechos nitrogenados (amonia, urea, cido rico) La toxicidad del amoniaco impide que pueda ser eliminado por los riones, el agua que se requerira para llevar a efecto su eliminacin no estaba al alcance de los tetrpodos. Huevo cleidoico (amnitico) es la clave de conquista terrestre permanente. Es una adaptacin a la vida terrestre ya que los embriones deben ser provistos de agua, alimento y sales que requieren para su desarrollo Las estructuras que hicieron posible la vida en tierra (pulmones y patas) fueron adquiridas por animales acuticos como parte de la radiacin adaptativa a los cuerpos de agua peridicos que existan en el devoniano.
Captulo 13. Pruebas Bioqumicas y Moleculares de la Evolucin Introduccin Carlos Linneo ide un mtodo para clasificar y catalogar plantas y animales basado exclusivamente en la similitud estructural. o Confunda homologas con convergencias: Ej. Ballenas eran catalogadas peces Especies que componen un gnero son similares son similares porque heredaron esas similitudes de un ancestro en comn. o Dos gneros en una misma familia comparten caracteres que heredaron del ancestro de ambos. o Ej. Filogenia de las aves ratitas y la filogenia molecular
El DNA: Su Hibridacin Gen- secuencia de nucletidos en la cadena de DNA que determina la secuencia linear de cidos amnicos en un polipptido. Genes actan a travs de las enzimas. Sistema de codificacin provisto por el DNA es el que garantiza que esas enzimas se produzcan cuando se necesitan. Las clulas slo expresan una fraccin determinada de la informacin gentica que contienen. Tcnica de Hibridacin: Consiste en derretir en DNA de una especie y ver con cuanta facilidad hibrida con el DNA de otra. Pasos: o Desnaturalizar Calentar una solucin de DNA en agua hasta cerca del punto de ebullicin o Inmovilizar o atrapar bandas individuales pasndolas por filtros membranosos y luego se dividen en pequeos fragmentos. o Aadir bandas sencillas y fragmentadas de DNA de la misma especie (A) y de la especie con la que se quiere comparar (B). Fragmentos individuales tienen 500 nc o DNA de la especie A se marca con istopo radioactivo y la cantidad se mantiene constante, cantidad de B varia en cada experimento. o Incubar Annealing (Templado): Se bajaa la temperatura para revertir el proceso las bases de restablecen o DNA sobrante se lava de la solucin o Determinar la cantidad de segmentos libres que se han emparejado con el DNa atrapado en el filtro membranoso Mientras mayor sea el nmero de secuencias de nc emparejados, mayor es la similitud de las instrucciones genticas y mayor la relacin taxonmica entre las especies comparadas. (Ver figura XIII-2 Pag. 314) Se puede determinar el grado de relacin entre las especies comparadas determinando cuan fcil es separar las bandas del DNA hbrido. Pasos: o Calentar el DNA hbrido a 1 o C cada 2-3 min o Colectar, a intervalos regulares, las bandas sencillas o Se traza una grfica de la proporcin del DNA disociado a cada temperatura o Proporcin de nucletidos no complementarios se estima comparando la curva de disociacin del DNA hbrido con el control (DNA no hbrido) Estabilidad trmica (ET): temperatura a la cual el 50% del DNA hbrido se ha disociado Diferencia (ET o ) entre la ET del hbrido y la del control es proporcional a la proporcin de nc sin parejas complementarias en el DNA hbrido.
Las Tijeras Moleculares (Las Enzimas Restrictivas) Las endonucleasas de restriccin existen en las bacterias (a veces slo en las infectadas con fagos) en donde sirven para atacar el DNA extrao y cortarlo en segmentos cortos. Experimentalmente: o Cortan DNA en diferentes puntos o Catalizan el corte de los enlaces qumicos que unen cadenas DNA-RNA y nc individuales o Reconocen secuencias palindrmicas Los cortes pueden ser limpios o pegajosos Cortes pegajosos facilitan insercin de fragmentos de DNA en fagos, plsmidos u otros vectores de DNA El hombre comparte un nmero mayor de cortes con el chimpanc y el gorila. o Ej. EcoRI
DNA y Sntesis de protenas Secuencia lineal de nucletidos en el DNA determina secuencia lineal de aa en la protena. Sntesis de protenas es en el citoplasma DNA RNA ~ Transcripcin~ RNA polimerasa RNAprotenas ~ Ribosomas Transcriptores se degradan por ribonucleasas La mayor parte del RNA celular consiste de hebras sencillas pero a veces de forman hairpins o helicoides DNA-RNA Transcripcin: o Comenzando con el promotor, la polimerasa separa dos bandas del DNA y selecciona una de ellas para copiarse. (Banda con sentido) o Continua hasta que se aade secuencia de terminacin. o Adems de RNAm, tambin hay genes que codifican para RNAr y RNAt, son parte de la maquinaria que traduce el RNA a protenas. Traduccin: o RNAt recoge los aa del sistema y los lleva a los ribosomas en donde su tripleta de nucletidos (llamada anticodn) se empareja con la secuencia complementaria del codn. o Traduccin comienza cuando un ribosoma y un RNAt con un anticodn se ata a un RNAm que tiene la tripleta AUG en la posicin inicial. (Metionina) o Termina con seal de terminacin. o Traduccin procede de 5-3 en el RNAm y la protena crece del lado amnico al carboxlico.
Las Diferencias en las Secuencias de los cidos Amnicos y de los Nucletidos Citocromo C o Pigmento respiratorio de naturaleza enzimtica, que est presente en todos los organismos que utilizan oxgeno en su respiracin. o 100 aa o 20% de las posiciones en la cadena no pueden ser sustituidas y siempre contienen los mismos aa, sin importar cual sea el organismo estudiado. o El cerdo, la vaca y la oveja, miembros del orden Artiodactyla, tienen citocromos C idnticos, pero el caballo, Perissodactyla, difiere de stos en tres posiciones de la cadena. o Hombre difiere del mono Rhesus en una sla posicin, del perro por once y del caballo por doce. (Ver figura XIII-7) o Las posiciones invariables de la molcula de citocromo Cmuestran una homologa equivalente a la de la estructura interna de las extremidades, mientras que las variables son el resultado del proceso de adaptacin a las varias condiciones a las que los diferentes organismos estn sometidos.
Hemoglobina o Compuesta de 4 cadenas polipeptdicas (2 alpha y 2 beta idnticas) o 140 aa/cadena o Entre el hombre y el gorila, slo hay un punto de diferencia en la alpha y uno en la beta. o La mutacin de un solo nucletido es suficiente para ocasionar efectos considerables en el individuo afectado.
Las Alteraciones en la Secuencia de Nucletidos Grado de diferencia o distancia entre dos polipptidos puede determinarse de 2 maneras: o Contando el nmero de aa distintos en las varias posiciones o Contando el nmero mnimo de substituciones de nc necesarios para causar la substitucin del aa. (Distancia mutacional) Protenas evolucionan a diferentes velocidades. Para determinar la relacin entre formas ntimamente relacionadas se deben utilizar protenas que evolucionen ms rpido: o Anhidrasa carbnica o Fibrinopptidos Protenas parlogas: comienzan su evolucin independientemente tan pronto ocurre la duplicacin de un gen. Protenas ortlogas: comienzan a evolucionar independientemente al momento de la separacin de las poblaciones.
Otras tcnicas Electroforesis o Tcnica consiste en liberar las proteeinas de un tejido mediante su homogenizacin y poner la muestra en el centro de una placa de gel permeada por un amortiguados acuoso. o Gel retrasa la migracin de las protenas. o Migracin depende de carga elctrica, forma y peso molecular. o Luego de la migracin, se remueve la gel y se tie para hacer visibles las bandas de protenas, se rastrean con luz UV o se traza una curva de absorbancia. o Intensidad del campo elctrico, pH del amortiguador y tiempo de duracin y la naturaleza del gel pueden variarse para lograra mayor definicin. o Las tcnicas electroforticas permiten saber cuantos loci son fijos o invariables en una poblacin, cuantos son variables y cual es el grado de polimorfismo entre stos. (Ver figuras XIII-9 y XIII-10 pg. 326-327) o Solamente los variantes allicos en los que se afecta la carga elctrica de la protena son detectados por la electroforesis. o Tcnicas electroforticas pueden extenderse a poblaciones si se pretende determinar diferencias genticas entre estas. El grado de diferenciacin proteica entre estas ser el grado de diferenciacin gentica o Casi siempre, las diferencias electroforticas son mayores entre las especies que entre las poblaciones de una misma especie, o entre las semiespecies. o Las protenas del hombre son idnticas a las del chimpanc (dos especies son electroforticamente idnticas en 50% de los loci para las enzimas y sus DNA difieren en slo 33 de cada 3,000 parejas de nc) Serologa e Inmunogentica o Serologa sistematica = mtodo ms antiguo y preciso o Se basa en la comparacin de los anticuerpos producidos por diferentes especies contra la misma protena. o Mtodo de precipitina: Se inyecta repetidamente suero sanguneo de un animal, en otro que forme anticuerpos contra l. Se remueve una muestra de sangre y se separa el suero de los corpsculos. o El suero contendr los Ac producidos por el receptor, y como es un suero que corresponde a otros suero, se conoce como antisuero. Se produce un precipitado blanco si al mezclar nuevamente suero y antisuero del mismo organismo, en este caso la reaccin es homloga Se produce precipitado blanco al mezclar suero y antisuero de los organismos que se estn comparando, en este caso la reaccin es heterloga. Si no hay reaccin, no hay relacin entre los organismos comparados. A mayor reaccin, mayor relacin. La cantidad de Ag-Ac se puede medir con un espectofotmetro o un fotonreflectmetro de Libby. Al mtodo serolgico que utiliza una sola concentracin del Ag, se llama unidimensional o de punto sencillo.
o Inmunodifusin o Prueba de Outcherlony: Tcnica consiste en poner en contacto dos Ag y el antisuero correspondiente, en un bloque de agar-gel y determinar el grado de difusin inmunolgica que existe en el gel. Los dos Ag se ponen en dos pequeos receptculos alrededor de la placa y el antisuero va en un tercer receptculo. Si el Ag homlogo tiene componentes iguales al heterlogo se precipita formando una banda de V invertida. Si faltan componentes, la reaccin es parcial y se produce una banda en forma de espuela.
o Fijacin microcomplementaria: Pasos: Protena muy purificada se inyecta a un conejo en dosis mltiples para producir antisuero Antisuero y protena se mezclan con complemento en dilucin serial para producir mximo de reaccin Complejo residual se hace reaccionar luego con los corpsculos sensibilizados, y el grado de lisificacin se determina con un espectrofotmetro. A mayor grado de lisificacin, menor la cantidad de complemento enlazado. El grado a que el Ag, Ac y complemento se enlacen, est relacionado con la similitud en las secuencias de cidos amnicos entre la protena usada para producir el antisuero y la que reacciona con el Ac. Proteeinas ortlogas similares enlazan ms complemento que otras no tan similares.
o Inmunoelectroforesis
o Radioinmunologa Ms efectiva para obtener info gentica sobre las protenas fsiles
o Inmunoreactivacin Se emplea para ver el grado de pureza de los antgenos King y Wilson encontraron que 44 protenas de humanos y chimpancs son 99% idnticas Diferencias en el grado de duplicacin son responsables del 27% de las diferencias. Alteraciones individuales son responsables de 1.2%.
Tcnicas discutidas en las presentaciones: 1. Marcadores de RFLPs a. Se analizan los alelos de RFLPs 2. Chromosome Walking a. Se usa para identificar genes 3. PCR 4. Secuenciacin del DNA 5. Southern Blot 6. DNA Microarrays