UNIVERSIDADE DE COIMBRA

FACULDADE DE CINCIAS E TECNOLOGIA

DEPARTAMENTO DE CINCIAS DA VIDA




EFEITO DAS HORMONAS CIDO GIBERLICO (GA
3
) E
CIDO ABSCSICO (ABA) NA GERMINAO DE
SEMENTES

Relatrio referente s Prticas de Fisiologia Vegetal (FV HV5)
Turma TP 2





Carolina Santos
Elder Jales
Juliana Rodrigues
Tiago Mendes


Coimbra
2011/2012
INTRODUO

A planta faz muito mais que aumentar simplesmente sua massa em volume
medida que cresce. Ela diferencia-se, desenvolve-se e adquire forma produzindo muitos
tipos de clulas, rgos e tecidos.
Sabe-se que o crescimento e o desenvolvimento das plantas so controlados por
fatores internos e externos. Entre os fatores extrnsecos que influenciam no crescimento
e desenvolvimento das plantas, destacam-se a temperatura, a luz, a gravidade, etc. Entre
os fatores intrnsecos podemos destacar o papel das hormonas vegetais.
As hormonas vegetais, tambm denominadas de fito-hormonas, so substncias
que esto relacionadas com o crescimento, algumas agindo no processo inibitrio,
outras o estimulando, o que as difere das hormonas animais, que tm a funo de
coordenar diferentes atividades dos vrios tecidos e rgos, e so transportadas pelo
sangue. No caso das hormonas vegetais, algumas so transportados por difuso, outras
pelo xilema, ou ainda de clula a clula.
As giberelinas so hormonas vegetais que actuam numa vasta gama de funes
reguladoras nas plantas. Estas tm vrios efeitos:
- alongamento dos caules (atravs da estimulao de divises celulares, controlo
do ciclo mittico e desencadeando a expanso celular);
- quebra na dormncia das sementes (especialmente nas espcies que necessitam
de muita luminosidade);
- induo da produo de enzimas necessrias mobilizao e degradao de
reservas das sementes (como a -amilase).
Hoje sabe-se que as giberelinas possuem funes muito importantes na planta.
Se as auxinas provocam o crescimento de certa forma normal, as giberelinas provocam
o crescimento um pouco mais acelerado e acentuado, sendo que diversos problemas de
crescimento dos vegetais (nanismos) so ocasionados devido perda da capacidade de
formar essa hormona.
As giberelinas so produzidas nos tecidos jovens do sistema caulinar e sementes
em desenvolvimento, sendo transportadas posteriormente pelo xilema e floema. Alm
de acelerar o crescimento e a distenso celular, as giberelinas tambm estimulam a
germinao das sementes, o desenvolvimento da florao e a formao de frutos
carnosos.
A giberelina mais utilizada o cido giberlico, conhecido por GA3.
Comercialmente, essas hormonas auxiliam no desenvolvimento de frutos grandes, sem
semente e soltos entre si, como no caso das plantaes de uvas; alm disso, eles podem
ser usados em substncias que agem como fertilizantes, j que as giberelinas quebram a
dormncia das sementes, promovendo o crescimento do embrio e a emergncia da
plntula.
O cido abscsico (ABA) um outro tipo de hormona vegetal. Ele pode inibir a
germinao das sementes, o crescimento das plantas e induzir a dormncia. O
tratamento de sementes maduras com ABA conduz inibio da germinao das
sementes. Este estado de dormncia imposta pode ser mantida por vrios dias se as
sementes permanecerem em contacto com a hormona. Quando o ABA for removido e as
sementes lavadas, elas retomam a germinao. Isto significa que a inibio da
germinao das sementes imposta pelo ABA reversivel. O efeito do ABA tambm
pode ser parcial ou totalmente contrariado pela aplicao simultnea de giberelinas e
citocininas.
O ABA inibe vrios processos de crescimento, mas seu efeito mais marcante
est associado dormncia de gemas de plantas lenhosas e queda natural de folhas e
frutos. Alm desses efeitos responsvel pela inibio da germinao de muitas
sementes e provoca inibio de florao em algumas plantas de dias longos.
Os efeitos retardantes dos inibidores naturais nos processos de crescimento
parecem envolver interaes com os promotores do crescimento. Essas interaes so
conhecidas ao nvel fisiolgico, onde certos inibidores agem como antagonistas dos
promotores. o caso, por exemplo, do antagonismo entre as giberelinas e o cido
abscsico na dormncia de gemas e das auxinas e cumarinas no crescimento.










EXPERINCIAS REALIZADAS

A. Efeito do cido giberlico no alongamento dos hipoctilos de alface (Lactuca
sativa);
B. Induo de dormncia de sementes pelo cido abscsico: Sementes de nabo
(Brassica napus);
C. Interao de hormonas na germinao de sementes.


OBJETIVOS
- Etapa A Efeito do cido giberlico no alongamento dos hipoctilos de alface
(Lactuca sativa):
Observar o efeito que o GA3 exerce sobre o crescimento dos hipoctilos de
alface;
Relacionar o comprimento mdio do hipoctilo com a concentrao da hormona
utilizada.

- Etapa B Induo de dormncia de sementes pelo cido abscsico em sementes de
nabo (Brassica napus):
Observar o efeito de induo de dormncia nas sementes promovido pelo ABA;
Determinar a concentrao de ABA capaz de inibir a germinao de pelo menos
50% das sementes.

- Etapa C Interao de hormonas na germinao de sementes:
Verificar se ocorre interao entre as hormonas ABA e GA3 no processo de
germinao de sementes de nabo;
Determinar a percentagem mdia de germinao das sementes em cada
tratamento.

PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
Etapa A
Materiais:
Sementes de alface (Lactuca sativa);
Solues de cido giberlico (GA3) 10-4; 10-5; 10-6 e 10-7M;
Caixas de Petri;
Discos de papel de filtro.
Foram colocadas 200 sementes de alface a germinar, sob luz difusa e
temperatura ambiente, num copo com cerca de 30 mL de gua destilada durante 1-2
dias. Aps as razes atingirem um comprimento de cerca de 5 mm, foram selecionadas
plantas que possuam razes do mesmo comprimento, de modo que 20 delas foram
transferidas para caixas de Petri contendo 8 mL de gua, o que se constituiu no controlo,
ou de solues com as diferentes concentraes de GA3.
As sementes foram ento deixadas a desenvolver, e ao fim de 3-4 dias foi
medido o comprimento de seus hipoctilos (poro de caule compreendida entre a base
da raiz e os cotildones), o qual foi devidamente registrado. Foi construdo um grfico
que traduzisse a relao entre o logaritmo da concentrao da hormona e o comprimento
mdio do hipoctilo.
Etapa B
Materiais:
Sementes de nabo (Brassica napus);
Solues de ABA (0; 1; 5; 10; 20 mg/L);
Caixas de Petri.
Discos de papel de filtro.
Antes do incio da experincia, sementes de nabo foram deixadas em gua
destilada por 24 horas, temperatura ambiente. Aps esse perodo, grupos de 20
sementes foram tranferidos para caixas de Petri forradas com papel de filtro e contendo
10 mL das diferentes concentraes de ABA e incubadas temperatura ambiente no
escuro. Foram feitas duas rplicas para cada tratamento.
As sementes germinadas foram ento contadas a cada 24 horas, durante 3 dias,
tendo a sua percentagem de germinao determinada. Considerou-se a semente de nabo
germinada quando sua radcula atingiu um comprimento de 2 milmetros. Determinou-
se a percentagem de germinao mdia para cada soluo. Foram elaborados grficos
que expressassem a evoluo da germinao nas diferentes concentraes.
Etapa C
Materiais:
80 sementes de nabo (Brassica napus);
Soluo de GA
3
mais eficiente quanto ao alongamento dos hipoctilos de alface
(10
-6
M);
Soluo de ABA que inibiu a germinao de pelo menos 50% das sementes de
nabo (5mg/L);
Caixas de Petri;
Discos de papel filtro.
O procedimento realizado para a etapa C semelhante ao que foi feito para a
etapa B. A nica diferena que, desta vez, se utilizou uma combinao das hormonas
anteriormente testadas, GA
3
e ABA
,
nas concentraes que apresentaram os melhores
resultados, 10
-6
M e 5 mg/L, respectivamente. Tambm se preparou uma caixa de Petri
apenas com GA
3
e outra apenas com ABA, alm de outra apenas com gua destilada,
constituindo o controlo. Da mesma forma que a experincia anterior, as caixas foram
incubadas temperatura ambiente e no escuro, e foram contadas as sementes
germinadas durante trs dias consecutivos. Os dados obtidos serviram de base para a
construo de tabelas e grficos que traduzem os resultados obtidos.

RESULTADOS

Etapa A
Na primeira etapa do conjunto de experincias realizadas pretendeu-se verificar
a influncia de diferentes concentraes de cido giberlico (GA3) no alongamento do
hipoctilo das sementes de alface, onde j tnhamos cincia da sua aco como
estimulador do alongamento caulinar.
Ao fim do perodo experimental, as sementes se encontravam conforme
representado na Figura 1.


Figura 1: viso geral das caixas de Petri aps o trmino da etapa A da experincia.
Ao trmino da experincia, os valores mdios do comprimento do hipoctilo nas
diferentes concentraes de GA3 deram origem ao grfico da Figura 2. A unidade da
concentrao do cido giberlico utilizada foi o molar (M), e o comprimento do
hipoctilo dado em milmetros (mm).

0,0
5,0
10,0
15,0
20,0
25,0
Mdia do comprimento dos hipoctilos nos diversos
tratamentos
gua
GA3 10 -3
GA3 10 -5
GA3 10 -6
GA3 10 -7
Figura 2: grfico a relacionar a mdia do comprimento dos hipoctilos de Lactuva
sativa com a concentrao de GA3 utilizada.
Foi tambm elaborado um grfico correlacionando o comprimento mdio do
hipoctilo com o logaritmo da concentrao da hormona em questo, o qual est
representado na Figura 3.



Dessa forma, verificamos que a concentrao mais eficiente no alongamento dos
hipoctilos de alface foi a de 10
-6
M.
Etapa B
Na etapa B procurou-se verificar a que concentraes de cido abscsico pelo
menos 50% das sementes de nabo teriam sua germinao inibida. Foram realizadas duas
rplicas para cada tratamento, cujo total de sementes germinadas em cada rplica est
descrito na Tabela 1.





0
5
10
15
20
25
0 7 6 5 4
C
o
m
p
r
i
m
e
n
t
o

d
o
s

h
i
p
o
c
o
t
i
l
o
s

(
m
m
)

[GA3] (10^-x M)
Figura 3: grfico a relacionar a mdia do comprimento dos hipoctilos de Lactuva sativa
com o logaritmo da concentrao de GA3 utilizada.
ABA 0 mg/L 1 mg/L 5 mg/L 10 mg/L 20 mg/L
Rplica 1 11 15 0 0 0
Rplica 2 19 18 5 0 0
TOTAL 30 33 5 0 0

Tabela 1 Total de sementes germinadas por tratamento em cada rplica

A percentagem de germinao das sementes em cada tratamento tambm foi
calculada para cada rplica, e esto descritos nas Figuras 4 e 5.










Etapa C
Finalmente, na etapa C, foram utilizados os dados obtidos nas duas etapas
anteriores para montar uma experincia na qual pudessem ser observados os efeitos
conjuntos do cido giberlico e do cido abscsico no processo de germinao das
sementes. Ao longo de trs dias o nmero de sementes germinadas em cada tratamento
0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
80%
0 mg/L 1 mg/L 5 mg/L 10 mg/L 20 mg/L
Percentagem de germinao das sementes de nabo - rplica 1
Rplica 1
Figura 4: grfico a relacionar a percentagem de germinao das semenets de Brassica napus com a
concentrao de ABA utilizada; rplica 1.
0%
20%
40%
60%
80%
100%
0 mg/L 1 mg/L 5 mg/L 10 mg/L 20 mg/L
Percentagem de germinao das sementes de nabo - rplica 2
Rplica 2
Figura 5: grfico a relacionar a percentagem de germinao das semenets de Brassica napus com a
concentrao de ABA utilizada; rplica 2.
foi anotado, e os dados recolhidos serviram de base para a confeco da Tabela 2 e da
Figura 6.









0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
1 Dia 2 Dia 3 Dia
Comparativo da germinao das sementes de nabo
gua ABA GA3 ABA+ GA3
gua ABA GA
3
ABA+ GA
3

1 Dia 17 10 12 13

2 Dia 18 13 16 17

3 Dia 19 13 18 17

Mdia 18 12 15,3 15,6
Tabela 2 nmero e mdia de sementes germinadas por cada tratamento.
Figura 6: grfico a relacionar a percentagem de germinao das semenets de Brassica napus com a
aplicao de GA
3
, ABA, e uma combinao das duas hormonas, ao longo dos trs dias de
experimentao.
DISCUSSO E CONCLUSES
De acordo com com a literatura disponvel, possvel inferir que ABA e GA
parecem desempenhar funes antagnicas na semente. Enquanto ABA responsvel
por inibir a germinao e induzir a dormncia, o GA
3
conhecido por estimular o
desenvolvimento e desempenha um papel chave na liberao de da dormncia e
promoo da germinao.
Entretanto, sabido que, mais do que a ao das hormonas em separado, o
balano entre as concentraes de ambos frequentemente mais crtico na regulao do
processo de desenvolvimento. ABA e GA
3
atuam em diferentes pocas do
desenvolvimento, de modo que os seus efeitos antagnicos no resultam
necessariamente de uma ao direta. No entanto, como se tentou demonstrar no presente
trabalho, foi verificado que uma adio simultnea de GA + ABA capaz de inibir os
efeitos promotores de germinao. (KUCERA, COHN e LEUBNER-METZGER, 2005;
EVANS e FRATIANNE, 1977, CARNEIRO et al, 2001).
Em plantas normais, verifica-se que ocorrem picos de concentrao de ABA e
GA
3
em determinadas pocas do processo. O pico do ABA ocorre durante a maturao
da semente, onde a hormona atua como um forte inibidor da germinao. medida que
a semente vai aproximando-se da sua maturidade, os nveis de ABA diminuem, e os de
GA aumentam, isto , a relao ABA/GA cai, o que fundamental para que a
germinao.
Em nosso trabalho, mesmo no tendo sido possvel verificar-se uma forte
inibio, ainda foi possvel constatar os efeitos da adio do cido abscsico junto com o
GA
3
esperados de acordo com as literatura. Observou-se que a percentagem das
sementes que germinaram no tratamento conjunto com gua e GA
3
foi menor do que as
que foram tratadas apenas com o GA
3
(figuras 6 e 7). Adicionalmente, as sementes
tratadas apenas com o ABA apresentaram a menor percentagem de germinao, o que
confirma a sua atuaco como inibidor do desenvolvimento.
Alm da constatao da atuaco do ABA como inibidor, a partir do conjunto de
experincias efetuado possvel perceber tambm que o GA
3
tem um efeito adicional de
proteger as sementes da ao inibitria do ABA, o que se constata atravs da anlise da
Figura Y, onde se pode verificar que a quantidade de sementes germinadas na presena
de GA
3
e ABA maior do que a quantidade de sementes que germinam apenas em
presena de ABA.




possvel tirar como concluses, portanto, que, em conjunto, ABA possui efeito
de interferncia no tocante germinao de sementes, sendo os efeitos do GA
3

insuficientes para superar a sua ao por completo (CARNEIRO et al, 2001) mas o GA
3

tambm exerce o que se pode chamar de efeito protetor dos efeitos do cido abscsico
sobre as sementes de nabo, de forma a abrandar a sua aco, o que explica o fato da
germinao com ABA + GA
3
ainda possuir valores considerveis. Isso apenas refora
mais uma vez, que o balano entre as duas hormonas durante o desenvolvimento
crucial para que a germinao ocorra de forma eficaz.

0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
80%
90%
100%
gua ABA GA3 ABA + GA3
Percentagem de
germinao
Figura 7: grfico a relacionar a percentagem de germinao das semenets de Brassica napus com a
aplicao de GA
3
, ABA, e uma combinao das duas hormonas; dados obtidos ao fim da experincia.
REFERNCIAS
CARNEIRO, L. M. T. A. et al. (2001). cido abscico e Giberlico na
germinao de sementes de Alfafa (Medicago sativa L.). Revista Brasileira de
Sementes, vol. 23, n2, p.177-185.
COSTA, R. C. L. cido Abscsico: inibidor do crecimento dos vegetais e
hormnio anti-estresse. Universidade Federal Rural da Amaznia. Disponvel
em
http://webcache.googleusercontent.com/search?q=cache:jkcR2kvk6Q4J:www.us
adesign.com.br/robertocezar/informa%C3%A7%C3%B5es%2520do%2520site/
aulas%2520da%2520graduacao%2520de%2520fisiologia%2520vegetal/AULA
S%2520TE%C3%93RICAS/Horm%C3%B4nios%2520textos/Horm%C3%B4ni
os%2520Vegetais%2520ABA.pdf+&cd=1&hl=pt-PT&ct=clnk&gl=pt. Acesso
em 30.05.2012
CUNHA, R.; CASALI, V. W. (1989). Efeito de substncias reguladoras de
crescimento sobre a germinao de sementes de Alface. Rev. Bras. Fisiol.
Vegetal 1(2): 121-132.
EVANS, R. C.; FRATIANNE, D. G.; Interactions of applied hormones in the
germination of Lepidium virginicum seeds. Ohio J. Sci. Ohio, 77 (5), p. 236-239,
1977.
GUIMARES, M. A.; DIAS, D. C. F. S.; LOUREIRO, M. E. Hidratao de
sementes. Revista Trpica Cincias Agrrias e Biolgicas. Vol. 2, n 1, p. 31,
2008.
KUCERA, B.; COHN, M. A.; LEUBNER-METZGER. Plant hormone
interactions during seed dormancy release and germination. Seed Science
Research. Louisiana, 15, p. 281-307, 2005.
LACERDA, C. F.; FILHO, J. E.; PINHEIRO, C. B. Dormncia e germinao.
In: Fisiologia Vegetal. Fortaleza, setembro de 2007, p. 333-352. Disponvel em
http://www.fisiologiavegetal.ufc.br/APOSTILA/DORMENCIA_GERMINACA
O.pdf. Acesso em 31.05.2012.
TAIZ, L.; ZEIGER, E. Fisiologia vegetal. 3ed. Porto Alegre: Artmed, 2004.