PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO: PLANIFICACIN

INTRODUCCION
Las plantas que crecen en la naturaleza tienen tres fuentes esenciales para su
nutricin. Los nutrientes minerales los obtienen, junto con el agua, desde el suelo
a travs del sistema radical. El dixido de carbono atmosfrico es utilizado en el
proceso de la fotosntesis para proveer carbono como fuente bsica de energa;
por ltimo, el cuerpo de la planta, utiliza los carbohidratos y nutrientes para
sintetizar las vitaminas y sustancias de crecimiento esenciales para su crecimiento
y desarrollo normal (Pierik, 1984).
El cultivo in vitro permite el crecimiento y desarrollo de material vegetal en
recipientes que lo separan del ambiente exterior y lo mantienen en condiciones
controladas y aspticas. Entre las diversas tcnicas de cultivo in vitro, la
micropropagacin consiste en la produccin clonal de vegetales a partir,
generalmente, de pices o explantos nodales de una planta madre. La gran
produccin de nuevas plantas se ve favorecida gracias al rpido crecimiento del
material vegetal in vitro y a la proliferacin de tallos durante los subcultivos
(Gamborg y col 1976).
Los requerimientos para que un tejido vegetal crezca in vitro, en general, son
similares a aquellos de las plantas intactas creciendo en la naturaleza. Sin
embargo, en la mayora de los casos slo se cultivan tejidos aislados o una parte
pequea de los rganos de la planta; estos tejidos u rganos aislados carecen de
la capacidad para sintetizar sus propios carbohidratos, la mayora de las
vitaminas, y las sustancias de crecimiento vegetales. Por lo tanto, todas las
sustancias que necesitara una planta intacta en la naturaleza deben ser
suministradas artificialmente a los tejidos cultivados (Navarro, 1979).
El establecimiento y crecimiento exitoso de un tejido vegetal in vitro, generalmente
est determinado por la naturaleza del explante, por la composicin del medio
nutritivo, y varios factores ambientales (luz, temperatura, etc.) (Pierik, 1984).
Antes de realizar la asepsia del material vegetal que se va a introducir in vitro, es
necesario disponer de Medios de Cultivo esterilizados y dosificados en recipientes
adecuados. Una parte importante del cultivo in vitro son los Medios de Cultivo ya
que en ellos se encuentran las sustancias necesarias para el crecimiento y
desarrollo de los tejidos vegetales UNIOVI.
Los medios de cultivo se pueden utilizar de forma lquida o con un agente
gelificante como el agar.
El objetivo de esta prctica consisti en aprender tcnicas y mtodos en la
preparacin y uso de medio de cultivo MS, para el desarrollo de explantos;
adems de aprender la tcnica de dispensin en frascos de penicilina con suma
asepsia.
MATERIAL Y MTODOS
Preparacin de medio MS
En una probeta de 250 ml, se agreg 50ml de agua destilada, luego 5 ml de
MS10x (Murashige y Skoog), luego se agreg 4.5 gr de azcar blanca 3%, y
despus incorporar 3 ml de AIA (50 ppm). Se disuelve todo en un matraz y se
afora a 150ml. Llevar a la cocina, ya entibiado un poco sele aadi 1.2 ml de agar
(0.8%).se mueve constantemente y ya cuando el medio estuvo transparente se
retir.
Dispensin del medio MS
Con ayuda de una jeringa se procedi a incorporar a cada frasquitos de penicilina,
previamente lavados detergentes y enjuagados con agua destilada, 1 ml de medio
de cultivo MS. Se cubri la boca del frasco con papel aluminio. Y empaquet para
llevar a autoclavar a 120C por 15 minutos a 1 atmsfera de presin. Cumplido el
lapso se dej enfriar los frascos con el medio, para su posterior uso.
RESULTADO
Se aprendi a preparar un medio de cultivo
DISCUSIN

CONCLUSIN
Se pudo elaborar medios de cultivo MS de manera sencilla siendo muy til para la
micropropagacin de explantos, debido a que en este tipo de medio se los puede
reproducir con facilidad, obtenindose frascos con medio listos para ensayar.
BIBLIOGRAFA
Gamborg, O.L., T. Murashige, T.A. Thorpe y I.K. Vasil. (1976). Plant Tissue
Culture Media. In Vitro 12(7): 473-478.
NAVARRO, L. (1979). Microinjerto de pices caulinares in vitro para la obtencin
de plantas de grios libres de virus. Bol Serv.Plagas 5: 127-148.
UNIOVI Practicas de biotecnologa VEGETAL visto en:
http://ocw.uniovi.es/pluginfile.php/2621/mod_resource/content/1/practicas/Cuadern
o_Pract_Biotec_11_OCW.pdf
Pierik, Ir. R.L.M. (1984). In vitro culture of Higher plants. Department of
Horticulture Agricultural University, Wageningen, 107 pags.