INTRODUCCION. La cromatografa en papel es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar anlisis cualitativos ya es sencilla de implementar y no requiere de equipamiento sofisticado. En esta tcnica la fase estacionaria est constituida simplemente por una tira o circulo de papel de filtro. La muestra se deposita en un extremo colocando pequeas gotas de una solucin de la muestra y evaporando el disolvente luego de cada aplicacin. Luego el disolvente o mezcla de disolventes empleada como fase mvil (eluente o eluyente) se hace ascender por capilaridad. Para esto se coloca una porcin del papel en contacto con la fase mvil dentro de un recipiente que la contiene (cmara de desarrollo). Despus de unos minutos, cuando el disolvente deja de ascender o ha llegado al borde extremo del papel, se retira el papel y seca. Es importante que la cmara de desarrollo permanezca bien tapada durante el proceso de ascenso capilar de la fase mvil (desarrollo cromatogrfico), pues de lo contrario no se alcanza el equilibrio necesario entre el lquido (fase mvil) y el vapor del lquido. Si el disolvente elegido fue adecuado y las sustancias tienen color propio se debern ver manchas de distinto color separadas a lo largo del papel. Cuando los componentes no tienen color propio el papel se somete a procesos de revelado. La cromatografa es un sistema de separacin dinmica, porque continuamente se producen equilibrios entre los componentes de la mezcla a separar y las fases mvil y estacionaria. El proceso de separacin se produce a causa de las interacciones entre los componentes de la mezcla con la fase mvil y la fase estacionaria; lo cual causa la distribucin de los componentes de la mezcla entre las dos fases. A este proceso se le denomina particin de los componentes.
4
MRCO TERICO En 1906, el botnico Ruso M. Tswett realiz un experimento que condujo al descubrimiento de lo que hoy conocemos como cromatografa. Coloc un extracto de pigmentos vegetales en la parte superior de una columna de vidrio rellena de carbonato de calcio (CaCO3). Al agregar ter, observ que la mezcla original se separaba en diversas bandas coloridas que descendan a travs de la columna a diferentes velocidades. La cromatografa comprende un conjunto de tcnicas que tienen como finalidad la separacin de mezclas basndose en la diferente capacidad de interaccin de cada componente en otra sustancia. De forma general, consiste en pasar una fase mvil (una muestra constituida por una mezcla que contiene el compuesto deseado en el disolvente) a travs de una fase estacionaria fija slida. La fase estacionaria retrasa el paso de los componentes de la muestra, de forma que los componentes la atraviesan a diferentes velocidades y se separan en el tiempo. Cada uno de los componentes de la mezcla presenta un tiempo caracterstico de paso por el sistema, denominado tiempo de retencin. Cuando el tiempo de retencin del compuesto deseado difiere del de los otros componentes de la mezcla, ste se puede separar mediante la separacin cromatogrfica. La separacin de los diferentes componentes de una mezcla que se encuentran en un lquido o gas es el resultado de las diferentes interacciones de los solutos a medida que se desplazan alrededor o sobre una sustancia lquida o slida (la fase estacionaria). Las diversas tcnicas para la separacin de mezclas complejas se fundamentan en la diversidad de afinidades de las substancias por un medio mvil gas o lquido y un medio absorbente estacionario (papel, gelatina, almina o slice) a travs del cual circulan.
5
De acuerdo a cmo est dispuesta la fase estacionaria las tcnicas cromatogrficas se pueden dividir en: 1. Cromatografa plana: La fase estacionaria se sita sobre una placa plana o sobre un papel. Las principales tcnicas son: Cromatografa en papel Cromatografa en capa fina
2. Cromatografa en columna: La fase estacionaria se sita dentro de un tubo o columna. Segn el tipo de fluido empleado como fase mvil se distinguen: Cromatografa de lquidos Cromatografa de gases Cromatografa de fluidos supercrticos Principales parmetros Cromatogrficos. Coeficiente de particin o de reparto de un componente (K): Se define como el cociente entre la concentracin de componente presente en la fase estacionaria y la concentracin de componente presente en la fase mvil Frente del eluente: mximo recorrido de la fase mvil Frente del analito: mximo recorrido del analito; entendindose por analito cada uno de los componentes individuales de la mezcla. Relacin de recorridos o frentes (Rf): Cociente entre el frente de cada analito y el frente del eluente.
Cromatografa en papel La cromatografa en papel es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar anlisis cualitativos ya que pese a no ser una tcnica potente no requiere de ningn tipo de equipamiento. La fase estacionaria est constituida simplemente por una tira de papel de filtro. La muestra se deposita en un extremo colocando pequeas gotas de la disolucin y evaporando el disolvente. Luego el disolvente empleado como fase mvil se hace ascender por capilaridad. La separacin se realiza en funcin de la afinidad de los solutos con las dos fases, las ms solubles en agua se quedarn cerca del punto donde se aplic la muestra, y las menos solubles en agua y ms solubles en el disolvente llegarn ms lejos. Las sustancias separadas se identifican mediante diversos procedimientos fsicos o qumicos. 6
La cromatografa en papel es una tcnica utilizada para anlisis inorgnico cualitativo, permite llevar a cabo la separacin e identificacin de iones, trabajando con cantidades mnimas de sustancia. Pertenece al tipo de Cromatografa de particin se fundamenta en que las sustancias problema, pueden tener diferentes coeficientes de reparto en dos disolventes de inmiscibilidad limitada, uno permanece fijo en la superficie del papel fase estacionaria generalmente en agua, la fase mvil constituida generalmente por una mezcla de disolventes parcialmente miscibles en ella. Hay varios tipos de cromatografa, la ascendente (papel hacia arriba), descendente (papel invertido), radial y de separacin de zonas y sectores.
Al entrar en contacto con los disolventes empieza su fase de movilidad lo que produce unas manchas caractersticas sobre el papel, generalmente, estas no son coloreadas y se revelan con una lmpara fluorescente, los contornos se marcan con lpiz. Como medida en cromatografa sobre papel se emplea el Rf (Retention factor), el cual se define como el cociente de dividir el recorrido de la sustancia por el disolvente, esto es, la distancia media desde el origen hasta el centro de la mancha (X) dividida por la distancia que media desde el origen hasta el frente del disolvente (S). Se efecta el clculo del Rf para cada componente de la mezcla por separado, que es caracterstico de cada compuesto en condiciones constantes: soporte, temperatura, solventes, altura de desarrollo. El Rf toma valores entre 0 y 1 y puede ser usado para la identificacin de los componentes de una muestra, siempre y cuando se trate de sistemas cromatogrficos idnticos. X Rf S
7
En la cromatografa en papel se utiliza como fase estacionaria una hoja de papel de celulosa de elevada pureza recubierta de una capa de agua asociada a las fibras de celulosa. La fase mvil, en la que ir disuelta la muestra, se forma por disolventes cuya naturaleza se elige en funcin de los componentes que se pretenden separar. Despus de unos minutos, cuando el disolvente deja de ascender o ha llegado al borde extremo del papel, se retira el papel y seca. Es importante que la cmara de desarrollo permanezca bien tapada durante el proceso de ascenso capilar de la fase mvil (desarrollo cromatogrfico), pues de lo contrario no se alcanza el equilibrio necesario entre el lquido (fase mvil) y el vapor del lquido. Si el disolvente elegido fue adecuado y las sustancias tienen color propio se debern ver manchas de distinto color separadas a lo largo del papel. Cuando los componentes no tienen color propio el papel se somete a procesos de revelado. La cromatografa es un sistema de separacin dinmica, porque continuamente se producen equilibrios entre los componentes de la mezcla a separar y las fases mvil y estacionaria. El proceso de separacin se produce a causa de las interacciones entre los componentes de la mezcla con la fase mvil y la fase estacionaria; lo cual causa la distribucin de los componentes de la mezcla entre las dos fases. A este proceso se le denomina particin de los componentes. Las interacciones mencionadas pueden tener su origen en dos fenmenos: 1. La adsorcin, que es un fenmeno de interaccin superficial por el cual tomos, iones o molculas son retenidas en la superficie de un material. Puede ser de dos tipos:
a) Fisisorcin, debida a fuerzas atractivas dbiles, generalmente fuerzas de Van der Waals; es la forma ms simple de adsorcin. b) La quimisorcin ocurre cuando se forma un enlace qumico
2. La absorcin, es un fenmeno de retencin que incluye la penetracin de una especie qumica en todo el volumen del material por lo cual se la considera como un fenmeno msico y no superficial. Un ejemplo de absorcin es la disolucin de una especie en un disolvente.
8
METODOLOGA
Cortar tiras de papel filtro de mismo tamao Observar cmo la fase mvil (el disolvente) sube por capilaridad, arrastrando los distintos componentes.
El disolvente se coloca en un vaso de precipitado y para sostener la tira se puede hacer una base con un agitador o una pluma. Luego colgamos esas tiras de manera que el extremo del papel est en contacto con el disolvente, pero la mancha que se hizo no. Como a dos centmetros de la base hacer una mancha (un punto gordo) la muestra. Puede ser una muestra por tira o todas en la misma, que con separadas para no revolverse. Disolventes: Acetona Agua Alcohol metlico Acetato de etilo Mancha de la muestra Realizar los pasos anteriores con los cada uno de los disolventes, en distintas concentraciones Anotar observaciones 9
RESULTADOS
Las primeras preparaciones de solventes fueron con cetona (10 % de cetona y 90 5 agua) la muestra de chile asi como la de hojas corri sin problemas pero la muestra de betabel no corra ni se vea coloracin alguna Con ninguno de los solventes solos o ya sea con agua o con otra solucin permitan que corrieran las 3 muestras por igual Las 3 muestras solo corran con el solvente agua, ya que la muestra de betabel no corria con ningn otro solvente ni siquiera en proporciones de 10:90 (mayor parte agua)
Muestra final con solvente agua las tres muestras se corrieron perfectamente Muestra con solvente 10% agua y 90% cetona 10
CONCLUSIONES
Las diferentes muestras que tenamos solo se corrieron las tres con el solvente agua, con otros solventes y mezclas entre los mismo igual no se corran las tres juntas por lo regular se corran dos o una ms o una menos, nuestra conclusin fue de que las molculas de los solventes no permitan el mismo paso de los componentes de nuestras muestras para su separacin es por ello que no pudo llevarse a cabo, aunque los solventes se diluyeron en agua seguan sin correrse adecuadamente, esto por lo mismo y solo con agua destilada pudo hacerse el corrimiento con xito. En esta prctica aprendimos nuevas tcnicas de cromatografa que son necesarias en nuestra carrera para anlisis de muestras, estas tcnicas requieren de gran paciencia ya que a veces pueden ser muy tardadas dependiendo del mtodo que se utilice, se debe de tener cuidado al manejo de solventes y su preparacin y se deben conocer cules son los solventes adecuados para la muestra. BIBLIOGRAFIA. Universidad Nacional de la Patagonia San Juan Bosco, Facultad de Qumica Biologca, Cromatografa de Particin. Disponible en : http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/quimicabiologica1/wp content/uploads/2010/08/2011-TP-9-CROMATOGRAFIA-PAPEL.pdf Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Facultad de Qumica, Tcnicas Cromatogrficas. Disponible en : http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatogrficos_6700.pdf Universidad Nacional del Sur, Facultad de Qumica, Cromatografa. Disponible en: http://biblioteca.uns.edu.pe/saladocentes/archivoz/curzoz/cromatograf%EDa.pdf Olga Prez de Mrquez, Gua de Anlisis Qumico Cualitativo, Facultad de Ciencias, Universidad de Los Andes.