Universidade Federal do Rio Grande do Norte

Centro de Cincias Exatas e da Terra - CCET

Instituto de Qumica
Fsico-Qumica Experimental
Docente: Davi Serradella Vieira







Alexsandra Alves da Silva
Mariana Helena de Oliveira Albuquerque
Paula Rafahela Silva dos Santos
Rafaela Ribeiro de Oliveira
(Grupo 3)






Relatrio Experimento 1:
Espectrofotometria de Nitrito












Natal/RN
2014
2

SUMRIO


1. INTRODUO ................................................................................................. 3
2. OBJETIVO ........................................................................................................ 9
3. METODOLOGIA EXPERIMENTAL .................................................................. 9
3.1. Regentes, vidrarias e equipamentos ......................................................... 9
3.2. Procedimento ............................................................................................. 10
4. RESULTADOS E DISCUSSO ..................................................................... 12
5. CONCLUSO ................................................................................................. 14
REFERNCIAS ..................................................................................................... 15
























3

1. INTRODUO

A espectroscopia o estudo da interao entre a radiao eletromagntica e a
matria (CHANG, 2010). Baseia-se na medida da quantidade de radiao produzida
ou absorvida pelas molculas ou pelas espcies atmicas de interesse (SKOOG,
2007).
Os mtodos espectroscpicos podem ser classificados de acordo com a regio
do espectro eletromagntico envolvida na medida. As tcnicas espectroscpicas
mais comumente utilizadas para estudar tanto os sistemas qumicos quanto os
biolgicos so o infravermelho, o ultravioleta e o visvel, a ressonncia magntica
nuclear e a fluorescncia (CHANG, 2010). Para efeito deste relatrio trataremos da
espectroscopia molecular na regio do ultravioleta-visvel (UV-VIS).
Segundo Rocha (2004), a espectrofotometria na regio UV-VIS do espectro
eletromagntico uma das tcnicas analticas mais empregadas, em funo da sua
robustez, do seu custo relativamente baixo e do grande nmero de aplicaes
desenvolvidas.
A tcnica utiliza radiao eletromagntica na faixa espectral compreendida entre
200 e 780 nm. Quando submetida a essa radiao, a molcula de um composto
pode sofrer transies eletrnicas por ocasio da absoro de energia quantizada.
(NUNES, 2008).
Para Field(2008), o espectro de absoro representado pela relao da
absoro de energia (radiao) com o seu comprimento de onda (.) ou frequncia
(), A Figura 1 mostra um exemplo de um espectro de absoro.
As caractersticas principais de uma banda de absoro so a sua posio e
intensidade. A posio de absoro corresponde ao comprimento de onda da
radiao cuja energia igual necessria para que ocorra a transio eletrnica. J
a intensidade de absoro depende essencialmente de dois fatores: da
probabilidade de transio e da energia dos orbitais moleculares. (NUNES, 2008).
Geralmente, a molcula estimulada aplicando-se energia na forma de calor,
energia eltrica, luz, partculas ou por uma reao qumica. Antes de se aplicar o
estmulo, a molcula se encontra predominantemente em seu estado de energia
mais baixo ou estado fundamental. O estmulo ento resulta que algumas das
espcies sofrem uma transio para um estado de maior energia ou estado excitado.
(SKOOG, 2007).
4

A energia do fton emitido ou absorvido, h, e, portanto a frequncia da radiao
emitida ou absorvida, , e dada pela condio de frequncia de Bohr (Equao 1)
(ATKINS, 2010)

Figura 1 - Exemplo de espectro de absoro

Fonte: SKOOG, 2007.


E = hv Equao (01)
Onde:h constante de Planck
v a frequncia da energia eletromagntica absorvida.

Desta maneira, as espectroscopias tanto de emisso, quanto as de absoro so
capazes de nos proporcionar a mesma informao no que diz respeito separao
entre os nveis de energia (Figura 2).

Figura 2 - Definio da espectroscopia de transio

Fonte: FIELD, 2008.
5


Rocha (2004) afirmaque a espectrofotometria fundamentada na lei de absoro,
chamada de Lei de Lambert-Beer, ou somente Lei de Beer. Ela considerada a
base matemtica para medidas de absoro de radiao por amostras no estado
slido, lquido ou gasoso, nas regies ultravioleta, visvel e infravermelho do
espectro eletromagntico.
Segundo Skoog(2008), em virtude das interaes entre os ftons e as partculas
absorventes, potncia radiante do feixe decresce de P
0
a P. A transmitncia T da
soluo a frao da radiao incidente transmitida pela soluo, como mostrado
na Equao 02. A transmitncia frequentemente expressa como uma porcentagem
denominada porcentagem de transmitncia.

T =
P
P
0
Equao (02)

A absorbncia A de uma soluo est relacionada com a transmitncia de forma
logartmica, e devido a perdas por reflexo ou espalhamento que eventualmente
podem ocorrer em funo do recipiente no qual a amostra deva estar, h a
necessidade de secompensar esses efeitos, desta forma a potncia do feixe,
transmitida atravs de uma clula com a soluo do analito, comparada com a
potncia que atravessa uma clula idntica contendo somente o solvente ou o
branco dos reagentes. Uma absorbncia experimental que se aproxima muito da
absorbncia verdadeira da soluo assim obtida. Portanto de acordo com a Lei de
Beer, a absorbncia diretamente proporcional concentrao de uma espcie
absorvente c e ao caminho ptico b do meio absorvente, como mostrado na
Equao 03:

A = log I = log
P
0
P
= bc Equao (03)

Onde:A a absorbncia
P
o
a intensidade da radiao monocromtica que incide na amostra
P a intensidade da radiao que emerge da amostra
a absortividade molar
c a concentrao da espcie absorvente
b a distncia percorrida pelo feixe atravs da amostra.
6


A partir da relao obtida observamos que quando a absorbncia de uma soluo
aumenta, a transmitncia diminui(Figura 3).

Figura 3Relao da potncia radiante com a absorbncia.

Fonte: SKOOG, 2007.

Segundo essa lei, a passagem de um feixe de radiao monocromtica num
nmero sucessivo de molculas absorventes idnticas resulta na absoro de
fraes iguais de energia radiante que as atravessa. Assim podemos concluir que a
absorbncia de uma soluo diretamente proporcional concentrao da espcie
absorvente quando se fixa o comprimento do percurso; e diretamente proporcional
ao comprimento do percurso quando se fixa a concentrao. (NUNES, 2008).
A instrumentao que compem os espectrmetros de UV-VIS consiste
basicamente em cinco componentes: (1) uma fonte estvel de energia radiante; (2)
um seletor de comprimento de onda que isola uma regio limitada do espectro para
a medida; (3) um ou mais recipientes para a amostra; (4) um detector de radiao, o
qual converte a energia radiante para um sinal eltrico mensurvel; e (5) uma
unidade de processamento e de leitura do sinal, geralmente constituda por um
circuito eletrnico e, nos instrumentos modernos, por um computador (SKOOG,
2007).
A utilizao da tcnica para determinao de compostos orgnicos e inorgnicos
bastante empregada, tendo em vista a simplicidade e o baixo custo de aplicao.
Assim, a espectroscopia de UV
poluentes no que diz respeito ao monitoramento ambiental
O mtodo utilizado para determinao de nitrito geralmente envolve os
procedimentos espectrofotomtricos baseados na reao de Griess, na qual o nitrito
reage com a sulfanilamida em meio cido. O diazo composto formado reage com o
cloridrato de N-(1-Naftil)Etilenodiamina (NED),
vermelha intensa, de acordo a
produto deve ser determinado entre 10 min e 2 haps a mistura dos reagentes.
mecanismo de reao usada no mtodo de Griess, foi proposto por Sawicki
aps investigarem 52 sistemas diferentes


A poluio geralmente traz mudanas indesejveis para as caractersticas
biolgicas, fsicas e qumicas da gua, do ar e da terra. Alm disso,
danosos vida humana, vegetao e aos outros organismos que vivem
sustentados por estes ecossistemas
Uma parte do ciclo do nitrognio
NH
4
+
convertido em NO
Assim, a espectroscopia de UV-VIS aplicada na determinao de
no que diz respeito ao monitoramento ambiental.
O mtodo utilizado para determinao de nitrito geralmente envolve os
imentos espectrofotomtricos baseados na reao de Griess, na qual o nitrito
reage com a sulfanilamida em meio cido. O diazo composto formado reage com o
)Etilenodiamina (NED), gerando um composto de colorao
acordo a figura 4. A reao controladapelo tempo, e o
produto deve ser determinado entre 10 min e 2 haps a mistura dos reagentes.
mecanismo de reao usada no mtodo de Griess, foi proposto por Sawicki
aps investigarem 52 sistemas diferentes(CAVALHEIRO et al, 2006).
Figura 4 Reao de Griess
Fonte: CAVALHEIRO et al, 2006.
A poluio geralmente traz mudanas indesejveis para as caractersticas
biolgicas, fsicas e qumicas da gua, do ar e da terra. Alm disso, acarreta efeitos
danosos vida humana, vegetao e aos outros organismos que vivem
sustentados por estes ecossistemas (NETO, 2006).
Uma parte do ciclo do nitrognio no ambiente o processo de nitrificao, no qual
convertido em NO
3
-
em um processo aerbio. Tal processo dividido em
7
VIS aplicada na determinao de gama de
O mtodo utilizado para determinao de nitrito geralmente envolve os
imentos espectrofotomtricos baseados na reao de Griess, na qual o nitrito
reage com a sulfanilamida em meio cido. O diazo composto formado reage com o
erando um composto de colorao
. A reao controladapelo tempo, e o
produto deve ser determinado entre 10 min e 2 haps a mistura dos reagentes.O
mecanismo de reao usada no mtodo de Griess, foi proposto por Sawickiet al.


A poluio geralmente traz mudanas indesejveis para as caractersticas
acarreta efeitos
danosos vida humana, vegetao e aos outros organismos que vivem
o processo de nitrificao, no qual
em um processo aerbio. Tal processo dividido em
8

duas etapas: a nitrozao, na qual se promove a oxidao de NH
4
+
em NO
2
-
, e a
nitratao, na qual NO
2
-
convertido a NO
3
-
(SOUZA, 2012).

As seguintes reaes podem ser observadas:

Nitrosao: 2NH
4
+
+ 3O
2
2NO
2
-
+ 4H
+
+ 2H
2
O

Nitratao: 2NO
2
-
+ O
2
2NO
3
-


O nitrito (NO
2
-
) tem sido consideradoum dos contaminantes ambientais de larga
expanso para corpos dgua, tanto subterrneos como superficiais, em todo o
mundo (AYDIN et al, 2005apudNETO, 2006). Ele tambm um potencial agente
poluidor de guas naturais, nas quais pode estar presente devido decomposio
de matria orgnica nitrogenada. A concentrao de nions nitrito em guas naturais
raramente superior a 0,1 mg.L
-1
. Entretanto, adicionado gua usada em
processos industriais, como inibidor da corroso podendo, assim, estar presente em
esgotos. Por outro lado, sendo o nitrito um produto da reduo do nitrato, estar
frequentemente presente em sistemas nos quais o on nitrato atue como um
oxidante (CAVALHEIROet al, 2006).
O conhecimento dos teores de NO
3
-
e NO
2
-
em amostras de gua tem despertado
grande interesse da sociedade, uma vez que, ultimamente, a presena desses ons
em guas naturais tem aumentado significativamente, causando problemas ao meio
ambiente e, consequentemente, sade humana (MONSER et al., 2002apudNETO,
2006).
A fim de se controlar o efeito desse on sobre a sade humana alguns locais vm
buscando estabelecer limites mximos de concentrao de nitrito em guas de
beber. No Brasil estes limites esto bem definidos pela Resoluo CONAMA
357/2005 e pela Portaria do Ministrio da Sade N 2914/2011. Os valores mximos
permitidos (VPM) pelo CONAMA esto apresentados na Tabela 1.





9

Tabela 1 - Valores mximos permitidos de Nitrito pela Resoluo CONAMA 357
(2005).
Tipo de Corpo D'gua VMP
guas doces - classe 1 1,0 mg L
-1
N
guas doces - classe 3 1,0 mg L
-1
N
guas salinas - classe 1 0,07 mg L
-1
N
guas salinas - classe 2 0,20 mg L
-1
N
guas salobras - classe 1 0,07 mg L
-1
N
guas salobras - classe 2 0,20 mg L
-1
N

A Portaria do Ministrio da Sade determina que o valor mximo permitido de
1,0 mg L
-1
.
de essencial importncia que se monitore a potabilidade da gua antes do
consumo humano porque a sade pode depender criticamente da disponibilidade e
da qualidade da gua de beber.
:
2. OBJETIVO

Construo de curva analtica para posterior determinao de nitrito.
3. METODOLOGIA EXPERIMENTAL
3.1. Regente, vidrarias e equipamentos:

- Balo volumtrico de 100 mL;
- Pipeta volumtrica;
- Pra;
- gua destilada;
- Bqueres de 100 mL;
- Soluo Estoque de Nitrito (100 ppm);
- Cubeta de quartzo;
- Lenos de papel;
- Espectrofotmetro na regio do ultravioleta-visvel (UV-VIS), modelo Spectrum
2000 UV.
10

3.2. Procedimento

Inicialmente, transferiu-se 10 mL da soluo estoque de 100 ppmpara um
balo volumtrico de 100 mL, e aferiu-se o volume com gua destilada, est soluo
foi denominada de soluo de trabalho. A concentrao foi calculada por simples
diluio a partir da equao:

C
1
I
1
= C
2
I
2
Equao (04)

Determinou-se ento que a concentrao da soluo de trabalho:

C
1
I
1
= C
2
I
2


1uu ppm 1u mI = C
2
1uu mI

C
2
=
1uu ppm 1u mI
1uu mI


C
2
= 1u ppm

A partir desta soluo de trabalho forampreparadas uma srie de solues de
concentraes variadas,onde foramadicionados os volumes de 1, 2, 3, 4 e 5 mL da
em bales volumtricos de 100 mL, que correspondem as seguintes concentraes:

Soluo 1:
C
1
I
1
= C
2
I
2


1u ppm 1 mI = C
2
1uu mI

C
2
=
1u ppm 1 mI
1uu mI


C
2
= u,1 ppm



Soluo 2:
C
1
I
1
= C
2
I
2


1u ppm 2 mI = C
2
1uu mI

11

C
2
=
1u ppm 2 mI
1uu mI


C
2
= u,2 ppm


Soluo 3:
C
1
I
1
= C
2
I
2


1u ppm S mI = C
2
1uu mI

C
2
=
1u ppm S mI
1uu mI


C
2
= u,S ppm

Soluo 4:
C
1
I
1
= C
2
I
2


1u ppm 4 mI = C
2
1uu mI

C
2
=
1u ppm 4 mI
1uu mI


C
2
= u,4 ppm

Soluo 5:
C
1
I
1
= C
2
I
2


1u ppm S mI = C
2
1uu mI

C
2
=
1u ppm S mI
1uu mI


C
2
= u,S ppm


Em seguida, pipetou-se 2mL do reagente de cor em cada um dos 5 bales. Eles
foram aferidos com gua destilada e homogeneizados.Deixou-se em repouso as
solues, durante dez minutos para desenvolvimento da cor e posterior leitura.
Foram medidas em triplicata as absorbncias de cada uma das solues, por
meio de um espectrofotmetro de UV-VIS, modeloSpectrum 2000 UV, utilizando o
comprimento de onda igual a 543 nm, previamente zerado com o branco.
12

Por fim, foi preparada uma amostra desconhecida fornecida pelo professor.
Pipetou-se 2mL da amostra para um balo volumtrico de 100 mL, em seguida
adicionou-se 2 mL do reagente de cor e foi realizada a medida da absorbncia em
triplicata, seguindo o mesmo procedimento utilizado para os pontos da curva
analtica.
4. RESULTADOS E DISCUSSO

As leituras de absorbncia para cada uma das solues de concentraes
distintas foram:

Tabela 2- Dados de Absorbncia em funo da respectiva concentrao
Concentrao
(ppm)
ABS
1
ABS
2
ABS
3
ABS
mdia

0,1 0,104 0,104 0,103 0,103
0,2 0,204 0,205 0,204 0,203
0,3 0,314 0,312 0,312 0,310
0,4 0,413 0,414 0,415 0,411
0,5 0,519 0,518 0,519 0,514


Com os dados obtidos, foi possvel a construo da curva analtica para
determinao de nitrito (Figura 5)
A curva foi obtida relacionando-se os valores de absorbncia com os valores de
concentrao, atraves desta, obteve-se a equao da reta (Equao 5) e o
coeficiente de correlao da curva. A partir da equao da reta foi possvel calcular a
concentrao do nitrito para as amostras desconhecidas. Na equao da reta
substitui-se o x pelo valor da absorbncia mdia, encontrando-se y, que a
concentrao de nitrito.

y = 1,u298x u,uuu9 Equao (5)


13

Figura 5 Curva analtica para determinao de Nitrito

Fonte: Microsoft Excel

Os valores das absorbncias e absorbncia mdia determinadas para a amostra
desconhecida so mostrados na Tabela 3.

Tabela 3 Absorbncias determinadas para a amostra desconhecida
Amostra desconhecida
ABS
1
ABS
2
ABS
3
ABS
mdia

0,269 0,27 0,271 0,270

O valor da concentrao de nitrito na amostra desconhecida, determinado pelo
mtodoespectrofotomtrico, foi de 0,260mg.L
-1
(ppm). Como trata-se de uma amostra
desconhecida, no conhecendo sua procedncia, fica invivel comparar o resultado
encontrado com a legislao vigente no pas. Mas pode-se observar que o resultado
est abaixo do limite estabelecido pelo Ministrio da Sade, que de 1,0 mg.L
-1
.

14

5. CONCLUSO

A partir do experimento, foi possvel determinar a concentrao de nitrito (NO
2
-
)
na amostra desconhecida, que foi de 0,260mg/L. Como no sabe-se a origem dessa
amostra, no foi possvel comparar o resultado com os valores estabelecidos pela
Resoluo 357 do CONAMA. A concentrao da amostra est abaixo do limite de
1,0 mg.L
-1
, que estabelecido pela portaria do Ministrio da Sade. A curva analtica
obtida gerou uma equao com coeficiente de correlao satisfatrio (R
2
= 0,9999),
obtendo-se assim, um bom resultado na quantificao de nitrito.















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REFERNCIAS

BRASIL. Ministrio da Sade, Secretaria de Vigilncia em Sade, Coordenao
Geral de Vigilncia em Sade Ambiental. Portaria MS 2914, 2011.
BRASIL. Resoluo CONAMA (Conselho Nacional do Meio Ambiente) N 357, 2005.
Dirio Oficial da Unio. 18/03/2005.
CAVALHEIRO et al. Determinao de nitrito em guas utilizando extrato de flores.
Quimica Nova, Vol. 29, No. 5, 1114-1120, 2006.
CHANG, Raymond. Fsico-qumica para as cincias qumicas e biolgicas. 3
ed., Vol. 2, Editora Bookman, 2010.
FIELD L. D; Sternhell S; Kalman J. R.: Organic Structures from Spectra, 4 edi,
EditoraJohn Wiley and Sons, LTD, 2008.
NETO, A. R. P. & KORN, M. das G. Os nutrientes nitrato e nitrito como
contaminantes ambientais e alternativas de determinao. Candomb Revista
Virtual, v. 2, n. 2, p. 9097, 2006.
NUNES, P. G. A. Uma nova tcnica para seleo de variveis em calibrao
multivariada aplicada s espectrometrias UV- VIS e NIR. Tese de Doutorado
(UFPB). Joo Pessoa, 2008. 106p
ROCHA, F. R. P. Strategies to increase sensitivity in UV-VIS spectrophotometry.
Quimica Nova, Vol. 27, No. 5, 807-812, 2004.

SKOOG, D.A; West, D.M; Holler, F.J. & Stanley, R.C. Fundamentos da Qumica
Analtica, Traduo da 8 edio norte americana. So Paulo, Ed.Thomson, 2007.

SOUZA, B. M. & PRADO, C. H. B. de A. O Ciclo do Nitrognio. Via Cincia, So
Carlos - SP, 2012. Disponvel em: <www.viacincia.com.br>. Acesso em:
03/09/2014.
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UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE. Experimento:
Espectrometria de Nitrito. (Apostila)