Universidad Tcnica de Machala

Facultad de Ciencias Agropecuarias

Escuela de Ingeniera Agronmica

Biologa Molecular.
Nombre: Cinthia Lizbeth Calva Cajas
Ciclo: 5to A
Fecha: Lunes 21 de Mayo del 2012.

Tcnicas utilizadas en Biologa Molecular

Son aquellas que usan mtodos y tcnicas con cidos nuclicos recombinantes para un
propsito determinado, que puede ser con fines diagnsticos, de monitoreo o de
estimacin de riesgos y pronstico.
Adems se conocen as a todas las tcnicas de laboratorio que se usan para aislar ADN o
extraerlo en alta pureza, visualizarlo para ver su estado, (clonacin de fragmentos en
bacterias u otros vectores como virus y PCR), corte de una determinada regin con
enzimas de restriccin para ver si por una mutacin se gana o se pierde un sitio de
restriccin.
Se denomina as a todas las tcnicas de laboratorio que se usan para aislar ADN o
extraerlo en alta pureza, visualizarlo para ver su estado, cortarlo y pegarlo, amplificar
una regin en una enorme cantidad de molculas (clonacin de fragmentos en bacterias
u otros vectores como virus y PCR), corte de una determinada regin con enzimas de
restriccin para ver si por una mutacin se gana o se pierde un sitio de restriccin.

Tcnicas ms utilizadas
Tcnica de Deteccin de ADN Y ARN

Los cidos nucleicos como el ADN y el ARN, pueden ser localizados mediante
numerosos mtodos.
Reaccin de Feulgen: utiliza cido clorhdrico que hidroliza el ADN formando
aldehdos.
Colorantes fluorescentes: colorantes como el ioduro de propidio, se unen al ADN y
dan una fluorescencia proporcional a la cantidad de ADN presente.
Colorantes bsicos: los colorantes bsicos como la hematoxilina, el azul de toluidina,
el violeta de cresilo se unen a los grupos fosfatos presentes en el ADN y ARN.
Tcnica de Electroforesis:

La electroforesis es un mtodo de laboratorio en el que se utiliza una corriente elctrica
controlada con la finalidad de separar biomoleculas segn su tamao y carga elctrica a
travs de una matriz gelatinosa.
Hibridacin in situ:







Es una de las ltimas tcnicas desarrolladas por la biologa molecular. Es un mtodo
que analiza la distribucin de una secuencia particular de nucletidos de ADN (genes
especficos) o ARN (ARN mensajeros especficos).
Esta tcnica permite localizar un ADN especfico o identificar la expresin gentica por
la presencia de ARN mensajero en el citoplasma celular.
Tcnica de Clonacin

La clonacin se basa en extraer de una clula adulta el ncleo, el cual contiene el
material gentico, para introducirlo en un vulo previamente enucleado, es decir al que
se le ha extrado el ncleo. Se obtiene as un embrin genticamente idntico al adulto
del que se obtuvo la clula de partida y que se implanta en el tero de la madre
portadora, en cuyo vientre se desarrollar el feto.La clonacin reproductiva tiene por
tanto el objetivo de reproducir seres humanos completos.

Tcnica de amplificacin de cidos nucleicos









El principal objetivo de la tcnica de amplificacin de cidos nucleicos, es mejorar la
sensibilidad de los test basados en cidos nucleicos y simplificarlos mediante el uso de
la automatizacin y la incorporacin de sistemas de deteccin no radiactivos.
Esta tcnica es diversa por lo que se hace necesario una clasificacin de las mismas
sistemas de amplificacin de la diana, que incluye la reaccin en cadena de la
polimerasa
Sistemas de amplificacin de la sonda, que la reaccin en cadena de la ligasa
Sistemas de amplificacin de la seal, en los cuales la seal generada por cada sonda
es aumentada.
Tcnica para el Anlisis del Genoma







El diagnstico gentico es una prueba muy compleja. Dicho estudio sirve para
identificar la causa gentica, de una determinada enfermedad en un paciente.
Aplicacin de las Tcnicas

Son inmumerables las aplicaciones de estas tcnicas y quizs las ms usadas hoy en dia,
son la PCR seguida de una restriccin con enzimas y deteccin de los fragmentos en un
gel o seguidas de un gel de poliacrilamida que tiene ms definicin para la separacin
de fragmentos de pocas bases de diferencias. Cuando se usa PCR y enzimas de
restriccin se denominan PCR/RFLP (derivado de variacin en la longitud de los
fragmentos de restriccin en ingles).
Esta tcnica puede usarse entre otras cosas para deteccin de alelos de un gen normales
y mutados (enfermedades hereditarias) o para distinguir cepas bacterianas o virales o
alelos ms favorables para una caracterstica de inters productivo para luego aplicarlo a
la seleccin.