BIOLOGA EDUCATIVA

DOCENTE: BLGO. WILLIAM BARTESAGHI ASTE

PRIMER AO SPRO. MACI. LELI FECH. ESED
PRCTICA N 2
MICROSCOPA

1. OBJETIVOS
1. Conocer e identificar las diferentes parles del microscopio compuesto y sus
respectivas funciones.
2. Aprender a manejar correctamente el microscopio.
3. Adquirir destreza para calcular las medidas de estructuras celulares, clulas y
organismos.

2. FUNDAMENTO TEORICO
El microscopio es un instrumento ptico que aumenta la imagen de los objetos. En
los ltimos tres siglos ha permitido ampliar el campo de las investigaciones
biolgicas y se ha convertido en el instrumento bsico para abre nuevas fronteras en
la biologa.
Antoni Van Leeuwenhoek. Hans y Zacharias Jansen fueron tres holandeses que
contribuyeron significativamente al desarrollo de la microscopa a principios del
siglo XVII. Leeuwenhoek fue uno de los primeros en dejar constancia de sus
observaciones, describiendo bacterias, protozoarios, glbulos rojos y
espermatozoides.
El microscopio compuesto consiste en dos sistemas de lentes, el objetivo y el ocular,
montados en extremos opuestos de un tubo cerrado. El objetivo est compuesto de
varas lentes que crean una Imagen real aumentada del objeto examinado. Las lentes
de los microscopios estn dispuestas de forma que el objetivo se encuentre en el
punto focal del ocular. Cuando se mira a travs del ocular se ve una imagen virtual
aumentada de la imagen real.
El equipamiento adicional de un microscopio consta de un armazn con un soporte
que sostiene el material examinado y de un mecanismo que permite acercar y alejar
el tubo para enfocar la muestra. Los especmenes o muestras que se examinan con un
microscopio son transparentes y se observan con una luz que los atraviesa; se suelen
colocar sobre un rectngulo fino de vidrio. El soporte tiene un orificio por el que pasa
la luz. Bajo el soporte se encuentra un espejo que refleja la luz para que atraviese el
espcimen. El microscopio puede contar con una fuente de luz elctrica que dirige la
luz a travs de la muestra.
El microscopio, al aumentar la imagen de los objetos, nos permite analizar la
estructura interna de clulas, tejidos y organismos, hacer mediciones y estimar el
tamao de una poblacin de microorganismos.
3. MATERIALES:
Microscopios compuestos
Portaobjetos
Cubreobjetos
Papel delgado con letras impresas
Goteros
Papel milimetrado



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4. PROCEDIMIENTO
DESCRIPCIN E IDENTIFICACIN DE LAS PARTES DEL
MICROSCOPIO
DEFINICIN: Etimolgicamente la palabra microscopio proviene de dos voces
griegas: MICROS = pequeo y SCOPIUM = ver u observar.
Se divide en dos partes:
SISTEMA OPTICO
1. OCULAR: Lente situado cerca del ojo del observador. Consta de un sistema de
lentes planas convexas, dispuestas en un tubo cilndrico de metal, con un
diafragma intermedio. ambos lentes presentan tas caras planas hacia el ojo del
observador y las caras convexas hada el objeto. La lente que va cerca del ojo del
observador se denomina ocular propiamente dicho y la lente inferior se le
conoce como lente de campo o colectora, el cual recibe la imagen ya formada
por el objetivo, siendo una imagen luminosa y corregida de aberraciones. En la
parte lateral o superior del tubo cilndrico lleva una numeracin (4X. 5X, 10X,
15X. etc.), que indica el nmero de aumentos propios del ocular. El ocular da la
imagen virtual y derecha, y se forma a la altura del diafragma.
2. OBJETIVOS: Lente situada cerca de la preparacin. Un objetivo est
constituido por un tubo metlico cilndrico, que lleva en su interior un sistema de
lentes destinados a dar una imagen real e invertida del objeto. La lente de la parte
inferior se denomina Lente Frontal. En la parte lateral del tubo metlico, lleva
inscrita una numeracin (4X, 10X. 40X, 60X, 95X. 100X, etc.), que indica el
nmero de aumentos propios del objetivo, y la apertura numrica (AN), es decir
la capacidad de reunin de la luz de objetivo, siendo de 0,30 para el objetivo de
10X de 0,65 para el de 40Xy de 1,30 para el de 100X.
Clases de objetivos
Objetivos a seco: Son aquellos que entre el tente frontal y el preparado a
observar, no existe sustancia alguna, excepto el aire. Se utilizan generalmente
para observaciones de preparados en fresco. Por el nmero de aumentos son de
tres clases:
Pequeo aumento: mayor de 0 y menor de 10x
Mediano aumento: mayor de 10 y menor de 30x
Gran aumento: mayor de 30 y menor de 90x
Objetivos de Inmersin: Son aquellos que entre la lente frontal y el preparado a
observar, se interpone una sustancia liquida, comnmente el aceite de cedro,
cuyo ndice de refraccin es de 1.5. Se utilizan generalmente para observaciones
en preparado en seco. De acuerdo a la procedencia lleva una franja o una raya
negra para facilitar su identificacin.
Caractersticas de los objetivos
ESCALA DE REPRODUCCIN: relacin lineal que existe entre el tamao
del objeto y su imagen, por ejemplo. 4:1,40:1, 65:1, etc. (donde 1 representa el
tamao del objeto y 4, 40, y 65 representa el aumento de su imagen).
PODER DEFINIDOR: es la capacidad del objetivo de formar imgenes de
contornos ntidos.
LMITE DE RESOLUCIN: es la menor distancia que debe existir entre dos
objetos para que puedan-visualizarse por separado.


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PODER DE RESOLUCIN: es la capacidad de mostrar la imagen en sus
detalles ms finos. Est en relacin inversa con el lmite de resolucin.
PODER DE PENETRACIN: es la propiedad de permitir la observacin
simultnea de varios planos del preparado. Es inversamente proporcional a la
escala de reproduccin o aumento.
DISTANCIA FRONTAL: es la distancia de la lente frontal al preparado
colocado en la platina, cuando est enfocado. Disminuye cuando aumenta la
escala de reproduccin del objetivo.
Pequeo aumento: entre 0.5 y 3 cm.
Mediano aumento, entre 3 mm y 0.5cm.
Gran aumento: entre 1 mm y 3 mm.
Inmersin: entre 0.8 mm y 1.20 mm.
AUMENTO TOTAL: Debemos notar que el ocular tambin tiene un aumento,
por lo tanto el aumento total de la imagen que observamos es el producto entre el
aumento del objetivo y el del ocular. Ejemplo: si tenemos colocado el objetivo
cuya escala de reproduccin es 40:1 y nuestro ocular tiene un aumento de 10x,
entonces el aumento total ser 40 x 10 = 400.
DISTANCIA FOCAL
Distancia entre el foco y el centro ptico de una lente o la superficie de un espejo
cncavo.
Objetivo
(distancia
focal en mm)
Aumento
Objetivo (para
L=16 cm)
Aumento total
Distancia de
trabajo (mm) Ocular x5 Ocular x10 Ocular x15
50 3,2 16 32 48 30
25 6,4 32 64 96 14
16 10 50 100 150 8
8 20 100 200 300 2
4 40 200 400 600 0,5
2 80 400 800 1200 0,2
SISTEMA DE ILUMINACIN
Se encuentra ubicado en la parte inferior de la platina, y comprende:
A) ESPEJO O LAMPARA DE ILUMINACIN: Tiene dos caras: una
cncava y otra plana. Goza de movimientos en todas las direcciones. La cara
cncava se emplea de preferencia con iluminacin artificial, y la plana, para
iluminacin natural (luz solar). Modernamente se prescinde del espejo en la
fabricacin de microscopios, ya que stos traen incorporada una lmpara
colocada en el eje del microscopio. Dirige los rayos luminosos hacia el
preparado.
B) DIAFRAGMA: Es un dispositivo constituido por un sistema de lminas
metlicas dispuestas concntricamente, regulando de esta manera la entrada
de luz emitida por el espejo o lmpara.
C) CONDENSADOR: Dispositivo constituido por un sistema de dos o ms
lentes montadas dentro de un cilindro cnico truncado de metal. Est
situado por debajo de la platina. Sirve para concentrar o condensar los rayos
luminosos emitidos por la lmpara. Funciona accionado por un tomillo.


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D) PORTAFILTRO: Es un dispositivo que permite colocar filtros de
diferentes colores, los que facilitan la observacin;
PARTE MECNICA
A) EL PIE: Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por
lo general forma de Y o bien es rectangular.
B) LA COLUMNA O BRAZO: llamada tambin asa o brazo, es una pieza
colocada en la parte posterior del aparato. Sostiene el tubo en su porcin
superior y por el extremo inferior se adapta al pie.
C) LA PLATINA: Es una pieza metlica plana en la que se coloca la
preparacin u objeto que se va a observar. Presenta un orificio en el eje
ptico del tubo que permite el paso de los rayos luminosos a la preparacin.
La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmvil; en otros casos
puede ser giratoria, es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o
producir movimientos circulares.
D) EL TUBO OPTICO: Tiene forma cilndrica y est ennegrecido
internamente para evitar las molestias que ocasionan los reflejos de la luz.
En su extremidad superior se colocan los oculares.
E) EL REVLVER: Es una pieza giratoria provista de orificios en los cuales
se enroscan los objetivos. Al girar el revlver, los objetivos pasan por el eje
del tubo y se colocan en posicin de trabajo, la cual se nota por el ruido de
un pin que lo fija.
F) CARRIL: Es un dispositivo colocado sobre la platina que permite deslizar
la preparacin con movimiento ortogonal de adelante hacia atrs y de
derecha a izquierda.
G) EL TORNILLO MACROMTRICO. Girando este tornillo, asciende o
desciende el tubo del microscopio, deslizndose en sentido vertical gracias a
una cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rpido de la
preparacin.
H) EL TORNILLO MICROMTRICO. Mediante el movimiento casi
imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el
enfoque exacto y ntido de la preparacin. Lleva acoplado un tambor
graduado en divisiones de 0,001 mm que se utiliza para precisar sus
movimientos y puede medir el espesor de los objetos.
CUIDADOS Y PRECAUCIONES DURANTE EL USO DEL MICROSCOPIO
1. Por ser el microscopio un instrumento de precisin y de elevado valor
econmico, se recomienda tener cuidado en la conservacin de sus lentes,
evitando una manipulacin que pueda rayar los lentes y empleando el material
adecuado para su limpieza.
2. Para transportar el microscopio utilizar las dos manos, tomar el brazo del mismo
con una mano y con la otra sostener su base. Nunca transportar el microscopio
invertido ni muy inclinado ya que la lente ocular no est fija y puede caer al piso.
3. Al colocar el microscopio sobre la mesa, colocarlo a unos 10 o 15 cm. del borde.
4. Nunca hay que tocar los lentes con las manos. Si se ensucian no utilizar pauelo
o los dedos para limpiar las lentes ya que puede rayar la superficie ptica.
Siempre usar el papel para lentes que provea el laboratorio.
5. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el
microscopio.
6. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que queda


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en el objetivo con pauelos especiales para ptica. En cualquier caso se pasar el
papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a
secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de
alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque
si se aplican estos disolventes en exceso se pueden daar las lentes y su sujecin.
7. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macromtrico,
micromtrico, platina, revlver y condensador).
8. El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la mirada
a la preparacin para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar
nunca de objetivo agarrndolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se est
observando a travs del ocular.
9. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn
lquido, secarlo con un pao. Si se mancha de aceite, limpiarla con un pao
humedecido en xilol.
10. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en
posicin de observacin, asegurarse de que la parte mecnica de la platina no
sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda. Nunca deje el
microscopio con el objetivo de mayor aumento en la posicin de observacin.
11. Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su
funda para evitar que se ensucie y dae las lentes. Si no se va a usar de forma
prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del
polvo.
12. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesin
prctica y, al acabar el curso, encargar a un tcnico para un ajuste y revisin
general de los mismos.
MANEJO DEL MICROSCOPIO
A) ILUMINACIN
Para realizar una buena observacin microscpica, lo primero que se debe
tener es una buena iluminacin y la observacin del campo microscpico.
Para iluminar se procede de la siguiente manera:
1. Verificar que el diafragma del condensador est abierta.
2. Utilizar el espejo cncavo o encender la lmpara y observar a travs del
ocular que el campo microscpico est totalmente iluminado.
3. Considerar al tubo ptico a uno o tres centmetros de la platina.
B) PREPARACIN DE LA MUESTRA
1. Utilizando las tijeras, recortar un trozo de papel de alrededor de 3x3 mm
que incluya una letra "e" 3.
2. Colocar la letra e" 3 en el centro de un portaobjeto agregando una
gota de agua.
3. Luego colocar el cubreobjeto sobre la muestra.
4. Por ltimo, colocar el preparado sobre la platina.
C) ENFOQUE DE LA MUESTRA
1. Colocar el portaobjeto con el cubreobjeto sobre la platina del microscopio.
Ubicar el portaobjeto de modo que la letra quede en el centro de la abertura


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de la platina.
2. Con ayuda del tornillo macromtrico, baje lentamente el tubo hasta que el
extremo inferior est aproximadamente a 1 mm do la muestra.
3. Observar a travs del ocular y eleve lentamente el tubo hasta que la letra se
haga visible.
4. Cuando se observe la imagen, mover el tornillo micromtrico hasta
obtener el mejor foco posible. Un ajuste adicional del diafragma, en
muchos casos, mejorar la claridad de la imagen.
5. Comparar la posicin de la imagen de la letra en el ocular con la posicin
de la letra sobre el portaobjeto.
6. Dibujar la letra observada. Indicar su posicin y calcular su tamao en
nmero de aumentos.
D) CAMBIO DE OBJETIVO
1. Girar el revlver y centrar el objetivo de mediano aumento.
2. Enfocar y aclarar la imagen con el tornillo micromtrico.
3. Describir lo observado. Dibujar y estimar el tamao de la imagen en
nmero de aumentos.
E) OBSERVACIN DE UN PREPARADO FRESCO
1. Colocar una gota de agua estancada en una lmina portaobjeto y cubrir
con una lmina cubreobjeto.
2. Sujetar el preparado con las pinzas de platina.
3. Observar con objetivo de menor a mediano aumento.
4. Dibujar lo observado y calcular los aumentos en cada caso.



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PRCTICA N 3
ELEMENTOS BIOGENESICOS

1. OBJETIVOS
1. Comprobar mediante un anlisis cualitativo, los elementos biogensicos de la
materia orgnica.
2. Comprobar la presencia de agua y sales minerales en materiales biolgicos de
origen animal y vegetal.

2. FUNDAMENTO TEORICO
La materia viva no es un compuesto qumico definido, al contrario es una mezcla
extraordinariamente compleja de iones, molculas orgnicas e inorgnicas y
agregados moleculares, variables cualitativa y cuantitativamente, segn los diversos
tipos de clulas y tejidos.
De los elementos qumicos conocidos, slo algunos son componentes esenciales de la
materia viva. stos se encuentran en todos los seres vivos, por lo que reciben el
nombre de elementos biogensicos o bioelementos.
Los bioelementos ms importantes son el carbono, hidrgeno, oxgeno y nitrgeno que
integran aproximadamente 95% de la materia viva. Estos elementos constituyen los
principios inmediatos o biomolculas que a su vez integran los compuestos, que son
parte constitutiva tambin de la clula. El resto est formado por otros elementos
como: fsforo, calcio, sodio, potasio, hierro y yodo, etc., y a los elementos que se
encuentran en proporciones inferiores al 0.1% se denominan oligoelementos.
Dentro de los biomolculas, los compuestos inorgnicos ms abundantes e
importantes en la materia viva son el agua, sales minerales y el CO
2
.
Todos los componentes qumicos de la materia viva se pueden identificar a travs de
pruebas especficas que usan reactivos especficos y luego se explican mediante
reacciones qumicas.
3. MATERIAL Y PROCEDIMIENTO
A. RECONOCIMIENTO DEL CARBONO, HIDRGENO, OXIGENO Y
NITROGENO

MATERIALES
Material biolgico: Levadura.
Material de vidrio y otros: Gradilla con tubo de ensayo. Mechero.

PROCEDIMIENTO
1. En un tubo de ensayo limpio y seco, colocar 3g. de levadura.
2. Someter al calor de un mechero por unos minutos.
3. Despus de calentar, en la parte superior del tubo se observa unas gotitas de
agua, lo que nos indica la presencia de H y O, as mismo se observa el
desprendimiento de vapores blanquecinos de un olor caracterstico a cuerno
quemado que nos indica la presencia de N.
4. Retirar el tubo del mechero y observe un residuo de color negro, que nos indica
la presencia de C.



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B. RECONOCIMIENTO DEL NITRGENO (MTODO DE LA CAL
SODADA)

MATERIALES
Material biolgico: Levadura de pan
Reactivos: Cal sodada, cido clorhdrico, papel rojo tomasol
Material de vidrio y otros: Gradilla con tubos de ensayo, tapn, tubo de vidrio en
forma de L. mechero, varilla.

PROCEDIMIENTO
1. En un tubo de ensayo, colocar 2 g de levadura de pan con cal sodada,
proporcionalmente.
2. Colocar en la boca del tubo un tapn de jebe horadado provisto de un tubo de
desprendimiento en L".
3. Llevar el tubo al calor de un mechero, por unos minutos
4. A medida que se calienta el tubo, se observa a travs del tubo de
desprendimiento, la salida de vapores blanquecinos
5. Acercar a estos vapores una tira de papel de tornasol rojo y observe.
6. Interpretacin de resultados: La comprobacin de los vapores blanquecinos
desprendidos son de amonio, se verifica acercando un frasco o una varilla con
cido clorhdrico concentrado, con lo cual se aprecia la formacin de humos
blanquecinos ms densos de cloruro de amonio.
7. La ecuacin de la relacin qumica del experimento es:
NaOH + CaO + Levadura HCl + NH
3
NH
4
Cl
(Cal sodada) Cloruro de amonio

C. RECONOCIMIENTO DE AZUFRE

MATERIALES
Material biolgico: Albmina o levadura.
Reactivos: Acetato de plomo.
Material de vidrio y otros: Gradilla con tubo de ensayo mechero, papel de filtro.

PROCEDIMIENTO
1. En un tubo de ensayo colocar 1 ml. de albmina o 2 g. de levadura de
panificacin
2. Tapar la boca del tubo con un papel de filtro previamente tratado con acetato de
plomo.
3. Someter al calor del mechero por unos minutos.
4. Al finalizar el calentamiento, retire el papel de filtro y observe el
ennegrecimiento de la zona correspondiente a la boca del tubo. La ecuacin de la
reaccin qumica del experimento es:
SH + AgNO
3
AgCl
-
+ NO
3

Cloruro Nitrato de plata Cloruro de Ag (blanco lechoso)




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CONSTITUYENTES MINERALES DE LA MATERIA VIVA: AGUA Y SALES
MINERALES
A) DEMOSTRACIN DE LA PRESENCIA DE AGUA
MATERIALES
Material biolgico: Carne o levadura
Material de vidrio: Gradilla con tubo de ensayo, mechero
PROCEDIMIENTO
1. En un tubo de ensayo colocar 2 g. de levadura de panificacin o carne.
2. Llevar al mechero por unos minutos hasta que se produzca un desprendimiento de
vapores.
3. Observe que en la parte superior del tubo, se forman pequeas gotitas de agua.
4. Interpretacin de resultado:
El protoplasma de una clula en su composicin est constituida ms del 80% de
agua que al ser sometida al calor eliminamos agua que se observa por el
desprendimiento de vapores y la formacin de gotitas de agua.